$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. إعداد التحفيز السمعي
- أول تسجيل للصوت منبهات في حين يجري لعبت داخل تجويف للنظام MR 7T. وقد حمل هو مكان ضيق يمكن أن تشوه المنبهات السمعية مما أدى إلى تعزيز ترددات معينة السمعية. ويبين الشكل (1) والترددات تعزيز وقمعها كما هو موضح لدينا تسجيلات لضوضاء بيضاء مصنوعة في موقع رأس الطائر داخل المغناطيس تتحمل باستخدام ميكروفون الألياف البصرية (Optimic 1160 Optoacoustics). لتعويض هذا التعزيز الاصطناعي، يتم تطبيق وظيفة معادلة كل التحفيز باستخدام برنامج ويف لاب. من أجل الإعداد لدينا خاصة، تتألف من نواة وظيفة جاوس مع المعلمات التالية: السعة القصوى:-20DB، تركزت على 3،750 هرتز، العرض: 0.05 أوكتافات (المقابلة لنطاق 2،500-5،000 هرتز للنظام لدينا).
- وتتكون المحفزات أغنية من عدة زخارف الأغاني الفردية لكل الطيور معشق مع فترات من الصمت. ديتم ضبط uration من هذه الفترات الصامتة للحفاظ على المبلغ الإجمالي للصوت والصمت متطابقة على كل المحفزات. هذا البناء تحافظ على التباين داخل الفرد وبين الفرد الطبيعي للطول الأغنية. ويبلغ طول كل التحفيز هو 16 ثانية. هو تطبيع كثافة كل أغنية من حيث يقابل جذر متوسط مربع وعالية تمرير تصفيتها في 400 هرتز قبل أن يتم دمجها في التحفيز كاملة (أغنية وفترات الصمت). تتم هذه المعالجات باستخدام البرامج برات.
- تتكون التجربة من ON / OFF تصميم كتلة فترات متناوبة التحفيز السمعي (على كتل) مع فترات الراحة (OFF بنات) (الشكل 2). كل كتلة (ON OFF و) يدوم 16 ثانية، والتي تتطابق مع اكتساب الوقت من 2 صورة (انظر أدناه للحصول على الاستحواذ). يتم تقديم كل نوع التحفيز 25 مرة، مما أدى إلى اقتناء 50 صورة لكل التحفيز ولكل موضوع. ترتيب العرض من الشروط يجب أن تكون العشوائية داخل وبينالموضوعات. يمكن أن تكون مشفرة هذا النظام العشوائية من المحفزات في صناعة البرمجيات عرض.
2. إعداد الموضوع
2.1 الموضوع وحجم المجموعة
هنا نقدم بروتوكول تكييفها خصيصا لاستخدام (الكبار) العصافير حمار وحشي. اختيار الأنواع يعتمد على مسألة علمية. ومع ذلك، يمكن أيضا أن تؤخذ اعتبارات أخرى مثل متانة الطيور إلى التخدير في الاعتبار. حمار وحشي العصافير (Taeniopygia الرقشاء) وينبغي أن يضم في الأقفاص تحت 12 ساعة ضوء: 12 ساعة الإضاءة مظلمة والحصول على الغذاء والماء بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية طوال فترة الدراسة. في أقل عدد ممكن من الأفراد في التجربة هو 15. هذا الرقم يأخذ في الاعتبار حساسية الرنين المغناطيسي الوظيفي تدور الصدى وتباين بين فرد طبيعي من الظواهر البيولوجية التي تم قياسها في التجربة.
2.2 تركيب الإعداد والتحضير للحيوان
(للمواصفاتمن المعدات المستخدمة، نشير إلى قائمة الكواشف والمعدات المحددة في نهاية هذه المقالة)
- تثبيت قناع منقار على السرير التصوير بالرنين المغناطيسي لنظام MR 7T وتوصيله إلى جهاز تحكم الغاز مع أنابيب بلاستيكية. فتح كل من الأكسجين والزجاجات غاز النيتروجين والتبديل على جهاز تحكم الغاز (معدل تدفق الأكسجين: 200 سم مكعب / دقيقة؛ النيتروجين: 400 سم مكعب / دقيقة).
كما ذكر أعلاه، ويستخدم نظام MR 7T في الإعداد المقدمة. نظم MR الأخرى مع شدة المجال مختلفة من الممكن أيضا، ولكن في 7T يتم التوصل إلى حل وسط جيد بين نسبة الإشارة إلى الضوضاء ودرجة قابلية التحف (انظر المناقشة). في شدة المجال أعلى نسبة الإشارة إلى الضوضاء سوف تزيد مع درجة من التحف قابلية.
- التبديل على نظام رقابة ردود فعل وجهاز تدفق الهواء الدافئ.
- تخدير حمار وحشي فينش مع 3٪ isoflurane وفي خليط من الأكسجين والنيتروجين عن طريق إدخال منقارهفي قناع وعقد الرأس إلى أسفل حتى الطيور هو تخدير كامل. يمكن التحقق من ذلك عن طريق سحب القدم بهدوء: سوف عندما يتم تخدير الطيور تماما لا يمكن التراجع عنها في القدم من قبل الطيور. وبالإضافة إلى ذلك، أعين الطيور سيتم إغلاق جزئيا.
- إدخال مسبار درجة الحرارة مذرقي لفحص درجة حرارة الجسم ورصد معدل التنفس عن طريق وضع جهاز استشعار تعمل بالهواء المضغوط تحت فينش بطن حمار وحشي. إغلاق سترة لكبح جسم الطائر (الشكل 3).
- الحفاظ على معدل التنفس في نطاق 40-100 نفسا في الدقيقة والحفاظ على درجة حرارة الجسم ثابتة ضمن نطاق ضيق من 40 ± 0.5 درجة مئوية. عندما النطاق التنفس منخفض جدا / عالية، وضبط مستوى التخدير (٪ isoflurane و) وفقا لذلك. عندما استمرت المشكلة، يجب أن تتوقف التجربة والحيوان إزالتها من الإعداد من أجل استرداد.
- ضع المتكلمين دينامية غير المغناطيسية على جانبي الرأس فينش حمار وحشي ويخدعnect منهم إلى مكبر للصوت. تأكد من أن أسلاك من المتحدثين ويقود بعيدا عن التحقيق في درجة الحرارة، لأنها يمكن أن تؤثر على قراءة درجة الحرارة عندما قريبة جدا.
- وضع لفائف الترددات اللاسلكية على سطح العلوي من الرأس فينش حمار وحشي وحمار وحشي فينش موقف في وسط المغناطيس (وتلقائيا وسط لفائف الإرسال التي تقع في منتصف المغناطيس).
- خفض مستوى التخدير إلى 1.5٪ isoflurane ومختلطة مع الأكسجين والنيتروجين.
3. الحصول على البيانات
- اكتساب مجموعة من 1 السهمي، 1 أفقي و 1 الاكليلية التدرج الصدى (GE) صورة الكشفية (ثلاثي الطيار تسلسل) ومجموعات من الأفقي، الاكليلية والسهمي صور متعددة شريحة (تجريب T 2 المرجحة السريع اقتناء الاسترخاء محسنة ( نادر) تسلسل SE) لتحديد موقف من الدماغ في المغناطيس (الشكل 4).
- تقليل الضوضاء من التدرجات من خلال زيادة مرات منحدر ل1،000 ميكرو ثانية.
<لى> إعداد تسلسل الرنين المغناطيسي الوظيفي: نادر T تسلسل 2 مرجح، فعالة TE: 60 ميللي ثانية، TR: 2،000 ميللي ثانية، عامل نادر: 8، مجال الرؤية: 16 مم، حجم مصفوفة: 64 × 32، التوجه: السهمي، شريحة سمك: 0.75 مم، المشتركة بين شريحة سمك الفجوة: 0.05 مم، 15 شرائح التي تغطي الدماغ كله تقريبا (الشكل 4). - حدد البروتوكول السمعي (مؤثرات السمعية وتوقيت تسليم التحفيز) في برنامج العرض. يتكون هذا البروتوكول من سلسلة من الأوامر - لبدء التحفيز السمعي محددة - والتي يتم تنفيذها في العدد مسح محددة. في كل تكرار ضمن تسلسل الرنين المغناطيسي الوظيفي، وبرنامج الماسح الضوئي إرسال الزناد لبرنامج العرض السمعي والذي بدوره يسجل عدد المسح الضوئي وتنفيذ الأمر الموافق.
- للتأكد من أن برنامج العرض السمعي لا تدع أيا الزناد من الماسح الضوئي، يبدأ بروتوكول السمعي الأول. بمجرد أن يتم تحميل بروتوكول بالكامل، يتم تشغيل تسلسل الرنين المغناطيسي الوظيفي.
- ويسبق كل تجربة الرنين المغناطيسي الوظيفي من قبل اقتناء 12 صورة وهمية للسماح للإشارة منسوبة إلى الضوضاء الماسح الضوئي للوصول إلى حالة مستقرة قبل بدء التحفيز السمعي.
- بعد اكتساب صفر ملء البيانات إلى 64 × 64.
- نلقي نظرة الأولى (الأولية) في النتائج باستخدام أداة وظيفية من Paravision (خيار التحميل / التصوير الوظيفية). حساب الفرق بين استجابة BOLD كل شيء على الكتل والأساس (OFF بنات). هذا التحليل يعطي أول إشارة لنوعية التجربة. إذا وينظر لا التنشيط في المناطق السمعية الأولية في هذه المرحلة، والطيور لم ربما لم تسمع / معالجة المنبهات السمعية بسبب مشاكل فنية مع عرض الحوافز، ومستوى التخدير، الخ وينبغي التحقق من الإعداد والقياس المتكرر.
- تشغيل 3D تسلسل T2 المرجحة التشريحية نادرة في نفس الاتجاه مثل أشعة الرنين المغناطيسي الوظيفي السابق ومع TE فعالة: 60 ميللي ثانية، TR: 2،000 ميللي ثانية، عامل نادر: 8، FOV: 16 مم، حجم المصفوفة: 256 × 128 × 64.
- صفر ملء البيانات إلى 256 × 256 × 256.
- خذ حمار وحشي فينش من السرير التصوير بالرنين المغناطيسي والسماح لها على التعافي من التخدير في قفص تحت مصباح أحمر. عادة، فإن الانتعاش من فينش حمار وحشي بعد التخدير isoflurane ويذهب بسرعة نسبيا (الحد الأقصى 5 دقائق). بعد بضع دقائق فقط، فإن الطيور في محاولة للوقوف وبمجرد استعادة الطيور بشكل كامل، وسوف جثم على فرع بدلا من الجلوس على الجزء السفلي من القفص. مدة التخدير حوالي 2 ساعة للتجربة الحالية. الحد الأقصى للوقت من التخدير isoflurane وتطبيقها على العصافير حمار وحشي في مختبرنا هو 6 ساعة، وبعد ذلك استعاد الطيور أيضا في غضون 5 دقائق.
4. معالجة البيانات
- تحويل البيانات إلى MR-تحليل أو شكل Nifti.
- لأنه قد تم تطوير إدارة الأداء الاجتماعي لمعالجة البيانات الرنين المغناطيسي الوظيفي المكتسبة في البشر، وهذا هو لvoxels من حوالي 2 مم. يتم تكييفها إعدادات SPM عديدة لهذا الحجم فوكسل تقريبي. إذا كان أحد لا ثالنمل لتغيير كل هذه الإعدادات، وأبسط طريقة للعمل هي مصطنعة الى زيادة حجم فوكسل من البيانات الرنين المغناطيسي الوظيفي الطيور. ضبط حجم فوكسل في رأس بضرب حجم فوكسل الحقيقي بنسبة 10 باستخدام MRIcro. وتجدر الإشارة إلى، أن مثل هذا التعديل لا يؤثر على البيانات في حد ذاته، لا اختزال أو أي تعديلات أخرى ليتم تطبيق البيانات.
بديل لهذا هو استخدام 'SPMMouse' الذي هو مجموعة أدوات إدارة الأداء الاجتماعي السماح لفتح وتحليل الملفات من أي البعد فوكسل. أداة تسمح ليتم إنشاؤه 'أدمغة زجاج' SPM من أي صورة، وتلقائيا بضبط الإعدادات الافتراضية موازين طول يعتمد على رؤوس من ملفات الصور أو البيانات التي تم إدخالها المستخدم. وبالتالي، يعمل هذا الأدوات في الطريق المعاكس من ما نقترح. بدلا من تغيير حجم فوكسل من الصور لتناسب في إدارة الأداء الاجتماعي، يتم تغيير الإعدادات الافتراضية لإدارة الأداء الاجتماعي لاستخدام الصور بأحجام مختلفة فوكسل.
- إعادة ترتيب البيانات الرنين المغناطيسي الوظيفي. شارك في تسجيل بيانات 3D التشريحية لرانه سلسلة زمنية الرنين المغناطيسي الوظيفي. تطبيع البيانات 3D (وسلسلة زمنية الرنين المغناطيسي الوظيفي المشترك المسجل) إلى حمار وحشي فينش الدماغ بالرنين المغناطيسي أطلس. تطبيق مصفوفة التحول إلى مجموعة البيانات الرنين المغناطيسي الوظيفي. يمكن لجميع القيام بذلك باستخدام رسم الخرائط حدودي الإحصائية (SPM) 8 البرمجيات.
- تمهيد البيانات مع 0.5 ملم عرض جاوس نواة باستخدام SPM8.
- إجراء تحليلات إحصائية المستندة إلى فوكسل باستخدام SPM8. نموذج البيانات على شكل مربع السيارة (أي وظيفة استجابة الدورة الدموية). تقدير معالم النموذج مع الكلاسيكية المقيدة القصوى خوارزمية أرجحية. حساب تأثير متوسط كل التحفيز السمعي في كل موضوع (تحليل الأثر الثابت) ثم حساب الاحصائيات كما تمنى للتحليلات مجموعة (التحاليل مختلط المفعول).
- مشروع خريطة حدودي الإحصائية على حمار وحشي فينش أطلس (الشكل 5) 9 في SPM8 في توطين الوظائف التنشيط (الشكل 6).