يوصف أسلوب لإدارة المخدرات على الفئران الأنف مستيقظا لغرض استهداف الدماغ. هذا الأسلوب يسمح للتكرار الجرعات على مدى فترات طويلة داخل الأنف باستخدام إدارة المخدرات من دون تخدير، والأنف إلى الدماغ مع التعرض تسليم النظامية الحد الأدنى.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الأنف الإدارة هو وسيلة لإيصال العوامل العلاجية للجهاز العصبي المركزي (CNS). فمن غير الغازية ويسمح الجزيئات الكبيرة التي لا تعبر الوصول حاجز الدم في الدماغ إلى الجهاز العصبي المركزي. وتستهدف العقاقير مباشرة إلى الجهاز العصبي المركزي مع التسليم داخل الأنف، والحد من التعرض النظامية وغير المرغوب فيها وبالتالي الآثار الجانبية الجهازية 1. التسليم من الأنف إلى CNS يحدث في غضون دقائق على طول الممرات العصبية الشمية على حد سواء ومثلث التوائم عبر الطريق خارج الخلية و لا يتطلب المخدرات لربط أي مستقبلات أو النقل محواري 2. تسليم داخل الأنف هو وسيلة إعلامية على نطاق واسع ويستخدم حاليا في التجارب السريرية البشرية 3.
تسليم داخل الأنف من الأدوية في النماذج الحيوانية يسمح لتقييم أولي لتوزيع الدوائية والفعالية. مع الفئران، فمن الممكن لإدارة المخدرات للحيوانات مستيقظا (غير تخدير) على أساس منتظم باستخدام specialized قبضة داخل الأنف. تسليم مستيقظا هو مفيد لأنه يسمح على المدى الطويل المزمن الجرعات بدون تخدير، فإنه يأخذ وقتا أقل من التخدير مع، ويمكن تعلمها والذي قام به الكثير من الناس أن فرق من الفنيين أرقام جرعة كبيرة من الفئران يمكن في فترات قصيرة. وقد ثبت فعالية العلاجات تدار الأنف بهذه الطريقة على الفئران في عدد من الدراسات بما في ذلك الأنسولين في السكري نماذج الماوس 4-6 و ديفيروكسامين في نماذج الماوس الزهايمر. 7،8
يمكن تعلم قبضة الأنف بالنسبة للفئران، ولكن ليست سهلة وتتطلب الممارسة والمهارة، وقبضة دقيق لتسليم المخدرات بشكل فعال إلى الدماغ وتجنب الصرف إلى الرئة والمعدة. وضبط النفس الفئران باليد باستخدام القفا تعديل في اليد غير المسيطرة مع الرقبة عقد بالتوازي مع الكلمة، في حين يتم تسليم المخدرات مع pipettor استعمال اليد المهيمنة. وعادة ما يستغرق 3-4 أسابيع من التأقلم على التعامل مع الفئران قبلويمكن عقد مع هذه قبضة دون رد الإجهاد. قمنا بإعداد هذا الفيديو إن الرب لجعل هذه التقنية أكثر سهولة تسليم داخل الأنف.
البروتوكول
1. التأقلم لمناولة الجرعات داخل الأنف على الفئران استيقظ
مقدمة
يجب التعامل مع الفئران لتأقلم لمدة 2-4 أسابيع قبل بدء الجرعات داخل الأنف. التأقلم لمعالجة أمر مهم، لأنه يساعد على ضمان موقف الجسم الصحيح لأقصى قدر من الفعالية من مستيقظا تسليم المخدرات داخل الأنف. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أن الفئران التي لم يتم بشكل صحيح اعتاد في هذه العملية يكون رد فعل القلق الشديد بعد الجرعات. يجب أن الفئران تنفق حوالي 2-3 أيام في كل من تسع خطوات قبل التقدم إلى الخطوة التالية، تبعا الراحة الحيوان للمعالجة. وينبغي استخ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
هناك عدة طرق لتحديد مدى فعالية لاستخدام العقاقير. الأول هو لإدارة الأنف صبغة، مثل الهند أو الحبر الأزرق والميثيلين لتصور الصبغة بعد القتل الرحيم للحيوان داخل الظهارة الشمية وبعد إزالة الدماغ، ودخول CNS من خلال لوحة المصفوية. والثاني هو لقياس المخدرات تسليمها إما باستخدام بصمة الراديوية المسمى أو باستخدام ELISA الكشف عن جزيء الخالي من الملصقات. ويمكن الاطلاع على مثال جيد على توزيع المخدرات في الجهاز العصبي المركزي بعد إعطاء الفئران لمستيقظا في هانسون وآخرون 2012 7.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
هذا الأسلوب يوضح كيف يمكن إعطاء الفئران جرعات منتظمة من الدواء داخل الأنف لاستهداف الدماغ من دون استخدام التخدير. يمكن أن يتم تسليم داخل الأنف المخدرات إلى مجموعات كبيرة من الفئران لفترات طويلة من الزمن مع الحد الأدنى من الجهد. يمكن مجموعة واحدة تصل إلى 20 الفئران التي عولجت الأنف قبل شخص واحد في أقل من ساعة واحدة. وقد أظهرت مجموعة واسعة من الجزيئات، التي تتراوح بين chelators الحديد الصغيرة لعوامل النمو للخلايا الجذعية الوسيطة، لاستهداف بسرعة CNS وأظهرت فعالية في نماذج القوارض. ال.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
فإن الكتاب أود أن أشكر HealthPartners رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة في مستشفى الأقاليم.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ماصة P20 مضبوطة على 6 μl | |||
| رؤوس ماصة لتحميل الهلام | |||
| مؤقت | |||
| وعاء نفايات للرؤوس | |||
| ورقة جرعات لتدوين الملاحظات | |||
| قلم | |||
| الدواء والمادة الحاملة | |||
| حاوية لحفظ قوارير الدواء | |||
| الحيوانات المقرر إعطاؤها الجرعات | |||
| قفازات احتياطية | |||
| مناشف ورقية لمسح البول | |||
| الجدول 3. المواد المطلوبة |
المراجع
- Dhuria, S. V., Hanson, L. R., Frey, W. H. 2nd Intranasal delivery to the central nervous system: mechanisms and experimental considerations. J. Pharm Sci. 99, 1654-1673 (2010).
- Thorne, R. G., Pronk, G. J., Padmanabhan, V., Frey, W. H. 2nd
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
