مقالة منهجية

إجراءات لمراقبة الناجم عن السياق تجديد مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس في الجرذان

14.2K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/51898

⸱

سبتمبر 19, 2014

 ,  , 
1Department of Psychology, Center for Studies in Behavioral Neurobiology, Concordia University

في هذه المقالة

ملخص

إجراء دراسة لقدرة الكحول المرتبطة السياق البيئي لتحريك يوصف تجديد السلوك الكحول التماس في الفئران.

الملخص

السياقات البيئية التي يتم استهلاكها تعاطي المخدرات يمكن أن تؤدي إلى حنين، استجابة مكيفة بافلوف-الذاتية التي يمكن أن تسهل السلوك المخدرات التماس والانتكاس الفوري في متعاطي المخدرات ممتنعين. وضعنا الداخلي لدراسة العمليات السلوكية والعصبية التي تتوسط تأثير السياق على السلوك الكحول التماس في الفئران. بعد التأقلم على الذوق والآثار الدوائية من 15٪ من الإيثانول في قفص المنزل، تتلقى الفئران الذكور لونغ إيفانس التدريب التمييز بافلوف (PDT) في غرف تكييف. في كل دورة (من الاثنين الى الجمعة) PDT اليومية، 16 تجربة كل اثنين من مختلف المحفزات السمعية 10 ثانية مكيفة تحدث. خلال التحفيز واحد، وCS +، يتم تسليم 0.2 مل من 15٪ من الإيثانول بمنفذ للاستهلاك السوائل عن طريق الفم. لم يتم إقران الحافز الثاني، CS-، مع الايثانول. عبر جلسات، الإدخالات في ميناء السوائل خلال زيادة CS +، في حين إدخالات خلال CS- تستقر عند مستوى أقل، مما يدل على أن prediويكتسب جمعية التفاعلية الذي نظمه بين CS + والايثانول. خلال PDT تم تجهيز كل غرفة مع تكوين محدد من المحفزات البصرية السياقية، الشم واللمس. PDT التالية، ويجري التدريب الانقراض في نفس الغرفة التي هي مجهزة تجهيزا الآن مع تكوين مختلف من المحفزات السياقية. وقدم CS + وCS- كما كان من قبل، ولكن حجب الإيثانول، الذي يؤدي إلى انخفاض تدريجي في مداخل الميناء خلال CS +. في الاختبار، يتم وضع الفئران مرة أخرى في سياق PDT وعرض مع CS + وCS- كما كان من قبل، ولكن دون الايثانول. هذا التلاعب يتسبب في زيادة قوية وانتقائية في عدد من مداخل الميناء التي قدمت أثناء الكحول التنبؤية CS +، مع أي تغيير في الاستجابة أثناء CS-. هذا التأثير، ويشار إلى التجديد الناجم عن السياق، يوضح قدرة قوية من السياقات المرتبطة باستهلاك الكحول لتحفيز سلوك التماس الكحول في استجابة لمنبهات الكحول بافلوف.

المقدمة

المتبقية الرصين يشكل تحديا كبيرا يواجهه الأفراد الذين يعانون من اضطرابات تعاطي الكحول. الامتناع عن ممارسة الجنس هو الوقت من التعرض للتأثير السلوكي والنفسي والفسيولوجي للمؤثرات البيئية التي تصاحب عادة تعاطي الكحول، والتي يمكن، من خلال تكييف بافلوف، تصبح مرتبطة مع حالة السكر 1،2. التعرض إلى الكحول العظة التنبؤية يمكن أن تثير استجابات مشروطة مثل حنين الكحول، والتي قد تشجع السلوكيات التي تسعى الكحول التي تسهل الانتكاس 3،4.

تسلسل النمطية من السلوك التي تؤدي إلى استهلاك الكحول يمكن أن تسبب أنواع معينة من المحفزات ليكونوا من ذوي الخبرة بشكل روتيني مباشرة قبل الآثار الدوائية من تناول الكحول. على سبيل المثال، والبصر والشم والذوق من الكحول هي الخصائص الحسية من الكحول التي تسبق موثوق التسمم. بالإضافة إلى هذه العظة، والتي يشار إليها باسم "المنفصلة" أو "بروكسيماالعظة ل 'والسياقات البيئية التي تستخدم فيها العقاقير بانتظام يمكن أيضا إثارة حنين 5،6. التعرض إلى المواقع المادية التي المخدرات قد سبق استخدامها وبالتالي قد يكون الزناد حاسم لانتكاسة 7.

وقد تم تطوير نماذج حيوانية لدراسة الآليات العصبية التي تتوسط تأثير السياقات المرتبطة المخدرات على السلوك المخدرات التماس 8-13. الإجراء الموضح هنا يسمح للتحقيق في كيفية تأثير السياقات المرتبطة باستهلاك الكحول يمكن أن تعدل سلوك التماس الكحول التي أثارت من قبل منفصلة، ​​والكحول التنبؤية جديلة بافلوف.

ويجري التدريب التمييز بافلوف في سياق بيئي محدد، حيث يتم تدريب الفئران على تمييز سلوكيا بين المثيرات السمعية مكيفة، و+ CS أن يقترن مع الكحول، وCS- ان لا يكون. ثم يتم تنظيم دورات الانقراض في سياق مختلف، حيث الاستجابة لCS+ يقلل نتيجة الكحول يجري حجب. وفي وقت لاحق، reexposure إلى الكحول المرتبطة بها، سياق التدريب بافلوف يتسبب في زيادة انتقائية في سلوك التماس التي تسببها الكحول وCS +، مع أي تغيير في الاستجابة لCS-. هذه النتيجة، التي لدينا تكرارها باستمرار 9،14-16، يمتد النتائج من الإجراءات تكييف فعال التي تم العثور سياقات المخدرات لتحفيز تجديد الردود استثابي المرتبطة تسليم المخدرات 10،13.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية في جامعة كونكورديا ويتفق مع التوصيات الصادرة عن المجلس الكندي للرعاية الحيوان.

1. الحيوانات

  1. الحصول على الفئران الذكور لونغ إيفانس (220 - 240 غرام على وصول).
  2. الحفاظ على الفئران في درجة حرارة (21 درجة مئوية) والرطوبة (44٪) التي تسيطر عليها مرفق للرعاية الحيوان، وعلى ضوء الظلام دورة 12 ساعة مع أضواء على الساعة 7:00 صباحا.
  3. الفئران منزل الزوج لدى وصولهم. بعد 3 أيام، الفئران منزل على حدة في أقفاص علب الأحذية البلاستيكية مع أغطية فراش بيتا رقاقة، والعظام النايلون، وحرية الوصول إلى طعام الفئران القياسية والماء. استخدام الأغطية التي لديها قفص الحلقات مزدوجة للسماح لوضع لاحق من زجاجة الثانية، بالإضافة إلى زجاجة المياه. ملاحظة: يمكن إيواء الفئران بشكل فردي بمجرد وصولهم إلى مرفق للرعاية الحيوان.
  4. البدء في التعامل مع الفئران يوميا. ملاحظة: كدليل، أسبوع واحد من المعالجة وعادة ما يكفي للتأقلم عليها إلى كونها بيللو صعودا والتعامل معها من قبل المجرب.

2. متقطع الإيثانول الدخول في قفص الرئيسية

ملاحظة: السلوك الوصول الإيثانول متقطعة في قفص المنزل للتأكد من الفئران وشرب كميات من الناحية الفسيولوجية ذات الصلة من الايثانول قبل مرحلة التدريب السلوكية التجربة تبدأ 17-19. الشروع في هذا الإجراء خلال المرحلة الخفيفة، على الرغم من أنه يمكن أن تبدأ في أي وقت خلال الدورة خفيفة أو داكنة.

  1. إعداد زجاجتين لكل الفئران.
    1. استخدام تخرج من البلاستيك 100 مل اسطوانة وزجاجة الإيثانول و473 مل زجاجة المياه البلاستيكية القياسية. استخدام الإيثانول زجاجة سعة صغيرة نسبيا، وشغل تقريبا لسعة وحدة التخزين القصوى، لتقليل الخسائر في الإيثانول بسبب التسرب والتبخر.
    2. ملء زجاجة واحدة مع 15٪ من الإيثانول، الذي أدلى به تمييع 95٪ من الإيثانول في مياه الحنفية. ملاحظة: تركيزات الإيثانول أخرى، مثل 10٪ أو 20٪، ويمكن أن تستخدم بدلا من 15٪ من الإيثانول.
    3. فايليرة لبنانية الزجاجة الثانية مع ماء الصنبور.
    4. إدراج سدادة مطاطية، مع أنبوب sipper التي تحتوي على اضعا الكرة للحد من التسرب، في كل زجاجة.
  2. إنشاء شركتين أقفاص الرقابة، وتعامل مماثل إلى أقفاص المنزل مع الاستثناء الذي الأقفاص السيطرة لا تحتوي على الفئران أو الفراش.
    1. إعداد الايثانول والمياه زجاجات للأقفاص السيطرة على النحو المحدد في الخطوات 2.1.1 - 2.1.4.
    2. استخدام تدابير الحصول عليها من أقفاص تحكم للسيطرة على التسرب و / أو التبخر التي قد تحدث على مدار الدورة الوصول الإيثانول (كما هو موضح في الخطوات 2.8.1 - 2.8.2).
  3. تزن كل الايثانول والمياه زجاجات. تسجيل جميع الأوزان.
  4. تزن كل الفئران. تسجيل جميع الأوزان.
  5. وضع زجاجة الإيثانول وزجاجة مياه على كل قفص المنزل والسيطرة قفص في نفس الوقت. ترك كل من زجاجات على أقفاص لمدة 24 ساعة.
  6. في نهاية فترة 24 ساعة، إزالة كل زجاجات منأقفاص في نفس الوقت.
  7. تزن كل الايثانول والمياه زجاجات. تسجيل جميع الأوزان.
  8. لتحديد مقدار الايثانول والمياه واستهلاكها خلال فترة 24 ساعة، طرح وزن كل زجاجة عندما تم إزالته من قفص المنزل من وزن الزجاجة عندما تم وضعها في قفص المنزل 24 ساعة في وقت سابق لكل فأر.
    1. تفعل الشيء نفسه بالنسبة للأقفاص سيطرة اثنين، ومن ثم حساب متوسط ​​كمية انسكاب لكل السوائل.
    2. طرح متوسط ​​كمية الإيثانول وتسرب المياه، على التوالي، من التدابير الإيثانول واستهلاك المياه المقابلة لكل الفئران.
    3. استخدام هذه التدابير انسكاب تسيطر الفرق لحساب استهلاك الإيثانول في جم / كجم، واستهلاك المياه، وتفضيل الايثانول.
  9. لحساب استهلاك الإيثانول (جم / كجم)، أولا تحويل الوزن (ز) من محلول الإيثانول يستهلك في (مل) حجم استنادا إلى كثافة من الحل الكلي (مكونات الايثانول + الماء)، وفقاإلى صيغة حجم (مل) = الوزن (ز) / الكثافة (ز مل /). ملاحظة: إن كثافة المحلول تختلف كدالة للتركيز الايثانول.
    1. المقبل، مضاعفة حجم (مل) من محلول الإيثانول التي يستهلكها الكثافة (جم / مل) من الإيثانول تحجيمها من أجل حل نسبة محددة تستخدم لانتاج وزن (ز) من الايثانول المستهلكة.
    2. تقسيم الوزن (ز) من الايثانول المستهلكة من قبل الفئران الوزن (كلغ) للحصول على غرام / كغ قياس استهلاك الايثانول.
  10. لحساب تفضيل الإيثانول، والتعبير عن كمية الإيثانول (مل) كنسبة مئوية من إجمالي السوائل (الماء + الإيثانول، مل) المدخول.
  11. العودة زجاجة الماء فقط إلى قفص المنزل وفأر. ل24 ساعة المقبلة، وإعطاء الفئران الحصول على المياه ولكن ليس الإيثانول. بدلا من زجاجة الإيثانول، ضع زجاجة المياه الثانية وزنه قبل في قفص المنزل.
  12. في نهاية فترة 24 ساعة، وإزالة كل من زجاجات المياه من القفص في نفس الوقت.
  13. تزن كلتا المجموعتين من زجاجات المياه. تسجيل جميع ويghts.
  14. طرح وزن كل زجاجة عندما تم إزالته من قفص المنزل من وزن الزجاجة عندما تم وضعها في قفص المنزل 24 ساعة في وقت سابق، طرح من متوسط ​​قياس انسكاب تم الحصول عليها من أقفاص السيطرة كما هو موضح في الخطوات 2.8.1 - 2.8.2.
  15. استخدام هذه التدابير الفرق التي تسيطر عليها انسكاب لحساب استهلاك المياه.
  16. تبدأ الدورة مرة أخرى من خلال توفير كل من الإيثانول وزجاجات المياه للفئران، كما هو موضح في الخطوات 2.1 خلال 2.14.
    1. تكرار هذه الدورة لمتعددة (حوالي 12) جلسات للحث على مستويات عالية ومستقرة للاستهلاك الإيثانول. انظر الشكل 1 لنتائج ممثلة من استهلاك الإيثانول (جم / كجم) في قفص المنزل.
    2. تناوب موقف المكاني للإيثانول وزجاجة مياه على غطاء القفص عبر جلسات لمنع تطور تفضيل الجانب.
    3. جعل حل الإيثانول النقي مرة واحدة في الأسبوع لضمان دقة ومستقر تركيز الإيثانول عبرالجلسات. تقليل تأثير التبخر من الايثانول على مدى فترات طويلة من الزمن باستخدام هذا النهج.

3. جهاز

  1. بيت كل غرفة تكييف داخل التهوية، حجرة-تخفيف الصوت.
  2. بناء كل غرفة تكييف من المعدن الصلب المقاوم للصدأ قضيب الطابق، سقف البولي واضح، واضح البولي الجدار الخلفي والباب الأمامي، والجوانب الألومنيوم لوحة معدنية.
    1. تثبيت ميناء السوائل مركزيا بالقرب من قاعدة الحق في جدار معدني. تجهيز مدخل ميناء السوائل مع ضوئية بالأشعة تحت الحمراء للكشف عن الإدخالات في الميناء.
    2. ربط أنابيب البولي ايثيلين من الجزء الخلفي من ميناء السوائل إلى حقنة 20 مل تحتوي على الإيثانول باستخدام إبرة حادة ذات الرؤوس. وضع الحقنة في ضخ حقنة تقع خارج حجرة-تخفيف الصوت. لدورات تدريبية التمييز بافلوف، تحميل الإيثانول في حقنة قبل وضعه في المضخة. الرئيسية أنابيب بذ تقدم يدويا المضخة، ثم يمسح الايثانول الزائدة من ميناء السوائل.
    3. على جدار الأيسر، تثبيت houselight الأبيض مركزي بالقرب من سقف الغرفة.
    4. تثبيت الفرس (2 دورة هرتز) ومولد الضوضاء البيضاء مع مكبر الصوت في الزاوية اليسرى العليا من جدار نقاط.
  3. تجهيز كل غرفة تكييف مع تكوين معين من البصرية، وحاسة الشم، واللمس المحفزات لخلق سياق مميز.
    1. استخدام اثنين من سياقات مختلفة، المعين السياق 1 والسياق 2. تكوين نصف دائرة من الدوائر وتكييف السياق 1 والنصف الآخر والسياق 2.
    2. لخلق السياق 1، وضع لوحات سوداء من الورق المقوى على السقف والجدران الأمامي والخلفي من الغرفة، رائحة رذاذ ليمون (10٪ V / V، التي أدلى بها تمييع زيت الليمون في ماء الصنبور) في طبق بتري ووضعه في وسط من علبة النفايات المعدنية تحت أرضية الغرفة، وإدراج لوحة الطابق البولي واضحة على ص المعادنالطابق التطوير التنظيمي. تبطن صينية النفايات مع منشفة ورقية ماصة أو بطانة مقاعد البدلاء.
    3. لخلق السياق 2، وترك السقف والجدران الأمامية والخلفية للغرفة كشف، بحيث تكون واضحة، رذاذ رائحة اللوز (10٪ V / V، التي أدلى بها تمييع بنزيلديهايد توجد فى ماء الصنبور) في طبق بتري وضعها مركزيا في علبة النفايات المعدنية تحت أرضية الغرفة، وإدخال لوحة معدنية مثقبة الطابق أنحاء الأرض قضيب معدني. تبطن صينية النفايات مع منشفة ورقية ماصة أو بطانة مقاعد البدلاء.

4. التعويد

روض الفئران إلى غرفة التدريب السلوكية وكل من السياقات اثنين داخل الغرف تكييف هواء. لهذه المرحلة من التجربة، لا تحميل الإيثانول إلى 20 مل المحاقن.

  1. روض الفئران في عملية نقله من مرفق رعاية الحيوان إلى غرفة التدريب السلوكية في المختبر في دورتين التعود قصيرة.
    1. في الدورة الأولى، تحميل الفئران طن أقفاص وطنهم على عربة بعجلات في مرفق الرعاية الحيوانية، ونقلهم إلى قاعة التدريب السلوكية في المختبر. إضاءة مصابيح الغرفة، بدوره على المشجعين في كل صوت تخفيف حجيرة، الخروج من الغرفة، وأغلق الباب، والسماح للفئران التكيف مع هذه البيئة الجديدة لمدة 20 دقيقة، في حين تبقى في أقفاص وطنهم على العربة. في نهاية هذه الفترة 20 دقيقة، وعودة الجرذان إلى مرفق رعاية الحيوان.
    2. في الدورة الثانية، وجلب الفئران إلى غرفة التدريب السلوكية في المختبر. كما كان من قبل، وترك الأضواء والمشجعين على حجيرة في الغرفة. البقاء في الغرفة، مع الباب المغلق لتقليل الانحرافات، والتعامل مع ووزن كل فأر في غرفة التدريب السلوكية. تسجيل الأوزان، ومن ثم العودة الفئران إلى مرفق رعاية الحيوان.
  2. روض الفئران إلى غرف تكييف في دورتين التعود قصيرة.
    1. نقل الفئران إلى غرفة التدريب السلوكية، وتسجيل وزن كل فأر،وتحميل كل فأر في غرفة تكييف المعينة.
    2. في الدورة الأولى التعود انشاء نصف الدوائر والسياق 1 والباقي 2 والسياق.
    3. في الدورة الثانية التعود إعداد كل غرفة مع السياق لم يستعمل في الجلسة السابقة.
    4. إجراء جلسات التعود بطريقة ازنت، وكشفت لأول مرة مثل أن نصف الجرذان إلى السياق 1، تليها السياق 2، والنصف الآخر يمثلون للمرة الأولى تتعرض ل2 السياق، تليها السياق 1. ومن الناحية المثالية، وإجراء جلسات التعود على حد سواء في نفس اليوم، على الرغم من أنها يمكن أن تنتشر في جميع أنحاء يومين إذا لزم الأمر.
    5. لدورات التعود، واستخدام برنامج كمبيوتر لإلقاء الضوء على houselight 1 دقيقة بعد صدور البرنامج. تسجيل عدد إدخالات ميناء السوائل التي قدمت خلال جلسة 20 دقيقة. في نهاية الدورة، برمجة houselight لإيقاف. لا تقدم أي الإيثانول أو العظة خلال جلسات التعود.
  3. إزالة الفئران من الدوائر، وإعادتهم إلى أقفاص وطنهم، ونقلها إلى مرفق الرعاية الحيوانية.
  4. تنظيف المعدات (مثل ألواح الأرضيات، والصواني النفايات، أطباق بتري). راجع الخطوة 5.7 لمزيد من التفاصيل.

5. بافلوف التدريب التمييز (PDT)

تدريب الفئران لسلوكيا تميز بين واحد جديلة السمعية أن يقترن مع الإيثانول وجديلة السمعية الثانية التي ليست كذلك. لهذه المرحلة من التجربة، وملء 20 مل المحاقن مع 15٪ من الإيثانول.

  1. تجهيز كل غرفة تكييف مع تكوين معين من البصرية، وحاسة الشم، واللمس المحفزات لخلق سياق مميز، كما هو موضح في الخطوات 3.3.2 و 3.3.3
    1. تعيين نصف عدد الفئران إلى السياق 1، والنصف الآخر إلى السياق 2 بطريقة توازن، استنادا إلى استهلاك الايثانول وتفضيل المتوسط ​​عبر الدورات الأخيرة (2) من الإجراء الوصول الإيثانول قفص المنزل. الرجوع إلى تابعتحويلة تستخدم خلال PDT والسياق A. ملاحظة: كل الفئران أن تجربة سياق واحد فقط في هذه المرحلة من التدريب.
    2. تأكد من أن تحفيز حاسة الشم هو التحفيز السياقي الماضي تضاف إلى كل غرفة تكييف. إغلاق أبواب الغرفة وحجرة-تخفيف الصوت لاحتواء تحفيز حاسة الشم وتقليل comingling من الروائح المختلفة.
  2. جعل الفئران في قاعة التدريب السلوكية، وتسجيل وزن كل فأر، وتحميل كل فأر في غرفة تكييف المعينة.
  3. الشروع في برنامج الكمبيوتر الذي يتحكم في التسلسل التالي من الأحداث خلال كل دورة PDT.
    1. في 5 دقائق بعد البرنامج قد صدر، إلقاء الضوء على houselight.
    2. تقديم ضجيج التحفيز الأبيض والفرس التحفيز كل 16 مرات. تعيين واحد من هذه المنبهات السمعية ليكون CS + والآخر ليكون CS-، بشكل يوازن بين كلا السياقين.
    3. جعل كل CS + وCS- محاكمة لAST 10 ثانية.
    4. تقديم 0.2 مل ايثانول في منفذ السوائل خلال ثانية 6 الأخير من CS +. لا تقدم أي الإيثانول خلال CS-.
    5. جعل كل دورة PDT 58 دقيقة مشاركة في المتوسط. تقديم CS + وCS- على كل متغير الوقت 67 ثانية الجدول الزمني.
    6. سجل مداخل ميناء السوائل خلال فترة 10 ثانية CS (المجلس الأعلى للتعليم 10 خلال العرض CS)، و10 ثانية قبل CS الفاصلة (10 ثانية على الفور قبل بداية CS)، وآخر 10 ثانية-CS الفاصلة (10 ثانية على الفور CS التالية الإزاحة) لكلا CS + والعروض CS-، فضلا عن مجموع المقالات ميناء السوائل طوال الدورة. أيضا تسجيل مدة كل دخول الميناء التي قدمت خلال هذه الفترات.
    7. في نهاية الدورة، وتحويل houselight قبالة.
  4. إزالة الفئران من الدوائر، وإعادتهم إلى أقفاص وطنهم، ونقلها إلى مرفق الرعاية الحيوانية.
  5. التحقق من المنافذ السوائل لضمان أن الفئران التي استهلكت 3.2 مل من الايثانول تسليمها في كل PDT قession.
  6. مسح الايثانول من أنابيب البولي ايثيلين مع حقنة 60 مل تحتوي على كمية صغيرة من الماء. ثم، لتمرير 60 مل من الهواء من خلال أنابيب باستخدام الثانية، حقنة فارغة، للتأكد من أنه جاف.
  7. تنظيف المعدات. للتنظيف اليومي، وغسل ألواح الأرضيات، والصواني النفايات، وأطباق بتري. مرة واحدة في الأسبوع، وتنظيف الغرفة تكييف بأكملها. لا تستخدم منتجات التنظيف المعطرة لتجنب إدخال الروائح غير المرغوب فيها في الجهاز التجريبي.
  8. مواصلة جلسات PDT يوميا حتى تظهر الفئران التمييز مستقر في الاستجابات دخول الميناء لفي CS + مقابل CS-. ملاحظة: يجب أن إدخالات ميناء المحرز في الاستجابة لCS + زيادة خلال الجلسات، بينما مداخل الموانئ المحرز في الاستجابة لCS- ينبغي أن تظل منخفضة. العدد الدقيق للجلسات PDT اللازمة لتحقيق التمييز مكيفة الاستجابة يمكن أن تختلف، ولكن كدليل، تخطط على ما يقرب من 20 جلسات.

6. الانقراض

  1. تجهيز كل شام تكييفتشرين مع البصرية، حاسة الشم، واللمس المحفزات لخلق السياق والتي تختلف من واحد الفئران شهدت خلال جلسات PDT. على سبيل المثال، إذا كان السياق 1 المستخدمة في PDT، تكوين غرفة والسياق 2 لدورات الانقراض. الرجوع إلى السياق استخدمت خلال الانقراض والسياق B.
  2. إجراء جلسات الانقراض مماثل لجلسات PDT، ولكن لا تقدم أي الإيثانول خلال CS +.
    1. استخدام برنامج الكمبيوتر نفسه الذي تم استخدامه أثناء PDT لتقديم CS + وCS-.
    2. للحفاظ على الاتساق عبر مراحل التجربة، تحميل حقنة فارغة إلى ضخ حقنة، وترك تحولت المضخة. تأكد لا يحتوي على أنابيب البولي ايثيلين الايثانول قبل جلسات الانقراض.
  3. مواصلة جلسات الانقراض يوميا حتى الفئران لا تظهر أطول التمييز بين يستجيب CS + وCS-. ملاحظة: يجب أن إدخالات ميناء المحرز في الاستجابة لCS + تنخفض تدريجيا عبر جلسات الانقراض، حتى لا يوجد احالامتحانات التنافسية الوطنية بين إدخالات ميناء المحرز في الاستجابة لCS + ومداخل الميناء المحرز في الاستجابة لCS-. العدد الدقيق للدورات الانقراض الضروري لإطفاء مكيفة الاستجابة يمكن أن تختلف، ولكن كدليل، تخطط لحوالي 8 جلسات.
  4. تنظيف المعدات في نهاية كل دورة، كما هو موضح في الخطوة 5.7.

7. السياق الناجم عن تجديد اختبار

  1. تجهيز كل غرفة مع تكييف البصرية، حاسة الشم، واللمس المحفزات لخلق سياق الذي شهدت خلال جلسات PDT. على سبيل المثال، إذا أعطيت الفئران شهدت السياق 1 في جلسات PDT، تكوين غرفة بصفته السياق 1 في الدورة اختبار. الرجوع إلى سياق استخدامها أثناء الاختبار والتجديد السياق A.
  2. إجراء اختبار التجديد الناجم عن سياق مماثل لجلسات PDT، ولكن لا تقدم أي الإيثانول أثناء الاختبار التجديد. عرض
    CS + وCS- كما كان من قبل خلال جلسات PDT، ولكن حجب الايثانول.
    1. استخدام نفس الكمبيوتر العلاقات العامةogram التي تم استخدامها أثناء PDT لتقديم CS + وCS-.
    2. للحفاظ على الاتساق عبر مراحل، تحميل حقنة فارغة إلى ضخ حقنة، وترك تحولت المضخة. تأكد لا يحتوي على أنابيب البولي ايثيلين الايثانول قبل الدورة الاختبار.
  3. نلاحظ التجديد الناجم عن سياق مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس. ملاحظة: سيتم تجديد هذا التأثير يكون واضحا من خلال زيادة انتقائية في عدد الإدخالات ميناء المحرز في الاستجابة لCS +، مع عدم وجود تغيير في السلوك دخول الميناء المحرز في الاستجابة لCS-، نسبة إلى CS + وCS- المجيبة لاحظت في نهاية التدريب الانقراض.
  4. تنظيف المعدات في نهاية الدورة، كما هو موضح في الخطوة 5.7.

النتائج

الوصول الإيثانول متقطعة في قفص المنزل: استهلاك الإيثانول (جم / كجم) والايثانول زيادة تفضيل عبر جلسات الوصول الإيثانول متقطعة في قفص المنزل، وعادة ما تصل مستويات مستقرة داخل 8-12 جلسات (الشكل 1). في مجموعة البيانات هو مبين في الشكل 1، وبلغ متوسط ​​استهلاك الإيثانول مستقر عبر الجلستين الاخيرتين من قفص المنزل الوصول الإيثانول تراوح 1،33-6،44 ز / كغ بالنسبة للفئران الفردية. يمكن وقفها مرحلة استهلاك الإيثانول قفص المنزل التجربة بمجرد أن استقر ز / كغ الاستهلاك، وتتم المحافظة على الفئران عند هذا المستوى المستقر للشرب لعدد من الدورات.

لتحليل البيانات من هذه المرحلة، وإجراء تحليل منفصل تدابير المتكررة التباين (ANOVA) عبر عامل داخل موضوع جلسة للاستهلاك الإيثانول (جم / كجم) وتفضيل الايثانول.

التخطيطي التي يسببها سياق إجراءات تجديد: كل مرحلة من مراحلويتضح الإجراء التجريبي (PDT، الانقراض، تجديد الاختبار) في الشكل 2. انظر التسمية التوضيحية الرقم لمزيد من التفاصيل.

استجابة التدابير وتحليل البيانات: في جميع مراحل السلوكية المبينة أدناه، والاستجابات دخول الموانئ التي قدمت خلال CS + وCS- هي تطبيع مع الإشارة إلى ما قبل CS الردود دخول ميناء خط الأساس. لإنشاء تدابير CS تطبيع، طرح عدد الإدخالات الميناء التي قدمت خلال فترة ما قبل الأساسي CS (المجلس الأعلى للتعليم 10 مباشرة قبل بداية CS) من عدد الإدخالات الميناء التي قدمت خلال العروض من CS + وCS-. وتطبيع CS + والتدابير CS- تطبيع بمثابة مؤشرات السلوك أثارت تحديدا العروض CS، مرتفعة فوق مستويات خط الأساس.

إجراء تدابير المتكررة ANOVA منفصلة مع العوامل الخاضعة داخل المتكررة من الدورة ونوع CS (CS + مقابل CS-) لPDT ومراحل الانقراض. للمقارنات بين مرحلة (PDT، الانقراض، تجديدآل الاختبار)، وبلغ متوسط ​​استخدام البيانات عبر الجلستين الاخيرتين من PDT والانقراض ودورة واحدة من بيانات الاختبار في تجديد المتكررة تدابير ANOVA. لمتابعة آثار كبيرة الرئيسية والتفاعلات، واستخدام اللاحق تي اختبارات لعينات مستقلة أو تقرن أن يتم تصحيح للمقارنات متعددة. ومن المقرر معيار الأهمية في α = 0.05.

PDT: ردود دخول ميناء لزيادة CS + عبر جلسات PDT، في حين استجابات دخول الميناء إلى CS- لا تزال منخفضة ومستقرة، عموما. لاحظ أن الردود دخول الميناء إلى CS- قد تزيد قليلا في الدورات الأولى من التدريب PDT. ومع ذلك، ومداخل الموانئ المحرز في الاستجابة لCS- تستقر عند مستوى أقل بكثير من تلك المصنوعة ردا على CS +. ويتجلى التمييز الناجح من قبل الارتفاع دلالة إحصائية في مداخل الميناء خلال CS + مقارنة مع CS- (الشكل 3). هذه النتيجة تشير إلى أن مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس تكون لديهأون أنشئت لCS +، ولكن ليس CS-.

الانقراض: ردود دخول ميناء لCS + تنخفض تدريجيا عبر جلسات الانقراض. لا تزال ردود دخول الميناء إلى CS- منخفضة ومستقرة عبر جلسات الانقراض. من الناحية المثالية، وإلغاء التمييز الاستجابة بحلول نهاية التدريب الانقراض، كما يدل على ذلك عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين مداخل الميناء إلى CS + وCS-. ومع ذلك، فإنه ليس من غير المألوف بالنسبة لبعض درجة من التمييز الاستجابة للبقاء، حتى في نهاية التدريب الانقراض. في هذه الحالة، فمن المهم التحقق من أن الردود دخول الميناء إلى CS + في نهاية التدريب الانقراض هي أقل إحصائيا من ردود دخول الميناء إلى CS + في بداية الانقراض، وكذلك في نهاية PDT (الشكل 3) . هذا النمط من نتائج يشير إلى أن مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس تم اخماده بشكل كبير.

الناجم عن سياق تجديد الاختبار: ميناءردود دخول إلى زيادة CS + في تجديد اختبار الناجم عن السياق، نسبة إلى ميناء إدخالات CS + لاحظت في نهاية التدريب الانقراض. هذه الزيادة هي انتقائية إلى CS +، مع استمرار القيود الميناء إلى CS- دون تغيير. وبالإضافة إلى ذلك، ومداخل الموانئ إلى CS + هي مرتفعة إحصائيا مقارنة مداخل الميناء إلى CS- في تجديد اختبار الناجم عن السياق (الشكل 4). تأكيدا الإحصائي من المقارنات الإدخالات ميناء CS + بين الانقراض والاختبار، وكذلك مقارنات بين CS + ومداخل الميناء CS- ضمن الاختبار، يشير إلى تجديد الانتقائي للسلوك التماس الكحول مكيفة بافلوف-الناجمة عن الكحول السياق المرتبطة في الاختبار.

figure-results-1
الرقم 1. تصاعد استهلاك الايثانول وتفضيل الناجمة عن الوصول الإيثانول متقطعة في قفص المنزل. يعني و# 177؛ SEM (A) استهلاك الإيثانول (جم / كجم) و (B) تفضيل الإيثانول عبر 12 جلسة من الوصول الإيثانول متقطعة في قفص المنزل. زيادة كل من التدابير عادة عبر جلسات ثم تستقر. بلغ متوسط ​​استهلاك الإيثانول مستقر عبر الجلستين الاخيرتين من قفص المنزل الوصول الإيثانول تراوحت 1،33-6،44 ز / كغ بالنسبة للفئران الفردية. تم الحصول على هذه البيانات باستخدام الفئران الذكور لونغ إيفانس الشرب 15٪ (V / V) الايثانول.

figure-results-2
. الرقم 2. التخطيطي لإجراء التجارب ويتكون الداخلي من ثلاث مراحل: التدريب التمييز بافلوف (PDT)، الانقراض، والتي يسببها سياق تجديد الاختبار. خلال كل دورة PDT، الفئران تتلقى 16 محاكمات التحفيز السمعي واحدة مكيفة (CS +) أن يشير إلى تسليم من الايثانول و 16 محاكماتالتحفيز السمعي الثاني (CS-) التي لا ترتبط مع تسليم الايثانول. جلسات PDT تجري في سياق A، تتألف من تكوين محدد من البصري، حاسة الشم، والمنبهات اللمسية. خلال جلسات الانقراض، والتي أجريت في سياق B، ويتألف من مجموعة مختلفة من المحفزات البصرية، وحاسة الشم، واللمس، وقدم CS + CS- ولكن حجب الايثانول. لتجديد اختبار الناجم عن السياق، يتم إرجاع الفئران إلى السياق A، وقدم CS + وCS- دون الايثانول. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-3
الرقم 3. اقتناء وانقراض تمييز الاستجابة للإيثانول مكيفة بافلوف. يعني ± SEM مداخل ميناء تطبيع مADE خلال CS + وCS- عبر PDT (جلسات 1-18) في سياق ألف والانقراض (جلسات 19-26) في سياق B. وقد تم الحصول على هذه البيانات باستخدام الفئران الذكور الطويل إيفانز، تدرب مع 10٪ (V / V) الإيثانول والتحفيز دون شروط (US) التي قدمت بالتعاون مع + CS خلال PDT. * P <0.05، CS + مقابل CS-. الرقم نشرت أصلا في شودري، Sahuque، وجاناك (2008). تستخدم مع إذن من إلسفير.

figure-results-4
الرقم 4. تجديد مداخل الاستجابة للإيثانول مكيفة بافلوف. يعني ± SEM ميناء تطبيع قدمت خلال CS + وCS- في جلسات PDT في سياق A، جلسات الانقراض في سياق B، وتجديد الاختبار في السياق A. البيانات هي التي يسببها السياق المتوسط ​​خلال الجلستين الاخيرتين لPDT والانقراض. اختبار التجديد جلسة واحدة. هذهتم الحصول على البيانات باستخدام الفئران الذكور الطويل إيفانز، تدرب مع 10٪ (V / V) الايثانول والتحفيز دون شروط (US) التي قدمت بالتعاون مع CS + خلال PDT. * P <0.05. ** ع <0.001، CS + مقابل CS-. #P <0.05، CS + PDT مقابل CS + الانقراض. ^ P <0.05، CS + الانقراض مقابل CS + الاختبار. الرقم نشرت أصلا في شودري، Sahuque، وجاناك (2008). تستخدم مع إذن من إلسفير.

المناقشة

النتائج من هذا الإجراء تكشف أن المنبهات البيئية المنفصلة التي تصاحب عادة تسليم الكحول يمكن أن يكتسب القدرة على دفع سلوك التماس الكحول. أنها تثبت أيضا أن المحفزات السياقية المرتبطة توافر مسبق أو غياب الكحول يمكن أن توجه مشروطة الاستجابات السلوكية لمنبهات الكحول التنبؤي منفصلة.

الخطوات الحاسمة ضمن بروتوكول

السياقات في المهمة الحالية تتضمن المحفزات التي هي خارجة عن الفئران. ومع ذلك، يمكن للدولة داخلي الاستقبال من الفئران في اختبار تشكل أيضا "السياق" يمكن أن يؤثر تجديد 20. ولذلك فمن المهم أن روض الفئران إلى أي إجراءات التي قد تحدث قبل الاختبار تجديد وتغيير دولتهم داخلي الاستقبال، مثل microinfusions داخل الجمجمة أو الحقن النظامية. وعلاوة على ذلك، ينبغي إجراء التعود على microinfusions أو الحقن النظامية قبل كل من الانقراض وPDT قتكون جلسات، لمنع مثل هذه الإجراءات من الإصابة المرتبطة مرحلة واحدة محددة من التجربة.

المعلمات الزمنية، مثل مدة CS، فاصل CS-الولايات المتحدة، والفاصل الزمني للintertrial (ITI)، منذ فترة طويلة كان من المعروف للتأثير على الاستجابة المكيفة في مجموعة متنوعة من النماذج تكييف 21-26. وبالمثل، قد تؤثر المعلمات الزمنية مراقبة تأثير في تجديد الإجراء لدينا. أي مجموعة من المعلمات غير تلك المحددة في البروتوكول يجب التأكد من صلاحيتها تجريبيا في دراسات تجريبية قبل الشروع في توظيفها في التحقيقات أكبر.

التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها

وقد وجدت الأبحاث السابقة أن كمية الإيثانول التي تستهلك الفئران في قفص المنزل يمكن أن تختلف بوصفها وظيفة من المورد التي يتم شراؤها من الفئران 17،27. لذا المورد هو أحد الاعتبارات الهامة لهذه المرحلة من الدراسة. وبالمثل، ينبغي أن يشترك في اختيار سلالة الفئرانnsidered بعناية، كما أن هناك العديد من التقارير عن الخلافات السلالة في استهلاك الإيثانول 28-31.

وقد أظهرت عمل مسبق في تكييف نموذج مكره أن سن التنموي من الفئران يؤثر على مراقبة تجديد بافلوف مشروطة استجابة الخوف 32. وقد اقترح عدم وجود تأثير التجديد في الفئران صغيرة جدا (أصغر من 20 يوم بعد الولادة) أن ذلك يعود إلى ضعف ترميز المعلومات السياقية 33. ولذلك ينبغي أن تؤخذ في سن التنموي من الفئران لاستخدامها في الإجراء الحالي في الاعتبار.

وقد لوحظ تجديد بافلوف سلوك مشروط الكحول التماس عندما استخدمت 10٪ 9،16، 15٪ 14، أو 20٪ 15 خلال حلول الايثانول قفص المنزل الوصول الإيثانول وPDT مراحل التجربة. الباحثون ويمكن استخدام أي من هذه التركيزات من الإيثانول لأغراض إنشاء هذا الإجراء في المختبر علىالمنشأ.

خلال اكتساب التدريب التمييز بافلوف من المهم أن تحقق موانئ السوائل بعد كل دورة لضمان أن جميع الإيثانول التي تم تسليمها قد تستهلك. ترك الفئران في غرف تكييف لعدد إضافي من 10-15 دقيقة بعد كل دورة يمكن أن يتم في وقت مبكر PDT لتشجيع الاستهلاك من أي الإيثانول الذي لا يستهلك خلال الدورة. عدد من الفئران ترك الإيثانول غير المستهلكة في الموانئ يجب أن تنخفض تقدم PDT. إذا بنهاية الفئران PDT إما (أ) لا تستهلك كل الايثانول و / أو (ب) عدم الرد على CS + ثم يجب أن يكون إسقاط هذه المواضيع من الدراسة. معظم الفئران تستجيب بشكل موثوق أكثر إلى CS + من CS-. ومع ذلك، قد تستجيب بعض الفئران عند مستويات مرتفعة على كل من العظة، وبالتالي لا يظهر دليل على التمييز. لم يتم إسقاط الفئران التي تظهر عالية الاستجابة إلى كل من CS + وCS- خلال PDT من الدراسة. في تجربتنا، وتظهر هذه الموضوعات التمييز الملحوظخلال الدورة الأولى الانقراض في غياب الإيثانول، مما يشير إلى أن مستويات عالية من الاستجابة لCS- خلال PDT هي التي تحرك من وجود الايثانول في ميناء السوائل. تميل هذه المواضيع أيضا لإظهار آثار تجديد قوية.

حدود الإجراء

لأنه يتم إجراء اختبار التجديد في غياب الإيثانول، ومداخل الميناء مكيفة أثارت من قبل CS + يتناقص تدريجيا عبر الدورة الاختبار. ولذلك، فإن المبلغ الإجمالي للسلوك ولدت في الاختبار، والتي يسببها تجريبيا ضد التغييرات يمكن تقييمها، منخفضة إلى حد ما. لأنه في هذه المهمة الاستجابة تميل إلى أن تكون أعلى في بداية مقابل نهاية الدورة اختبار، فمن المهم دراسة آثار التلاعب التجريبية مشروطة على الاستجابة على أساس تجريبي من قبل المحاكمة.

مقالات في وعاء السوائل توفر مقياسا يعتمد الرئيسي في هذه المهمة. ومع ذلك، قد يكون دخول الميناء الخاطئ ريجيstered إذا حيوان قريب بما فيه الكفاية من السوائل وعاء لكسر شعاع الأشعة تحت الحمراء عبر افتتاح ميناء السوائل مع شعيرات لها. بينما نادرة، والاستجابات الخاطئة واضحة وزيادة كبيرة في إجمالي ميناء إدخالات النسبية لسلوك هذا الموضوع على الدورات السابقة. سوف بتصوير الحيوانات تسهيل الكشف عن الاستجابات الخاطئة المحتملة، والسماح لإجراء تحليل أكثر دقة من السلوكيات التي أظهرتها الفئران طوال التدريب والاختبار.

أهمية تقنية فيما يتعلق بأساليب القائمة / البديلة

يتم دراسة تجديد الناجم عن سياق السلوك المخدرات التماس إلى حد كبير باستخدام مهمة تكييف فعال فيها المتغير التابع الأساسي هو استجابة استثابي، مثل ذراع الصحافة 8،34 أو الأنف كزة 12. في الإجراء الحالي، استجابة التماس المخدرات هو 'نهج مكيفة "إلى ميناء السوائل التي تسببها العروض منو+ CS. يتم الحصول على الأرجح هذا الرد من خلال التعلم بافلوف، الذي هو عملية التعلم التي تتوسط تشكيل الجمعيات بين المثيرات البيئية والتأثيرات الدوائية للتعاطي المخدرات في البشر.

التطبيقات المستقبلية

هذه المهمة يمكن استخدامها في تركيبة مع علم الأدوية العصبية، optogenetics والكيمياء العصبية لدراسة الآليات العصبية التي تشارك في التجديد الناجم عن سياق التماس الكحول السلوك مكيفة بافلوف-16. بالإضافة إلى ذلك، الآليات السلوكية والعصبية التي تنظم حيازة وانقراض مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس يمكن التحقيق. أخيرا، هذه المهمة يمكن استخدامها لاستكشاف التلاعب الانقراض التي قد تمنع تجديد، يمثل توجها هاما للبحوث متعدية تهدف إلى الحد من تأثير المخدرات المرتبطة السياقات البيئية على التفاعل التنبؤية لمنبهات المخدرات بعد العلاج في التعرض جديلة عدي البشريسنت.

الإفصاحات

وقد وافق جميع الإجراءات التجريبية من لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية وجامعة كونكورديا وفقا للمبادئ التوجيهية من المجلس الكندي لرعاية الحيوان. تم نشر الوصول المفتوح من هذه المادة ممكن من خلال رعاية من ميد شركاه المحدودة

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل المعهد الوطني لتعاطي الكحول وإدمان الكحول (RO1 AA014925 منحت للدكتورة باتريشيا إتش جاناك في جامعة كاليفورنيا ، سان فرانسيسكو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، Fonds de recherche du Quebec - Santé (NC) ومجلس أبحاث العلوم الطبيعية والهندسة (NC ، 387224-2010). أصبح نشر هذه المقالة بحرية الوصول ممكنا برعاية شركة Med Associates Inc.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
عربة المرافق الثقيلةRubbermaid# 4520-88تستخدم لنقل الفئران في قفص منزلها من غرفة المستعمرة إلى غرفة السلوك أو غيرها من المرافق
الفئران ، Long-EvansHarlanRats وزنها 220-240 جم عند وصولها
Ohaus scaleFisher#S402421لوزن الفئران ؛ قم بتفريغ قاع حاوية بلاستيكية أولا ، ثم ضع الفئران فيه لوزنها
رقائق بيتا ، الحور الرجراجHarlan #7090Aالفراش للقفص المنزلي
NylaboneBio-Serv#K3580الإثراء المقدم في قفص المنزل
القوارض القابلة للتعقيمتشارلز ريفر# 5075لتغذية الفئران
غطاء قفص شريطالأسلاك Ancare#R20SS2Bمخصص مصنوع من فتحتين ل   زجاجات
أسفل القفصAncare#R20PCلإيواء الفئران
سداداتAncare# 8.5سدادات مطاطية لسد الفتح في زجاجات المياه والأسطوانات المتدرجة ؛ يذهب مع أنابيب الشطبة الكروية   ؛
أنابيب حبر كروي ، بطول 1.5 بوصةAncare#TD-99يتم إدخالها في سدادات ، تمكن الفئران من الشرب من زجاجات المياه والأسطوانات المتدرجة زجاجات
المياهAncare#FSPC8HT473 مل (16 أونصة) ، يجب أن تكون مسدودة بسدادة
أسطوانات متدرجة ، 100 ملفيشر# 0300741لاحتواء الإيثانول أثناء التعرض للكحول في قفص المنزل ؛ يجب قطع الطرف المنفوض لتمكين الانسداد بسدادات
مقياس MettlerToledo#MS6001Sلوزن زجاجات المياه واسطوانات الإيثانول
أنابيب البولي إيثيلين ، 1/32 بوصة القطر الداخلي ،   ؛ 1/32 بوصة سمك الجدار ، 3/32 بوصة القطر الخارجيفيشر# 14-169-1Aلتوصيل 20 مل من حقنة الإيثانول بمنفذ السوائل
إبرة ، 18 جم ، 1.5 بوصةطول فيشر#B305199لتوصيل أنابيب البولي إيثيلين بمحاقن الإيثانول ؛ يجب أن يتم تقديمها
محاقن ، 20 مل ، فيشر غير معقم#1482316Jلاحتواء الإيثانول على مضخات السوائل ؛ يحتاج إلى توصيله بأنابيب البولي إيثيلين بواسطة محاقن إبرة 18 جم 1 1/2
، 60 مل ، Luer-Lok غير معقمةفيشر# 14-820-11لتنظيف أنابيب البولي إيثيلين بعد جلسات PDT
مضخة حقنة أحادية السرعة ، 3.33 دورة في الدقيقةMed Associates Inc.#ENV-018MDلحمل 20 مل من محاقن الإيثانول وتسليم منفذ سائل الإيثانول
Med Associates Inc.#ENV-254-CBلتمكين توصيل الإيثانول أثناء جلسات PDT ؛ متصل بمحاقن الإيثانول بأنابيب البولي إيثيلين
كاشف الأشعة تحت الحمراء لدخول المنفذMed Associates Inc.#ENV-215Mثابت على جانبي   منفذ السوائل ؛ تحتاج إلى 2 لكل منفذ سائل
Houselight ، 28 فولت ، 100 مللي أمبيرMed Associates Inc.#ENV-135Mيوفر إضاءة عامة في غرفة
تكييف وحدة ClickerMed Associates Inc.#ENV-225SMالتحفيز السمعي لتكييف غرفة
مولد الضوضاء البيضاء مع مكبر الصوتMed Associates Inc.#PHM-100حافز سمعي لغرفة التكييف
أرضية بارMed Associates Inc.#ENV-009A-GFللذهاب مع معطف مقعد غرفة الاختبار المعيارية
، ورق ماصVWR# 89126-790ماصة لوضعه في صينية معدنية ، يجب قطعه ليناسب لوح البولي كربونات ،
بسمك 1/8 بوصة ، 12-5 / 8 بوصة × 10 بوصةجونستون بلاستيك# 30102515لجعل إدراج الأرضية الشفافة السلسة المستخدمة للسياق 1. يجب قطعها في 11.5 بوصة × 12.25 بوصة
قطع من صفائح الألمنيوم المثقبة ، بسمك 0.063 بوصة ، 48 بوصة × 96 بوصة ، 0.250 بوصة ثقوب × 0.375 بوصة مراكزأنيكا ستيللصنع إدراج أرضية مثقبة تستخدم للسياق 2. يجب تقطيعه إلى قطع مقاس 11.5 × 12.25
من الورق المقوى الأسود ، بسمك 0.053 بوصة ، 28 بوصة × 44 بوصةOmer DeSerres#P1909لبناء ألواح تغطي السقف والباب والجدار الخلفي لغرفة التكييف في السياق 1. يحتاج إلى قص حسب الحجم. تحتاج كل غرفة إلى ثلاث ألواح بقياس 11.5 × 13.25 بوصة تقريبا. يمكن ربط الألواح بالجانب الأضيق باستخدام شريط لاصق.
شريط لاصق قوي لجميع الأغراض ، 1.88 بوصة × 45 ياردة.بطة الشريطمادة لاصقة لتوصيل الألواح الكرتونية السوداء المستخدمة لتغطية الجدار الخلفي والسقف والباب في السياق 1.
غرفة الاختبار المعياريةMed Associates Inc.#ENV-009Aغرفة تكييف
مقصورات تخفيف الصوتAssociates Inc.#ENV-200R3AMيأتي مع مروحة 28 فولت تيار مستمر مثبتة (#ENV-025 فهرنهايت)
طبق بتريفيشر#08748Bأسفل فقط ، لاحتواء المحلول المرشوش الذي يوفر حافز الرائحة ؛ يحتاج إلى توسيطه في الدرج المعدني في غرف تكييف
حزمة واجهة PCIMed Associates Inc.#DIG-700P2-R2يربط خزانة واجهة منضدية بالكمبيوتر ؛ يتضمن 1 بطاقة واجهة ، 1 بطاقة فك تشفير ، 1 كابل شريط و 1 28 فولت كابل طاقة تيار مستمر
خزانة منضدية كبيرة ومصدر طاقةMed Associates Inc.#SG-6510Dتستخدم لاحتواء البطاقات ال 12 المضمنة في SmartCrtrl 8 Input ، و 16 حزمة إخراج
SmartCtrl 8 Input و 16 حزمة إخراجMed Associates Inc.#DIG-716P2يستخدم لتوصيل الأجهزة والتحكم فيها في غرفة التكييف. تتضمن الحزمة جميع الكابلات ووحدة الواجهة ولوحة الاتصال.
برنامج Med PC IVAssociates Inc.#SOF-735برنامج لتشغيل البرامج. يجب تثبيته على الكمبيوتر.
مراقب LG ، 19 "LCDكونكورديا متجرالكمبيوتر #W1942TQ BFشاشة الكمبيوتر ؛ للذهاب مع الكمبيوتر الذي يعمل بنظام Med PC IV
HP Z200 برج محطة العملConcordia متجر الكمبيوتر#BZ788US#ABAالكمبيوتر الذي يتم تشغيل Med PC IV
عليه Benzaldehyde ، & GE ؛ 99٪Les produits chimiques شركة أوميغا للكيماويات#B37-50تمييع في ماء الصنبور لرائحة اللوز
زيت الليمون ، معصور على البارد ، كاليفورنياسيجما ألدريتش#W262528-1KG-Kتمييع في ماء الصنبور لرائحة سياق الليمون
الكحول الإيثيلي ، 95٪كحوليخفف في ماء الصنبور إلى التركيز المطلوب
، سعة شركة بوصة Med Med تجاري

المراجع

  1. Field, M., Duka, T. Cues paired with a low dose of alcohol acquire conditioned incentive properties in social drinkers. Psychopharmacology (Berl). 159, 325-334 (2002).
  2. Litt, M. D., Cooney, N. L., Morse, P. Reactivity to alcohol-related stimuli in the laboratory and in the field: predictors of craving in treated alcoholics). Addiction. 95, 889-900 (2000).
  3. Pomerleau, O. F., Fertig, J., Baker, L., Cooney, N. Reactivity to alcohol cues in alcoholics and non-alcoholics: implications for a stimulus control analysis of drinking. Addict Behav. 8, 1-10 (1983).
  4. Sinha, R. New findings on biological factors predicting addiction relapse vulnerability. Curr Psychiatry Rep. 13, 398-405 (2011).
  5. Conklin, C. A. Environments as cues to smoke: implications for human extinction-based research and treatment. Exp Clin Psychopharmacol. 14, 12-19 (2006).
  6. Conklin, C. A., Robin, N., Perkins, K. A., Salkeld, R. P., McClernon, F. J. Proximal versus distal cues to smoke: the effects of environments on smokers' cue-reactivity. Exp Clin Psychopharmacol. 16, 207-214 (2008).
  7. Janak, P. H., Chaudhri, N. The potent effect of environmental context on relapse to alcohol-seeking after extinction. Open Addict J. 3, 76-87 (2010).
  8. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Cone, J. J., Janak, P. H. Reinstated ethanol-seeking in rats is modulated by environmental context and requires the nucleus accumbens core. Eur J Neurosci. 28, 2288-2298 (2008).
  9. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. Context-induced relapse of conditioned behavioral responding to ethanol cues in rats. Biol Psychiatry. 64, 203-210 (2008).
  10. Crombag, H. S., Shaham, Y. Renewal of drug seeking by contextual cues after prolonged extinction in rats. Behav Neurosci. 116, 169-173 (2002).
  11. Fuchs, R. A., Eaddy, J. L., Su, Z. I., Bell, G. H. Interactions of the basolateral amygdala with the dorsal hippocampus and dorsomedial prefrontal cortex regulate drug context-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats. Eur J Neurosci. 26, 487-498 (2007).
  12. Marchant, N. J., Hamlin, A. S., McNally, G. P. Lateral hypothalamus is required for context-induced reinstatement of extinguished reward seeking. J Neurosci. 29, 1331-1342 (2009).
  13. Zironi, I., Burattini, C., Aicardi, G., Janak, P. H. Context is a trigger for relapse to alcohol. Behav Brain Res. 167, 150-155 (2006).
  14. Sciascia, J. M., Mendoza, J., Chaudhri, N. Blocking dopamine D1-like receptors attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in rats. Alcohol Clin Exp Res. 38, 418-427 (2014).
  15. Chaudhri, N., Woods, C. A., Sahuque, L. L., Gill, T. M., Janak, P. H. Unilateral inactivation of the basolateral amygdala attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking. Eur J Neurosci. 38, 2751-2761 (2013).
  16. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Schairer, W. W., Janak, P. H. Separable roles of the nucleus accumbens core and shell in context- and cue-induced alcohol-seeking. Neuropsychopharmacology. 35, 783-791 (2010).
  17. Sparks, L. M., Sciascia, J. M., Ayorech, Z., Chaudhri, N. Vendor differences in alcohol consumption and the contribution of dopamine receptors to Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in Long-Evans rats. Psychopharmacology (Berl). 231, 753-764 (2014).
  18. Simms, J. A., et al. Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats. Alcohol Clin Exp Res. 32, 1816-1823 (2008).
  19. Wise, R. A. Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules. Psychopharmacologia. 29, 203-210 (1973).
  20. Bouton, M. E., Westbrook, R. F., Corcoran, K. A., Maren, S. Contextual and temporal modulation of extinction: behavioral and biological mechanisms. Biol Psychiatry. 60, 352-360 (2006).
  21. Pavlov, I. Conditioned reflexes: an investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. , Oxford University Press. Oxford, England. (1927).
  22. Gibbon, J., Baldock, M. D., Locurto, C., Gold, L., Terrace, H. S. Trial and intertrial durations in autoshaping. J Exp Psychol Anim Behav Process. 3, 264-284 (1977).
  23. Holland, P. C. CS-US interval as a determinant of the form of Pavlovian appetitive conditioned responses. J Exp Psychol Anim Behav Process. 6, 155-174 (1980).
  24. Stein, L., Sidman, M., Brady, J. V. Some effects of two temporal variables on conditioned suppression. J Exp Anal Behav. 1, 153-162 (1958).
  25. Coleman, D. A., Hemmes, N. S., Brown, B. L. Relative durations of conditioned stimulus and intertrial interval in conditioned suppression. J Exp Anal Behav. 46, 51-66 (1986).
  26. Schwarz-Stevens, K. S., Cunningham, C. L. Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration. Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).
  27. Palm, S., Roman, E., Nylander, I. Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers. Alcohol. 45, 607-614 (2011).
  28. Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn. Alcohol. 10, 37-43 (1993).
  29. Goodwin, F. L., Amit, Z. Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study. Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).
  30. Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats. Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).
  31. Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms. Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).
  32. Yap, C. S., Richardson, R. Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects. Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).
  33. Carew, M. B., Rudy, J. W. Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis. Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).
  34. Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats. Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

التكييف البافلوفيتدريب الانطفاءتدريب التمييزعمليات الدخول إلى منفذ السائلالإشارات السمعيةغرف التكييفإعطاء الإيثانولالاختبارات السلوكية
إجراءات لمراقبة الناجم عن السياق تجديد مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس في الجرذان
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.