التصوير بالموجات فوق الصوتية المحسن على التباين هو أداة موثوقة في الجسم الحي لقياس تدفق دم الحبل الشوكي في نموذج تجريبي لإصابة الحبل الشوكي للفئران. تحتوي هذه الورقة على بروتوكول شامل لتطبيق هذه التقنية بالاشتراك مع نموذج كدمة لإصابة الحبل الشوكي الصدري.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
على النقيض المحسن التصوير بالموجات فوق الصوتية لتقييم الحبل الشوكي تدفق الدم في التجريبية العمود الفقري اصابات الحبل
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
انخفاض تدفق دم الحبل الشوكي (SCBF) (أي نقص التروية) يلعب دورا رئيسيا في إصابات الحبل الشوكي (النخاع الشوكي) الفيزيولوجيا المرضية وفقا لذلك هو هدف هام للعلاجات اعصاب. على الرغم من أن العديد من التقنيات تم وصفها لتقييم SCBF، لديهم كل قيود كبيرة. للتغلب على هذه الأخيرة، نقترح الاستفادة من الوقت الحقيقي التصوير النقيض المحسن الموجات فوق الصوتية (سي إي يو). نحن هنا وصف تطبيق هذه التقنية في نموذج كدمة الفئران اصابات النخاع الشوكي. يتم زرع قسطرة الوريد أول لحقن متكررة من وكيل النقيض من ذلك، محلول كلوريد الصوديوم من سادس فلوريد الكبريت microbubbles مغلفة. ثم استقرت في العمود الفقري مع العرف 3D الإطار ويتعرض العمود الفقري الجافية الحبل الأم من قبل الثقب في ThIX-ThXII. ثم يتم وضع مسبار الموجات فوق الصوتية في الجانب الخلفي من الأم الجافية (المغلفة مع هلام الموجات فوق الصوتية). لتقييم SCBF خط الأساس، والحقن في الوريد واحد (400 ميكرولتر) من كونترايتم تطبيق عامل الواحد لتسجيل مرور من خلال الأوعية الدموية الدقيقة الحبل الشوكي سليمة. ويستخدم الجهاز الوزن الإفلات في وقت لاحق لتوليد نموذج كدمة التجريبية استنساخه من اصابات النخاع الشوكي. وكيل النقيض إعادة حقن 15 دقيقة بعد اصابة لتقييم التغيرات في الوظائف-SCI SCBF. CEU يسمح في الوقت الحقيقي وداخل الجسم الحي تقييم التغيرات SCBF التالية اصابات النخاع الشوكي. في الحيوان لم يصب، وأظهر التصوير بالموجات فوق الصوتية تدفق الدم متفاوتة على طول الحبل الشوكي سليمة. وعلاوة على ذلك، لمدة 15 دقيقة بعد اصابات النخاع الشوكي، كان هناك نقص التروية حاسما على مستوى مركز الزلزال في حين SCBF ظلت محفوظة في أكثر المناطق النائية سليمة. في المناطق المتاخمة للمركز (سواء منقاري والذيلية)، تم تخفيض SCBF بشكل كبير. هذا يتوافق مع سبق وصفها "منطقة شبه الظل الدماغية". هذه الأداة هي ذات الأهمية الرئيسية لتقييم آثار العلاجات التي تهدف إلى الحد من نقص التروية وما ينجم عنها من نخر الأنسجة لاحق لاصابات النخاع الشوكي.
المقدمة
إصابة الحبل الشوكي الصدمة (SCI) هو شرط مدمرة مما أدى إلى انخفاض كبير في السيارات، والحسية وظائف مستقلة. حتى الآن، وقد أثبت العلاج لا كفاءته في المرضى. لهذا السبب، من المهم للتعرف على تقنيات جديدة من شأنها تحسين تقييم العلاجات المحتملة ويمكن أن يزيد من توضيح الاصابة pathiophysiology 1.
وينقسم إلى قسمين SCI مراحل متتابعة، ويشار إلى الإصابات الأولية باعتبارها والثانوية. الإصابة الأولية يناظر إهانة الميكانيكية الأولية. في حين أن الجماعات الإصابات الثانوية سلسلة من الأحداث البيولوجية المختلفة (مثل التهاب، الاكسدة ونقص الأكسجين) التي ستؤدي إلى زيادة التوس....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
ملاحظة: تمت الموافقة على الطرق الموضحة في هذه المخطوطة من قبل لجنة أخلاقيات علم الأحياء في كلية Lariboisière الطب، باريس، فرنسا (CEEALV / 2011-08-01).
1. أداة إعداد
- تحضير وتنظيف الأدوات التالية لإدخال القسطرة: ملقط الصغرى، مقص الصغرى، المشبك الأوعية الدموية الدقيقة، مقص كبير، موضوع الجراحية (أسود مضفر الحرير 4-0) والقسطرة 14 G. يعالج بالهيبارين القسطرة مع الحل الهيبارين (5000 U / مل).
- تحضير وتنظيف الأدوات التالية لالثقب: ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
مع بروتوكول المذكورة أعلاه، فمن الممكن لتعيين SCBF على طول الحبل الشوكي الجزء سهمي الطولي.
في الحبل الشوكي سليمة، يبدو أن هناك مخالفات SCBF داخل لحمة (الشكل 12). ويمكن تفسير ذلك من خلال توزيع متغير الشرايين-radiculo النخاعية (RMA) من حيوان واحد إلى آخر. RMA يشير إلى قطعي الشرايين التي تصل إلى الشريان الفقري الأمامي (ASA)، وبالتالي توفير إمدادات الدم في لحمة الحبل الشوكي. في المقابل، فإن الشرايين .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
على الرغم من أننا قد وصفت كيفية استخدام CEU في الفئران اصابات النخاع الشوكي نموذج كدمة، هذا البروتوكول يمكن تعديلها لتناسب أهداف تجريبية أخرى أو نماذج اصابات النخاع الشوكي. اخترناه لقياس SCBF عند نقطتين فقط الوقت (قبل الإصابة و 15 دقيقة بعد SCI)، إلا أن عدد من النقاط الوقت والتأخير بين القياسات SCBF يمكن تكييفها لتلبية احتياجات دراسات أخرى. على سبيل المثال، في عملنا السابق 17، قمنا بقياس SCBF على خمس نقاط زمنية متتالية على مدار الساعة الأولى بعد اصابات النخاع الشوكي. من.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم تضارب مالي متنافس في المصالح. تم إعارة جهاز الموجات فوق الصوتية بلطف من قبل شركة Toshiba France. تم إعارة مضخة Vueject بلطف من قبل شركة Bracco France.
شكر وتقدير
نعرب عن تقديرنا لستيفاني جورجيرد وتييري شيرلينك (توشيبا فرنسا) وكريستوف لازار (براكو فرنسا).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| المثبت الخارجي هوفمان 3 | سترايكر ، كالامازو ، الولايات المتحدة الأمريكية | نظام معياري يستخدم لبناء إطار ثلاثي الأبعاد مخصص والذراع المفصلية التي تحمل مسبار الموجات فوق الصوتية | |
| توشيبا أبليو | توشيبا ، طوكيو ، اليابان | آلة الموجات فوق الصوتية | |
| سونوفيو | براكو ، ميلانو ، إيطاليا | عامل التباين: microbubbles | |
| مضخة Vueject | براكو ، ميلانو ، إيطاليا | مضخة كهربائية لضخ بلعة الفقاعات | |
| الموجات فوق الصوتية Aquasonic | Parker Laboratories ، فيرفيلد ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | جل الموجات فوق الصوتية المستخدم لنقل الموجات فوق الصوتية | |
| Isovet | Piramal Healthcare ، مومباي ، الهند | Isoflurane المستخدمة في التخدير | |
| Ultra Extend | Toshiba ، طوكيو ، اليابان | البرنامج المستخدم لقياس تدفق | |
| دم الحبل الشوكيطقم كماشة صغيرة من خمس قطع من Mastercraft ، المنتج # 58-4788-6 | Canadian Tire ، تورنتو ، كندا | مجموعة من الكماشة لوظيفة افعلها بنفسك |
المراجع
- Cadotte, D. W., Fehlings, M. G. Spinal cord injury: a systematic review of current treatment options. Clin Orthop Relat Res. 469 (3), 732-741 (2011).
- Beattie, M. S., Farooqui, A. A., Bresnahan, J. C. Review of current evidence for apoptosis after spinal cord injury. <....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
