$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
1.
ملاحظة تحضير: تتطلب التي ستخضع لإصابة خفيفة تكيفا مظلما في الليلة السابقة لنقص التروية البعيد. تتطلب التي تتعرض لأضرار ضوئية تربية داكنة (12 ساعة ضوئية: دورة مظلمة ، 5 لوكس)
- قم بإجراء نقص التروية عن بعد في القوارض المستيقظة أو المخدرة. تأكد من أن تتمتع بقوة عضلية صحية. تأكد من ذلك عن طريق الضغط على الطرف الخلفي العلوي للتأكد من وجود عضلات كافية. تم اختبار الحماية التي يسببها RIP ضد الإصابة الخفيفة في الفئران المستقرة حتى عمر 6 أشهر.
- تحضير مخدر للتكييف الإقفاري عن بعد (RIP)
- حقن الفئران بحقن داخل الصفاق 60 ملغم/كغ من الكيتامين و5 ملغم/كغ زيلازين. تحقق من عمق التخدير عن طريق مد الساق وقرص الجلد على الجانب السفلي من القدم. ليس لديه رد فعل إذا تم تخديره بعمق. ضع الدموع الاصطناعية لتجنب جفاف القرنية أثناء التخدير.
- ضع الفئران إما على وسادة تدفئة أو أنبوب سخان مياه دائري للحفاظ على درجة حرارة ثابتة للجسم تبلغ 37.5 درجة مئوية. ضع الجرذ في وضع الانبطاح مع توجيه وسادات قدم الأطراف السفلية لأعلى. قد يخضع الطرف الأيمن أو الأيسر لنقص التروية عن بعد.
2. تطبيق مسبار درجة حرارة
- الجلد: قم بتمديد ساق الفئران التي ستخضع لنقص التروية ووضع مسبار الجلد على وسادة القدم. ضع مسبار الجلد لزيادة التلامس بين مسبار درجة الحرارة والجلد. ادفع المسبار بقوة في وسادة القدم وقم بلصق المسبار بشريط ورقي.
- تحقق من وضع مسبار الجلد عن طريق تتبع درجة الحرارة على برنامج تسجيل درجة الحرارة. تأكد من أن درجة حرارة الجلد تتراوح بين 30-34 درجة مئوية وتظل مستقرة. تتبع درجة حرارة الجلد لمدة 1-2 دقيقة. اضبط مسبار الجلد إذا كانت درجة الحرارة غير مستقرة أو أقل من 30 درجة مئوية.
3. نقص التروية عن بعد
- : قم بتفريغ الكفة والتأكد من إغلاق صمام ضغط الهواء. مد الساق وقم بتطويق الكفة على الطرف الخلفي العلوي. استخدم السبابة والإبهام لتمديد الساق والأصابع السفلية للحفاظ على الكفة المفكوكة في موضعها.
- ارفع ضغط الكفة للحيوان المخدر إلى 160 مم زئبق ، وفي المستيقظة ، قم بزيادة ضغط الكفة إلى 180 مم زئبق.
ملاحظة: يتراوح ضغط الدم المخدر للفئران من 120-140 مم زئبق ويرتفع إلى 160 مم زئبق عند الوعي. ابدأ تسجيلات المؤقت ودرجة حرارة القدم بمجرد الوصول إلى الضغط الصحيح.
ملاحظة: يجب أن تنخفض درجة حرارة القدم بمقدار 2 درجة مئوية بعد 5 دقائق من الضغط الثابت. - حافظ على وضع الكفة فوق "ركبة" طوال فترة نقص التروية. سيبدأ ضغط الكفة في الانخفاض بعد بضع دقائق أو إذا كان طرف الفئران يتحرك.
- قم بضخ لمبة النفخ بشكل متكرر في رشقات نارية قصيرة للحفاظ على ضغط الكفة المطلوب ، ويمكن
تسليم نقص - التروية البعيد بشكل مستمر لمدة تتراوح بين 5 و 15 دقيقة. يتضمن بروتوكول إعادة تروية نقص التروية فترتين من 5 دقائق مع إعادة تروية لمدة 5 دقائق.
- قم بتفريغ ضغط الكفة عن طريق فك صمام ضغط الهواء. تحقق من تغير درجة الحرارة على مدار بروتوكول نقص التروية. حرر الكفة.
- استمر في تجربة الإصابة. يجب وضع تحت تأثير التخدير على وسادة حرارية. استمر في مراقبة حتى المتنقلة. لا يمكن إعادة إلى السكن حتى المشي.