مقالة منهجية

مجلس هول التعديل - قياس السلوك، الإدراك والتفاعل الاجتماعي في الفئران والجرذان

21.4K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/52529

⸱

أبريل 8, 2015

 ,  ,  , 
1Department of Animals in Science and Society, Utrecht University, 2Brain Center Rudolf Magnus

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول لوحة الثقب المعدلة ، وهي عبارة عن إعداد اختبار سلوكي يشتمل على خصائص الحقل المفتوح ولوحة الثقب التقليدية. يتيح هذا الإعداد التحليل التفاضلي للسلوك غير المشروط لثدييات المختبر الصغيرة بالإضافة إلى تحليل القدرات المعرفية.

الملخص

يصف هذا البروتوكول ثقب مجلس المعدلة (MHB)، الذي يجمع بين ميزات من لوحة حفرة التقليدية وحقل مفتوح ويهدف إلى قياس أبعاد متعددة من السلوك غير المشروط في الثدييات الصغيرة مختبر (على سبيل المثال، الفئران والجرذان، الزبابة شجرة وقرود صغيرة). هذا النموذج هو بديلا قيما لاستخدام بطارية اختبار السلوكية، لأن الطيف السلوكي واسعة من البيانات الشخصية السلوكي الحيوان يمكن أن يتم التحقيق في اختبار واحد واحد.

ويتكون الجهاز من مربع، وتمثل منطقة "محمية"، وفصلها عن حجرة المجموعة. لوحة، والتي هي متداخلة اسطوانات صغيرة في ثلاثة خطوط، يتم وضعها في وسط مربع، وتمثل منطقة "غير المحمية" من مجموعة المتابعة. على القدرات المعرفية للحيوانات يمكن أن يقاس الاصطياد بعض اسطوانات على متن وقياس الذاكرة العاملة والمرجعية. السلوك دون شروط أخرى، مثل النشاط.ص related-، للقلق related- والسلوك الاجتماعي، ويمكن ملاحظة باستخدام هذا النموذج. المرونة السلوكية والقدرة على روض إلى بيئة جديدة يمكن بالإضافة إلى ذلك يمكن ملاحظتها من خلال إخضاع الحيوانات لتجارب متعددة في MHB، وكشف عن نظرة ثاقبة قدرات التكيف الحيوانات.

نظرا لاختبار آثار النظام في بطارية اختبار السلوكية، وينبغي أن تستخدم الحيوانات ساذجة لكل تجربة فردية. عن طريق اختبار أبعاد سلوكية متعددة في نموذج واحد، وبالتالي الالتفاف على هذه المشكلة، يتم تقليل عدد الحيوانات التجريبية المستخدمة. وعلاوة على ذلك، عن طريق تجنب العزلة الاجتماعية أثناء الاختبار ودون الحاجة إلى الغذاء حرمان الحيوانات، وMHB يمثل نظام اختبار السلوكي، حمل إن وجدت، كمية قليلة جدا من الإجهاد.

المقدمة

يتم استخدام حفرة مجلس المعدلة (MHB) لتقييم أبعاد متعددة من السلوك غير المشروط، وذلك أساسا في الفئران والجرذان 1. وهناك عدد من الاختبارات المستخدمة على نطاق واسع قياس معلمة السلوكية واحدة التي لا تغطي تماما النمط الظاهري بأكمله من البعد السلوكي. وقد تم تطوير MHB على أساس مفهوم أن القوارض يمكن أن تظهر ذخيرة السلوكي الغني فقط في بيئة اختبار الغنية 2، وبالتالي يسمح لملاحظات علم السلوك المعقدة.

ويضم مجموعة المتابعة خصائص لوحة حفرة التقليدي واختبار حقل مفتوح، مما أدى إلى نموذج معقد واحد الذي يتغلب على عيوب بطارية اختبار (أي في خفض عدد الحيوانات المستخدمة 1،3،4، التحايل على التأثيرات المحتملة لاختبار النظام 5، وتقليل الوقت اللازم تأثير وتكاليف 6). وعلى النقيض من معظم التجارب السلوكية (على سبيل المثال، Hånell وMarklund، 2014) 7 </ سوب>، ميزة من MHB هي أن الحيوانات لا تحتاج إلى أن تكون المواد الغذائية حرمت من أجل زيادة الدافع لحل المهمة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن التحايل العزلة الاجتماعية أثناء الاختبار عن طريق وضع زملائه في مجموعة من حيوانات التجارب في (group-) حجرة منفصلة عن اختبار مقصورة من قبل قسم مثقبة شفافة، مما يسمح للالبصرية والسمعية والشمية اتصال 8،9.

وMHB تم (دواء) التحقق من صحة لكل من الفئران والجرذان 1،6. وهناك مجموعة واسعة من السلوكيات يمكن قياسها، مثل سلوك التهرب، وتقييم المخاطر، والإثارة، والتنقيب، والنشاط الحركي، التعود، تقارب الاجتماعي والإدراك 2،8-10. بالإضافة إلى ذلك، MHB يمكن الجمع مع اختبار تثبيط الاستهلاك الغذائي، فضلا عن وجوه الرواية اختبار الاعتراف 10،11. وأخيرا، يمكن للMHB أيضا أن تستخدم لإجراء تجارب الإجهاد الاجتماعية عن طريق اختبار الحيوانات هزم اجتماعيا في حين وضع الفرد المهيمن فيمقصورة مجموعة 12،13. وهذا البروتوكول بالنسبة للفئران والجرذان إعطاء لمحة عامة عن تطبيقات متعددة من MHB.

البروتوكول

ملاحظة: تمت الموافقة على التجارب من قبل لجنة تجارب على الحيوانات من المركز الطبي لجامعة أوتريخت وجامعة أوترخت، هولندا. وعلاوة على ذلك، اتبعت التجارب على الحيوانات مبادئ مختبر رعاية الحيوان، وتشير إلى المبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الثدييات في علم الأعصاب والبحوث السلوكية. 25

1. التجريبية مجموعة المتابعة

ملاحظة: يتكون الجهاز MHB القياسية من مربع رمادي PVC التجريبي (100 × 50 × 50 سم) فصل من حجرة إضافية (50 × 50 × 50 سم) فيه الاصحاب مجموعة من حيوانات التجارب يمكن وضعها خلال فترة الاختبار قبل شفافة والتقسيم مثقب 1. إذا كان وجود زملائه في المجموعة هو غير مرغوب فيه أو إذا كان يتم اختبار الحيوانات يضم بشكل فردي، محل التقسيم شفافة من قبل قسم مصنوعة من PVC رمادي (الشكل 1؛ وانظر أيضا OHL وآخرون (2001) 1). وMHB (وايقياسات مختلفة عشر) المستخدمة في الاختبار المعرفي يوصف في المادة 5 من البروتوكول.

  1. وضع لوحة (60 × 20 × 0.5 سم، مصنوعة من PVC رمادي) في منتصف منطقة الجزاء.
    ملاحظة: يمكن أن يحتوي متن 20 اسطوانات (ᴓ 1.5 سم) 14 متداخلة في سطرين أو 23 اسطوانات (ᴓ 3 سم) 8 مراحل في ثلاثة خطوط.
  2. تقسيم المنطقة المحيطة المجلس عن طريق خطوط سوداء في 10 المستطيلات (20 × 15 سم) و 2 المربعات (20 × 20 سم).
  3. ضع في ضوء المرحلة فوق لوحة لخلق تناقض أكبر في شدة الضوء بين المجلس (الذي يمثل منطقة غير محمية مقارنة مع مركز حقل مفتوح أو مقصورة الخفيفة لاختبار الانتقال الخفيف الظلام) ومربع (منطقة المحمية) من أجل زيادة الطابع مكره من 4،8 متنها.
  4. بيت الحيوانات تحت 12 ساعة عكس دورة الليل والنهار (على سبيل المثال، الأنوار عند الساعة 7:00 صباحا وأضواء على الساعة 7:00 بعد الظهر).
    ملاحظة: ومع ذلك، يمكن للMHB أيضاأن تستخدم بموجب الجدول الزمني ضوء التقليدية (انظر المناقشة على أوجه القصور المحتملة) 1،6.
  5. أداء اختبار السلوكية في المرحلة الأكثر نشاطا من الحيوانات (على سبيل المثال، 10:00 حتي 14:00) 4،15.
  6. الحفاظ على فترة التعود من 2 أسابيع بعد وصول الحيوانات في المرافق. وخلال هذه الفترة يكون نفس الشخص أداء التجربة السلوكية التعامل مع الحيوانات أربع مرات في الأسبوع، وتشمل جميع إجراءات التعامل مع التي يتعين القيام بها خلال الاختبار الفعلي. التعامل مع الحيوانات بشكل حصري خلال ذلك الوقت من اليوم الذي سوف يتعرض الحيوانات لاختبار في وقت لاحق.
  7. تسجيل التجارب لتخزين البيانات على الفيديو وسعيا لتحسين النتائج والحد من التقلبات مراقب أمور، وممارسة التسجيل السلوكي باستخدام تسجيل الفيديو من التجارب السابقة 2. تأكد لتوحيد جميع الإجراءات والإجراءات التي تنفذها المراقب.

2. بهاءvioral اختبار - دون وجود الأصحاب المجموعة

  1. أداء الاختبار السلوكي في غرفة إيواء الحيوانات بانتظام في (لتجنب الآثار المحتملة للنقل إلى موقع الاختبار) وتركيب جميع معدات الاختبار قبل وصول الحيوانات في المرافق (لروض الحيوانات إلى وجود المعدات).
  2. التقاط الحيوان من قاعدة الذيل من القفص وطنه ووضعه مباشرة في MHB.
  3. وضع كل الحيوانات في الجهاز في نفس الزاوية التي تواجه الجدار (كما هو مبين في الشكل 1).
  4. السماح للحيوان لاستكشاف بحرية MHB لفترة من الزمن (غالبا 5 دقائق 1،6،16-18).
  5. هل لديك خبرة مراقب يسجل يعيش المعلمات السلوكية باستخدام برنامج التهديف السلوكي. استخدام المعلمات المدرجة في الجدول 1.
    ملاحظة: بعض المعايير السلوكية (على سبيل المثال، motor- والسلوك الاستكشافي) قد سجل تلقائيا كما على سبيل المثال، مناقشتها من قبل هنري وآخرون (2010) 19 بعد التعديل اللازم من MHB.
  6. تنظيف الجهاز مع ماء الصنبور ومنشفة ورقية بعد كل محاكمة من أجل تجنب وجود تحيز على أساس العظة الشمية.
    ملاحظة: آثار اختبار النظام المحتملة عند اختبار الحيوانات يضم اجتماعيا يجب أن يوضع في الاعتبار 17،20.

3. السلوكية اختبار - في وجود مجموعة الأصحاب

  1. في حالة السكن مجموعة، وقياس التفاعل مع حيوانات التجارب والاصحاب قفصه أثناء الاختبار.
    1. وضع زملائه في الفريق في المقصورة المجموعة قبل اختبار حيوانات التجارب للسماح التعود (أساسا 10-30 دقيقة 1،12).
      ملاحظة: اختبار في ظل ظروف من التوتر الاجتماعي من الممكن عن طريق وضع مهيمن قفص زميله في المقصورة مجموعة عند اختبار فردي 13 هزم اجتماعيا.
    2. وضع الحيوان التجريبية في اختبار المقصورة والسماح لها لتحريرلاي استكشاف MHB كما هو موضح في القسم 2.
      ملاحظة: آثار اختبار النظام المحتملة عند اختبار الحيوانات يضم اجتماعيا يجب أن يوضع في الاعتبار 17،20.
    3. هل لديك خبرة مراقب يسجل يعيش المعلمات السلوكية باستخدام برنامج التهديف السلوكي. استخدام المعلمات المدرجة في الجدول 1.
    4. تنظيف الجهاز مع ماء الصنبور ومنشفة ورقية بعد كل محاكمة من أجل تجنب وجود تحيز على أساس العظة الشمية.

4. كائن رواية الاعتراف والغذاء كمية تثبيط

  1. تعريف الحيوانات مع كائن (على سبيل المثال النرد أو الغذاء بيليه) في قفص وطنهم قبل 2 أيام التجربة.
  2. وضع الكائن اطلع في جهاز 2 سم وبصرف النظر عن وجوه رواية (على سبيل المثال الترباس أو الطعام غير مألوف) في الزاوية عبر من نقطة البداية.
  3. قياس الوقت الذي يستغرقه الحيوان من الاقتراب من رواية ودراية وجوه / الغذاء. استخدام المعلمات في <قوي> الجدول 1.
  4. تنظيف الجهاز مع ماء الصنبور ومنشفة ورقية بعد كل محاكمة من أجل تجنب وجود تحيز على أساس العظة الشمية.

5. اختبار المعرفي

  1. وضع لوحة أصغر (35 × 22 × 1 سم) مع 10 اسطوانات في وسط مربع (الشكل 1) لاختبار الفئران 3،22. خفض صندوق في حجم 50 × 50 سم الفئران لاختبار 21 عن طريق إدراج قسم مصنوعة من PVC رمادي.
  2. رائحة جميع الاسطوانات مع تنجذب من الحيوانات نكهة ل(على سبيل المثال، الفانيليا) والطعم مع كل مكافأة (على سبيل المثال، وقطعة من اللوز، ومكافأة مستساغة للغاية بالنسبة للفئران والجرذان) تحت الشبكة بحيث الحيوانات لا يمكن حذفها.
  3. اسطوانات جديلة (غالبا ثلاثة) مع عصابة الملونة (المتناقضة مع PVC الرمادي) وبيت لهم مكافأة القابلة للإزالة (على سبيل المثال، 0.05 غ قطعة من اللوز).
  4. تعريف الحيوانات مع مكافأة يوميا في أيام 2 قبل التجربة فيقفص وطنهم من خلال تقديم ذلك مع ملاقط والتأكد من أن الحيوانات أكله.
  5. هل لديك خبرة مراقب يسجل يعيش المعلمات السلوكية باستخدام برنامج التهديف السلوكي. قياس المعلمات المدرجة في الجدول رقم 2 بالإضافة إلى المعايير السلوكية المذكورة في قسم 2 (الجدول 1) باستثناء المعلمات المتعلقة التعرف على الأشياء أو تناول الطعام كبت.
  6. يتم التوصل مع كل حيوان، نفذ أربع محاكمات يوميا مع فاصل زمني بين المحاكمة المستمر (على سبيل المثال، 30-60 دقيقة) حتى وقت ثابت لإنهاء محاكمة (أي، عندما تم جمع جميع القطع اللوز ثلاثة): المرحلة 1.
  7. المرحلة 2: جديلة والطعم ثلاث اسطوانات مختلفة وتضع الحيوانات في الإعداد لأربع تجارب لاختبار القدرة على التعلم انعكاس.
  8. تنظيف الجهاز مع ماء الصنبور ومنشفة ورقية بعد كل محاكمة من أجل تجنب وجود تحيز على أساس العظة الشمية.

النتائج

كمية كبيرة من المعلمات التي يمكن قياسها في MHB جعل هذا الإعداد مناسبة خاصة لقياس العديد من الأبعاد السلوكية. ومن الأمثلة على ذلك تحديد التكيف السلوكي في بيئة جديدة من خلال التعرض المتكرر للاختبار. . Salomons وآخرون (2010) درس التعود من سلالتين من الفئران الفطرية (BALB / CJ و129P3 / J) إلى MHB تحت شرطين الضوء المختلفة (الضوء الأحمر: على النقيض مربع والمجلس بين: 45 لوكس مقابل الضوء الأبيض: على النقيض مربع والمجلس بين: 115 لوكس (انظر أيضا القسم بروتوكول 1.3)) 4. تظهر الفئران BALC / CJ على خفض (التعود) الكمون حتى دخول أول مجلس إدارة (انظر الجدول 1) في ظل ظروف الإضاءة الحمراء كما هو مبين في الشكل 2A. متضارب، تظهر الفئران 129P3 / J أي علامة على التعود على المحاكمات. ويبين الشكل 2B التجربة في ظل ظروف الإضاءة البيضاء. تظهر الفئران BALB / CJ مرة أخرى الكمون تناقص إلى دخول أول مجلس على محاكمات ولو أن لعرض nimals نمط التعود أبطأ بالمقارنة مع حالة الضوء الأحمر. الفئران 129P3 / J ليس فقط تظهر مرة أخرى تضعف التعود، ولكن أيضا الاتجاه نحو توعية تحت شرط الضوء الأبيض. وبالمثل، في دراسة أجرتها Salomons (2012) 129P2 / OlaHsd الفئران أظهر مرونة السلوكية ضعف في استجابة الجدة لمقارنة BALB / cOlaHsd الفئران 23. الفرق في القدرة التعود وهكذا يصبح واضحا بين سلالتين من الفئران الفطرية عند اختباره في MHB 4.

النسخة المعرفي من MHB يمكن على سبيل المثال أن تستخدم لقياس إدراكيا في الفئران. فان دير Kooij وآخرون. (2010) استخدم هذا الإعداد لقياس الأداء المعرفي للC57BL / 6J الفئران معتدلا مع الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية (45 دقيقة من نقص الأكسجة، مرحبا-45)، مرحبا شديد (75 دقيقة من نقص الأكسجة، مرحبا-75) وsham- السيطرة على الفئران 9. القدرة على استكمال المحاكمات (أي، والعثور على ثقوب الطعم داخل 5 دقائق) هو مبين في الشكل 3A. عدد من الأخطاء الذاكرة على المدى القصير (يعيد النظر الى حفرة اصطاد)، والأخطاء الذاكرة طويلة المدى (مرة الى حفرة غير اصطاد) وأخطاء السهو (لا زيارة الى حفرة اصطاد) وترد في الشكل 3B-D على التوالى.

من أجل التأكد من أن المجموعة مرحبا-45 ليس لديها ضعف الادراك، تم اختبار هذه المجموعة ضد ضوابط صورية في مهمة انعكاس. تم تعيين الثقوب الطعم ثلاث إلى ثلاث اسطوانات مختلفة وتم اختبار الحيوانات لمدة 4 المحاكمات. يصبح تأثير انعكاس واضح عند مقارنة المحاكمة الأخيرة من المرحلة الأولى مع المحاكمة الأولى للمرحلة الانعكاس. المدة إلى استكمال المحاكمات انعكاس أربعة يعطي مؤشرا على الأداء العام. ويبين الشكل 4 الكمون لاستكمال محاكمة لكلا الفريقين وتأثير العلاج الشامل واضحا هو واضح. وهذا يعني أنه في مهمة انعكاس هناك في الواقع وجود ضعف في المرونة الإدراكية (إعادة التعلم) في المجموعة مرحبا-45 التي تكون جاء كشفها باستخدام MHB 9.

figure-results-1
الشكل 1. نظرة عامة تخطيطي للمجلس حفرة المعدلة. (A) ومجموعة المتابعة يتكون من حجرة الاختبار (مربع) مع في منتصف أشار (وقاية) المجلس مع خطوط متعرجة ومقصورة المجموعة. figure-results-2 = الكائن الرواية، figure-results-3 = وجوه مألوفة، figure-results-4 = نقطة البداية. (B) نظرة عامة تخطيطي للنسخة المعرفي في مجلس حفرة المعدلة للفئران. (C) عرض الجانبية للاسطوانة كما هو مستخدم في النسخة المعرفي في مجلس حفرة المعدلة. يتم وضع قطعة من اللوز تحت شبكة من جميع الاسطوانات.الهدف = "_ فارغة"> الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-5
الشكل 2. الضوء الأحمر أو ظروف الإضاءة البيضاء. (A) الكمون حتى بدء أول مجلس إدارة (يعني + SEM) من BALB / CJ والفئران 123P3 / J تقاس في ظل ظروف الإضاءة الحمراء (مربع 0-5 لوكس والمجلس 45 لوكس). وكشفت التدابير ANOVA المتكررة مع تعديل هوين-فلت سلالة (P = 0.025)، والمحاكمة (P <0.001) ومحاكمة س سلالة التفاعل (P <0.001) المشاركة خاصة يحلل: بين سلالات: * = P <0.0026، بين تجربتين متتاليتين: $ = P <0.0026 (BALB / CJ) (B) والكمون من دخول المجلس الأول (يعني + SEM) في ظل ظروف الإضاءة البيضاء (المربع 0-5 لوكس والمجلس 120 لوكس). وكشفت التدابير ANOVA المتكررة مع تعديل هوين-فلت سلالة (P = 0.031)، والمحاكمة (P <0.001) ومحاكمة التفاعل س سلالة (P <0.001) EFFE. ط م اللاحق يحلل: بين سلالات: * = P <0.0026، بين تجربتين متتاليتين: $ = P <0.0026 (BALB / CJ) وT = P <0.0026 (123P3 / J). لقد تم تعديل هذا الرقم من Salomons وآخرون. 2010 4 و. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-6
الشكل 3. اختبار المعرفي في MHB (المرحلة 1). وتشير جميع الأرقام متوسط ​​+ SEM. (A) والكمون لاستكمال محاكمة (ثانية) من الفئران للسيطرة على الشام، مرحبا-45 ومرحبا-75. (B) عدد من الأخطاء إغفال، مرة حفرة (C) غير الطعم و(D) يعيد النظر عن الثقوب اصطاد. * = P <0.05، ** = P <0.01، *** = P <0.001 صورية مقابل مرحبا-75، # = P <0.05، ## = P <0.01، ### = P <0.001مرحبا-45 مقابل مرحبا-75. تم تعديل هذا الرقم من فان دير Kooij وآخرون 2010 9 و. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-7
الشكل 4. عكس التعلم مهمة (المرحلة 2). الإختفاء لاستكمال محاكمة (ثانية) في مهمة انعكاس التعلم (يعني + SEM). آثار المحاكمة: # = P <0.05، ## = P <0.01 (أول مهمة انعكاس محاكمة مقابل المحاكمة السابقة). تأثير العلاج: * = P <0.05، ** = P <0.01 (مرحبا-45 مقابل الشام). تم تعديل هذا الرقم من فان دير Kooij وآخرون 2010 9 و.

نظام نشاط المعلمة قياس
آفوأرقص دخول المجلس التردد، الكمون (ق)، ومدة (٪) ومتوسط ​​مدة (ق) على لوحة
تقييم المخاطر يحضر امتدت التردد والكمون (ق) من المواقف الجسم امتدت (بما في ذلك أطرافه الخلفية)
يقظة الاستمالة التردد، الكمون (ق)، ومدة (٪) ومتوسط ​​مدة (ق) الاستمالة الذاتي
تغوط التردد والكمون (ق) من إنتاج بولي
تبول التردد والكمون (ق) من urinations
استكشاف موجهة مرة حفرة التردد والكمون (ق) من اسطوانة مرة
استكشاف الكائن رواية التردد، الكمون (ق)، ومدة (٪) ومتوسط ​​مدة (ق) استكشاف الكائن رواية
استكشاف صليات مربع تربية < / td> التردد والكمون (ق) من rearings في مربع (الجبهة الكفوف لا لمس الجدار)
تربية متنها التردد والكمون (ق) من rearings على متن
استكشاف حفرة التردد والكمون (ق) من الاستكشافات اسطوانة
ذاكرة استكشاف شيء مألوف التردد، الكمون (ق)، ومدة (٪) ومتوسط ​​مدة (ق) استكشاف شيء مألوف
تقارب الاجتماعي تفاعل المجموعة التردد، الكمون (ق)، ومدة (٪) ومتوسط ​​مدة (ق) التفاعل مع مقصورة مجموعة
النشاط الحركي عبور خط التردد والكمون (ق) من المعابر خط

الجدول 1: قائمة المعايير السلوكية

نظام الذاكرة عامل متغير في التجربة وصف
الذاكرة على المدى الطويل خيار خاطئ زيارة إلى اسطوانة غير الطعم. الأنف تحت الحافة
الخطأ إغفال إغفال اسطوانة اصطاد لا زيارة لاسطوانة اصطاد
الذاكرة على المدى القصير اختيار المتكررة إعادة النظر في اسطوانة اصطاد. الأنف تحت الحافة
الأداء العام إجمالي وقت المحاكمة الوقت حتى يتم زار جميع الاسطوانات اصطاد
جي = "0">

الجدول 2: قائمة من المعلمات المعرفية

المناقشة

نموذج MHB يمكن استخدامها لقياس أبعاد متعددة من السلوك غير المشروط. بروتوكول يمكن تغييرها قليلا اعتمادا على الغرض من التجربة. في هذا البروتوكول نناقش الإعدادات، مرات والقياسات المستخدمة عادة في مختبرنا. ومع ذلك، فقد تم استخدام انحرافات بسيطة لقياسات الجهاز في الماضي، وأيضا على كمية من اسطوانات على متنها قد تختلف 3. في كثير من الأحيان دراسات توظف وقت الاختبار من 5 دقائق لكل محاكمة، ولكن يمكن أيضا أن تكون مرات أخرى اختبار المناسب، أي إنهاء اختبار في أقرب وقت كما تم الانتهاء من محاكمة المعرفية بنجاح أو في توسيع وقت الاختبار إذا الحيوانات هي حريصة للغاية أو ضعف جسديا. وقد تم اختيار الوقت من اليوم من الاختبار لتكون تحت شرط الضوء الأحمر منذ القوارض هي حيوانات ليلية وهي الأكثر نشاطا في المرحلة الأولى المظلمة. Roedel وآخرون (2006) تظهر تأثيرات الضوء أو اختبار مرحلة مظلمة على الأداء السلوكي المعرفي وفي الفئران DBA في MHB 16. وقد أجريت دراسات أخرى التجارب MHB في ظل ظروف الإضاءة البيضاء 1،6، ومع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن اختبار في ظل ظروف الضوء الأبيض يمكن أن تحدث تثبيط السلوكي والاضطراب المعرفي (كما هو موضح في DBA الفئران) 16.

الجدولين 1 و 2 تحتوي على كمية كبيرة من المعايير السلوكية للقياس. خلال تحليل البيانات وهذا يمكن أن يؤدي إلى بعض المعلمات يشير إلى وجود زيادة كبيرة في سبيل المثال "الكمون لوحة الإدخال الأول، ولكن ليس في غيرها من المعالم من نفس نظام تحفيزي (في هذه الحالة 'تجنب'). في بعض الحالات وهذا قد يؤدي إلى نتائج غير حاسمة. قدم GUILLOUX وآخرون (2011) متكاملة السلوكية ض عشرات إلى phenotyping السلوكية في الفئران 24. مع استخدام متكاملة السلوكية ض عشرات المعلمات متعددة يمكن الجمع بين واحد ض درجة تصف motivatio معيننظام نال. يمكن لللاحقة ض عشرات بدورها أن يكون أكثر سهولة مقارنة عبر الاختبارات السلوكية والتجارب.

وإلى جانب الميزات الموضحة لهذا النموذج، أصبح استخدام أكثر عمقا واضحا في دراسة Salomons وآخرون (2012). وبالمقارنة مع التعود على الجدة من سلالتين الماوس (BALC / CJ و129P3 / J) في MHB، واظهار الفرق في المرونة السلوكية مما يدل على الشخصية السلوكية غير التكيفية من الفئران 129P3 / J 4، النسخ المتطابق ضعف القدرات على التكيف وربما حتى القلق المرضي.

الختامية، وMHB يسمح قياس الأبعاد السلوكية متعددة في تجربة واحدة. من خلال الجمع بين ميزات من لوحة التقليدي حفرة واختبار حقل مفتوح، والسلوك غير المشروط، والتفاعل الاجتماعي، والإدراك والقدرات التكيفية، أي يمكن التحقيق الرعاية الاجتماعية. يمكن استخدام هذا الاختبار يمكن على سبيل المثال لتقييم التغيرات السلوكية الناجمة عن pharmacological- و / أوالتلاعب الجيني، التربية الانتقائية والقدرات التكيفية. وبالمقارنة مع بطاريات اختبار الكلاسيكية، يتم تقليل عدد الحيوانات الواضح ان هناك حاجة والتوتر التي يعيشها الحيوانات خلال اختبار منخفضة للغاية.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

يود المؤلفون الاعتراف بعمل Annemarie Baars و José Lozeman-van 't Klooster في أداء التجارب ومساعدتها وتدريسها باستخدام إعداد mHB.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
mHB المعرفيصندوق الاختبار المعرفي 50 × 50 سم عن طريق إدخال قسم مصنوع من PVC الرمادي في mHB القياسي. يتم وضع لوح أصغر (35 × 22 × 1 سم) مع 10 أسطوانات في منتصف الصندوق. جميع الأسطوانات معطرة بنكهة تنجذب إليها (مثل الفانيليا) ويتم اصطيادها جميعا بمكافأة (مثل قطعة من اللوز) تحت شبكة حتى لا تتمكن من إزالتها. الأسطوانات (غالبا ثلاثة) مزودة بحلقة ملونة (تتناقض مع PVC الرمادي) ويتم تطهيرها بمكافأة قابلة للإزالة (على سبيل المثال 0.05 جرام قطعة من اللوز). 
الفانيليانكهة الفانيليا المذابة في الماء (0.02٪)
كاميراالكاميرا التي تولد مخرجات عالية الجودة لإعادة تسجيل السلوك من الفيديو.
ضوءضوء theather يسمح بضبط شدة الضوء وأبعاد السطح المضاء.
التسجيل السلوكيبرنامج التسجيل السلوكي.
جهاز نكهة المسرح برنامج

المراجع

  1. Ohl, F., Holsboer, F., Landgraf, R. The modified hole board as a differential screen for behavior in rodents. Behav. Res. Methods Instrum. Comput. 33 (3), 392-397 (2001).
  2. Ohl, F. Anxiety and Anxiolytic Drugs. Holsboer, F., Ströhle, A. 169, Springer. 35-69 (2005).
  3. Staay, F. J., Gieling, E. T., Pinzon, N. E., Nordquist, R. E., Ohl, F. The appetitively motivated 'cognitive' holeboard: A family of complex spatial discrimination tasks for assessing learning and memory. Neurosci. Biobehav. Rev. 36 (1), 379-403 (2012).
  4. Salomons, A. R., van Luijk, J. A., Reinders, N. R., Kirchhoff, S., Arndt, S. S., Ohl, F. Identifying emotional adaptation: Behavioural habituation to novelty and immediate early gene expression in two inbred mouse strains. Genes Brain Behav. 9 (1), 1-10 (2010).
  5. McIlwain, K. L., Merriweather, M. Y., Yuva-Paylor, L. A., Paylor, R. The use of behavioral test batteries: Effects of training history. Physiol. Behav. 73 (5), 705-717 (2001).
  6. Ohl, F., Sillaber, I., Binder, E., Keck, M. E., Holsboer, F. Differential analysis of behavior and diazepam-induced alterations in C57BL/6N and BALB/c mice using the modified hole board test. J. Psychiatr. Res. 35 (3), 147-154 (2001).
  7. Hanell, A., Marklund, N. Structured evaluation of rodent behavioral tests used in drug discovery research. Front Behav Neurosci. 8 (252), (2014).
  8. Laarakker, M. C., van Lith, H. A., Ohl, F. Behavioral characterization of A/J and C57BL/6J mice using a multidimensional test: Association between blood plasma and brain magnesium-ion concentration with anxiety. Physiol. Behav. 102 (2), 205-219 (2011).
  9. Kooij, M. A., Ohl, F., Arndt, S. S., Kavelaars, A., van Bel, F., Heijnen, C. J. Mild neonatal hypoxia-ischemia induces long-term motor- and cognitive impairments in mice. Brain. Behav. Immun. 24 (5), 850-856 (2010).
  10. Boleij, H., Salomons, A. R., van Sprundel, M., Arndt, S. S., Ohl, F. Not all mice are equal: Welfare implications of behavioural habituation profiles in four 129 mouse substrains. PLoS One. 7 (8), e42544(2012).
  11. Enard, W., et al. A humanized version of Foxp2 affects cortico-basal ganglia circuits in mice. Cell. 137 (5), 961-971 (2009).
  12. Bartolomucci, A., Fuchs, E., Koolhaas, J. M., Ohl, F. Acute and chronic social defeat: Stress protocols and behavioral testing. Mood and anxiety related phenotypes in mice. Gould, T. D. 42, Humana Press. 261-275 (2010).
  13. Erhardt, A., et al. Consequences of chronic social stress on behaviour and vasopressin gene expression in the PVN of DBA/2OlaHsd mice-influence of treatment with the CRHR1-antagonist R121919/NBI 30775. J. Psychopharmacol. 23 (1), 31-39 (2009).
  14. Salomons, A. R., Kortleve, T., Reinders, N. R., Kirchhoff, S., Arndt, S. S., Ohl, F. Susceptibility of a potential animal model for pathological anxiety to chronic mild stress. Behav. Brain Res. 209 (2), 241-248 (2010).
  15. Kooij, M. A., et al. NF-κB inhibition after neonatal cerebral hypoxia–ischemia improves long-term motor and cognitive outcome in rats. Neurobiol. Dis. 38 (2), 266-272 (2010).
  16. Roedel, A., Storch, C., Holsboer, F., Ohl, F. Effects of light or dark phase testing on behavioural and cognitive performance in DBA mice. Lab. Anim. 40 (4), 371-381 (2006).
  17. Arndt, S. S., et al. Individual housing of mice--impact on behaviour and stress responses. Physiol. Behav. 97 (3-4), 385-393 (2009).
  18. Salomons, A. R., Arndt, S. S., Lavrijsen, M., Kirchhoff, S., Ohl, F. Expression of CRFR1 and Glu5R mRNA in different brain areas following repeated testing in mice that differ in habituation behaviour. Behav. Brain Res. 246, 1-9 (2013).
  19. Henry, B. L., Minassian, A., Young, J. W., Paulus, M. P., Geyer, M. A., Perry, W. Cross-species assessments of motor and exploratory behavior related to bipolar disorder. Neurosci. Biobehav. Rev. 34 (8), 1296-1306 (2010).
  20. Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26 (8), 907-923 (2002).
  21. Ohl, F., Roedel, A., Binder, E., Holsboer, F. Impact of high and low anxiety on cognitive performance in a modified hole board test in C57BL/6 and DBA/2 mice. Eur. J. Neurosci. 17 (1), 128-136 (2003).
  22. Gordan, M. L., Jungwirth, B., Ohl, F., Kellermann, K., Kochs, E. F., Blobner, M. Evaluation of neurobehavioral deficits following different severities of cerebral ischemia in rats: A comparison between the modified hole board test and the morris water maze test. Behav. Brain Res. 235 (1), 7-20 (2012).
  23. Salomons, A. R., Arndt, S. S., Ohl, F. Impact of anxiety profiles on cognitive performance in BALB/c and 129P2 mice. Cogn. Affect. Behav. Neurosci. 12 (4), 794-803 (2012).
  24. Guilloux, J., Seney, M., Edgar, N., Sibille, E. Integrated behavioral z-scoring increases the sensitivity and reliability of behavioral phenotyping in mice: Relevance to emotionality and sex. J. Neurosci. Methods. 197 (1), 21-31 (2011).
  25. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , Eighth edition, National Research Council. Washington, D.C.. (2010).

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة