الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) التي يؤديها حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية الصور ICGA بالطبع الوقت لتميز شذوذ في الماوس المشيمية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) التي يؤديها حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية الصور ICGA بالطبع الوقت لتميز شذوذ في الماوس المشيمية.
الإندوسيانين الأخضر تصوير الأوعية الدموية (أو ICGA) هي تقنية التي يقوم بها أطباء العيون لتشخيص تشوهات في الأوعية الدموية المشيمية والشبكية من أمراض العيون المختلفة مثل الضمور البقعي المرتبط بالعمر (AMD). ICGA يكون مفيدا بشكل خاص لصورة الأوعية الدموية المشيمية الخلفي من العين نظرا لقدرتها على اختراق من خلال طبقة مصطبغة مع الطيف بالأشعة تحت الحمراء. ويمكن تقسيم ICGA بالطبع الوقت في وقت مبكر، والمتوسطة، والمراحل المتأخرة. تقدم المراحل الثلاث معلومات قيمة عن علم الأمراض من مشاكل في العين. على الرغم من أن الوقت بالطبع ICGA بواسطة الوريد (IV) ويستخدم على نطاق واسع الحقن في عيادة لتشخيص وإدارة المشاكل المشيمية، ICGA طريق الحقن داخل الصفاق (IP) يشيع استخدامها في البحوث الحيوانية. نحن هنا أثبتت هذه التقنية للحصول على صور عالية الدقة ICGA الوقت بالطبع في الفئران عن طريق الحقن الوريد الذيل ومتحد البؤر المسح تنظير العين بالليزر. استخدمنا هذه التقنية لصورة المشيمية جنيهالتوترات في نموذج الفأر من سن المتصلة تحلل البقعة الصفراء. على الرغم من أنه من الأسهل بكثير أن أعرض ICG إلى الأوعية الدموية الماوس عن طريق IP، البيانات المتوفرة لدينا تشير إلى أنه من الصعب الحصول على استنساخه ICGA الصور بالطبع الوقت عن طريق IP-ICGA. في المقابل، ICGA عبر حقن الوريد الذيل يوفر جودة عالية ICGA الوقت بالطبع الصور مماثلة لدراسات الإنسان. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت لنا أن ICGA أجريت على الفئران البيضاء يعطي صورة أكثر وضوحا من الأوعية المشيمية من ذلك أجريت على الفئران المصطبغة. نقترح ينبغي أن يصبح ذلك الوقت بالطبع IV-ICGA من الممارسات المعتادة في البحث AMD بناء على النماذج الحيوانية.
تصوير الأوعية الخضراء الإندوسيانين (ICGA) هو اختبار تشخيصي للمشاكل المتعلقة صورة الأوعية الدموية في العين. الامتصاص من ICG يتراوح 790-805 نانومتر بينما يتراوح الطيف الانبعاثات 770-880 نانومتر مع الانبعاثات ذروتها في 835 نانومتر 1. هذا يختلف عن الصبغة الشعبية الأخرى، فلوريسئين الصوديوم، الذي يقع في المدى المرئي الطيف. الطيف بالأشعة تحت الحمراء يمكن ICG لاختراق من خلال الشبكية ظهارة الصباغ (RPE)، والسوائل مصلي دموي، والإفرازات الدهنية، والتي يمكن أن تسد بسهولة عن طريق التصور الصوديوم فلوريسئين مقرها فلوريسئين تصوير الأوعية (FA). ICG في الأوعية الدموية مما يؤدي إلى تسرب أقل 98٪ من البروتين ملزمة، مما يتيح تعزيز تصوير الأوعية المشيمية والآفات المشيمية 1،2. ICGA يكاد يكون الخيار الوحيد لتصور الأوعية الدموية المشيمية، وهو الخلفي لRPE. الشكل 1 يبين المقارنة بين ICGA وFA في الأوعية الدموية في العينين التصوير الماوس. FA يمكن به استخدامها لصورة الأوعية الدموية في شبكية العين بشكل جيد ولكن ليس الأوعية الدموية المشيمية. في المقابل، ICGA يمكن استخدامها لصورة كل من شبكية العين والأوعية الدموية المشيمية. يتم تنفيذ ICGA مع أنظمة التصوير الرقمية عالية الدقة أو ناظور العيون المسح الضوئي ليزر (سلوفاكيا) جنبا إلى جنب مع كاميرات الفيديو الحساسة الأشعة تحت الحمراء، والتي سوف نستخدم في هذه الدراسة.
في العيادة، وقد أوصى ICGA في تشخيص عدد من الاضطرابات المشيمية و الشبكية التي تنطوي على الأوعية الدموية المشيمية بما في ذلك Polypoidal غلاف العين المشيمي وعائي (PCV)، الشبكية الورم الوعائي انتشار (RAP)، والشرائط شبيه الأوعية، المحي الشكل البقعي الضمور، اعتلال المشيمية و الشبكية المصلي المركزي، ورم وعائي المشيمية، نزيف في شبكية العين macroaneurysms تصلب والأورام المشيمية، وأشكال معينة من التهاب القزحية الخلفي 1،3. مزيج من ICGA مع الاتحاد الانجليزي والبصرية بالاتساق التصوير المقطعي (أكتوبر) توفير أدوات قوية لالأطباء في تشخيص وإدارة نضحي البقعي المرتبط بالعمرالضمور (AMD) 4-10. ICGA مفيد خاصة لتشخيص الظروف التي تنطوي على المشيمية. في الواقع، يعتبر ICGA المعيار الذهبي لتشخيص PCV، وهو البديل من نضحي AMD 11-13. يتميز PCV من خلال شبكة من الأوعية المتفرعة مع التوسعات polypoidal محطة في الأوعية الدموية المشيمية 11-13. كثيرا ما يرتبط PCV مع مفارز مصلي دموي المتكررة من RPE والشبكية مع التسرب ونزيف من مكونات polypoidal 11،14،15. نحن ذكرت مؤخرا توليد أول نموذج حيواني PCV بالإعراب عن transgenically HTRA1 الإنسان، وهو الأنزيم البروتيني سيرين متعددة الوظائف، في شبكية العين الماوس الظهارة الصبغية (RPE) 16. أظهرنا أن زيادة HTRA1 يسببها السمات المميزة لPCV، مثل الآفات polypoidal.
نحن هنا أثبتت الاستفادة من الوقت بالطبع ICGA بواسطة ذيل حقن الوريد في مجال البحوث AMD باستخدام لدينا HTRA1 نموذج الفأر. وتشير البيانات المتوفرة لدينا أنIV-ICGA متفوقة على الملكية الفكرية (أو تحت الجلد (SC)) ICGA التي يتم استخدامها حاليا في مجال 17،18 لوصف الآفات في المشيمية.
بيان للبحوث الحيوان
وأجريت التجارب على الحيوانات وفقا لبروتوكولات المعتمدة من قبل المؤسسات ورعاية الحيوان اللجنة استخدم (IACUC)، وأجريت وفقا للبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
1. إعداد الأدوات
ملاحظة: وقد أفيد أن استخدام سو عدسة شبه كروي مزدوج خارجي يمكن تحسين جودة الصورة 17-20 على الرغم من أن ليس لدينا أي مشكلة في الحصول على صور ذات جودة عالية من قبل IV-ICGA دون استخدام العدسات الخارجية (انظر نتائج ممثل، أرقام 1-4).
2. الذيل الوريد حقن ICGA
ملاحظة: يمكن الحصول على عيون ماوس بسهولة الجافة ويمكن أن تتطور الساد تحت التخدير. فمن المهم للحفاظ على العين رطبة من خلال تطبيق برنامج تلفزيوني العقيمة أثناء العملية. تمحو PBS الزائدة مع مسحة القطن المعقم قبل تسجيل ICGA. وقد استخدمت مختبرات أخرى العدسات اللاصقة لتجنب جفاف القرنية 17-20.
3. ICG تصوير الأوعية الدموية
ملاحظة: توقيت كل مرحلة ليست مطلقة. وجدنا أن توقيت عصامقد تتغير مرحلة الفصل اعتمادا على كمية من ICG حقن. أكثر ICG يميل إلى إطالة أمد كل مرحلة. أفضل طريقة لتحديد المرحلة هو وفقا لخصائص كل مرحلة رئيسية من المذكورة أعلاه.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
أجرينا ICGA بالطبع الوقت في HTRA1 الفئران المعدلة وراثيا والسيطرة تتزاحم WT، وكلاهما على خلفية CD1. وقد تم اختيار الخلفية CD1 البيضاء لتسهيل تصوير الأوعية الخضراء الإندوسيانين (ICGA) التصوير (انظر المناقشة). تمدد الأوعية الدموية مثل بعض التوسعات بدأت تظهر في المرحلة المبكرة في الماوس HTRA1 (الشكل 2، السهم الأحمر يشير إلى تمدد في طرف سفينة ودائرة حمراء تشير إلى نوع الآفة polypoidal العنقودية). الأوعية المشيمية هي واضحة للعيان في كل WT والفئران HTRA1 خلال هذه المرحل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في هذه الدراسة، أثبتنا استخدام ICGA لصورة الآفات المشيمية في HTRA1 الفئران المعدلة وراثيا. خصائص في وقت مبكر، المتوسطة، والمراحل المتأخرة من ICGA في نموذج الفأر لدينا تطابق بالطبع الوقت جيدا في الدراسات الإنسانية 1. هذا مهم لإجراء مقارنات أفضل بين أمراض الحيوان والظواهر البشرية التي لا تقدر بثمن للبحوث بشأن آليات الفيزيولوجية المرضية واستراتيجيات علاج الحالات ذات الصلة المشيمية مثل AMD.
أجرينا أول ICGA...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
YF هو مخترع اثنين من براءات الاختراع في انتظار التي هي ذات الصلة إلى نموذج الفأر AMD المستخدمة في هذا العمل. SK، ZB، وADJ ليس لديهم ما يكشف.
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح 1R01EY022901، وجائزة التطوير المهني من البحوث للوقاية من العمى (RPB)، CMReeves & MA مؤسسة ريفز، ومؤسسة E. ماتيلدا زيغلر للمكفوفين، ومؤسسة فرسان الهيكل العين، ومنحة غير المقيد إلى إدارة طب العيون في جامعة ولاية يوتا من RPB. نشكر Balamurali Ambati للحصول على المساعدة التقنية على نظام متعدد القيد التصوير Spectralis وتشانغ تاو للمناقشات وتعليقات على المخطوطة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| نظام التصوير متعدد الطرائق Spectralis | هايدلبرغ الهندسية ، ألمانيا | SPECTRALIS HRA + OCT | |
| محلول العيون تروبيكاميد (1٪) | Bausch & amp Lomb | NDC 24208-585-64 | لتوسيع حدقة العين |
| GenTeal Gel | Genteal | NDC 58768-791-15 | ؛ جل زيوت التشحيم الشفاف للعين |
| Ketamine | Vedco Inc | NDC 50989-996-06 | |
| مختبرات | زيلازين | NADA 139-236 | |
| Acepromazine | Vedco Inc | NDC 50989-160-11 | |
| 32-G إبرة | Steriject | PRE-32013 | |
| حقنة 1 مل | BD | 309659 | |
| Indocyanine Green | Pfaltz & amp باور | I01250 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.