تصويب: تحضير مستنبتات عضوية للغدة الزعترية معالجة بـ 2-dGuo

ملخص

تم إجراء تصحيح على: Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures. وقد تمت إعادة نشر ملخص مراجع بسبب خطأ من الناشر.

الملخص

تم إجراء تصحيح على: تحضير مستنبتات عضوية للغدة الزعترية المعالجة بـ 2-dGuo. وقد أعيد نشر ملخص منقح بسبب خطأ من الناشر. تم تصحيح الملخص ليصبح على النحو التالي:

من المعروف أن التفاعلات في الغدة الزعترية بين أسلاف الخلايا التائية النامية والخلايا السدوية، والتي تشمل الخلايا الظهارية القشرية والنخاعية، تلعب دوراً رئيسياً في تطوير تجمع من الخلايا التائية الكفؤة وظيفياً. ومع ذلك، فإن تعقيد تطور الخلايا التائية في الغدة الزعترية in vivo يمكن أن يحد من تحليل المكونات الخلوية الفردية ومراحل تطور معينة. وتوفر أنظمة الزراعة in vitro وسيلة سهلة الوصول لدراسة العديد من العمليات الخلوية المعقدة. وتمثل أنظمة زراعة أعضاء الغدة الزعترية نهجاً مستخدماً على نطاق واسع لدراسة التطور داخل الزعترية للخلايا التائية في ظل ظروف محددة in vitro. ونحن نصف هنا نظاماً يمكن من خلاله استنفاد العناصر المكونة للدم الداخلية من فصوص الغدة الزعترية الجنينية للفئران عن طريق زراعة العضو مسبقاً في 2-deoxyguanosine، وهو مركب سام بشكل انتقائي للخلايا المكونة للدم. وبالإضافة إلى توفير مصدر سهل الوصول للخلايا السدوية الزعترية لاستقصاء دور البيئات المجهرية الزعترية في تطور وانتخاب الخلايا التائية، فإن هذه التقنية تدعم أيضاً مناهج تجريبية إضافية تشمل إعادة تكوين فصوص زعترية خالية من الخلايا اللمفاوية in vitro باستخدام عناصر مكونة للدم محددة، وزراعة غدد زعترية خالية من الخلايا اللمفاوية في فئران مستقبلة، وتكوين مزارع أعضاء زعترية معاد تجميعها. (تعتمد هذه المقالة على عمل تم الإبلاغ عنه لأول مرة في Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380 الصفحات 185-196).

من

في الغدة الزعترية، تخضع الخلايا الزعترية غير الناضجة CD4+8+ التي تعبر عن جينات سلاسل α و b لمستقبلات الخلايا التائية المعاد ترتيبها عشوائياً لعمليات انتخاب إيجابي وسلبي بناءً على قدرتها على التعرف على جزيئات الببتيد الذاتي/معقد التوافق النسيجي الكبير (MHC) التي تعبر عنها الخلايا السدويّة الزعترية. ويصعب إجراء تحليل حي (in vivo) لدور الخلايا السدويّة الزعترية أثناء الانتخاب داخل الغدة الزعترية بسبب التعقيد الخلوي للبيئة المجهرية الزعترية في الغدة الزعترية للبالغين في الحالة المستقرة، وبسبب نقص استراتيجيات الاستهداف المناسبة للتحكم في التعبير الجيني في مقصورات سدويّة زعترية محددة. لقد أظهرنا أنه يمكن التحكم في البيئة المجهرية الزعترية بسهولة مختبرياً (in vitro) من خلال استخدام مزارع أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها، والتي تسمح بتحضير فصوص زعترية ثلاثية الأبعاد من خلايا سدويّة ولمفاوية محددة. ورغم أن الأنظمة المختبرية الأخرى تدعم بعض جوانب تطور الخلايا التائية، تظل مزرعة أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها هي النظام المختبري الوحيد القادر على دعم عمليات انتخاب الخلايا الزعترية الفعالة بوساطة MHC من الفئة I و II، وبالتالي يمكن استخدامها كأداة فعالة لدراسة التنظيم الخلوي والجزيئي للانتخاب الإيجابي والسلبي في الغدة الزعترية.

البروتوكول

تم إجراء تصحيح لـ: Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures. وقد أُعيد نشر ملخص مراجع بسبب خطأ من الناشر. تم تصحيح الملخص إلى:

في الغدة الزعترية، من المعروف أن التفاعلات بين سلائف الخلايا التائية النامية والخلايا السدوية التي تشمل الخلايا الظهارية القشرية والنخاعية تلعب دوراً رئيسياً في تطوير مجموعة من الخلايا التائية الكفؤة وظيفياً. ومع ذلك، فإن تعقيد تطور الخلايا التائية في الغدة الزعترية in vivo قد يحد من تحليل المكونات الخلوية الفردية ومراحل تطور معينة. وتوفر أنظمة الزراعة in vitro وسيلة سهلة الوصول لدراسة العديد من العمليات الخلوية المعقدة. وتمثل أنظمة زراعة أعضاء الغدة الزعترية نهجاً مستخدماً على نطاق واسع لدراسة التطور داخل الزعترية للخلايا التائية تحت ظروف محددة in vitro. نصف هنا نظاماً يمكن من خلاله استنزاف العناصر المكونة للدم الداخلية من فصوص الغدة الزعترية الجنينية للفئران عن طريق زراعة العضو مسبقاً في 2-deoxyguanosine، وهو مركب سام بشكل انتقائي للخلايا المكونة للدم. وبالإضافة إلى توفير مصدر سهل الوصول للخلايا السدوية الزعترية لبحث دور البيئات الدقيقة الزعترية في تطور واختيار الخلايا التائية، تدعم هذه التقنية أيضاً مناهج تجريبية إضافية تشمل إعادة تكوين فصوص زعترية عديمة الخلايا اللمفاوية in vitro باستخدام عناصر مكونة للدم محددة، وزراعة غدد زعترية عديمة الخلايا اللمفاوية في فئران مستقبلة، وتكوين مزارع أعضاء زعترية معاد تجميعها. (تعتمد هذه المقالة على عمل تم الإبلاغ عنه لأول مرة في Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380 pages 185-196).

من

في الغدة الزعترية، تخضع الخلايا الزعترية غير الناضجة CD4+8+ التي تعبر عن جينات سلاسل α و b لمستقبلات الخلايا التائية المعاد ترتيبها عشوائياً لعمليات اختيار إيجابي وسلبي بناءً على قدرتها على التعرف على جزيئات الببتيد الذاتي/معقد التوافق النسيجي الكبير (MHC) التي تعبر عنها الخلايا السدوية الزعترية. ويصعب إجراء التحليل الحي (in vivo) لدور الخلايا السدوية الزعترية أثناء الاختيار داخل الغدة الزعترية بسبب التعقيد الخلوي للبيئة المجهرية الزعترية في الغدة الزعترية البالغة في الحالة المستقرة، وبسبب نقص استراتيجيات الاستهداف المناسبة للتلاعب بالتعبير الجيني في أقسام سدوية زعترية محددة. لقد أثبتنا أنه يمكن التلاعب بالبيئة المجهرية الزعترية بسهولة في المختبر (in vitro) من خلال استخدام مزارع أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها، والتي تسمح بتحضير فصوص زعترية ثلاثية الأبعاد من خلايا سدوية ولمفاوية محددة. وعلى الرغم من أن هناك أنظمة أخرى في المختبر تدعم بعض جوانب تطور الخلايا التائية، إلا أن مزرعة أعضاء الغدة الزعترية المعاد تجميعها تظل النظام الوحيد في المختبر القادر على دعم عمليات اختيار الخلايا الزعترية الفعالة التي يتوسطها MHC من الفئة I و II، وبذلك يمكن استخدامها كأداة فعالة لدراسة التنظيم الخلوي والجزيئي للاختيار الإيجابي والسلبي في الغدة الزعترية.