الأقلمة، تحديد الهوية، واستئصال مستودعات الفئران الدهنية

ملخص

نظرا لاتصال جذري والسلبية بين السمنة وأمراض المصاحبة الأخرى، يلعب البحوث حول دور الدهنية في المرض وهناك ما يبرر الصحة العامة. نقدم بروتوكول لعزل واستئصال مستودعات الدهنية مما يسمح لدراسة الدهنية باستخدام في الموقع وطرق المختبر.

الملخص

زادت السمنة بشكل كبير في العقود القليلة الماضية وتؤثر على أكثر من ثلث سكان الولايات المتحدة البالغين. بلغ التأثير الاقتصادي للسمنة في عام 2005 مبلغا مذهلا قدره 190.2 مليار دولار من التكاليف الطبية المباشرة وحدها. السمنة هي عامل خطر رئيسي لمجموعة واسعة من الأمراض. تاريخيا ، لم يكن معروفا سوى القليل عن الدهون ووظائفها الرئيسية والأساسية في الجسم. الدهون البنية والبيضاء هما النوعان الرئيسيان من الدهون ، لكن الأدبيات الحالية حددت نوعا جديدا من الدهون يسمى الدهون النارية أو البيج. أظهرت الأبحاث أن مستودعات الدهون لها ملامح أيضية محددة وأن بعض المستودعات تسمح بالميل إلى السمنة والاضطرابات الأخرى ذات الصلة. الهدف من هذا البروتوكول هو تزويد الباحثين بالقدرة على تحديد وإزالة مستودعات الدهون التي ستسمح بتحليل التأثيرات العاملية المختلفة على الدهون. بالإضافة إلى الدور المفيد أو الضار الذي تلعبه الدهون في المرض والصحة العامة. يسمح عزل واستئصال المستودعات الدهنية للمحققين بالنظر في التغيرات المورفولوجية الإجمالية بالإضافة إلى التغيرات النسيجية. يمكن أيضا استخدام الدهون المعزولة للدراسات الجزيئية لتقييم التغيير النسخي والانتقالي أو للتجارب في المختبر لاكتشاف أهداف الاهتمام وآليات العمل. تتفوق هذه التقنية على التقنيات المنشورة الأخرى نظرا للتصميم الذي يسمح بعزل مستودعات متعددة مع البساطة والحد الأدنى من التلوث.

المقدمة

جعلت الدهنية وظهور ملحوظ في أضواء وسائل الإعلام، وذلك بسبب الزيادة الهائلة السمنة خلال العقود القليلة الأخيرة من القرن ال20. يؤثر السمنة حاليا أكثر من ثلث البالغين و 17٪ من الأطفال والمراهقين في الولايات المتحدة (US) ^1. تغطي جميع المجموعات العرقية، وقد أظهرت البحوث الإحصائية المحيطة وباء السمنة أن السود غير اللاتينيين لديها أعلى معدل تعديل سن السمنة (49.5٪) مقارنة مع المكسيكي الاميركيين (40.4٪)، وجميع اللاتينيين (39.1٪)، وغير البيض من أصل اسباني (34.3٪) ^2. تأثير الاقتصادي للسمنة هو أيضا مصدر قلق متزايد لنظام الرعاية الصحية. في عام 2012، أشارت التقديرات إلى أن التكلفة السنوية للرعاية الطبية للسمنة في الولاي....

البروتوكول

ملاحظة: تم تنفيذ كافة الإجراءات الحيوانية بموافقة اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة سينسيناتي وفقا لدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية من المعاهد الوطنية للصحة (NIH النشر لا . 85-23، منقحة 1996).

1. الموت ببطء وتعقيم ماوس

1. ضع الماوس في المربع المنسدل تحتوي على جرعة supratheraputic من الأيزوفلورين والسماح ليستنشق إلى تأثير. بمجرد الموت الرحيم الماوس، وإزالة من مربع.
2. خلخل Cervically كوسيلة الثانية....

النتائج

وقد تحقق تحديد الهوية، وتوطين الدهنية تحت الجلد الإربي، الدهنية البني بين الكتفين، الحشوية الدهنية بربخي (الشكل 1)، وكذلك الدهنية قوس الأبهر ماحول الأوعية، الدهنية الأبهر الصدري، الدهنية الأبهري الكظري والدهنية الأبهر infrarenal (الشكل 2) بنجاح باستخدام طريقة جراحية وصفها. تم تقييم الفحص النسيجي والتمايز بين العينات BAT وWAT إيجابيا باستخدام الهيماتوكسيلين ويوزين (H & E) تلطيخ (الشكل 3). تحليل مستويات RNA من اديبونيكتين (Adipo.......

المناقشة

السمنة يمكن أن يؤدي إلى مجموعة واسعة من الحالات المرضية وفهم كامل للدور الذي الدهنية ليست مفهومة تماما يلعب. وبالتالي مواصلة البحث في مجال الدهنية أمر ضروري. النماذج الحيوانية، وتحديدا نماذج الفئران هي مثالية للبحث الأولي في تطور الأمراض واختبار العلاجات الدوائية المحتملة. في استخدام هذه النماذج، والعزلة دقيقة واستئصال مستودعات الدهنية هي أداة هامة للغاية وضرورية في دراسة علم الأمراض من الأمراض الدهنية المتضررة.

.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
Isoflurane	Med-Vet International	#RXISO-250
70٪ إيثانول	فيشر	07-678-001
DMEF-12	Sigma Aldrich	D-6421	دافئ في حمام مائي قبل وضع الأنسجة.
2 مل أنابيب الطرد المركزي الدقيقة	Midsci	MCT-200-C-S
محلول ملحي مخزن الفوسفات	Sigma Aldrich	P5368-10PAK