يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

علم وظائف الأعضاء مختبر مظاهرة: معدل الترشيح الكبيبي في الجرذ

17K مشاهدات

DOI:

10.3791/52425

يوليو 26, 2015

في هذه المقالة

ملخص

الغرض من هذا البروتوكول هو توضيح المبادئ والتقنيات لقياس وحساب معدل ترشيح الكبيبات ومعدل تدفق البول وإفراز الصوديوم والبوتاسيوم في الفئران. يمكن استخدام هذا العرض التوضيحي لتزويد الطلاب بفهم مفاهيمي شامل لكيفية قياس وظائف الكلى.

الملخص

تعتبر قياسات

ومعدل الترشيح الكبيبي (GFR) والإفراز الجزئي للصوديوم (Na) والبوتاسيوم (K) أمرا بالغ الأهمية في تقييم وظائف الكلى في الصحة والمرض. يتم قياس GFR على أنه التصفية الكلوية المستقرة للإينولين والتي يتم ترشيحها في الكبيبة ، ولكن لا يتم إفرازها أو إعادة امتصاصها على طول النيفرون. يمكن تحديد الإفراز الجزئي ل Na و K من تركيز Na و K في البلازما والبول. يمكن إثبات التصفية الكلوية للإينولين في مخدر يحتوي على قسطرة في الشريان الفخذي والوريد الفخذي والمثانة. المعدات والإمدادات المستخدمة في هذا الإجراء هي تلك المتوفرة بشكل شائع في منشأة أساسية للبحث ، وبالتالي يجعل هذا الإجراء وسيلة عملية لقياس وظائف الكلى. الغرض من هذا الفيديو هو توضيح الإجراءات المطلوبة لإجراء عرض معملي يتم فيه تقييم وظائف الكلى قبل وبعد دواء مدر للبول. يمكن استخدام التقنية المقدمة لتقييم وظائف الكلى في نماذج الفئران لأمراض الكلى.

المقدمة

أهم وظيفة للكلية هي التنظيم الاستتبابي للماء خارج الخلية ومحتوى الإلكتروليت. تنظم الكلى عن كثب الماء خارج الخلية والصوديوم (Na) والبوتاسيوم (K) للحفاظ على المستويات الفسيولوجية الطبيعية. يمكن أن تؤدي الاضطرابات في وظائف الكلى إلى اضطرابات استقلابية خطيرة يمكن أن تكون قاتلة. تحدث العملية الكلوية الأساسية في النيفرون وتبدأ بترشيح البلازما في الكبيبة وتنتهي بإفراز البول. العمليات الأخرى التي تحدد التركيز النهائي للماء و Na و K في البول هي الإفراز وإعادة الامتصاص داخل النيفرون. تعد قياسات معدل الترشيح الكبيبي (GFR) والإفراز الجزئي ل Na و K أمرا بالغ الأهمية في تقييم وظيفة الكلى في الصحة والمرض. تتم إحالة القارئ إلى مقالات المراجعة والكتب المدرسية المنشورة مسبقا لإجراء مناقشة أكثر شمولا لوظائف الكلى1-4.

يمكن قياس

GFR على أنه التصفية الكلوية المستقرة للإينولين التي يتم ترشيحها في الكبيبة ، ولكن لا يتم إفرازها أو إعادة امتصاصها على طول النيفرون5. في حين أن هذه التقنية تتطلب التخدير والتحضير الجراحي وتجربة نهائية ، إلا أنها تعتبر المعيار الذهبي لقياس GFR. باستخدام الأنسولين الموسوم بالفلوريسين إيزوثيوسيانات (FITC) ، يمكن قياس تركيز البلازما والبول من FITC-inulin بسهولة بكميات صغيرة واستخدامه لحساب GFR خلال نقاط زمنية متعددة من التجربة. يمكن تحديد الإفراز الجزئي ل Na و K من تركيز Na و K في البلازما والبول.

يمكن بسهولة إثبات الفهم المفاهيمي لكيفية قياس وظائف الكلى في مختبر قصير مصمم للسماح للطلاب بالمشاركة بنشاط في بعض جوانب التجربة. يصور هذا الفيديو التحضير قبل المختبر ، وعرض وظائف الكلى ، وتقييم النتائج بعد المختبر. يتم عرض التقنيات الجراحية اللازمة لإجراء قياسات GFR في فأر مخدر. بالإضافة إلى ذلك ، يتم عرض أمثلة على حسابات GFR ، والإفراز الجزئي ل Na و K قبل وبعد إعطاء دواء مدر للبول.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

قبل الشروع في أي إجراء الحيوان، لجنة رعاية الحيوان واستخدام المؤسسية (IACUC) يجب الموافقة على البروتوكول. وقد وافق هذا البروتوكول من قبل جامعة IACUC ولاية ميشيغان.

1. إعداد قبل مختبر FITC-حبوب الحل

  1. الدافئة 20 مل من المياه المالحة إلى 70 درجة مئوية، وببطء ضجة في 100 ملغ من FITC-حبوب (5 ملغ / مل FITC-حبوب) حتى يذوب كل حبوب.
  2. حل بارد لRT وإضافة 800 ملغ من ألبومين المصل البقري (40 ملغ / مل BSA، مسحوق مجفف بالتجميد، الجلوبيولين أساسا الحرة، الذيفان الداخلي منخفضة، ≥98٪ نقاء بواسطة agarose هلام الكهربائي).
  3. تصفية الحل حبوب-BSA مع ورق الترشيح (الصف 1). وضع حل تصفيتها في حقنة 20 مل مع فلتر حقنة طرف (0.2 ميكرون)، ويغطى بورق للحماية من الضوء.

2. التخدير وجراحة

  1. وضع فأر في غرفة تحريض مليئة 5٪ الأيزوفلورين للحث على التخدير. سجل بودالوزن ص (250-350 ز) ووضع فأر على منصة الجراحية ساخنة تهدف إلى الحفاظ على 37 درجة مئوية درجة حرارة الجسم في كافة مراحل التجربة. تأمين بلطف الفئران على منصة مع الشريط المختبر على الكفوف. الحفاظ على التخدير مع 1-2٪ الأيزوفلورين مع الصف الطبية 100٪ O 2 في معدل تدفق الهواء من 0،8-1،0 لتر / دقيقة.
  2. ادخال قسطرة مدبب (داخل الأوعية OD طرف، 2.7F) في الشريان الفخذي لضغط الدم ورصد معدل ضربات القلب، وأخذ عينات الدم.
  3. ادخال قسطرة (PE-50) في الوريد الفخذي للحبوب الحقن في الوريد. تأمين القسطرة إلى الأنسجة المحيطة مع 5-O مضفر الحرير خياطة جراحية 6.
  4. إرفاق القسطرة الشريانية لمحول الضغط قياس الضغط. سجل ضغط الدم ومعدل ضربات القلب باستخدام برنامج الحصول على البيانات وعرضها على شاشة الكمبيوتر في الوقت الحقيقي. ويتجلى هذا الأسلوب في التفاصيل على شريط فيديو 6.
  5. فضح المثانة عن طريق شق فوق العانة. قطع صغيرةثقب في طرف المثانة وإدراج قنية (PE-190) مع حرارة اندلع طرف داخل المثانة لجمع البول. تأمين قنية إلى المثانة مع خياطة محفظة سلسلة.

3. البول وجمع الدم

  1. وضع حقنة من FITC-حبوب في ضخ حقنة مع معدل تدفق مجموعة من 1 مل / ساعة لكل 100 غرام من وزن الجسم (3 مل / ساعة لفأر وزنها 300 غرام). نعلق حقنة لقسطرة الوريد الفخذي. بدء ضخ حبوب والسماح لفترة موازنة 2/1 ساعة. الحفاظ على حقنة مغطاة بورق للحماية من الضوء.
  2. تحديد ما إذا كان معدل تدفق البول هو ثابت وكاف لتحليل العينة (20 ميكرولتر / دقيقة) عن طريق جمع عينة البول في وزنه قبل القارورة جمع لمدة 10 دقيقة. تحديد حجم البول gravimetrically مع مقياس رقمي. وحدة تخزين البول الكافي لفترة التحصيل 10 دقيقة 0.2 مل. مواصلة جمع عينات البول حتى تشير إلى مجموعتين متتاليتين معدل تدفق البول من 20 ميكرولتر / مأو أكثر.
  3. عينات ما قبل الدواء
    1. جمع عينة البول خلال فترة 20 دقيقة. جمع عينة الدم (0.5 مل) من القسطرة الشريانية في منتصف فترة جمع البول. كن حذرا لواضحة تماما القسطرة الشريانية من المياه المالحة قبل جمع عينة الدم في قارورة جمع تحتوي على 1 U الهيبارين. استخدام قارورة جمع مع علامات حجم لتسهيل جمع 0.5 مل من الدم الشرياني.
    2. طرد القسطرة الشريانية مع الهيبارين المالحة (20 U / مل) لمسح القسطرة من الدم (حوالي 0.1 مل). يجب أن يكون طول القسطرة الشريانية قصيرة قدر الإمكان للحد من حجم الهيبارين المالحة المطلوبة للقضاء.
      ملاحظة: عينات الدم المخفض تنتج حسابات غير دقيقة من GFR وإفراز كسور من نا وK.
    3. انتظر 10 دقيقة، وتكرار مجموعة من ثانية البول قبل المخدرات وعينة من الدم.
  4. بعد جمع عينتين قبل المخدرات وإدارة ودرو مدر للبول ز، فوروسيميد (10 ملغ / كلغ)، عن طريق القسطرة في الشرايين. طرد القسطرة الشريانية مع المياه المالحة heparinized لمسح القسطرة من المخدرات. الحرص على منع ضخ الهواء عن طريق القسطرة في الشرايين. تسجيل الوقت من حقن فوروسيميد.
  5. عينات بعد المخدرات: في كل نقطة من النقاط الزمنية 3 أدناه، وجمع عينة من البول خلال فترة جمع 10 دقيقة، وعينة الدم (0.5 مل) في منتصف فترة جمع البول.
    1. العينة بعد المخدرات 1 - جمع خمسة دقيقة بعد فوروسيميد.
    2. العينة بعد المخدرات 2 - جمع عشرة دقيقة بعد فوروسيميد.
    3. العينة بعد المخدرات 3 - جمع خمسة عشر دقيقة بعد فوروسيميد.
  6. بعد الانتهاء من جمع كل العينات، الموت ببطء الفئران وفقا للإجراءات المؤسسية بضع الصدر وإزالة القلب. إزالة كل من الكليتين. Decapsulate (إزالة الغشاء المحيط) وصمة عار الكلى لإزالة الدم الزائد. وزن الكلى.

الحمار = "jove_title"> 4. تحليل عينة

  1. قياس كافة وحدات التخزين عينة البول gravimetrically مع مقياس رقمي، وأوزان قياسية.
  2. الطرد المركزي عينات الدم الكامل مع جهاز للطرد المركزي فوق المنضدة (1800 x ج) لفصل البلازما. نقل عينات البلازما إلى قارورة صغيرة المسمى.
  3. تحليل تركيزات البوتاسيوم والصوديوم في عينات البول والبلازما مع محلل الصوديوم / البوتاسيوم.
  4. قياس FITC-حبوب في البلازما والبول
    1. تمييع البول قبل المخدرات (من 1: 200-1: 400)، وبول بعد المخدرات (1:10) مع HEPES العازلة (500 ملي، ودرجة الحموضة 7.4).
    2. إضافة 40 ميكرولتر من ميكرولتر القياسية أو عينة و 60 العازلة HEPES في 96 لوحة جيدا (عينة واحدة لكل بئر) والسماح لخلط لمدة 10 دقيقة في حين مغطاة بورق الألمنيوم.
    3. توليد منحنى القياسية لFITC-حبوب لتركيزات 6.25، 12.5، 25، 50، 100، 200، 400 ميكروغرام / مل (الشكل 1). تحديد مضان FITC-حبوب في العينات والمعايير باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية مع السابقينالاقتباس وانبعاث موجات من 485 و 538 نانومتر، على التوالي.
    4. تناسب القيم الفلورسنت لمعايير ل4-paramter ظيفة اللوجستية تحليل الانحدار. وتستخدم المعلمات وظيفة الانحدار لحساب تركيز FITC-حبوب في البلازما والبول عينات (الجدول 1).

5. تحليل ما بعد المختبر من النتائج: الحسابات

  1. حساب معدل تدفق البول (UV، مل / دقيقة): [حجم البول جمع (مل)] ÷ [وقت جمع (دقيقة)]
  2. حساب معدل الترشيح الكبيبي (GFR، مل / دقيقة): [البول تركيز حبوب (ميكروغرام / مل) × الأشعة فوق البنفسجية (مل / دقيقة)] ÷ [البلازما حبوب اضرب. (ميكروغرام / مل)]
  3. حساب المصفاة تحميل الصوديوم (ميكرومول / دقيقة): البلازما تركيز الصوديوم (ميكرومول / لتر) س GFR (مل / دقيقة)
  4. حساب الصوديوم إفراز معدل (U V نا؛ ميكرومول / دقيقة): البول تركيز الصوديوم (ميكرومول / لتر) × الأشعة فوق البنفسجية (مل / دقيقة)
  5. حساب كسور إفراز الصوديوم (FE نا؛٪): [U V نا (ميكرومول / دقيقة)] ÷ [تصفيتها تحميل الصوديوم (ميكرومول / دقيقة)] × 100
  6. حساب تحميل المصفاة البوتاسيوم (ميكرومول / دقيقة): البلازما تركيز البوتاسيوم (ميكرومول / لتر) × GFR (مل / دقيقة)
  7. حساب البوتاسيوم إفراز معدل (U K V؛ ميكرومول / دقيقة): البول تركيز البوتاسيوم (ميكرومول / لتر) × الأشعة فوق البنفسجية (مل / دقيقة)
  8. حساب كسور إفراز البوتاسيوم (K FE؛٪): [U K V (ميكرومول / دقيقة)] ÷ [تصفيتها البوتاسيوم تحميل (ميكرومول / دقيقة)] × 100

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

كان مدر للبول يستخدم في المظاهرة مختبر فوروسيميد الذي يثبط بشكل سريع جدا استيعاب من البوتاسيوم والصوديوم تصفيتها عن طريق الكلى مما أدى إلى زيادة الصوديوم، البوتاسيوم، وإفراز المياه في غضون دقائق من الدواء. بواسطة آلية الأساسية، يجب أن يكون فوروسيميد الحد الأدنى من الآثار على GFR والحمل تصفيتها من البوتاسيوم والصوديوم، ولكن سيزيد تدفق البول، وإفراز كسور من نا وK.

كانت نتائج ممثلة في الجدول 3 تبين ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

علامة المناسبة لقياس GFR يجب أن تفي أربعة معايير هي: أن تتم تصفيته بحرية في الكبيبة، تكون غير منضم إلى بروتينات البلازما، ولا يمكن استيعابها ولا يفرز في كليون. حبوب هو بوليمر الفركتوز الذي يرضي هذه المعايير. ونتيجة لذلك، يعتبر التصفية الكلوية للحبوب المعيار الذهبي لقياس GFR 7. وتمثل هذه التقنية أثبتت النهج التقليدي لتحديد التصفية الكلوية للحبوب باستخدام مجموعات البول في الوقت المناسب خلال ضخ مستمر للحبوب 8،9. وقد تم إجراء قياسات حبوب التقليدية باستخدام طريقة ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة. آراء أو التأكيدات الواردة في هذه الوثيقة هي آراء خاصة للمؤلف، وليس يمكن تفسيره بأنه مسؤول أو يعكس وجهات نظر قسم من الجيش أو وزارة الدفاع.

شكر وتقدير

وكان مصدر التمويل للمظاهرة مختبر منحة NIGMS: GM077119. نشكر الدكتور جوزيف R. هايوود والدكتور بيتر كوبيت على دعمهم للتتسبب قصيرة في التكاملية ونظم الجهاز الصيدلة. كما نشكر السيدة هانا جارفر لها الدعم الفني للمظاهرة المختبر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
5-0 خياطة جراحية من الحرير مضفرللتخصصات الجراحية CorpSP1033
لوحة الفحص ، 96-WellCostar   ؛3922
ألبومين مصل الأبقارSigma Chemical CoA2934-25G
أجهزة الطرد المركزيBeckman CoulterMicroFuge 18 ، 357160
أنابيب عينة مخروطيةDot Scientific Inc.   ؛#711-FTG
أدوات تطبيق القطن ذات الرؤوسSolon Manufacturing Co56200
برنامج الحصول على البياناتADInstrumentsLabChart Pro 7.0
Digital Scale دنفر إنسترومنتAPX-4001
FITC-InulinSigma Chemical CoF3272-1G
إسفنج شاشCovidien2146
سرير جراحي ساخنEZ-AnesthesiaEZ-212
HeparinSagnetNDC 25021-402-10
HEPESSigma Chemical CoH3375
Isofluraneأبوت لصحةIsoFlo ، 5260-04-05
مبخر الأيزوفلورانEZ-AnesthesiaEZ-190F
Dissecting FallpsBiomedical Research Instruments Inc.70-1020
قارئ صفيحة دقيقة - FluoroskanThermoScientificAscent FL ، 5210460
NOVA 5+ محلل الصوديوم / البوتاسيومNOVA BioMedical14156
حاملات إبرة Olsen-Hegar مع أدواتالعلوم الدقيقةللمقص 12002-12
PE-190 (لقسطرة المثانة)BD محول ضغط 427435
& نب سب.ADInstrumentsMLT1199
Pyrex Culture TubesCorning Inc.99445-12
شركة القسطرة الإستراتيجية للشريان الفخذي المدببللفئرانRFA-01
Salix Furosemide 5٪Intervet# 34-478
مقص الحولأدوات العلوم الدقيقة14075-11
مقص جراحي للطلابأدوات العلوم الدقيقة91402-12
قفازات جراحيةقفازاتالنتريل الاسترليني كيمبرلي كلارك
حقنةRazel ScientificR99-E
ملقط الأنسجةأدوات العلوم الدقيقة91121-12
مقص المناديلجورج تيمان   Co105-420
< p>5-0 التخصصات الجراحية للخياطة الجراحية من الحرير المضفر Corp SP1033 لوحة الفحص ، 96-Well Costar   3922 مصل الأبقار الألبومين Sigma Chemical Co A2934-25G جهاز طرد مركزي Beckman Coulter MicroFuge 18 ، 357160 أنابيب عينة مخروطية Dot Scientific Inc.  # 711-FTG أدوات تطبيق القطن ذات الرأس Solon Manufacturing Co 56200 برنامج الحصول على البيانات ADInstruments LabChart Pro 7.0 رقمي مقياس  دنفر إنسترومنت APX-4001 FITC-Inulin Sigma Chemical Co F3272-1G إسفنج شاش Covidien 2146 سرير جراحي ساخن EZ-Anesthesia EZ-212 Heparin Sagnet NDC 25021-402-10 HEPES Sigma Chemical Co H3375 Isoflurane Abbott Animal Health IsoFlo ، 5260-04-05 Isoflurane Vaporizer EZ-Anesthesia EZ-190F Micro Dissecting Fallps Biomedical Research Instruments Inc. 70-1020 Microplate Reader - Fluoroskan ThermoScientific Ascent FL ، 5210460 NOVA 5+ محلل الصوديوم / البوتاسيوم NOVA BioMedical 14156 Olsen-Hegar حاملات الإبرة مع أدوات العلوم الدقيقة للمقص 12002-12 PE-190 (لقسطرة المثانة) محول ضغط 427435 الطبي BD   ؛ ADInstruments MLT1199 أنابيب ثقافة بيركس Corning Inc. 99445-12 فئران الفخذ مدبب الشريان القسطرة التطبيقات الاستراتيجية Inc. RFA-01 Salix Furosemide 5٪ Intervet # 34-478 مقص الحول أدوات العلوم الدقيقة 14075-11 مقص جراحي للطلاب أدوات العلوم الدقيقة 91402-12 قفازات جراحية قفازات النتريل الاسترليني كيمبرلي كلارك مضخة حقنة Razel Scientific R99-E ملقط الأنسجة أدوات العلوم الدقيقة 91121-12 مقص المناديل جورج تيمان  Co 105-420< / ص>
Micro الطبي مضخة

المراجع

  1. Silverthorn, D. U. Human Physiology: An integrated approach. , Pearson. (2012).
  2. Hall, J. E. Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology. , 303-344 (2011).
  3. Levey, A. S. Measurement of renal function in chronic renal disease. Kidney International. 38 (1), 167-184 (1990).
  4. Thurau, K., Valtin, H., Schnermann, J. Kidney. Annual Review of Physiology. 30, 441-524 (1968).
  5. Shannon, J. A., Smith, H. W. The excretion of inulin, xylose, and urea by normal and phoriziniaed man. Journal of Clinical Investigation. 14, 393-401 (1935).
  6. Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. Journal of Visualized Experiments. (59), (2012).
  7. Sterner, G., et al. Determining 'true' glomerular filtration rate in healthy adults using infusion of inulin and comparing it with values obtained using other clearance techniques or predictive equations. Scandinavian Journal of Urology and Nephrology. 42, 278-285 (2008).
  8. Toto, R. D. Conventional measurement of renal function utilizing serum creatinine, creatinine clearance, inulin and para-aminohippuric acid clearance. Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 4 (6), 505-509 (1995).
  9. Matavelli, L. C., Kadowitz, P. J., Navar, L. G., Majid, D. S. Renal hemodynamic and excretory responses to intra-arterial infusion of peroxynitrite in anesthetized rats. Americam Journal of Physiology. 296, F170-F176 (2009).
  10. Davidson, W. D., Sackner, M. A. Simplification of the anthrone method for the determination of inulin in clearance studies. Journal of Laboratory, & Clinical Medicine. 62, 351-356 (1963).
  11. Symes, A. L., Gault, M. H. Assay of inulin in tissues using anthrone. Clinical Biochemistry. 8 (1), 67-70 (1975).
  12. Shalmi, M., Lunau, H. E., Petersen, J. S., Bak, M., Christensen, S. Suitability of tritiated inulin for determination of glomerular filtration rate. Americam Journal of Physiology. 260 (2 Pt 2), F283-F289 (1991).
  13. Denton, K. M., Anderson, W. P. Glomerular untrafiltration in rabbits with superficial glomeruli. EUropean Journal of Physiology. 419 (3-4), 235-242 (1991).
  14. Jobin, J., Bonjour, J. -P. Measurement of glomerular filtration rate in conscious unrestrained rats with inulin infused by implanted osmotic pumps. Americam Journal of Physiology. 248 (5 Pt 2), F734-F738 (1985).
  15. Lorenz, J. N., Gruenstein, E. A simple, nonradioactive method for evaluating single-nephron filtration rate using FITC-inulin. Americam Journal of Physiology. 276 (1 Pt 2), F172-F177 (1999).
  16. Qi, Z., et al. Serial determination of glomerular filtration rate in conscious mice using FITC-inulin clearance. Americam Journal of Physiology. 286 (3), F590-F596 (2004).
  17. Bivona, B. J., Park, S., Harrison-Bernard, L. M. Glomerular filtration rate determinations in conscious type II diabetic mice. Americam Journal of Physiology. 300 (3), F618-F625 (2011).
  18. Rosen, S. M. Effects of anaesthesia and surgery on renal hemodynamics. British Journal of Anesthesiology. 44, 252-258 (1972).
  19. Cousins, M. J. Anesthesia and the kidney. Anaesthesia and intensive care. 11 (4), 292-320 (1983).
  20. Walter, S. J., Zewde, T., Shirley, D. G. The effect of anaesthesia and standard clearance procedures on renal function in the rat. Quarterly Journal of Experimental Physiology. 74, 805-812 (1989).
  21. Rieg, T. A. A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice. Journal of Visualized Experiments. (75), (2013).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم