تطوير شبكة عصبية مهندسة الأنسجة الدقيقة باستخدام عمود دقيق قائم على الهيدروجيل

Method Article

تطوير شبكة عصبية مهندسة الأنسجة الدقيقة باستخدام عمود دقيق قائم على الهيدروجيل

August 7th, 2025

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Struzyna، L. A. et al. ، مستوحاة تشريحيا من الشبكات العصبية ثلاثية الأبعاد للأنسجة الدقيقة الهندسية لإعادة بناء الجهاز العصبي وتعديله ونمذجته. J. Vis. Exp. (2017)

يوضح هذا الفيديو تطوير الشبكات العصبية المصممة بالأنسجة الدقيقة باستخدام عمود صغير هيدروجيل مع نواة مصفوفة خارج الخلية. تلتصق المجاميع العصبية المصنفة ، وتوسع التوقعات ، وتشكل شبكات عصبية منظمة ، مما يساهم في التقدم في النمو العصبي وأبحاث العلاج العصبي.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. تطوير Agarose Hydrogel (المكون اللاخلوي للشبكات العصبية الهندسية للأنسجة الدقيقة (micro-TENNs))

تحضير محلول الاغاروز
1. داخل خزانة السلامة الحيوية ، قم بإعداد خزانات للأعمدة الدقيقة عن طريق نقل 20 مل من محلول Dulbecco المخزن بالفوسفات (DPBS) إلى كل من طبقين من أطباق بتري مقاس 10 سم. عقم الملقط الدقيق والمشارط الدقيقة باستخدام معقم الخرز الساخن.
2. قم بوزن 3 جم من الاغاروز وانقله إلى دورق معقم داخل خزانة السلامة الحيوية. أضف 100 مل من DPBS للحصول على تركيز نهائي يبلغ 3٪ من الوزن / الحجم (و....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

فئة الشكل = 'صورة image-style-align-center image_resized' style='display: table؛ margin-left: auto؛ margin-right: auto ؛ width: 75٪ ؛ '> figure-results-1

الشكل 1: مخططات لجهاز تصنيع العمود الصغير المقطوع بالليزر وقالب البئر الصغير الهرمي المطبوع ثلاثي الأبعاد لتجميع الخلايا. (أ) - (ب) مخطط وصورة للنصفين السفلي والعلوي من مصفوفة القنوات الأسطوانية ، على التوالي ، المستخدمة لتصنيع أعمدة الهيدروجيل .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

<فئة الشكل = 'الجدول'><فئة الجدول = 'ck-table-resize'> List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments Laser Cutter Universal Laserأنظمة الليزر PLS4.75تستخدم لتصنيع قالب القناة الدقيقة المقطوع بالليزر.جهاز تصنيع العمود الصغير المقطوع بالليزرحسب الطلب -------------- اتصل بمجموعة البحث لدينا إذا كنت مهتما. الأبعاد والمخططات الواردة في المخطوطة.مسامير -------------- -------------- # 4-40 بقطر خيط 3.05 ممالصواميل -------------- -------------- # 4-40 بقطر خيط 3.05 ممإبرة الوخز بالإبر (قطر 180 ميكرومتر) Lhasa الطبيةsj.16X40قد يختلف القطر وفقا للحجم المطلوب لتجويف العمود الصغير.طبق بتريفيشر08772B محلول ملحي مخزن بالفوسفات من دولبكو (DPBS)Invitrogen14200075 البوليسترين الماصة المصلية التي يمكن التخلصمنها فيشر13-678-11D AgaroseSigmaA9539-50G أنبوب شعري (قطر 398 ميكرومتر)فيشر21170Dقد يختلف القطر وفقا للحجم المطلوب لغلاف العمود الصغير.صفيحة ساخنةفيشرSP88857200 شريط مغناطيسيفيشر1451352 ماصة دقيقةسيجماZ683884-1EA 25 مم مقياس إبرةفيشر14-826-49 مشرطميكرو روبوز جراحيRS-6270 مقصأدوات العلوم الدقيقة14081-09 ملقطأدوات الدقة العالمية501985 معقم الخرز الساخنSigmaZ378550-1EA StereoscopeNikonSMZ800Nتستخدم لجميع خطوات التشريح وتصنيع micro-TNN.ذيل الفئران من النوع الأول من الكولاجينCorning354236يحفظ عند 4 درجات مئوية وقم بإزالته فقط عند الحاجة. استخدم الثلج للحفاظ على درجة حرارته عند الاستخدام.أنبوب الطرد المركزيالدقيق فيشر02-681-256 الفأر لامينينكورنينج354232الحفاظ على درجة حرارة 4 درجات مئوية وإزالته فقط عند الحاجة. استخدم الثلج للحفاظ على درجة حرارته عند الاستخدام.الوسط العصبي القاعدي Invitrogen21103049الوسط القاعدي لثقافة الخلايا العصبية قبل الولادة والجنينية. يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية ويسخن في 37 درجة مئوية قبل الاستخدام.هيدروكسيد الصوديوم (هيدروكسيد الصوديوم)فيشرSS2661 حمض الهيدروكلوريك (HCl)فيشر SA48-1 ورق عباد الشمس فيشر09-876-18 محلول الملح المتوازن من هانك (HBSS)Invitrogen14170112يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية.0.25٪ Trypsin-EDTAInvitrogen25200056يحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية ويسخن في 37 درجة مئوية قبل الاستخدام.ديوكسيربونوكلياز البنكرياس البقري (DNase) ISigma10104159001يحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية ويسخن في 37 درجة مئوية قبل الاستخدام.مكمل B-27المكمل 12587010 Invitrogenيضاف إلى الوسط العصبي لثقافة الخلايا العصبية الحصينية والقشرية. يحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية ويسخن في 37 درجة مئوية قبل الاستخدام.35050061 L-glutamineInvitrogenيحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية ويسخن في 37 درجة مئوية قبل الاستخدام.سبراج دولي اليوم الجنيني 18 جرذا سلالةنهر تشارلز001 ماصة باستورفيشر22-042816 15 مل أنبوب الطرد المركزيEMESCO1194-352099 دوامةفيشر02-215-414 جهاز طرد مركزيفيشر05-413-115 مقياس الدمفيشر02-671-6 Objet30 طابعة ثلاثية الأبعادستراتاسيس -------------- تستخدم لتصنيع قوالب الآبار الصغيرة الهرمية.قالب البئر الهرمي المطبوع ثلاثي الأبعادحسب الطلب -------------- اتصل بمجموعتنا البحثية إذا كنت مهتما. الأبعاد والمخططات الواردة في المخطوطة.Polydimethylsiloxane (PDMS) وعامل المعالجةFisherNC9285739يأتي كمجموعة مع المطاط الصناعي وعامل المعالجة. استخدمه داخل غطاء الدخان الكيميائي.قمعفيشر10-348C 1 مل لمبة ماصةسيجماZ509035 ملعقة صغيرةفيشرS50821 لوحة ثقافة 12 بئرEMESCO1194-353043 فرنفيشر11-475-154 حاضنةفيشر13 998 076 Eclipse Ti-S MicroscopeNikon-------------- يستخدم لالتقاط صور تباين الطور. من خلال الحصول على الصور الرقمية باستخدام كاميرا QiClick المتصلة ببرنامج البحث الأساسي لعناصر نيكون (4.10.01).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

تطوير شبكة عصبية مهندسة الأنسجة الدقيقة باستخدام عمود دقيق قائم على الهيدروجيل

In This Article

Abstract

Protocol

Results

Materials

Reprints and Permissions

Tags

Related Articles