والفحص السلوكية بسيطة لاختبار وظيفة البصرية في القيطم المورق

Summary

القيطم المورق الضفادع الصغيرة يفضلون السباحة على الجانب الأبيض من الأسود / الأبيض دبابة. ويسترشد هذا السلوك حسب رؤيتهم. بناء على هذا السلوك، نقدم مقايسة بسيطة لاختبار وظيفة البصرية من الضفادع الصغيرة.

Abstract

قياس وظيفة البصرية في الضفادع الصغيرة من الضفادع، القيطم المورق، ويسمح الفحص للعمى في الحيوانات الحية. استجابة حركة العين هو القائم على الرؤية، والسلوك الانعكاسي التي لوحظت في جميع الفقاريات التي تم اختبارها. عيون الشرغوف هي صغيرة جدا كانت تستخدم الاستجابة الذيل الوجه كإجراء بديل، الأمر الذي يتطلب تدريب فني لتسجيل استجابة خفية. وضعنا مقايسة السلوك البديلة استنادا إلى حقيقة أن الضفادع الصغيرة يفضلون السباحة على الجانب الأبيض من دبابة عند وضعه في خزان مع الجانبين على حد سواء بالأبيض والأسود. مقايسة المقدمة هنا هي غير مكلفة، والبديل بسيط هو أن يخلق الاستجابة التي يتم قياسها بسهولة. يتكون الإعداد ترايبود، وكاميرا ويب والدبابات اختبار متداخلة، متوفرة في معظم المختبرات القيطم. يتضمن هذا المقال فيلم يظهر سلوك الضفادع الصغيرة، قبل وبعد قطع العصب البصري. من أجل اختبار وظيفة عين واحدة، ونحن تشمل أيضا تمثيلاالنتائج sentative من الشرغوف الذي خضع كل عين axotomy الشبكية في أيام متتالية. يمكن أن الدراسات المستقبلية تطوير نسخة من هذا الاختبار الآلي لاختبار رؤية العديد من الضفادع الصغيرة في آن واحد.

Introduction

وقد استخدمت المورق القيطم كما كائن نموذج لدراسة تشكيل العين. عيون تتطور بسرعة، وتزايد إلى النضج في أقل من أسبوع لاختبار الجينات أو الممرات التي يكون لها تأثير على تطوير البصرية وظيفة. لاختبار وظيفة البصرية، وقد استخدمت استجابة حركة العين وoptomotor في الزرد والشراغف القيطم، على التوالي ^1،2. لأن عيون الضفادع الضفدع هي أصغر نسبيا من الزرد، ويتطلب هذا الاختبار استخدام المعدات المتخصصة والموظفين المدربين للكشف عن ذيل الوجه وحركة العين السلوك خفية في القيطم. A السلوك أكثر قوة في القيطم هو تفضيل السباحة في خزان مع خلفية بيضاء، الذي يوصف هنا ^3. عند وضع الشرغوف في أسود ....

Protocol

رعاية الحيوان

والقيطم المورق كانت تزرع الضفادع الصغيرة المستخدمة في هذه الدراسة، التي أثيرت ويعامل وفقا للإجراءات المعتمدة من قبل جامعة شمالي ولاية الطبية IACUC ودليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.

1 الإعداد ما قبل السلوك: الشراغف

1. الحصول على الأجنة المخصبة القيطم من مصدر متاح تجاريا أو إخصاب البويضات في المختبر، كما هو موضح سابقا ^6.

Results

وقد أظهرت تقارير سابقة أن الضفادع الصغيرة القيطم premetamorphic يفضلون السباحة على الجانب الأبيض من الأسود / الأبيض دبابة ودعا هذا الاختبار، ولون الخلفية ميول الفحص ³ لقد غيرنا هذا الاختبار من أجل اختبار وظيفة البصرية من العين إما من الضفادع الصغيرة في أقل من أسبوع. في هذه الطريقة، عيونهم يمكن جمعها للفحص النسيجي.

نعرض هنا كيف هو الرد بسبب الإشارات البصرية. في الفيلم 1، والضفا.......

Discussion

نحن هنا التقرير مقايسة السلوكية الموجهة الرؤية البسيطة التي يمكن القيام بها بسهولة في أقل من أسبوع من قبل أفراد مدربين مختبر الحد الأدنى. بينما فحوصات أخرى تتطلب معدات متخصصة وخبرة في سلوك الحيوان، هذا الاختبار يسمح اختبار سريع لتحديد وظيفة البصرية. وقد تم تطوير فحص السلوكية آخر، وتجنب الفحص المرئي، لتحديد كيفية مساهمة السقف إلى الإدراك البصري في القيطم ^10. وذكرت هذه التدابير فحص ضبط المكانية وحساسية التباين في استجابة لتتحرك مقابل خلفية مستقرة، وبالتالي، يمكن .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
1/2 جالون فليكس تانك مع غطاء	eNasco	SB19271M	الحجم: 5-3 / 8 بوصة × 7 بوصة × 3-3 / 4 بوصة
شريط
مناديل ورقية
دوار كبير للتلقيح	VWR	50809-022	الحجم: ضياء 114.3 x & nbsp ؛ H 76.2 مم (4 1/2   ؛ x & nbsp ؛ 3 بوصات)
Durasorb underpad	VWR	82004-836	الحجم: 43.2 × 60.1 سم (17 × 24 بوصة) Kimwipe
	Krackeler Scientific، Inc.	1945-34155-CS
حامل ثلاثي القوائم
كاميرا iSight أو كاميرا ويب	Apple	M8817LL / A	جيد للضفادع الصغيرة الكبيرة ولكن يصعب رؤية الضفادع
الصغيرة أجهزة الكمبيوتر المحمولة	Apple / PC	متنوعة	استخدمنا جهاز MacBook مقاس 13 بوصة ، 2 جيجاهرتز Intel Core 2 Duo يعمل بنظام MacOSX Lion 10.7.5
كاميرا فيديو MiniDV handycam	SONY	DCR-HC42	متصلة عن طريق firewire بالكمبيوتر مع 6 موصل و 4 موصل ألفا FireWire 400 & nbsp ؛
محطة Handycam	SONY	DCRA-C121	يمكن استخدام هذا لتوصيل Firewire بالكاميرا
برنامج QuickTime Player		Quicktime الإصدار 10.1
26 G إبرة (5/8 بوصة)	VWR	BD305115
Dumont # 5 ملقط	أدوات العلوم الدقيقة	11295-10
المستهلكات
كبريتات الجنتاميسين [50 مجم / مل]	فيشر سينتيفيك	17-528Z	مخزنة في RT
Sylgard 184 مطاط سيليكون	فيشر ساينتفيك	NC9644388
المحيط الفوري	أطباء فوستر وسميث	CD-116528	محلول المخزون = 100 جم / لتر مخزن في RT
فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة	Sigma Aldrich	S0876	محلول المخزون = 0.4 متر مخزن في RT
في المختبر < / em > الأجنة المخصبة	eNasco	LM00490MX	100 جنين / وحدة