تصويب: تحليل ترانسكريبتوم الخلايا المفردة

597 مشاهدات

نوفمبر 18, 2011

في هذه المقالة

ملخص

تم إجراء تصحيح لمقال تحليل الترانسكريبتوم للخلايا المفردة. حيث كانت هناك أخطاء في الأحجام المستخدمة في قسم تضخيم aRNA.

البروتوكول

تم إجراء تصحيح لـ تحليل الترانسكريبتوم للخلايا المفردة. كان هناك أخطاء في الأحجام المستخدمة في قسم تضخيم aRNA. وقد تم تغيير الأحجام من:

  • 6.2.1 7.5 μL من منظم السلسلة الثانية 5x Second strand buffer
  • 6.2.4 أضف 29 μL من ماء DEPC
    2 μL من الجليكوجين (5 mg/mL) 1/10 من الحجم (3 μL) من خلات الصوديوم 3M Sodium acetate
    2.5 ضعف الحجم (~250 μL) من الإيثانول البارد 100% ethanol
  • 6.2.7 تخلص من الطافي واتركه ليجف في الهواء لمدة 15-20 دقيقة.
  • 6.3.4.2 أضف 50 μL من ماء DEPC
    2 μL من الجليكوجين (20 mg/mL)
    0.6 ضعف الحجم (37.2 μL) من خلات الأمونيوم 5M Ammonium acetate
    2.5 ضعف الحجم (~180 μL) من الإيثانول البارد ethanol
  • 6.3.4.7 تخلص من الطافي واتركه ليجف في الهواء لمدة 15-20 دقيقة.
  • 6.3.5.1 أضف 50 μL من ماء DEPC
    2 μL من الجليكوجين (20 mg/mL)
    0.6 ضعف الحجم (37.2 μL) من خلات الأمونيوم 5M Ammonium acetate
    1 ضعف الحجم (98 μL) من الفينول:كلوروفورم:كحول الإيزوأميل phenol:chlorofom:isoamyl alcohol بنسبة 25:24:1 (موزون عند pH 7.8-8.0)
  • 6.3.5.7 تخلص من الطافي واتركه ليجف في الهواء لمدة 15-20 دقيقة.

إلى

  • 6.2.1 5.6 μL من منظم الشريط الثاني 5x Second strand buffer
  • 6.2.4 إضافة 40 μL من ماء DEPC
    1 μL من الجليكوجين (5 mg/mL) 1/10 من الحجم (5 μL) من خلات الصوديوم 3M Sodium acetate
    2.5 حجم (~125 μL) من الإيثانول البارد بنسبة 100%
  • 6.2.7 إزالة الطافي والتجفيف بالهواء لمدة 15-20 دقيقة.
  • 6.3.4.2 إضافة 50 μL من ماء DEPC
    2 μL من الجليكوجين (5 mg/mL)
    0.1 حجم (10 μL) من خلات الأمونيوم 5M Ammonium acetate
    2.5 حجم (~275 μL) من الإيثانول البارد
  • 6.3.4.7 إزالة الطافي والتجفيف بالهواء لمدة 15-20 دقيقة.
  • 6.3.5.1 إضافة 90 μL من ماء DEPC
    2 μL من الجليكوجين (5 mg/mL)
    0.1 حجم (10 μL) من خلات الأمونيوم 5M Ammonium acetate
    1 حجم (100 μL) من الفينول:الكلوروفورم:كحول الأيزواميل بنسبة 25:24:1 (موازن إلى pH 7.8-8.0)
  • 6.3.5.7 إزالة الطافي والتجفيف بالهواء لمدة 15-20 دقيقة.

إعادة الطباعة والأذونات