يتم إنشاء تمدد الأوعية الدموية الجانبي المجهري في الفئران عن طريق مفاغرة طرف إلى جانب لطعم الأبهر في الشريان الأورطي البطني. نقدم إرشادات خطوة بخطوة ونناقش التفاصيل التشريحية والجراحية لإنشاء تمدد الأوعية الدموية الكيسي التجريبي الناجح.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
هلسنكي الجرذ المجهرية جانب الجدار تمدد الأوعية الدموية نموذج
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
النماذج التجريبية تمدد الأوعية الدموية كيسية ضرورية لاختبار خيارات العلاج الجراحي واللف والأجهزة الجديدة قبل أن يتم إدخالها في الممارسة السريرية. وعلاوة على ذلك، هناك حاجة إلى نماذج تجريبية لتوضيح البيولوجيا تمدد الأوعية الدموية المعقدة مما يؤدي إلى تمزق تمدد الأوعية الدموية من كيسية.
وقد أنشئت عدة أنواع مختلفة من نماذج تجريبية لتمدد الأوعية الدموية كيسية في الأنواع المختلفة. كثير منهم، ومع ذلك، تتطلب مهارات خاصة، معدات باهظة الثمن، أو في البيئات الخاصة، الأمر الذي يحد من استخدامها على نطاق واسع. وهناك حاجة إلى نموذج تجريبي بسيط وقوي، وغير مكلفة كأداة موحدة يمكن استخدامها بطريقة موحدة في مختلف المؤسسات.
الفئران المجهرية البطن نموذج جدار الأبهر تمدد الأوعية الدموية يجمع بين إمكانية لدراسة كل استراتيجيات علاجية جديدة اللف والأساس الجزيئي للتمدد الأوعية الدموية في البيولوجيا موحدة وغير مكلفةالطريقة. ويتم حصاد الطعوم موحدة عن طريق الشكل والحجم، والهندسة من الانزلاق الأبهر الصدري فأر المتبرع ومن ثم نقلهم إلى الفئران المتلقي syngenic. تتم خياطة تمدد نهاية إلى جنب مع مستمرة أو توقف 9-0 خيوط النايلون إلى الشريان الأورطي البطني infrarenal.
نقدم الإرشادات الإجرائية خطوة بخطوة، معلومات عن المعدات اللازمة، ومناقشة التفاصيل التشريحية والجراحية الهامة لخلق المجهرية الناجح لجدار الأبهر البطني تمدد الأوعية الدموية في الفئران.
المقدمة
تمزق في الشريان الدماغي الكيسية يسبب تمدد الأوعية الدموية نزيف يهدد الحياة مما يؤدي إلى السكتة الدماغية، والضرر العصبي الدائم أو الوفاة. تمزق يمكن الوقاية منها عن طريق إما لقطة المجهرية أو تمدد الأوعية الدموية انسداد الأوعية الدموية من الداخل. لم يتم بعد تأسيس العلاج الطبي لمنع نمو وتمدد الأوعية الدموية تمزق.
وهناك حاجة إلى نماذج تجريبية لتمدد الأوعية الدموية كيسية لدراسة علم الأحياء من تمدد الأوعية الدموية الشريانية واختبار الأجهزة واستراتيجيات علاجية جديدة. لهذه الأغراض، تم وضع عدة نماذج مختلفة في أنواع مختلفة، ونشرت 1. وتستخدم نماذج تمدد الأوعية ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
ملاحظة: ذكر فئران ويستار (متوسط وزن الجسم: 356 ± 44 غرام؛ 10-14 أسابيع من العمر) كانوا يقيمون في غرفة الحيوان في 22-24 درجة مئوية، واثني عشر ساعة ضوء / دورة الظلام مع حرية الوصول إلى نظام غذائي بيليه، ماء الصنبور العادية وتلقى أيضا الرعاية الإنسانية وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية. تم استعراض التجارب التي وافقت عليها لجنة رعاية الحيوان في جامعة هلسنكي، فنلندا.
ملاحظة: في المظاهرة التالية أسلوبنا الجراحي كما يلي: تخدير الفئران بواسطة تكييفها الوزن الحقن تحت الجلد من هيدروكلوريد medetomidine (0.5 ملجم / كجم)، والحقن داخل الصفاق من الكيتامين هيدروكلوريد (50 ملغ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تتألف سلسلة الطيار 14 الفئران. بعد ذلك تم تشغيل ما مجموعه 84 الحيوانات وفقا لبروتوكول المعروضة لعدة مشاريع بحثية بين مارس وسبتمبر 2012. إضافية 29 الحيوانات بمثابة المانحين لترقيع الشرايين كيسية. وأجريت التجارب المتبقية باستخدام الطعوم معاملة ما قبل حصادها وتخزينها من التجارب السابقة باستخدام الفئران من نفس الجنس والسلالة والوزن والعمر.
وزن الجسم، والوقت التشغيل الشامل، الأبهر الوقت لقط، والوقت لإنشاء مفاغرة، والو.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
التقدم في فهمنا لعلم الأحياء معقد من الشريان الدماغي الكيسية تمدد الأوعية الدموية يعتمد على تحليل البيانات الوبائية والسريرية، وتستكمل الدراسات المختبرية على عينات من المرضى والعمل التجريبي في النماذج الحيوانية 3،12،13.
الحيوانات الصغيرة مثل الفئران ترتبط بطبيعتها مع انخفاض تكاليف التجارب والإسكان، وانخفاض الحاجة من المعدات المتخصصة. متوسط إجمالي وقت تشغيل أقل من 60 دقيقة لخلق المجهرية من تمدد الأوعي.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم مصلحة مالية أو تجارية في أي من الأدوية أو المواد أو المعدات المستخدمة.
شكر وتقدير
المؤلفون هم وحدهم المسؤولون عن تصميم وإجراء الدراسة المقدمة. تم دعم الدكتور مارباشر بمنحة من المؤسسة الوطنية السويسرية للعلوم (PBSKP3-123454). ويعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
تشمل مساهمات المؤلف في الدراسة وإعداد المخطوطة ما يلي. المفهوم والتصميم: SM ، JM ، JF. الحصول على البيانات: SM ، EA، JF. تحليل وتفسير البيانات: SM ، JF ، JM. صياغة المقال: SM ، JF ، JM. مراجعة نقدية للمقال: JH ، MN. التحليل الإحصائي: SM, JF. الإشراف على الدراسة: JF, JH, MN.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ميديتوميدين | أي genericon | ||
| Ketamin | أي genericon | ||
| بوبرينورفين | أي genericon | ||
| فوسفات مخزن محلول ملحي | |||
| كبريتات دوديسيل الصوديوم (0.1٪) 3-0 | |||
| خياطة قابلة للامتصاص | Ethicon Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية | VCP824G< / a> | |
| 5-0 خياطة غير قابلة للامتصاص | Ethicon Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية | 8618G | |
| 6-0 خياطة حريرية غير قابلة للامتصاص | B. براون ، ألمانيا | C0761060 | |
| 9-0 خياطة نايلون صغيرة | B. Braun ، ألمانيا | G1118471 | |
| Spongostan | Ethicon Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية | MS0002 | |
| مجهر عملية | لايكا ، ألمانيا | كاميرا مجهر رقمي M651 | |
| سوني ، اليابان | SSC-DC58AP | ||
| الأدوات الجراحية القياسية | B. براون ، ألمانيا | بروتوكول رؤية | متعددة 1.4 |
| أدوات الجراحة المجهرية | B. براون ، ألمانيا | متعددة | انظر البروتوكول 1.5 |
| مشبك الأوعية الدموية | B. Braun ، ألمانيا | FT495T | |
| مشابك الأوعية الدموية المؤقتة | B. براون, ألمانيا | FT250T | |
| الرسم البياني لوحة المنشور البرمجيات الإحصائية | GraphPad ، سان دييغو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | V 6.02 لنظام التشغيل Windows |
المراجع
- Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
- Marbacher, S., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
