إحداث نوبة اشتباك كهربائي حادة في نموذج الفئران

الملخص

المصدر: Jang، S.، et al، الضربات الكهربائية في الفئران وتجزئة الحصين لفحص التغيرات الناجمة عن النوبات في بروتينات كثافة ما بعد المشبكي. J. Vis. Exp. (2017)

يوضح هذا الفيديو تحريض نوبة الصدمات الكهربائية الحادة (ECS) في نموذج الفئران لدراسة المرونة العصبية الناجمة عن النوبات. يطبق الباحثون التحفيز الكهربائي عبر أقطاب مشبك الأذن ، مما يؤدي إلى فرط استثارة الخلايا العصبية والكلونوس. يساعد هذا النموذج في التحقيق في اللدونة المشبكية وآليات النوبات والتأثيرات العلاجية المرتبطة بالعلاج بالصدمات الكهربائية (ECT).

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. تحريض ECS

الحاد ملاحظة: انظر الشكل 1 ب ، اللوحة العلوية.

1. بلل مشابك الأذن بمحلول ملحي معقم وتأكد من تشبعها.
2. بلل آذان الفئران بمحلول ملحي معقم عن طريق لفها بشاش مبلل بالمحلول الملحي. بمجرد أن تصبح مبللة ، قم بإزالة الشاش.
3. قم بتوصيل مشبك واحد لكل أذن وضعه خارج شريط الغضروف الرئيسي.
4. تأكد على جهاز ECS من إنشاء حلقة حقيقية ؛ إذا لم يكن الأمر كذلك ، فستظهر رسالة خطأ أو قراءة "1" على الجهاز.
5. ارتد قفازا سميكا غير معدني. أثناء إمساك الجرذ برفق في يد مرتدية قفازا ، اضغط على زر "SHOCK" لبضع ثوان وحرر قبضة الجرذ ببطء لمراقبة النوبة. للتحكم الوهمي في "عدم النوبة" (NS) ، تعامل مع الجرذ بشكل متماثل ، لكن لا توصل التيار.
6. افصل مشابك الأذن مع بدء الاستيلان وسجل سلوك النوبة وفقا لمقياس راسين المنقح الذي يتضمن "حركات الفم والوجه" (المرحلة 1) ، "إيماءة الرأس" (المرحلة 2) ، "كلونوس الطرف الأمامي" (المرحلة 3) ، "التربية باستخدام كلونوس الأمامي" (المرحلة 4) ، و "التربية والسقوط باستخدام كلونوس الطرف الأمامي" (المرحلة 5). يجب أن تستمر النوبة حوالي 10 ثوان. سجل مدة النوبة باستخدام مؤقت.
7. بعد إنهاء النوبة ، أعد الجرذ إلى قفص منزله. راقب الجرذ لمدة 5 دقائق أخرى للتأكد من تعافي الفئران من النوبات. احتفظ بها منفردة في القفص وأعد القفص إلى غرفة الإنعاش.
8. كرر تحريض ECS على الجرذ التالي.
9. راقب الفئران طوال الفترة المتبقية من اليوم ومرة واحدة على الأقل في الصباح ومرة واحدة بعد الظهر في اليوم التالي حتى يتم قتلها رحيما للتجارب.
   ملاحظة: يمكن أن تؤدي طريقة تحريض ECS إلى ظهور علامات سريرية كأثر جانبي عرضي ، الأمر الذي يتطلب الاهتمام. على سبيل المثال ، يمكن أن يؤدي بروتوكول تحريض ECS إلى حدوث نوبات تستمر لأكثر من 15 ثانية وتسبب ضائقة غير ضرورية للفئران. في هذه الحالة ، قم بإنهاء النوبة باستخدام الديازيبام (10 مجم / كجم ، IP) أو البنتوباربيتال (25-30 مجم / كجم ، IP.). إذا أصيبت الفئران بضيق تنفسي أو تشوهات سلوكية شديدة بعد الإقلاع عن النوبة ، فقم بالقتل الرحيم عن طريق استنشاق ثاني أكسيد الكربون متبوعا بقطع الرأس.

النتائج

فئة الشكل = 'صورة image-style-align-center image_resized' style='display: table؛ margin-left: auto؛ margin-right: auto ؛ width: 75٪ ؛ '>

الشكل 1: مخطط لتحريض ECS الحاد و ECS المزمن. (أ) تم توصيل فأر بمولد نبضات عبر أقطاب كهربائية لمشبك الأذن ، وتم تطبيق صدمة كهربائية (55 مللي أمبير ، 100 نبضة / ثانية لمدة 0.5 ثانية) لاستنباط نوبات منشط وغراء في المرح...

المواد

< الرقم class = 'table'>

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
Sprague-Dawley rat	Charles River Laboratories		ECS يزود
مولد النبض	Ugo Bsile ، Comerio ، إيطاليا	57800	لوازم ECS