تصويب: إعادة تجميع مستنبتات الغدة الزعترية

ملخص

تم إجراء تصحيح على: إعادة تجميع مستنبتات الغدة الزعترية. وقد تمت إعادة نشر ملخص مراجع بسبب خطأ من الناشر.

الملخص

تم إجراء تصحيح على: إعادة تجميع مزارع الغدة الزعترية. وقد أعيد نشر ملخص منقح بسبب خطأ من الناشر. تم تصحيح الملخص إلى:

تتنظم الخلايا السدوية داخل الأنسجة اللمفاوية في هياكل ثلاثية الأبعاد توفر سقالة يُعتقد أنها تتحكم في هجرة وتطور الخلايا المكونة للدم. ومن الأهمية بمكان أن الحفاظ على هذا التنظيم ثلاثي الأبعاد يبدو أمراً حاسماً لوظيفة الخلايا السدوية الطبيعية، حيث تظهر المزارع أحادية الطبقة ثنائية الأبعاد غالباً قدرتها على دعم أجزاء فردية فقط من وظيفة النسيج اللمفاوي. وفي الغدة الزعترية، تعمل شبكات معقدة من الخلايا الظهارية القشرية والنخاعية كإطار يتحكم في استقطاب وتكاثر وتمايز وبقاء السلائف اللمفاوية أثناء خضوعها لعملية تطوير الخلايا التائية متعددة المراحل داخل الغدة الزعترية. إن فهم الدور الوظيفي للمكونات السدوية الفردية في الغدة الزعترية أمر أساسي في تحديد كيفية فرض الغدة الزعترية للتمييز بين الذات وغير الذات. نصف هنا تقنية نستغل فيها مرونة الأنسجة الجنينية لإعادة ارتباطها في هياكل ثلاثية الأبعاد سليمة in vitro، وذلك بعد تفكيكها إنزيمياً. يتم دمج تفكيك فصوص الغدة الزعترية الجنينية إلى مخاليط خلوية غير متجانسة، متبوعاً بفصلها إلى مكونات خلوية فردية، مع إعادة الارتباط in vitro لأنواع الخلايا المطلوبة هذه في هياكل إعادة تجميع ثلاثية الأبعاد بنسب محددة، مما يوفر فرصة لبحث جوانب معينة من تطوير الخلايا التائية تحت ظروف خلوية محددة. (تستند هذه المقالة إلى عمل نُشر لأول مرة في Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380 pages 185-196).

من

في الغدة الزعترية، تخضع الخلايا الزعترية غير الناضجة CD4+8+ التي تعبر عن جينات سلاسل α و b لمستقبلات الخلايا التائية التي أعيد ترتيبها عشوائياً لعمليات اختيار إيجابي وسلبي بناءً على قدرتها على التعرف على جزيئات الببتيد الذاتي/معقد التوافق النسيجي الكبير (MHC) التي تعبر عنها الخلايا السدوية الزعترية. ويصعب تحليل دور الخلايا السدوية الزعترية أثناء عملية الاختيار داخل الغدة الزعترية في الجسم الحي بسبب التعقيد الخلوي للبيئة المجهرية الزعترية في الغدة الزعترية لدى البالغين في الحالة المستقرة، وبسبب نقص استراتيجيات الاستهداف المناسبة للتحكم في التعبير الجيني في مقصورات سدوية زعترية محددة. وقد أثبتنا أنه يمكن التحكم في البيئة المجهرية الزعترية بسهولة في المختبر من خلال استخدام مزارع أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها، والتي تسمح بتحضير فصوص زعترية ثلاثية الأبعاد من خلايا سدوية ولمفاوية محددة. ورغم أن هناك أنظمة أخرى في المختبر تدعم بعض جوانب تطور الخلايا التائية، إلا أن مزارع أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها تظل النظام الوحيد في المختبر القادر على دعم عمليات اختيار الخلايا الزعترية الفعالة التي يتوسطها MHC من الفئتين الأولى والثانية، وبالتالي يمكن استخدامها كأداة فعالة لدراسة التنظيم الخلوي والجزيئي للاختيار الإيجابي والسلبي في الغدة الزعترية.

البروتوكول

تم إجراء تصحيح لـ: إعادة تجميع مزارع الغدة الزعترية. وقد أُعيد نشر ملخص منقح بسبب خطأ من الناشر. وقد تم تصحيح الملخص ليصبح:

تنتظم الخلايا السدوية داخل الأنسجة اللمفاوية في هياكل ثلاثية الأبعاد توفر سِقالة يُعتقد أنها تتحكم في هجرة وتطور الخلايا المكونة للدم. ومن المهم ملاحظة أن الحفاظ على هذا التنظيم ثلاثي الأبعاد يبدو أمراً بالغ الأهمية لوظيفة الخلايا السدوية الطبيعية، حيث غالباً ما تظهر المزارع أحادية الطبقة ثنائية الأبعاد أنها قادرة فقط على دعم أجزاء فردية من وظيفة النسيج اللمفاوي. وفي الغدة الزعاقية، تعمل شبكات معقدة من الخلايا الظهارية القشرية والنخاعية كإطار يتحكم في استقطاب السلائف اللمفاوية وتكاثرها وتمايزها وبقائها أثناء خضوعها لعملية متعددة المراحل من تطور الخلايا التائية داخل الغدة الزعاقية. إن فهم الدور الوظيفي للمقصورات السدوية الفردية في الغدة الزعاقية أمر أساسي في تحديد كيفية قيام الغدة الزعاقية بفرض التمييز بين الذات وغير الذات. ونصف هنا تقنية نستغل فيها لدونة الأنسجة الجنينية لإعادة تجميعها في هياكل ثلاثية الأبعاد سليمة in vitro، وذلك بعد تفكيكها إنزيمياً. ويتم بعد ذلك دمج عملية تفكيك فصوص الغدة الزعاقية الجنينية إلى مخاليط خلوية غير متجانسة، متبوعة بفصلها إلى مكونات خلوية فردية، مع إعادة التجميع in vitro لهذه الأنواع الخلوية المطلوبة في هياكل تجميعية ثلاثية الأبعاد بنسب محددة، مما يوفر فرصة لاستقصاء جوانب معينة من تطور الخلايا التائية تحت ظروف خلوية محددة. (تستند هذه المقالة إلى عمل نُشر لأول مرة في Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380 pages 185-196).

من

في الغدة الزعترية، تخضع الخلايا الزعترية غير الناضجة CD4+8+ التي تعبر عن جينات سلاسل α و b لمستقبلات الخلايا التائية المعاد ترتيبها عشوائياً لعمليات اختيار إيجابية وسلبية بناءً على قدرتها على التعرف على جزيئات المعقد الرئيسي للتوافق النسيجي (MHC) والببتيد الذاتي التي تعبر عنها الخلايا السدوية الزعترية. ويصعب إجراء تحليل حي (in vivo) لدور الخلايا السدوية الزعترية أثناء عملية الاختيار داخل الغدة الزعترية بسبب التعقيد الخلوي للبيئة المجهرية الزعترية في الغدة الزعترية البالغة في الحالة المستقرة، وبسبب الافتقار إلى استراتيجيات استهداف مناسبة للتحكم في التعبير الجيني في مقصورات سدوية زعترية محددة. لقد أثبتنا أنه يمكن التحكم بسهولة في البيئة المجهرية الزعترية مخبرياً (in vitro) من خلال استخدام مزارع أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها، والتي تسمح بتحضير فصوص زعترية ثلاثية الأبعاد من خلايا سدوية ولمفاوية محددة. ورغم أن الأنظمة المخبرية الأخرى تدعم بعض جوانب تطور الخلايا التائية، تظل مزارع أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها النظام المخبري الوحيد القادر على دعم عمليات اختيار الخلايا الزعترية الفعالة بوساطة MHC من الفئتين الأولى والثانية، وبالتالي يمكن استخدامها كأداة فعالة لدراسة التنظيم الخلوي والجزيئي للاختيار الإيجابي والسلبي في الغدة الزعترية.