Phenotyping ماوس الرئوي وظيفة في فيفو مع قدرة الرئة نشرها

Summary

نصف وسيلة لقياس قدرة انتشار الرئة بسرعة وبساطة في الفئران ونظهر أنها حساسة بما فيه الكفاية لتغيرات النمط الظاهري في أمراض الرئة الشائعة المتعددة. وبالتالي ، فإن هذا المقياس يجلب أهمية انتقالية مباشرة لنماذج الفأر ، حيث يمكن أيضا قياس قدرة الانتشار بسهولة في البشر.

Abstract

الفأر هو الآن الحيوان الأولية المستخدمة في تصميم نموذج لمجموعة متنوعة من أمراض الرئة. لدراسة الآليات التي تكمن وراء مثل هذه الأمراض، وهناك حاجة إلى أساليب المظهرية التي يمكن قياس تغيرات مرضية. وعلاوة على ذلك، لتوفير صلة متعدية إلى نماذج الماوس، وينبغي أن تكون هذه القياسات الاختبارات التي يمكن بسهولة أن يتم ذلك في كل من البشر والفئران. لسوء الحظ، في الأدب الحالي القليلة القياسات المظهرية وظائف الرئة لدى التطبيق المباشر للبشر. الاستثناء الوحيد هو القدرة نشرها لأول أكسيد الكربون، وهو القياس الذي يتم بشكل روتيني في البشر. في هذا التقرير، وصفنا وسيلة بسرعة وببساطة لقياس هذه القدرة نشرها في الفئران. ويشمل الإجراء التضخم الرئة وجيزة مع الغازات التتبع في الماوس تخدير، تليها 1 دقيقة وقت تحليل الغاز. لقد اختبرنا قدرة هذه الطريقة للكشف عن عدة أمراض الرئة، بما في ذلك انتفاخ الرئة والتليف، إصابة الرئة الحادة، والإنفلونزا، والتهابات الرئة الفطرية، فضلا عن رصد نضوج الرئة في الجراء الصغار. أظهرت النتائج انخفاض كبير في جميع أمراض الرئة، وكذلك زيادة في القدرة نشرها مع نضوج الرئة. هذا القياس من الرئة نشرها قدرة بالتالي يوفر اختبار وظيفة الرئة التي لديها تطبيق واسع النطاق مع قدرتها على اكتشاف التغيرات الهيكلية المظهرية مع معظم النماذج الرئة المرضية الموجودة.

Introduction

الفأر هو الآن الحيوان الأولية المستخدمة في تصميم نموذج لمجموعة متنوعة من أمراض الرئة. لدراسة آليات تشكل أساس هذه الأمراض، وهناك حاجة إلى أساليب المظهرية التي يمكن قياس ذلك التغيرات المرضية. على الرغم من أن هناك العديد من الدراسات الماوس حيث يتم قياس الميكانيكا والتهوية، وهذه القياسات هي عموما لا علاقة لها التقييمات القياسية من وظائف الرئة يتم عادة في الجسم البشري. وهذا أمر مؤسف، لأن القدرة على أداء قياسات تعادل في الفئران والموضوعات الإنسان قد تسهيل ترجمة نتائج في نماذج الماوس إلى الأمراض التي تصيب البشر.

واحدة من القياسات الأكثر شيوعا وأدلى بسهولة في المواد ا....

Protocol

ملاحظة: تمت الموافقة على جميع البروتوكولات الحيوان من قبل لجنة جامعة رعاية الحيوان واستخدام جونز هوبكنز.

1. إعداد الحيوانية

1. تحضير الفئران C57BL 6/6 السيطرة لقياس DFCO، من خلال التخدير لهم الكيتامين وزيلازين على النحو المبين في الخطوة 2.3 أدناه.
2. إعداد كل من الفئران الأخرى مع أمراض الرئة المختلفة هو مبين في الجدول رقم 1 عن طريق استخدام نفس الإجراء لعناصر التحكم. وتوجد تفاصيل محددة اللازمة لإنشاء كل من هذه ا....

Results

ويبين الشكل 1 القياسات DFCO من الفئران الكبار في مجموعات A، B، C، D، E، وF. كان هناك انخفاض كبير مع كل من عدوى الرشاشيات والإنفلونزا، وكذلك انخفاض كبير في متليف، نفاخي، وحادة نماذج إصابة الرئة. ويبين الشكل 2 التغيرات التنموية المجموعة G في DFCO بمرور الوقت مع عمر الفئران 2-6 أسابيع. كانت هناك زيادة طفيفة ولكنها هامة مع نمو الرئة خلال هذه الدورة الوقت. وكان أثر استخدام حجم التضخم أصغر أيضا واضح جدا في نقطة زمنية 6 أسابيع. كان هناك اتجاه للإناث لديه.......

Discussion

في العمل الحالي، حددنا مقياس جديد لقياس القدرة الغاز تبادل في الرئة الماوس. هذا المقياس هو مماثل لقدرات نشرها، وقياس السريري المشترك الذي يقيس الوظيفة الأساسية في الرئة، وهذا هو، قدرته على تبادل الغاز. القدرة نشرها هو الوحيد قياس وظيفية الرئة التي يمكن بسهولة وسرعة القيام به في كل من الفئران والبشر. للكشف عن أمراض الرئة في الفئران، وهو الهدف الرئيسي هو لقياس التغيرات في وظائف الرئة بين السيطرة والأفواج التجريبية. لتحقيق هذا الهدف، قمنا محددة والاستفادة من DFCO لإثبات قدرتها على qu.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
كروماتوجراف الغاز	Inficon	Micro GC موديل 3000A	Agilent يصنع نموذجا مشابها
18 G Luer إبرة كعب	Becton Dickenson		العديد من البائعين المحتملين الآخرين حقنة
بلاستيكية 3 مل	Becton Dickenson		العديد من البائعين المحتملين الآخرين
أكياس عينة غاز البولي بروبلين	SKC	1 أو 2 لتر تعمل بشكل جيد	ستعمل الأكياس الضيقة للغاز الأخرى بشكل جيد
خزان غاز ، 0.3٪ Ne ، 0.3٪ ثاني أكسيد الكربون ، توازن الهواء ؛ (مقاس ME)	Airgas، Inc	Z04 NI785ME3012	هذا هو الخليط القياسي المستخدم ل DLCO في البشر
25 TCID50 / فأر من فيروس الأنفلونزا A / PR8 المخفف في محلول ملحي مخزن بالفوسفات.
الإيلاستاز البنكرياس الخنزير	، أوينسفيل ، ميزوري		5.4 U
Bleomycin	APP Pharmaceuticals ، Schaumburg ، IL		0.25 U
الإشريكية القولونية < / م > LPS	Sigma L2880		3 & mu ؛ جم / جم وزن الجسم O55: B5<
i>Aspergillus fumigatus < / i> (عزل Af293) تم جمع كونيديا من المستعمرات الناضجة المزروعة على أجار سكر العنب البطاطس.