يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

مختبر الأحيائي تغذية الأسماك لتقييم آخر Antipredatory من المركبات الثانوية من الأنسجة من الكائنات البحرية

8.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/52429

⸱

يناير 11, 2015

 , 
1Department of Biology and Marine Biology and Center for Marine Science, University of North Carolina Wilmington

في هذه المقالة

ملخص

هذا الأحيائي توظف الأسماك المفترسة نموذج لتقييم وجود نواتج التغذية رادع من مقتطفات العضوية من أنسجة الكائنات البحرية في تركيزات الطبيعية باستخدام غذائيا مقارنة مصفوفة الغذاء.

الملخص

البيئة الكيميائية البحرية هي تخصص شاب ، نشأ من تعاون كيميائيي المنتجات الطبيعية وعلماء البيئة البحرية في الثمانينيات بهدف فحص الوظائف البيئية للمستقلبات الثانوية من أنسجة الكائنات البحرية. وكانت النتيجة تقدما في البروتوكولات التي صقلت بشكل متزايد الأهمية البيئية للنهج التجريبي. نقدم هنا أحدث نسخة من الاختبار الحيوي المختبري لتغذية الأسماك والذي يمكن الباحثين من تقييم النشاط المضاد للحيوانات المضادة للحيوانات المستقلبة الثانوية من أنسجة الكائنات البحرية. يتم استخراج المستقلبات العضوية من جميع الأقطاب بشكل شامل من أنسجة الكائن الحي المستهدف وإعادة تشكيلها بتركيزات طبيعية في مصفوفة غذائية مناسبة من الناحية التغذوية. يتم تقديم كريات الطعام التجريبية إلى مفترس عام في فحوصات التغذية المختبرية لتقييم النشاط المضاد للمفترس للمستخلص. يستخدم الإجراء الموصوف هنا الرأس الأزرق ، Thalassoma bifasciatum ، لاختبار استساغة اللافقاريات البحرية في منطقة البحر الكاريبي. ومع ذلك ، يمكن تكييف التصميم بسهولة مع الأنظمة الأخرى. تعد النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام هذا الاختبار المختبري مقدمة مهمة للتجارب الميدانية التي تعتمد على استجابات التغذية لمجموعة كاملة من المفترسة المحتملة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام هذا المقايسة الحيوية لتوجيه عزل مستقلبات الرادع للتغذية من خلال التجزئة الموجهة بالمقايسة الحيوية. لقد عزز هذا الاختبار الحيوي للتغذية فهمنا للعوامل التي تتحكم في توزيع ووفرة اللافقاريات البحرية على الشعاب المرجانية في منطقة البحر الكاريبي وقد تفيد التحقيقات في مجالات البحث المتنوعة ، بما في ذلك علم الأدوية والتكنولوجيا الحيوية والبيئة التطورية.

المقدمة

علم البيئة الكيميائية وضعت من خلال التعاون من الكيميائيين وعلماء البيئة. في حين كان subdiscipline من الأرضية البيئة الكيميائية في جميع أنحاء لبعض الوقت، أن علم البيئة الكيميائية البحرية ليست سوى بضعة عقود القديمة ولكن قدمت معلومات هامة في البيئة والمجتمع هيكل التطوري للكائنات البحرية 1-8. الاستفادة من التكنولوجيات الناشئة من رياضة الغطس وNMR الطيفي، ولدت علماء الكيمياء العضوية بسرعة عدد كبير من المنشورات التي تصف نواتج جديدة من اللافقاريات والطحالب البحرية القاعية في 1970s و 1980s 9. على افتراض أن المركبات الثانوية يجب أن يخدم بعض الأغراض، وكثير من هذه المنشورات المنسوبة بيئيا الخصائص الهامة لمركبات جديدة دون أدلة تجريبية. وفي الوقت نفسه، تم أخذ علماء البيئة أيضا الاستفادة من ظهور الغوص ويصف التوزيعات وفرة من الحيوانات والنباتات القاعية التي كانت تعرف سابقا جيئة وذهابام طرق أخذ العينات غير فعالة نسبيا مثل التجريف. كان الافتراض من هؤلاء الباحثين أن أي شيء لاطئة وميسرة جسديا يجب الدفاع عنه كيميائيا لتجنب الاستهلاك بنسبة 10 الحيوانات المفترسة. في محاولة لإدخال التجريبية إلى ما كان العمل صفي خلاف ذلك على وفرة الأنواع، بدأت بعض علماء البيئة استقراء الدفاعات الكيميائية من المقايسات سمية 11. وشملت معظم فحوصات السمية تعرض الأسماك الكاملة أو الكائنات الأخرى لتعليق المائية من مقتطفات العضوية الخام من الأنسجة اللافقارية، مع قرار لاحق للتركيز كتل جافة مقتطفات مسؤولة عن قتل نصف الكائنات الحية الفحص. ومع ذلك، فحوصات السمية لا تحاكي الطريقة التي الحيوانات المفترسة المحتملة ترى فريسة تحت الظروف الطبيعية، وقد وجدت الدراسات اللاحقة عدم وجود علاقة بين سمية واستساغة 12-13. ومن المثير للدهشة أن المنشورات في المجلات المرموقة تستخدم تقنيات وجود ضئيلة أو معدومة ECOLOGICAلتر أهمية 14-15 وأن هذه الدراسات لا تزال استشهد على نطاق واسع اليوم. بل لعله أكثر إثارة للقلق أن نلاحظ أن استمرار الدراسات على أساس بيانات السمية التي ستنشر 16-18. تم تطوير طريقة الأحيائي الموصوفة هنا في أواخر 1980s لتوفير نهج ذات الصلة بيئيا لعلماء البيئة البحرية الكيميائية لتقييم الدفاعات الكيميائية antipredatory. يتطلب الأسلوب المفترس نموذج لعينة استخراج العضوية الخام من الكائن المستهدف عند تركيز الطبيعي في غذائيا مقارنة مصفوفة الأغذية وتوفير البيانات استساغة التي هي أكثر وضوحا من الناحية البيئية من بيانات السمية.

النهج العام لتقييم النشاط antipredatory من أنسجة الكائنات البحرية ويشمل أربعة معايير المهم: (1) يجب أن تستخدم وهو مفترس اختصاصي المناسب في المقايسات التغذية، (2) الأيض العضوية من جميع أقطاب يجب أن يكون استخراجه مستفيض من أنسجة استهداف الحي، (3) يجب على الأيض بالبريد مختلطة في الغذاء التجريبي المناسب من الناحية التغذوية في نفس التركيز الحجمي كما هو موجود في الكائن الحي من التي تم استخراجها، و (4) التصميم التجريبي والمنهج الإحصائي يجب أن توفر مغزى متري للإشارة distastefulness النسبي.

تم تصميم الإجراء المذكورة أدناه خصيصا لتقييم الدفاعات الكيميائية antipredatory في اللافقاريات البحرية في منطقة البحر الكاريبي. نحن توظيف اللبروس bluehead، Thalassoma bifasciatum، باعتباره الأسماك المفترسة نموذجية لهذا النوع شائع على الشعاب المرجانية في الكاريبي وكما هو معروف لتذوق تشكيلة واسعة من اللافقاريات القاعية 19. يتم استخراج الأنسجة من الكائنات المستهدفة أولا، ثم مجتمعة مع خليط الغذاء، وأخيرا عرضت مجموعة من T. bifasciatum لمراقبة ما إذا كانوا يرفضون الأطعمة المعالجة استخراج. وقد وفرت بيانات الفحص باستخدام هذه الطريقة معلومات هامة في الكيمياء دفاعي من الكائنات البحرية 12،20-21، لالتاريخ IFE المفاضلات 22-24، والبيئة المجتمعية 25-26.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ملاحظة: الخطوة 3 من هذا البروتوكول تتضمن موضوعات الحيوانات الفقارية. وقد تم تصميم هذا الإجراء بحيث تتلقى الحيوانات العلاج الأكثر إنسانية ممكن، وتمت الموافقة من قبل لجنة المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) في جامعة ولاية كارولينا الشمالية ويلمنجتون.

1) استخلاص الأنسجة

  1. استخدام النسيج الذي هو في حالته الطبيعية من الماء وليس ضغط، والمجففة التدريجي أو الرطب بشكل مفرط حيث سيؤدي ذلك إلى تغيير التركيز الحجمي من المركبات الثانوية. قطع أو ختم الأنسجة إلى قطع أو شرائح التي يمكن إدراجها في أنبوب الطرد المركزي 50 مل. ملاحظة: الأنسجة الطازجة يمكن استخدامها في بعض الحالات، ولكن من الأفضل في كثير من الأحيان إلى قطع أو ختم الأنسجة المجمدة، والتي لا تخضع لعصر عندما قطع.
  2. تضاف قطع الأنسجة إلى 30 مل من 1: 1 خليط من ثنائي كلورو ميثان (DCM) والميثانول (MeOH) في أنبوب الطرد المركزي تخرج حتى الحجم النهائي من 40 مل يتم التوصل إليه. يجب التأكد من إجراء جميع الخطوات التي تنطوي على نقلالمذيبات في غطاء الدخان مع التهوية الكافية.
  3. غطاء الأنبوب وعكس ذلك عدة مرات، ثم تستنهض الهمم مرارا وتكرارا خلال فترة استخراج 4 ساعة. ملاحظة: خلال هذه الفترة، ويجمع الماء مع MeOH وMeOH الناتجة: المرحلة الماء يفصل من مرحلة DCM. تتعرض الأنسجة بالتناوب لDCM وMeOH: الماء كما مستحلب كما يتم تحريكها الأنابيب.
  4. نقل استخراج DCM إلى دورق كروي وتتبخر إلى جفاف على المبخر الدوار باستخدام حرارة منخفضة (<40 ° C). باستخدام الحد الأدنى من المذيبات، ونقل استخراج المجففة إلى 20 مل التلألؤ القارورة. تناسب القارورة مع محول المبخر الدوار، ومرة ​​أخرى تتبخر للجفاف على المبخر الدوار باستخدام حرارة منخفضة (<40 ° C).
    ملاحظة: تتطلب الخطوة التالية استخدام أداة ضغط محلية الصنع التي يمكن تجميعها من قبل الشد العناصر التالية في ترتيب تسلسلي إلى نهاية قضيب الخيوط: (1) الجوز (2) غسالة، و (3) الجوز بلوط. يجب أن تكون إما مثقبة غسالة أوتركيبها بحيث يكون أقل من القطر الداخلي للأنبوب الطرد المركزي 50 مل.
  5. العودة إلى أنبوب الطرد المركزي تخرج يحتوي على الأنسجة وMeOH: استخراج المياه، والضغط المتوسط ​​استخراج من الأنسجة من خلال الضغط. نقل MeOH: استخراج المياه لنفس دورق كروي وتخزين مبردة (<10 ° C).
  6. إضافة MeOH إلى أنبوب الطرد المركزي تخرج حتى يتم المغمورة الأنسجة الآن المجففة لاستخراج الثاني من 2 إلى 6 مدة ساعة، ثم نقل MeOH جديد استخراج إلى دورق كروي المبردة التي تحتوي على MeOH: استخراج المياه. إذا كان هناك أي قلق من أن الأنسجة لم يتم استخراج تماما، كرر استخراج MeOH 2 إلى 6 ساعة.
  7. تجف قبالة MeOH على المبخر الدوار باستخدام الحرارة المنخفضة (<40 ° C). نقل المستخلص المائي المتبقية من دورق كروي إلى القارورة التلألؤ التي تحتوي على مستخلص قطبي المجففة، وذلك باستخدام حجم الأدنى من MeOH لشطف دورق كروي.
  8. Evaporate المستخلص المائي للجفاف باستخدام حرارة منخفضة (<40 ° C) على المكثف فراغ. يحتوي على قارورة التلألؤ الآن مجموع الجاف استخراج العضوية الخام من 10 مل من الأنسجة. إخلاء مساحة الرأس من القارورة مع N 2 الغاز لمنع أكسدة، وختم بإحكام، وتخزين تجميد (-20 ° C).

2) إعداد الطعام

  1. إعداد الحبار مسحوق عباءة تجميد المجفف.
    ملاحظة: توفر عباءة الحبار مصدر التغذية التي هي مماثلة لتلك التي من اللافقاريات القاعية أخرى، وسيتم استخدامها كعنصر في substeps 2.2.
    1. حلقات المجمدة ذوبان الجليد من عباءة الحبار في منزوع الأيونات الدافئة (DI) الماء، ثم هريس لهم في خلاط عالية السرعة.
    2. صب طبقة رقيقة من المهروس الحبار عباءة على ورقة الكعكة الضحلة وتجميد (-20 ° C)، ثم كسر ورقة من هريس الحبار المجمد الى قطع صغيرة ليتم مجفف بالتجميد.
    3. يجفد والمجمدة والحبار عباءة هريس بعد إجراءات التشغيل من الاب-eeze أكثر جفافا.
    4. يطحنون القطع مجفف بالتجميد من الحبار عباءة هريس في الخلاط عالية السرعة لتشكيل مسحوق.
    5. في غطاء الدخان، صب عباءة الحبار المجفف في الدقيق المغربل الدوارة وتدقيق لفصل أجزاء كبيرة من الأنسجة من مسحوق ناعم.
    6. نقل عباءة الحبار مسحوق غرامة لوعاء قابل للغلق. إخلاء الحاوية مساحة الرأس مع N 2 الغاز لمنع الأكسدة وتخزين مجمدة (-20 ° C).
  2. تحضير خليط المواد الغذائية.
    ملاحظة: عند تشغيل فحوصات متعددة متتالية، فمن العملي لإعداد ~ 100 مل من خليط الغذاء، ولكن هذه الوصفة قد يمكن تحجيمها إلى حجم أصغر إذا لزم الأمر.
    1. الجمع بين خليط من 3 غرام حمض الألجنيك و 5 ز تجميد المجفف مسحوق عباءة الحبار مع 100 مل من الماء DI في كوب 150 مل. يحرك بقوة مع microspatula لبضع دقائق حتى المسحوق هو رطب تماما ويصبح الخليط متجانسا.
      ملاحظة: إذا رغبت في ذلك، يمكن إضافة تلوين الطعام في هذه الحاديالجيش الشعبي: أنه من الأسهل لإضافة صبغة إلى خليط المواد الغذائية من شأنها أن تولد كل من الخلائط السيطرة المعالجة و(اخفاء الصباغ الطبيعي للاستخراج في استخراج معاملة خليط) بدلا من محاولة لتتناسب مع لون من استخراج معاملة الخليط بإضافة صبغ إلى خليط السيطرة. ومخضر أو ​​البني لون الطعام وغالبا ما يكون من المرغوب فيه لإخفاء أي أصباغ في استخراج النفط الخام.
    2. تحميل بالضبط 10 مل من خليط الغذاء إلى حقنة تخرج. الحرص على تجنب إدراج فقاعات الهواء أثناء هذه العملية.
    3. إزالة 20 مل قارورة التلألؤ مع الجاف استخراج العضوية الخام من الثلاجة. إضافة قطرة أو اثنتين من MeOH، ثم يقلب استخراج في خليط متجانس مع microspatula.
    4. إخراج تحميل حقنة 10 مل من مصفوفة الغذاء في التلألؤ قارورة 20 مل ويحرك مع microspatula لتجانس استخراج معاملة خليط الغذاء.
      ملاحظة: قد تساعد على إخراج الحقنة في دفعات صغيرة (أي إخراج 2 مل والتجانس، ثم ص.EPEAT حتى كل مل 10 تم المتجانس).
  3. إعداد الكريات الفحص.
    1. تحميل حجم صغير جدا من خليط استخراج (~ 1 مل) في حقنة، وغمر طرف الحقنة في حل من 0.25 M CaCl 2. إخراج محتويات حقنة لتشكيل طويلة، تشبه السباغيتي حبلا.
    2. بعد بضع دقائق، وإزالة حبلا صلابة، ختم عليها إلى 4 مم الكريات طويلة على لوحة قطع الزجاج بشفرة حلاقة، ثم يشطف في ماء البحر.
    3. كرر الخطوات من 2.3.1 و2.3.2 دون بما في ذلك استخراج النسيج لجعل الكريات السيطرة. تأكد لعلاج الكريات السيطرة مع حجم مماثل من المذيبات (انظر إضافة MeOH إلى الخليط المعالج في الخطوة 2.2.3) للسيطرة على إضافة مذيب. إذا كان المطلوب السيطرة السلبية للتأكد من أن الأسماك الفحص يمكن ردعها من التغذية، إضافة ديناتونيوم بنزوات بتركيز 2 ملغ مل -1 إلى خليط المواد الغذائية الخام 27.

3) استساغة الاكلاختبارات بيولوجية

  1. أداء المقايسات التغذية مع الصفراء مراحل اللبروس bluehead البرية اشتعلت، Thalassoma bifasciatum، وأبقى في مجموعات من ثلاثة في مقصورات مبهمة من جانب من أحواض المختبر.
  2. تقديم الغذاء الكريات من دورق مياه البحر باستخدام ماصة الزجاج مع لمبة المطاط. ملاحظة: قد يستغرق بضعة أيام لتدريب السمك للحصول على الغذاء في هذه الطريقة. والتحفيز تكييف (على سبيل المثال عدد قليل من الصنابير من ماصة على الزجاج حوض السمك) التي تسبق تسليم الأغذية قد تكون مفيدة لتدريب الأسماك أن نتوقع إضافة الكريات الغذاء.
  3. وسجل الكريات. النظر في قبول بيليه إذا استهلك بسهولة من قبل الأسماك. النظر في رفض بيليه إذا لم يؤكل بعد مدة لا تقل عن ثلاث محاولات الأسماك واحد أو أكثر من أخذه بعين تجويف الفم، أو إذا اقترب من بيليه وتجاهلها بعد واحدة من هذه المحاولة.
  4. عينات التهديف. ملاحظة: وصفت الإجراء فحص باعتباره المخطط الانسيابي في الشكل 1 مجموعة من الأسماك التي ترفض أكل.لا تعتبر الكريات السيطرة على أي خطوة في بروتوكول أبعد من ذلك. هناك نوعان من النتائج المحتملة لتشغيل واحد للمقايسة: العينة إما قبول أو رفض.
    1. تبدأ مع بيليه تحكم للتأكد من أن مجموعة من الأسماك التعاونية. تقدم بيليه المعالجة. إذا كان السمك تقبل بيليه المعالجة، يسجل العينة كما قبلت. إذا كان السمك ترفض بيليه المعالجة، وتقديم بيليه السيطرة لاحق لتحديد ما إذا كانت الأسماك قد توقفت التغذية. إذا كان السمك تقبل سيطرة بيليه لاحق، والنتيجة العينة مرفوضا.
  5. النسخ المتماثل. كرر الإجراء فحص مع عشر مجموعات مستقلة من الأسماك لكل استخراج.

4) تقييم أهمية

  1. تقييم أهمية الاختلافات في استهلاك السيطرة مقابل الكريات تعامل مع نسخة معدلة من اختبار فيشر الدقيق 26. تعديل الاختبار بحيث يتم إصلاح المجاميع الهامشية من أجل السيطرة وكريات تعامل، وعلاج لهم على حد سواء عينات عشوائية كما. ملاحظة: هذا يوفر ع = 0.057 عندما تؤكل 7 الكريات. وبالتالي، يعتبر أي استخراج رادع إذا تؤكل 6 أو أقل الكريات، وقبولا إذا تؤكل 7 أو أكثر الكريات.
  2. لمقارنة استساغة النسبي بين مجموعات من مقتطفات، حساب متوسط ​​عدد الكريات تؤكل داخل كل مجموعة. الحفاظ على عتبة 6 في الكريات ذلك تعتبر مجموعة من مقتطفات تكرار رادع إذا كان متوسط ​​عدد الكريات تؤكل + الخطأ المعياري (SE) ≤6. ملاحظة: في نتائج تمثيلية، تعيين مجموعة من الأنواع، لذلك تكرار مقتطفات تأتي من الأفراد متميزة ويمكن مقارنة استساغة النسبي بين الأنواع.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

نحن هنا تقرير نتائج هذا الأحيائي لستة أنواع من الإسفنج البحر الكاريبي المشتركة (الشكل 2). ونشرت هذه البيانات في البداية في عام 1995 من قبل بوليك وآخرون. 12 وتظهر قوة هذا النهج لدراسة الاختلافات في استراتيجيات الدفاع الكيميائية بين الأصناف التي تحدث المشترك. تم الإبلاغ عن النتائج بمثابة متوسط ​​عدد الكريات الطعام التي يتم تناولها + الخطأ المعياري (SE) لكل الأنواع. تقريبا كانت تؤكل لا الكريات في المقايسات مع مقتطفات العضوية الخام من clathrode...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الإجراء الموصوفة هنا يوفر بروتوكول مختبر بسيط نسبيا، ذات الصلة من الناحية البيئية لتقييم الدفاعات الكيميائية antipredatory في الكائنات البحرية. نحن هنا استعراض المعايير الهامة التي يتم توفيرها من قبل هذه المجموعة من الأساليب:

(1) المفترس المناسب. ويعمل هذا الاختبار تغذية اللبروس bluehead، Thalassoma bifasciatum، واحدة من الأسماك الأكثر وفرة على الشعاب المرجانية في جميع أنحاء منطقة البحر الكاريبي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.

شكر وتقدير

نشكر جيمس مايدا وآرون كوك على المساعدة في تصوير وتحرير هذا الفيديو. تم توفير التمويل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم (OCE-0550468 ، 1029515).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
ثنائي كلورو ميثانفيشر ScientificD37-20
ميثانولفيشر ScientificA41220
كلوريد الكالسيوم اللامائيفيشر ScientificC614-500
سائل نقل الحرارة Cryocoolفيشر Scientific20-548-146لمكثف الفراغ
حمض الألجنيك ملح الصوديوم عالي اللزوجةMP Biomedicalsحلقات عباءة الحبار 154723
N / AN / A يمكنشراؤها من محل البقالة
بنزوات الديناتونيومAldrichD5765
50 مل أنبوب الطرد المركزي المتدرجفيشر Scientific14-432-22
قارورة التلألؤ 20 ملفيشر ساينتفيك03-337-7
ماصات باستور يمكن التخلصمنها فيشر ساينتفيك13-678-20D
لمبات مطاطية لماصات باستورفيشر ساينتفيك03-448-24
لمبات حمراء لتوصيل الحبيباتفيشر ساينتفيك03-448-27
250 مل قارورة مستديرةالقاع فيشر Scientific10-067E
محول قارورة تلألو ل rotavapFisher ScientificK747130-1324
Weightboatsفيشر ساينتفيك02-202B
MicrospatulaFisher Scientific21-401-10
5 مل حقنة متدرجةفيشر ساينتفيك14-817-53
10 مل حقنة متدرجةفيشر ساينتفيك14-817-54
شفرة حلاقةفيشر ScientificS17302

المراجع

  1. Paul, V. J., ed, Ecological roles of marine natural products. , Comstock Publishing. Associates: Ithaca, N.Y. (1992).
  2. Pawlik, J. R. Marine invertebrate chemical defenses. Chemical Reviews. 93 (5), 1911(1993).
  3. Hay, M. E. Marine chemical ecology: what's known and what's next. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 44 (5), 476-476 (1996).
  4. McClintock, J. B., Baker, B. J. Marine Chemical Ecology. , CRC Press. Boca Raton, Fla. (2001).
  5. Amsler, C. D. Algal Chemical Ecology. , Springer. New York. (2008).
  6. Hay, M. E. Marine chemical ecology: Chemical signals and cues structure marine populations, communities, and ecosystems. Annual Review of Marine Science. 1, 193-212 (2009).
  7. Pawlik, J. R. The chemical ecology of sponges on Caribbean reefs: Natural products shape natural systems. BioScience. 61 (11), 888(2011).
  8. Pawlik, J. R. Antipredatory Defensive Roles of Natural Products from Marine Invertebrates. Handbook of Marine Natural Products. , 677-710 (2012).
  9. Pawlik, J. R., Amsler, C. D., Ritson-Williams, R., McClintock, J. B., Baker, B. J., Paul, V. J. Marine Chemical Ecology: A Science Born of Scuba. Research and Discoveries: The Revolution of Science through Scuba. 39, 53-69 (2013).
  10. Randall, J. E., Hartman, W. D. Sponge-feeding fishes of the West Indies. Marine Biology. 1, 216-225 (1968).
  11. Bakus, G. J., Green, G. Toxicity in sponges and holothurians — geographic pattern. Science. 185, 951-953 (1974).
  12. Pawlik, J. R., Chanas, B., Toonen, R. J., Fenical, W. Defenses of Caribbean sponges against predatory reef fish. 1. Chemical deterrency. Marine Ecology Progress Series. 127, 183-194 (1995).
  13. Schulte, B. A., Bakus, G. J. Predation deterrence in marine sponges — laboratory versus field studies. Bulletin of Marine Science. 50, 205-211 (1992).
  14. Jackson, J. B. C., Buss, L. Allelopathy and spatial competition among coral reef invertebrates. Proceedings of the National Academy of Sciences. 72, 5160-5163 (1975).
  15. Bakus, G. J. Chemical defense mechanisms on the great barrier reef. Australia. Science. 211, 497-499 (1981).
  16. Gemballa, S., Schermutzki, F. Cytotoxic haplosclerid sponges preferred: a field study on the diet of the dotted sea slug Peltodoris atromaculata (doridoidea: nudibranchia). Marine Biology. 144, 1213-1222 (2004).
  17. Voogd, N. J., Cleary, D. F. R. Relating species traits to environmental variables in Indonesian coral reef sponge assemblages. Marine and Freshwater Research. 58, 240-249 (2007).
  18. Mollo, E., et al. Factors promoting marine invasions: a chemolecological approach. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 4582-4586 (2008).
  19. Randall, J. E. Food habits of reef fishes of the West Indies. Studies in Tropical Oceanography. 5, 665-847 (1967).
  20. O'Neal, W., Pawlik, J. R. A reappraisal of the chemical and physical defenses of Caribbean gorgonian corals against predatory fishes. Marine Ecology Progress Series. 240, 117-126 (2002).
  21. Hines, D. E., Pawlik, J. R. Assessing the antipredatory defensive strategies of Caribbean non-scleractinian zoantharians (Cnidaria): is the sting the only thing. Marine Biology. 159 (2), 389-398 (2012).
  22. Walters, K. D., Pawlik, J. R. Is there a trade-off between wound-healing and chemical defenses among Caribbean reef sponges. Integrative and Comparative Biology. 45 (2), 352-358 (2005).
  23. Leong, W., Pawlik, J. R. Evidence of a resource trade-off between growth and chemical defenses among Caribbean coral reef sponges. Marine Ecology Progress Series. 406, 71-78 (2010).
  24. Leong, W., Pawlik, J. R. Comparison of reproductive patterns among 7 Caribbean sponge species does not reveal a resource trade-off with chemical defenses. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 401 (1-2), 80-84 (2011).
  25. Pawlik, J. R., Loh, T. -L., McMurray, S. E., Finelli, C. M. Sponge Communities on Caribbean Coral Reefs Are Structured by Factors That Are Top-Down, Not Bottom-Up. PLoS ONE. 8 (5), e62573(2013).
  26. Loh, T. -L., Pawlik, J. R. Chemical defenses and resource trade-offs structure sponge communities on Caribbean coral reefs. Proceedings of the National Academy of Science. 111, 4151-4156 (2014).
  27. Miller, A. M., Pawlik, J. R. Do coral reef fish learn to avoid unpalatable prey using visual cues. Animal Behaviour. 85, 339-347 (2013).
  28. Pawlik, J. R., Fenical, W. A re-evaluation of the ichthyodeterrent role of prostaglandins in the Caribbean gorgonian coral, Plexaura homomalla. Marine Ecology Progress Series. 52, 95-98 (1989).
  29. Fenical, W., Pawlik, J. R. Defensive properties of secondary metabolites from the Caribbean gorgonian coral Erythropodium caribaeorum. Marine Ecology Progress Series. 75, 1-8 (1991).
  30. Pawlik, J. R., Fenical, W. Chemical defense of Pterogorgia anceps, a Caribbean gorgonian coral. Marine Ecology Progress Series. 87, 183-188 (1992).
  31. Chanas, B., Pawlik, J. R. Does the skeleton of a sponge provide a defense against predatory reef fish. Oecologia. 107 (2), 225-231 (1996).
  32. Chanas, B., Pawlik, J. R., Lindel, T., Fenical, W. Chemical defense of the Caribbean sponge Agelas clathrodes (Schmidt). Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 208 (1-2), 185-196 (1997).
  33. Wilson, D. M., Puyana, M., Fenical, W., Pawlik, J. R. Chemical defense of the Caribbean reef sponge Axinella corrugata against predatory fishes. Journal of Chemical Ecology. 25 (12), 2811-2823 (1999).
  34. Chanas, B., Pawlik, J. R. Defenses of Caribbean sponges against predatory reef fish II. Spicules, tissue toughness, and nutritional quality. Marine Ecology Progress Series. 127 (1), 195-211 (1995).
  35. Albrizio, S., Ciminiello, P., Fattorusso, E., Magno, S., Pawlik, J. R. Amphitoxin, a new high molecular weight antifeedant pyridinium salt from the Caribbean sponge Amphimedon compressa. Journal of Natural Products. 58 (5), 647-652 (1995).
  36. Assmann, M., Lichte, E., Pawlik, J. R., Köck, M. Chemical defenses of the Caribbean sponges Agelas wiedenmayeri and Agelas conifera. Marine Ecology Progress Series. 207, 255-262 (2000).
  37. Kubanek, J., Fenical, W., Pawlik, J. R. New antifeedant triterpene glycosides from the Caribbean sponge Erylus Formosus. Natural Product Letters. 15 (4), 275-285 (2001).
  38. Pawlik, J. R., McFall, G., Zea, S. Does the odor from sponges of the genus Ircinia protect them from fish predators. Journal of Chemical Ecology. 28 (6), 1103-1115 (2002).
  39. Waddell, B., Pawlik, J. R. Defenses of Caribbean sponges against invertebrate predators. I. Assays with hermit crabs. Marine Ecology Progress Series. 195, 125-132 (2000).
  40. Waddell, B., Pawlik, J. R. Defense of Caribbean sponges against invertebrate predators. II. Assays with sea stars. Marine Ecology Progress Series. 195, 133-144 (2000).
  41. Burns, E., Ifrach, I., Carmeli, S., Pawlik, J. R., Ilan, M. Comparison of anti-predatory defenses of Red Sea and Caribbean sponges. I. Chemical defense. Marine Ecology Progress Series. 252, 105-114 (2003).
  42. Jones, A. C., Blum, J. E., Pawlik, J. R. Testing for defensive synergy in Caribbean sponges: Bad taste or glass spicules. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 322 (1), 67(2005).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الكيمياء البيئية البحريةالمقايسة الحيوية لتغذية الأسماكاستخلاص الأنسجةتحضير مصفوفة الغذاءسمكة Bluehead Thalassomaتكوين الكرياتتقييم الدفاع الكيميائيالتجزئة الموجهة بالمقايسة الحيوية
مختبر الأحيائي تغذية الأسماك لتقييم آخر Antipredatory من المركبات الثانوية من الأنسجة من الكائنات البحرية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.