RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
Research Article
Dominique Martinez1, Lotfi Arhidi1, Elodie Demondion2, Jean-Baptiste Masson3, Philippe Lucas2
1UMR 7503, Laboratoire Lorrain de Recherche en Informatique et ses Applications (LORIA),Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), 2UMR 1392 iEES-Paris,Institut d'Ecologie et des Sciences de l'Environnement de Paris, 3Physics of Biological Systems,Institut Pasteur
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
نصف بروتوكولا لاستخدام هوائيات الحشرات في شكل مخططات كهربائية (EAGs) على الروبوتات المستقلة. يسمح تصميمنا التجريبي بتسجيلات مستقرة في غضون يوم واحد ويحل بقع الروائح الفردية حتى 10 هرتز. تتجلى كفاءة مستشعرات EAG للبحث الشمي في دفع الروبوت نحو مصدر الرائحة.
الروبوتات المصممة لتتبع التسريبات الكيميائية الخطرة في المنشآت الصناعية 1 أو آثار المتفجرات في حقول الألغام الأرضية 2 وجه نفس المشكلة كما الحشرات تبحث عن الطعام أو البحث عن الاصحاب 3: يتم تقييد البحث حاسة الشم من قبل الفيزياء النقل المضطرب 4. المشهد تركيز الرياح تنقلها الروائح غير متقطع ويتكون من بقع تقع بشكل متقطع. وهناك شرط مسبق إلى البحث حاسة الشم هو أن يتم الكشف عن بقع رائحة متقطعة. بسبب سرعتها العالية وحساسية 5-6، الجهاز الشمي من الحشرات يوفر فرصة فريدة من نوعها للكشف. وقد استخدمت هوائيات الحشرات في الماضي للكشف ليس فقط الفيرومونات الجنس 7 ولكن أيضا المواد الكيميائية التي هي ذات الصلة إلى البشر، على سبيل المثال، مركبات طيارة الصادرة عن الخلايا السرطانية 8 أو المواد السامة وغير المشروعة 9-11. نحن هنا وصف بروتوكول لاستخدام هوائيات الحشرات على الروبوتات المستقلة ود تقديم إثبات المفهوم لتتبع رائحة أعمدة إلى مصدرها. يتم تسجيل استجابة عالمية من الخلايا العصبية الشمية في الموقع في شكل electroantennograms (EAGs). لدينا التصميم التجريبي، استنادا إلى إعداد الحشرات كله، يسمح التسجيلات مستقرة خلال يوم العمل. في المقارنة، EAGs على هوائيات رفعه يكون عمر من 2 ساعة. وقد تم تطوير واجهة الجهاز مخصص / برنامج بين الأقطاب EAG والروبوت. نظام القياس يحل بقع رائحة الفردية تصل إلى 10 هرتز، وهو ما يتجاوز النطاق الزمني لأجهزة استشعار كيميائية اصطناعية 12. وكذلك أثبتت كفاءة من أجهزة الاستشعار EAG لعمليات البحث حاسة الشم في قيادة الروبوت نحو مصدر فرمون. باستخدام المحفزات وأجهزة الاستشعار حاسة الشم متطابقة كما في الحيوانات الحقيقية، ويوفر منصة لدينا الروبوتية وسيلة مباشرة لاختبار الفرضيات البيولوجية حول الترميز حاسة الشم واستراتيجيات البحث 13. فإنه قد يثبت أيضا مفيدة للكشف عن عطر أخرى من المصالح من قبلالجمع بين EAGs من أنواع الحشرات المختلفة في تكوين الأنف bioelectronic 14 أو باستخدام أجهزة الاستشعار الغاز ذات البنية النانومترية التي تحاكي الحشرات هوائيات 15.
في الوقت الحاضر، وكثيرا ما تستخدم الحيوانات مثل الكلاب في تطبيقات السلامة والأمن التي تنطوي على توطين التسريبات الكيميائية والمخدرات والمتفجرات لما لها من ممتازة قدرات الكشف رائحة 16. حتى الآن، وأنها تظهر الاختلافات السلوكية، بالتعب بعد العمل المكثف، وتتطلب إعادة تدريب متكررة، ويقلل أدائها مع مرور الوقت 17. طريقة واحدة للتحايل على هذه القيود هو استبدال الكلاب المدربة من قبل الروبوتات حاسة الشم.
مع ذلك، وتتبع الروائح ومصادر الرائحة يشكل تحديا كبيرا في مجال الروبوتات. في بيئات مضطربة، والمناظر الطبيعية من عمود رائحة غير متجانسة للغاية وغير مستقرة، ويتكون من بقع تقع بشكل متقطع 4. حتى على مسافات متوسطة من المصدر، قصيرة قدر بضعة أمتار، المكتشفة تصبح متقطعة وتقديم العظة فقط بشكل متقطع. علاوة على ذلك، التدرجات تركيز المحلية خلال المكتشفة لا تشير عموما نحو المصدر. قرص معينتدفق ontinuous المعلومات والمعلومات المحلية محدودة عندما تتم اكتشافات كيفية التنقل روبوت نحو مصدر؟
ومن المعروف جيدا أن الحشرات مثل العث الذكور استخدام الاتصالات الكيميائية لتحديد أقرانهم بنجاح لمسافات طويلة (مئات الأمتار). للقيام بذلك، فإنها تبني السلوك النمطية 18-20: أنها ترتفع عكس الريح على استشعار رائحة التصحيح وإجراء بحث موسع دعا الصب عندما تختفي الرائحة المعلومات. هذه الاستراتيجية الصب تصاعد رد الفعل هو محض، ويتم تحديد الإجراءات تماما من أي تصورات الحالية (الكشف وعدم الكشف عن الأحداث). حتى الآن، وتنفيذه على الروبوتات حاسة الشم قد النجاح في الماضي محدودة بسبب الكشف عن بقع رائحة يعوقه بطء أجهزة الاستشعار الغاز الاصطناعي.
أجهزة الاستشعار أكسيد المعدن الذي يستخدم في معظم الروبوتات حاسة الشم لديهم الاستجابة والإنعاش مرات عدة عشرات ثانية بحيث تصفية عموما خارجتقلبات تركيز اجه في أعمدة مضطربة 21. في المقابل، فإن زمن الاستجابة من المستقبلات الكيميائية للحشرات هو أقصر من ذلك بكثير، على سبيل المثال، في الوقت صعود electroantennograms الحشرات (EAGs) هو أقل من 50 ميللي ثانية 22. بالتالي، باستخدام EAGs الحشرات، ويتم حل البقول رائحة بترددات عدة هيرتز 23. هذه الخاصية يجعل أجهزة الاستشعار EAG مناسبة تماما للكشف عن خيوط رائحة في أعمدة الطبيعية. نحن هنا وصف بروتوكول لتضمين EAGs الحشرات على الروبوتات السماح لعمليات البحث باستخدام حاسة الشم كفاءة وزيادة الصب الاستراتيجيات.
ويستند البروتوكول على الروبوت المتاحة تجاريا (انظر الجدول مواد) والعث الذكور (AGROTIS ipsilon) مع فرمون جنسهم. حتى الآن، وأنه يمكن تكييفها مع تعديلات طفيفة لأنواع من الحشرات، عطر، والروبوتات.
1. الحشرات
3. الأجهزة واجهة
4. واجهة البرامج
والمواضيع الرئيسية تحتوي على واجهة المستخدم الرسومية (GUI)، وأساليب للكشف عن إشارة وظائف مختلفة للتحكم في الروبوت.
والمنخفضة تمرير مرشح 1 شارع أجل مع وظيفة دفعة الأسي
إلى
، انظر الشكل 3A. في استجابة لتغير تركيز الرائحةuation 4 "FO: محتوى العرض =" 0.3in "سرك =" / files/ftp_upload/51704/51704eq4.jpg "/>، وتعطى الناتج EAG من الإلتواء لا يتجزأ
. يتم الحصول على Deconvolution ببساطة عن طريق معكوس النظام؛ وهذا هو
في مجال التردد. ثم،
كما تحويل فورييه للاستجابة الدافع هو
. للكشف عن إشارة، اتبع الخطوات 4.2.1 إلى 4.2.3.
و
، الشكل 3B. تقريب استقامة
بواسطة وظيفة متعدد الحدود. تناسب المعلمات متعدد الحدود والوقت ثابت على أزواج بيانات المدخلات والمخرجات لتقليل متوسط مربع الخطأ بين الحقيقي
وإعادة بنائها
تركيز الرائحة.
يتجاوز عتبة محددة سلفا.
(المعدل الحالي تأخر K +، + ونا كا 2 + التيارات، وهو تصرف صغيرة كا 2 + K + التي تعتمد الحالية الجهد بوابات) وقد وضعت سابقا لإنتاج الاستجابات الفسيولوجية لاحظ 13. للكشف عن إشارة، اتبع الخطوات 4.3.1 إلى 4.3.3.
في تطور غشاء المحتملة
. استخدام غشاء السعة C = 22.9 الجبهة الوطنية وتيار تسرب قدمها
مع تصرف ز L = 0.011161 ميكروثانية والانعكاس المحتمل E L = -61.4 بالسيارات. وصفت التيارات الأيونية التي كتبها
مع
من قبل حيث
وظائف غير الخطية من الاطلاع على الأعمال السابقة V. 13 للحصول على التفاصيل.
= 0.01 ميللي ثانية. تشغيل الاختبار ارتفاع V (ر و)> 0 بالسيارات والخامس (ر و -
) <0 بالسيارات عبر الإنترنت للحصول على أضعاف ارتفاع وinterspike فترات. وصف بروتوكول أعلاه تم اختباره الأول مع قصيرة 20 ميللي ثانية البقول من فرمون (جرعة 1 ميكروغرام و 10 ميكروغرام) ينفخ مباشرة على هوائي. ويبين الشكل 4A في EAGs ردا على البقول فرمون. فهي إيجابية لأنه تم توصيل القطب تسجيل لإدخال قلب من مكبر للصوت، كما هو موضح في الخطوة 3.3. كما يتبين من طيف الطاقة، ونظام القياس هو قادرة على حل البقول فرمون تصل إلى 10 هرتز. للمقارنة، ونحن أيضا اختبار جهاز استشعار الغاز المتاحة تجاريا. وTGS2620 هو استشعار أكسيد المعادن المصنعة للكشف عن أبخرة المذيبات. على الرغم من أن أجهزة الاستشعار يمثل حساسية عالية للإيثانول، وكان غير قادر على متابعة التغيرات في تركيز (انظر منحنى متقطع في الشكل 4B). جاءت المشكلة من السكن الاستشعار. يتم تسويقها في TGS2620 مع غطاء يحتوي على الفولاذ المقاوم للصدأ شاش واقية من اللهب. وقت استجابة بطيئة لأنه، من الناحية العملية، فإنه يأخذ ووقت معين للغاز على الانتشار عبر الشاش وتصل إلى سطح أكسيد المعادن. التعافي بطيئة أيضا لأن الأمر يتطلب بعض الوقت لتنظيف جهاز الاستشعار عندما يتم المحاصرين الغاز داخل الغطاء. لذا فإننا إزالة الغطاء وتحسن ديناميات هذا التعديل بشكل كبير (انظر المنحنى العادي في الشكل 4B). ومع ذلك، كان هناك عامل عشرة بين EAG وTGS2620 (10 هرتز مقابل 1 هرتز). هذه المقارنة هي مع ذلك النوعية كما EAG وTGS2620 لم يتم اختبار في نفس الظروف.
نحن بعد ذلك بتقييم الاستقرار مع مرور الوقت لدينا إعداد كامل للحشرات (ن = 12 العث) بالمقارنة مع الهوائيات رفعه (ن = 7 هوائيات). تم تسجيل EAG دوري ردا على التحفيز فرمون (مدة 500 ميللي ثانية، جرعة 1 ميكروغرام). تم تحويل EAGs الخام (في السيارات) لEAGs النسبية (النسبة المئوية من القيمة الأولية التي تم الحصول عليها في الوقت t = 0). الشكل 5 يظهر الاستقرار جيدة جدا لدينا الإعدادية كله للحشراتaration خلال يوم العمل. في المقابل، سجلت EAGs على انخفاض هوائيات معزولة بسرعة مع مرور الوقت بحيث يقع إشارة إلى نصف قيمته الأولية بعد 1.5 ساعة فقط. يوصف هذا الاعتماد الوقت بشكل جيد من قبل الاضمحلال الأسي مع عمر من 2 ساعة.
أخيرا، اختبرنا قدرة plateform الروبوتية EAG للبحث عن مصدر الرائحة (مجمع فرمون Z7-12: شنو) باستخدام استراتيجية البحث على رد الفعل (الشكل 6A). استراتيجية البحث يجمع بين الطفرة عكس الريح في كل مرة يتم الكشف عن فرمون مع الصب دوامة في غياب المكتشفة 28. تم الكشف عن وجود فرمون من EAG بواسطة كاشف neuromorphic، كما هو موضح في الخطوة 4.3. وترد مثالين من EAG سجلت خلال البحث في الشكل 6B. دون مصدر الرائحة، وEAG يبقى حول الصفر (أي 2.5 V) مع عدد قليل جدا أو معدومة المكتشفة. الروبوت ينفذ الصب دوامة ويترك فرنكا فضاء البحث بشكل عامخام الوصول إلى الموقع المستهدف (في 92٪ من المحاكمات، ن = 26 المحاكمات، الشكل 6C اليمين). مع مصدر الرائحة (الشكل 6C اليسار)، وEAG يقدم رشقات نارية من النشاط (المكتشفة) تتشابك مع فترات من الصمت (لا المكتشفة). يحدث الصب دوامة أساسا في محيط عمود (الشكل 6C اليسار، خط أحمر) ويبدو أن استراتيجية فعالة لنقل محور عمود عند فقدان الرائحة. في هذه الحالة، يتم العثور على مصدر عموما (= نسبة نجاح 96٪، ن = 44 المحاكمات).

الشكل 1. الجامع للحشرات إعداد EAG والإعداد الروبوتية. أ) يتم تسجيل electroantennogram (EAG) من إعداد كامل للحشرات (انظر النص للحصول على التفاصيل). B) هي التي شنت على إعداد سرقةبعد التمديد. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2. الأجهزة واجهة البرمجيات. A) النسر التخطيطي من الأجهزة. تتكون الدائرة من ستة أقسام (انظر النص للحصول على التفاصيل). لأنها تتيح تصفية (نطاق التردد ،1-500 هرتز، من الدرجة الأولى في 50 هرتز)، والتضخيم (مجموع مكاسب 250X) وتكييف إشارة في نطاق 0-5 V. B) تخطيط النسر تظهر خطوط من النحاس (الأعلى باللون الأحمر و السفلي باللون الأزرق) والثقوب (باللون الأخضر). C) لوحة الدوائر المطبوعة (PCB) تظهر عناصر منفصلة. D) واجهة المستخدم الرسومية (GUI) مكتوب في كيو تي-C + + لتصور البيانات (التتبع الحمراء = EAG المدخلات، والتتبع الخضراء= الناتج نموذج الخلايا العصبية)، تصميم فلتر وكشف الإشارة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 3. الكشف عن إشارة من EAG. A) Electroantennogram (EAG) نموذج. وعلى غرار لEAG بواسطة شلال 27 غير الخطية التي تتكون من استقامة ثابتة تليها 1 شارع الترتيب المنخفض تمرير مرشح مع وظيفة دفعة الأسي
. وبالنظر إلى الناتج EAG لا يتجزأ من الإلتواء مع
باء) نهج الهندسة. وFILT deconvolutionإيه يكتب
و
، انظر النص للحصول على التفاصيل. تم الكشف عن لقاءات رائحة (زيارة) كلما
يتجاوز عتبة محددة سلفا. C) نهج مستوحاة الحيوية. يتم استخدام نوع هودجكين هكسلي نموذج الخلايا العصبية مع خمسة التيارات الداخلية (تسرب، K +، + نا، كا 2 + وSK) لإعادة إنتاج نمط اطلاق المرصودة من الإثارة تثبيط (EI) لوحظ تجريبيا 13. للكشف عن إشارة، يتم استخدام إشارة EAG كما يتم الكشف عن المدخلات الحالية ويضرب كلما تبعتها موجة من الإثارة عن طريق تثبيط النشاط في اطلاق النار.
< ر /> الشكل 4. وقت استجابة EAG. A) تسجيلات EAG ردا على 20 ميللي ثانية البقول فرمون (جرعة 1 ميكروغرام و 10 ميكروغرام) تسليم بمعدلات مختلفة (1، 2، 4، 6، 8، و 10 نبضات / ثانية). يظهر تطبيع EAG طيف الطاقة لتحفيز نابض في 1 و 10 هرتز (جرعة 1 ميكروغرام و 10 ميكروغرام). وEAG يحل البقول الفردية تصل إلى 10 هرتز. ب) تسجيلات من أجهزة الاستشعار الغاز TGS2620 ردا على الإيثانول (تذبذب تركيز). منحنيات متقطع وسهل هي استجابة الاستشعار مع وبدون غطاء، على التوالي. أجهزة الاستشعار مع غطاء لديه الوقت للاستجابة لعشرات ثانية، وبالتالي لا يمكن أن يتبع التقلبات في تركيز الغاز. وTGS2620 دون غطاء يحل تقلبات الفردية تصل إلى 1 هرتز. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.


الرقم 6. التجارب الروبوتية. أ) استراتيجية الصب زيادة يجمع بين زيادة في عكس الريحوجود رائحة مع الصب في دوامة عدم وجوده 28. B) EAG النموذجية سجلت خلال البحث في حين أن الروبوت يتحرك (مع وبدون رائحة). C) مسارات روبوت مع رائحة (ن = 44 تجارب) وبدون رائحة (ن = 26 المحاكمات). خط متقطع أحمر يمثل كفاف عمود حيث وقعت 90٪ من جميع المكتشفة أثناء المحاكمات. الظروف التجريبية: فضاء البحث = 4 متر x 2.5 متر، وسرعة الروبوت = 5.6 سم / ثانية، الهدف = 10 ميكروغرام من فرمون المودعة على ورق الترشيح واستبدال كل 2 المحاكمات، الروبوت المكان الأول = 2 متر من الهدف، سرعة الرياح = 0.9 ± 0.2 م / ثانية في الموقع المستهدف. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
نصف بروتوكولا لاستخدام هوائيات الحشرات في شكل مخططات كهربائية (EAGs) على الروبوتات المستقلة. يسمح تصميمنا التجريبي بتسجيلات مستقرة في غضون يوم واحد ويحل بقع الروائح الفردية حتى 10 هرتز. تتجلى كفاءة مستشعرات EAG للبحث الشمي في دفع الروبوت نحو مصدر الرائحة.
تم تمويل هذا العمل من قبل برنامج الولاية Investissements d'avenir الذي تديره ANR (منحة ANR-10-BINF-05 'Pherotaxis').
| Agrotis ipsilon< / em> | PISC http://www-physiologie-insecte.versailles.inra.fr/indexenglish.php | عثة | |
| روبوت Khepera III | K-team www.k-team.com | Khe3Base + KorBotLE + KorWifi | |
| KoreIOLE | K-team | لوحة تمديد الإدخال / الإخراج | |
| EAG-robot واجهة | LORIA www.loria.fr | الأجهزة والبرامج المصنوعة حسب الطلب | |
| Sirene | LORIA | محاكاة العصبية sirene.gforge.inria.fr | |
| النسر | CadSoft www.cadsoftusa.com | ثنائي الفينيل متعدد الكلور تصميم برنامج | |
| Micromanipulator | Narishige / Bio-logic | UN-3C | |
| قاعدة المغناطيس | Narishige / Bio-logic | USM-6 | |
| Adapter Narishige / Bio-logic | UX-6-6 | ||
| Rotule | Narishige / Bio-logic | UPN-B | |
| مقصات صغيرة | MORIA / Phymep | 15371-92 | |
| مجهر ستيريو Zeiss St & eacute ؛ mi 2000 | فيشر Scientific | B19961 | |
| مصدر الضوء 20 W KL200 | فيشر Scientific | W41745 | |
| Narishige PC-10 Na PC-1 | Narishige | Narishige PC-10 | |
| الشعيرات الدموية Na PC-1 | فيشر العلمية | C01065 | |
| فرمون رابطة الدول المستقلة -7-Dodecenyl أسيتات (Z7-12: OAc) | سيجما ألدريتش | 259829 | |
| عبوة من 3 ماصات: 2-20 وميكرو ؛ لتر / 50-200 وميكرو ؛ لتر / 100-1,000 وميكرو ؛ ل | Eppendorf | 4910000514 | لتخفيف الفرمون والترسيب على مرشح الورق |
| مستشعر الغاز TGS2620   ؛ | Figaro www.figarosensor.com | اختياري ، للمقارنة مع | |
| مجتذب القطب الكهربائي | EAG Narishige & nbsp ؛ | PC-10 |