هنا ، نقدم بروتوكولا لتحديد تجنب الأفراد المجهدين. هذا النموذج قوي ولكنه سهل الاستخدام ويمكن استخدامه لتقييم تأثير الجينات والبيئة على نوع واحد من التفاعل الاجتماعي في ذبابة الفاكهة السوداء.
مقالة منهجية
هنا ، نقدم بروتوكولا لتحديد تجنب الأفراد المجهدين. هذا النموذج قوي ولكنه سهل الاستخدام ويمكن استخدامه لتقييم تأثير الجينات والبيئة على نوع واحد من التفاعل الاجتماعي في ذبابة الفاكهة السوداء.
ذبابة الفاكهة السوداء هو نموذج ناشئ لدراسة الجوانب المختلفة للتفاعلات الاجتماعية. على سبيل المثال ، يتجنب الذباب المناطق التي كانت تشغلها سابقا أنواع محددة مجهدة بسبب رائحة إطلاقها أثناء الإجهاد تعرف باسم ذبابة الفاكهة رائحة الإجهاد (dSO). من خلال استخدام جهاز T-maze ، يمكن للمرء أن يحدد تجنب dSO بواسطة الذباب المستجيب في اختبار قوي وبأسعار معقولة للغاية. يتم عرض الشروط اللازمة للحصول على أداء قوي هنا. من الضروري تجربة مرهقة للذباب لإصدار dSO، بالإضافة إلى ما يكفي من الذباب الباعث لإحداث استجابة تجنب قوية لوجود dSO. غيرت الخلفية الجينية ، ولكن ليس حجم مجموعتها ، بقوة تجنب dSO بواسطة الذباب المستجيب. يعرض Canton-S و Elwood أداء أعلى في تجنب dSO مقارنة بسلالات أوريغون وسمرقند. سيسمح هذا الاختبار السلوكي بتحديد الآليات الكامنة وراء هذا السلوك الاجتماعي ، وتقييم تأثير الجينات والظروف البيئية على كل من انبعاث وتجنب dSO. يمكن تضمين هذا الاختبار في بطاريات الاختبارات التشخيصية البسيطة المستخدمة لتحديد أوجه القصور الاجتماعية للطفرات أو الظروف البيئية ذات الاهتمام.
والهدف من هذه الطريقة هو لقياس بسهولة جانبا جديدا من السلوك الاجتماعي بسيط في البطن ذبابة الفاكهة، مستقلة عن الخطوبة والعدوان.
التفاعلات الاجتماعية هي الحاسمة في تنمية سليمة وصحة الأفراد داخل المجتمع، فضلا عن وظيفة لفئة اجتماعية ككل. تعقيد عالية من هذه التفاعلات يتطلب أحجام عينة كبيرة والنظام الذي يسمح لتبسيط السلوك كما أسس الوراثية والعصبية للسلوك الاجتماعي لا تزال غير مفهومة. ذبابة الفاكهة البطن هو نموذج الجيني القوية التي يمكن أن تستخدم لتحديد الجيني و قواعد العصبية من التفاعلات الاجتماعية. في الواقع، D. البطن لديه ذخيرة من السلوكيات الاجتماعية المعقدة وبعض القياسات المباشرة للتنشئة الاجتماعية وبالفعل تم القيام به 1-7. ومع ذلك، فإن معظم هذه الجهود قد ركزت على السلوكيات الاجتماعية المعقدة نسبيا، مثل aggresالتفاعلات SIVE 3،6، مختلف جوانب الخطوبة 3،8-12، وكيف تجربة اجتماعية تؤثر السلوكيات الأخرى مثل التعلم، أو إيقاع الساعة البيولوجية 13-17. وبالإضافة إلى ذلك، فإن العديد من هذه المقايسات تعتمد على تحليل أنماط التفاعل معقدة من مجموعات من الذباب، وذلك باستخدام التتبع وبرامج الكمبيوتر لتحليل وفرة الناتج من البيانات. مثل هذه التحليلات لا تقدر بثمن، وتؤدي إلى رؤى جديدة مهمة مثل ديناميكية التفاعلات ذبابة ذبابة في مجموعات 7. القيد واحد، ومع ذلك، هو عدم إمكانية الوصول إلى هذه المقايسات للمجتمع ككل، ومعرفة محدودة من الآليات الكامنة الاعتراف بالآخر. وبعبارة أخرى، فإن أساس انبعاث إشارة من قبل فرد واحد والاعتراف بها من جانب آخر لا تزال غير مفهومة 18.
في المقابل، الذباب أيضا يحمل سلوك بسيط، وتجنب الاجتماعي، حيث يتحرك الأفراد بعيدا عن إشارة المنبعثة من الذباب وشدد: على D. melanogaster الإجهاد الرائحة أو احة دبي للسيليكون 19. في مقايسة الإنتاجية العالية، يمكن قياسها كميا هذا السلوك كما تجنب إشارة التوتر المنبعث من الذباب أخرى، أو تجنب الاجتماعي 19. توضع الذباب في جهاز T-المتاهة، وإعطاء خيار لتجنب قارورة تحتوي على احة دبي للسيليكون. باستخدام هذا الاختبار، تبين CO 2 لتكون عنصرا من عناصر احة دبي للسيليكون، وجزء من الدوائر العصبية اللازمة للاستجابة إلى CO 2 تم تشريح 19.
الفحص تجنب الاجتماعي المقدمة هنا هو المفهوم مماثل لالمقايسات سلوكية بسيطة وضعت في مختبر سيمور بنزر أن تمكين أجيال من الباحثين لتشريح السلوكيات المعقدة 20. تحليل تجنب الاجتماعي يمكن أن تنفذ فعالية من حيث التكلفة باستخدام مقايسة T-متاهة، والسماح لدراسة أكثر انتشارا من السلوك الاجتماعي. على سبيل المثال، وذلك باستخدام هذا الاختبار أثبتنا مؤخرا أن مخاطر وراثية مختلفة لمرض التوحد لها آثار متباينة في ب الاجتماعيةالمقايسات ehavior. المسوخ لجين مرشح لمرض التوحد - neurobeachin 21،22 - أوجه القصور الحالية على حد سواء في الفضاء الاجتماعي (وصف مكان آخر 23) وتجنب الاجتماعي 24. ومن المقترح غير طبيعية إشارات الدوبامين أيضا للعب دور في مسببات مرض التوحد في البشر 25،26. وعلى النقيض من النتائج التي تم الحصول عليها مع neurobeachin، وجدنا أن الأداء تجنب الاجتماعي لم يتأثر زيادة أو انخفاض مستويات من ذبابة الفاكهة الحويصلي أحادي الأمين الناقل (VMAT) في خلايا الدوبامين، على الرغم من الفضاء الاجتماعي ترتبط مباشرة إلى هذه المستويات من VMAT 27. النتائج المتناقضة التي تم الحصول عليها مع neurobeachin وVMAT تؤكد إمكانية تحديد أشكال مختلفة من السلوك ااجتماعي، وبالتالي مختلفة circuitries العصبية الكامنة تحوير الاستجابة للآخرين.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المعدات والكواشف مكون في منزل 1. (راجع قائمة المواد لأخرى)
ملاحظة: يمكن أيضا أن T-متاهة أن تستخدم لأغراض أخرى، كما وصفها 28.
2. إعداد الذباب قبل التجربة
1-2 أيام قبل تنفيذ التجربة:
2 ساعة قبل تنفيذ التجربة:
3. إجراء التجربة تجنب الاجتماعي
4. تحليل البيانات تجنب الاجتماعي
5. توليد قوارير التي كانت تحتلها الذباب بهيج - تنفيذ وبدلا من 3،5-3،6
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تجنب فحص الاجتماعي هو اختبار قوي قياس قدرة ذبابة الفاكهة على التعرف على إشارة الإجهاد (DSO) المنبعثة من الذباب أخرى، وبالتالي تقييم جانبا واحدا من التفاعلات الاجتماعية. يتم تنفيذ الفحص باستخدام جهاز يستخدم عادة في مختلف مقايسات السلوك المعروف باسم T-المتاهة، التي تمثل الذباب مع اختيار بين خيارين مختلفين - اليسار أو اليمين 19،28-31. في هذه الحالة، يتم كميا كفاءة التي الذباب تجنب احة دبي للسيليكون عن طريق حساب ومقارنة مؤشر أدائها (PI). A PI من الصفر يشير إلى توزي...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يصف هذا البروتوكول إجراء مفصل لتجنب الفحص الاجتماعي. سوف كانتون-S تجنب فقط قارورة فيها الذباب قد سبق وأكد ميكانيكيا، وأن الجنس وعدد من المستجيبين لا يؤثر ذلك الأداء تجنب الاجتماعي. ومع ذلك، والخلفية الوراثية للالمستجيبين لديها تأثير كبير.
وفيما يلي عدة خطوات حاسمة لأداء هذه التجربة بنجاح: 1) نقل دائما الذباب 2 ساعة قبل التجربة والتأكد من عدم تعكير صفو بيئتهم. 2) إجراء التجربة دائما في الوقت نفسه من اليوم، من النا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.
نشكر راشيل كانيبايور على مساعدتها في تحديد السلالة البرية الجديدة على أنها من أنواع melanogaster. R.W.F, O.F. و A.F.S. كانت مسؤولة عن تصميم البحث; أجرى R.W.F و M.N. و O.F. التجارب. R.W.F, M.N., O.F. و A.F.S. حلل البيانات. R.W.F. و I.S.M. و A.F.S. كتب المخطوطة.
تم دعم هذا العمل من خلال جوائز PSC-CUNY البحثية ، الممولة بشكل مشترك من قبل مؤتمر الموظفين المحترفين وجامعة مدينة نيويورك إلى AFS ؛ بتمويل داخلي من جامعة ويسترن إلى A.F.S. و I.S.M. ؛ من خلال دعم تدريبي من التحالف الوطني للصحة الإسبانية / برنامج العلماء من أصل إسباني للتحالف الوطني للصحة الإسبانية / Merck Ciencia (العلوم) وزمالة جامعية من كلية الدراسات العليا للآداب والعلوم بجامعة ييل إلى R.W.F.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مجهر تكبير ستيريو | نيكون | SMZ-645 | أي نطاق قياسي آخر للتعامل مع الذباب سيعمل |
| فرش الطلاء الصغيرة ؛ | لدفع الذباب | ||
| البولي إيثيلين المسامي ، 12 "× 12" ورقة | Flystuff - Genesee | 46-100 | http://www.flystuff.com/ProductInfo.php?productID=46-100 ورقة بلاستيكية مسامية لصندوق التخدير البارد |
| مصغرة إنذار مؤقت / ساعة | |||
| أقلام | |||
| شريط لاصق | |||
| دوامة صغيرة | فيشر | 14-955-151 ؛ | http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail للتحريض الميكانيكي للذباب - أي دوامة ستعمل. |
| Corning Life Sciences DL No.: 352017 ، أنبوب اختبار Falcon ؛ قاع دائري ؛ يمكن التخلص منه ؛ بدون إغلاق ، 14 مل ؛ 17 × 100 مم | فيشر | 14-959-8 ؛ | http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail?storeId=10652&langId=-1&catalogId=29104&productId=2771811&distype=0&highlightProductsItemsFlag=Y&fromSearch=1&searchType=PROD&hasPromo=0 هذه تسقط في مكانها في متاهة T الداخلية وأجهزة التيار المعاكس (انظر النص) |
| كرات | لإغلاق القوارير بعد التجربة. | ||
| لوح ثلاثي الطيات وغطاء | لتوفير خلفية بيضاء وضوء متجانس. | ||
| مقعد | |||
| وسادة | قصف أي لوحة ماوس تعمل. | ||
| قطعة قماش | لتغطية جهاز التيار المعاكس في استجابة التاكسي الضوئي. | ||
| ضوء أبيض بارد | 1000516563 Home Depot | http://www.homedepot.ca/product/illume-26-fluorescent-plug-in-linear/911423 أي ضوء خطي مماثل مع لمبة فلورسنت بيضاء باردة عند 13-15 واط ستعمل |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن