والهدف من هذا البروتوكول هو تقديم الطريقة القياسية لأداء الوريد اختبارات تحمل الغلوكوز (IVGTTs) لتقييم مراقبة نسبة السكر في الدم في الرئيسات من غير البشر وتقييم وضعهم الأيض من الأصحاء للdysmetabolic.
مقالة منهجية
والهدف من هذا البروتوكول هو تقديم الطريقة القياسية لأداء الوريد اختبارات تحمل الغلوكوز (IVGTTs) لتقييم مراقبة نسبة السكر في الدم في الرئيسات من غير البشر وتقييم وضعهم الأيض من الأصحاء للdysmetabolic.
اختبار تحمل الجلوكوز في الوريد (IVGTT) يلعب دورا رئيسيا في تحديد خصائص توازن الجلوكوز. عندما تؤخذ جنبا إلى جنب مع لمحات المصل البيوكيميائية، بما في مستويات السكر في الدم في كل من بنك الاحتياطي الفيدرالي وصام الدولة، نسبة HbA1c، ومستويات الانسولين، والتاريخ الطبي من النظام الغذائي، وتكوين الجسم، والجسم الوضع الوزن، وتقييما لمراقبة نسبة السكر في الدم طبيعية وغير طبيعية ويمكن إجراء . ويتم تفسير لIVGTT من خلال قياس التغيرات في مستويات السكر والانسولين مع مرور الوقت فيما يتعلق التحدي الدكستروز. العناصر الأساسية التي يتعين النظر فيها هي: ذروة مستويات السكر والانسولين تم التوصل إليه في ما يتعلق T0 (نهاية ضخ الجلوكوز)، ومعدل إزالة الجلوكوز K المستمدة من المنحدر من إزالة الجلوكوز سريع في دقيقة 20 الأول (T1 إلى T20)، والوقت للعودة إلى خط الأساس الجلوكوز، والمنطقة تحت المنحنى (AUC). ومن شأن هذه التدابير IVGTT تظهر تغييرات مميزة كما يتحرك توازن الجلوكوز من ر صحيالزراعة العضوية المريضة الدولة الأيض 5. هنا سنقوم بشرح توصيف الرئيسيات غير البشرية (قرود المكاك القرد وسينومولوغوس)، والتي هي النموذج الأكثر صلة حيوان من النوع الثاني من مرض السكري (T2D) في البشر وIVGTT وملامح السريرية لهذه الحيوانات من العجاف صحية، لdysmetabolic يعانون من السمنة المفرطة، والدولة 8، 10، 11 T2D.
وIVGTT هو فحص وظيفي مناسب يستخدم عادة لتحديد وظيفة β خلايا في البشر في مختلف الدول الأيضية 5 و 7. وفي النماذج الحيوانية من T2D، فمن المعترف بها وكذلك أداة لوصف الحيوانات التي تظهر تطور المرض الأيضي من صحية لdysmetabolic دولة فرط سكر الدم 8 و 9. ويتجلى هذا النموذج أقرب الحيوانات من T2D في الرئيسيات غير البشرية (الرئيسيات)، والتي ريسوس والرباح قرود المكاك هي الأمثلة البارزة. هذه الحيوانات بشكل طبيعي تطوير T2D مع نفس عوامل الخطر من العمر والسمنة تساهم في حدوثه كما في البشر 10. وعلاوة على ذلك، هناك تطور المرض مماثل، وأمراض البنكرياس تظهر رواسب أميلويد كما تقدم المرض dysmetabolic 11.
نحن هنا تقريرا عن الطريقة المعتادة لدينا من إجراء عملية IVGTT في الرئيسيات كجزء من توصيف مستعمرة من الوضع الأيضي في هذه الحيوانات. هذا الأسلوب هومن السهل أن أداء النسبي على الآخرين المزيد من الوقت، وتستهلك وتقنيات مكلفة 2. وIVGTT هو مفيد لوصف مستعمرة كبيرة من الحيوانات بسرعة وبشكل متكرر. عندما تؤخذ بعين الاعتبار مع مستوى الهيموجلوبين السكري (نسبة HbA1c)، والتاريخ والنظام الغذائي والغذاء تناول الحيوان، وكذلك في المئة العجاف كتلة الجسم والدهون، وIVGTT عادة كافية لوصف الوضع الأيضي الحيوان والتقدم نحو السكري العلني 6 8.
يمثل نسبة HbA1c متوسط مستوى السكر في الدم على مدى عمر خلايا الدم الحمراء، وتوفير مقياس موثوق لمستويات السكر على مدى الأسابيع الستة الماضية إلى ثلاثة أشهر. عندما تقاس من صام عينة الدم الأساسي من IVGTT، هذه القيمة توفر نافذة على السيطرة على السكر خلال الأشهر بين الإجراءات. إذا انتقلت الحيوان من dysmetabolic لمرضى السكري منذ IVGTT آخر، وسيكون قيمة نسبة HbA1c أعلى بكثير من قيمتها السابقة تشيرأن التحول بدأ بعد وقت قصير من IVGTT آخر، وحين، قيمة نسبة HbA1c أقرب إلى قيمتها السابقة تشير إلى أن أنها قد انتقلت مؤخرا فقط. بشكل عام، في قرود المكاك ريسوس، نسبة HbA1c القيم أكبر من يعتبرون 6٪ غير طبيعي، وتشير إلى ضعف السيطرة على نسبة السكر في الدم 10، 23.
ينبغي أن تفسر مستويات السكر في الدم ضمن سياق السلوك والصحة العامة للحيوان ككل. قرود المكاك السكري - مثل البشر - فرط الأكل المعرض، عطاش، وبوال. الإسكان مجموعة من الحيوانات يوفر تحديات كبيرة لقياس هذه المؤشرات والرعاية الفردية اللازمة لdysmetabolic والقردة مرضى السكري. نوصي السكن منفردة الحيوانات من أجل أن الرعاية أكثر تخصيصا قد تكون المقدمة، ويتم رصد العلامات السلوكية للصحة القرد أكثر سهولة 8. بالإضافة إلى ذلك، سوف قرود المكاك السكري تظهر خسارة الوزن، فضلا عن ارتفاع مستوى الدهون (زيادةالكولسترول، وزيادة شحوم الدم) واضطراب استقلاب المعادن في الكيمياء في الدم. من المهم قياس علامات الكبد ووظائف الكلى في الكيمياء في الدم، والأضرار التي لحقت هذه الأجهزة غالبا ما تكون مضاعفات دفع الأيض اضطراب / مرض السكري، ويمكن أن يكون شارك في محددات نسبة السكر في الدم، الدهون وعدم التوازن المعدنية 9، 11، 18، 24 .
عند استخدام هذا الأسلوب، والقيم التاريخية ولدت من متعددة، الأوصاف المتكررة على مدى عمر قرد ذات قيمة خاصة. إذا إجراءات أخرى، مثل المشبك الجلوكوز أو السكر في متدرج ضخ (GGI)، وهناك حاجة لإجراء تقييم كامل الصحة حيوان، فمن عادة على توصيف الأولي عندما تاريخهم غير متوفر. IVGTTs ومع ذلك، مرة واحدة وقد تم إنشاء خط الأساس، وكرر من تردد كل ثلاثة أشهر تكفي عادة لتتبع التقدم المحرز الحيوان. وهذا أمر مهم خاصة عندما التحق الحيوانات في دراسات متعددة في جميع أنحاءالسنة التقويمية استنادا إلى وضعهم الأيض. بينما قد تبقى حالتهم الصحية مستقرة نسبيا لسنوات في وقت واحد، عندما يتأزم الوضع الأيضي للحيوان، يمكن أن تحدث زيادة كبيرة في مقاومة الانسولين والجلوكوز التعصب بشكل سريع جدا. قيم نسبة HbA1c تسمح لبعض الاستيفاء من تراجع أو تحسن من الحالة الصحية للحيوان بين الإجراءات المقرر ثلاثة أشهر على حدة. لهذا السبب، وهذه الطريقة مثالية لوصف الحيوانات المستخدمة في عدة دراسات طولية على مدار حياتها الطبيعية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية من قبل معهد بحوث موردوك ديفيد اتش IACUC تقع في الحرم الجامعي ولاية كارولينا الشمالية بحوث (NCRC)، تحت بروتوكول 14-017، توصيف نموذج الرئيسيات غير البشرية من مرض السكري ومقدمات السكري / مقاومة الانسولين وفعالية العلاجات لتحسين حساسية الأنسولين وظيفة التمثيل الغذائي.
1. اختيار الحيوان وإعداد دراسة
2.التخدير الحيوانية والتحضير
ملاحظة: الإجراء IVGTT يتكون من 8 عينات سحب الدم مرة نقاط (الجدول 1).
4. استعادة الحيوانية وتجهيز العينات
5. معالجة البيانات
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وتبين النتائج الموضحة في الشكل رقم 1 هي برهانية من نموذجية الجلوكوز والأنسولين منحنيات من قرود المكاك الرباح ناضجة وصحية لمرضى السكري وعلى مدار IVGTT 30 دقيقة. وتظهر بيانات من القرود السكري صحية والمتقدمة وذلك لتباين واختلافات واضحة بين الحيوانات من طرفي المتطرفة من مجموعة من توصيف الأيض. وقد استخدم هذا البروتوكول IVGTT بنجاح من قبل المؤلفين في قرود المكاك ريسوس مع نتائج مماثلة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وIVGTT يقيم قدرة اطلاق الانسولين حفز الجلوكوز من خلال ضخ الدكستروز واحد على أساس وزن الجسم 5 و 12 و 13. من الفحص، وتحقيق نسبة الجلوكوز في الدم أثناء الصيام ومستوى الأنسولين، وأنه يسمح بتقييم قدرة الحيوان ل الافراج عن الانسولين ويعود مستوى الجلوكوز المرتفع نحو خط الأساس. هذا يوفر للمستخدم مع المعلومات لوصف حيوان هو والجلوكوز العادي ومراقبة صحية مستوى الأنسولين، وهو حيوان dysmetabolic hyperinsulinemic مع سوائية سكر الدم، أو فرط سكر الدم ومقاومة للأنسولين الحيوان السكري. <...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وينتمي الكتاب مع منظمة أبحاث العقد (ولي العهد العلوم البيولوجية) النشطة في مجال أمراض التمثيل الغذائي.
فإن الكتاب أود أن نشيد بالدعم القوي من موظفي رعاية الحيوانات DHMRI CLAS، مدير مرفق السيد دانيال بيرالتا وحضور الطبيب البيطري الدكتور Glicerio اجناسيو، DVM MRCVS.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| X-15R للطرد المركزي | : 4 &# 176; C عند 3,000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق | ||
| مصل الطرد | : 22 &# 176; C عند 3,000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق | ||
| Thermo Scientific -86 &# 176 ؛ فريزر سي ، سلسلة فورما 88000 | الموديل: 88500A | ||
| تسليم IV D50 | |||
| الإسفنج الشاش 2 × 2 | الغرب الأوسط البيطري Suppy | 366.23000.4 | مستعمل جاف ، مع 70٪ كحول ، و 2٪ محلول كلوروهيكس |
| 4 مل أنابيب فاصل المصل ؛ | الغرب الأوسط البيطري الإمداد | 366.45000.4 | أنبوب جمع الدم للوحة superchem |
| K2< / sub>EDTA ، 2 مل | VWR | 95057-239 | أنابيب جمع الدم |
| البروتينين ، 100 مجم | Sigma | A1153-100MG | أنبوب جمع الدم البروتياز المضاف |
| 22 جم × 1 "القسطرة | الغرب الأوسط البيطرية Suppy | 193.75250.2 | قسطرة IV ؛ |
| قابس الحقن مع غطاء | الغرب الأوسط البيطري Suppy | 001.11500.2 | ٪ 50 منفذ ضخ سكر العنب |
| Porus Tape ، 1/2 "× 10 ياردة | الغرب الأوسط | 001.85000.2 | يحافظ على التصاق القسطرة و hep. أقفال |
| محلول الكلورهيكسيدين 2٪ | الغرب الأوسط البيطري Suppy | 193.08855.3 | موقع القسطرة الإعدادية |
| 70٪ الإيثانول | VWR | 71001-654 | موقع القسطرة الإعدادية |
| عاصبة | ويبستر | 07-8003432 | |
| 3-way stopcock | الغرب الأوسط الإمداد البيطري | 366.28510.4 | hep. قفل |
| 37 "مجموعة | تمديد ويبستر | 07-8454200 | hep. lock |
| Exel 50-60cc LL محاقن | الغرب الأوسط البيطرية Suppy | 001.12250.2 | المحلول الملحي الهيباريني |
| 250 مل 0.9٪ محلول ملحي | ويبستر | 07-8365593 | دافق |
| 1،000 U هيبارين ، 10 مل | ويبستر | 07-883-4916 | |
| كيتامين (كيتاسيت) 100 & nbsp ؛ ملغ / مل | فورت دودج | (طلب AV) | |
| اختبار الجلوكوز Precision Xtra 50 / bx | Abbott (السكري الأمريكي بالجملة) | 9381599728K7 | اختبار خط الأساس / مستويات الجلوكوز في الدم |
| T3 ماسيمو راد 57 | DRE | 6052057V | التأكسج النبضي |
| بافيا ميزان الحرارة الشرجي | باترسون | 07-8391335 | |
| الدقة Xtra مقياس السكر | أبوت | 9381599728K7 | جهاز قياس السكر المحمول |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن