مقالة منهجية

جيل من تحجيم، لامع عالية الارتفاع Nanocomposites نسبة في البيولوجية السائل المتوسطة

8.8K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/52901

⸱

يوليو 8, 2015

 ,  ,  ,  , 
1Biophysics Department, Centenary College of Louisiana, 2Department of Chemistry, Louisiana Tech University, 3Department of Integrative Physiology, University of North Texas Health Sciences Center, 4Biomedical Engineering, Louisiana Tech University, 5Institute for Micromanufacturing, Louisiana Tech University

في هذه المقالة

ملخص

نحن هنا نقدم بروتوكول لتجميع الرواية، وارتفاع تبلغ نسبة أبعادها biocomposites في ظل الظروف البيولوجية ووسائل الإعلام السائلة. وbiocomposites مقياس من نانومتر إلى ميكرومتر في القطر والطول، على التوالي. النانوية النحاس (CNPS) وكبريتات النحاس جنبا إلى جنب مع السيستين هي المكونات الرئيسية للالتوليف.

الملخص

والهدف من هذا البروتوكول هو وصف تركيب اثنين biocomposites جديدة مع هياكل ارتفاع نسبة الجانب. تتكون biocomposites من النحاس والسيستين، وإما النانوية النحاس (CNPS) أو كبريتات النحاس المساهمة عنصر معدني. ويتم تجميع في السائل تحت الظروف البيولوجية (37 ° C) وشكل المركبة الذاتي تجميعها بعد 24 ساعة. تشكلت مرة واحدة، هذه المركبات هي درجة عالية من الاستقرار في كل وسائل الإعلام السائلة وفي شكل المجففة. المركبة مقياس من النانوية لمجموعة الصغرى في الطول، ومن بضعة ميكرونات إلى 25 نانومتر في القطر. أظهر الانبعاثات مجال المجهر الإلكتروني مع التحليل الطيفي التشتت الطاقة الأشعة السينية (EDX) أن الكبريت كان حاضرا في هياكل خطية NP المشتقة، في حين أنه كان غائبا عن المواد CNP ابتداء، مما يؤكد سيستين كمصدر من الكبريت في nanocomposites النهائية . خلال توليف هذه النانوية والصغرى المركبة الخطية، مجموعة متنوعة من أطوال شارعيتم تشكيل uctures في السفينة التوليف. وقد تجلى صوتنة من الخليط السائل بعد التوليف للمساعدة في السيطرة على متوسط ​​حجم الهياكل التي كتبها تناقص متوسط ​​طول الوقت مع زيادة صوتنة. منذ البنى المتشكلة مستقرة للغاية، لا التكتل، وتتشكل في الطور السائل، ويمكن أيضا أن تستخدم الطرد المركزي للمساعدة في التركيز وعزل المركبات تشكيلها.

المقدمة

النحاس هو معدن شديد التفاعل وهو ضروري في العالم البيولوجي في بعض وظائف الإنزيم 1،2 ، ولكن في التركيزات الأعلى يكون ساما بقوة بما في ذلك في شكل الجسيمات النانوية 3،4. أصبح القلق بشأن سمية النحاس أكثر أهمية مع استخدام CNPs والمواد النانوية الأخرى القائمة على النحاس ، بسبب زيادة مساحة السطح / الكتلة للهياكل النانوية. وبالتالي ، حتى كتلة صغيرة من النحاس ، في شكل جسيمات نانوية ، يمكن أن تسبب سمية موضعية بسبب قدرتها على اختراق الخلية وتقسيمها إلى أشكال تفاعلية. يمكن لبعض الأنواع البيولوجية أن تعقد مع أيونات المعادن وتكلبها ، بل ودمجها في الهياكل البيولوجية كما هو موضح في بلح البحر البحري 5. عند دراسة التأثيرات السامة المحتملة للمواد النانوية 4 ، تم اكتشاف أنه بمرور الوقت ، وفي ظل الظروف البيولوجية المستخدمة لزراعة الخلايا النموذجية (37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيدالكربون 2) ، يمكن تشكيل مركبات حيوية نحاسية مستقرة ببنية عالية نسبة عرض إلى ارتفاع (خطية).

من خلال عملية الإزالة ، تم تبسيط الاكتشاف الأولي لهذه المركبات الحيوية الخطية ، التي حدثت في وسائط زراعة الخلايا الكاملة ، إلى بروتوكول محدد للعناصر الأساسية اللازمة للمركبات الحيوية للتجميع الذاتي. تم اكتشاف أن التجميع الذاتي لنوعين من المركبات الحيوية الخطية للغاية ممكن مع مكونين معدنيين أوليين: 1) CNPs و 2) كبريتات النحاس ، مع المكون البيولوجي المشترك هو السيستين. على الرغم من أنه تم الإبلاغ سابقا عن الهياكل المحتوية على النحاس من نوع "القنفذ" و "الزهرة النانوية" الأكثر تعقيدا ، إلا أنها تم إنتاجها في ظل ظروف غير بيولوجية ، مثل درجات حرارة 100 درجة مئوية أو أكثر من 6-8. على حد علمنا ، لم يتم وصف تخليق الهياكل النانوية الفردية الخطية المحتوية على النحاس والتي يمكن تطويرها في الطور السائل في ظل الظروف البيولوجية من قبل.

< p class = 'jove_content'>تم الإبلاغ سابقا عن أن إحدى المواد الأولية المستخدمة لتخليق المركبات النانوية ، وهي CNPs ، شديدة السمية للخلايا 4. تم الإبلاغ مؤخرا أنه بعد تكوين المركبات النانوية ، تكون هذه الهياكل أقل سمية على أساس الكتلة من NPs 9 الابتدائية. وبالتالي ، قد يكون التوليف الموصوف هنا مشتقا من تفاعل بيولوجي وكيميائي حيوي له فائدة في تثبيت أنواع النحاس التفاعلية ، سواء بمعنى تحويل شكل NP إلى هياكل أكبر أو في إنتاج مركبات أقل سمية للخلايا.

على عكس العديد من أشكال المواد النانوية الأخرى المعروفة بأنها تتجمع أو تتكتل عند التفاعل مع الوسائط السائلة البيولوجية 10،11 ، بمجرد تكوينها ، فإن المركبات الخطية للغاية الموصوفة هنا تتجنب التجميع ، ربما بسبب إعادة توزيع الشحنة التي تم الإبلاغ عنها سابقا 9. كما هو مفصل في العمل الحالي ، فإن تجنب التجميع هذا مناسب لأغراض العمل مع الهياكل بمجرد تشكيلها لأسباب 3 على الأقل: 1) يمكن تركيز الهياكل المركبة بمجرد تشكيلها باستخدام الطرد المركزي ثم تشتيت بسهولة مرة أخرى باستخدام خلط الدوامة. 2) يمكن تقليل الهياكل المشكلة في متوسط الحجم عن طريق صوتنة لفترات زمنية مختلفة. و 3) قد توفر الهياكل الخطية المشكلة أداة إضافية لتجنب "تأثير حلقة القهوة" الموصوف مؤخرا 12 وبالتالي توفر مخدرا لإنشاء طلاءات موزعة بشكل متساو للمواد ، خاصة تلك التي تحتوي على جسيمات كروية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. التخطيط للتجارب

  1. تحديد حجم nanocomposites النحاس اللازمة لتخليق. على هذا الأساس، واختيار عدد من قوارير صغيرة الحجم (25 سم 2)، أو قوارير أكبر على النحو المبين أدناه في إعداد المواد.
  2. لهذا التوليف، استخدام 37 درجة مئوية مع حاضنة 5٪ CO 2 و 40٪ على الأقل الرطوبة. ضمان أن مثل حاضنة متاح، وأنه لن تكون منزعجة بشكل متكرر خلال الفترة من التوليف (حوالي 24 ساعة).
    تنبيه: افتتاح المتكررة وإغلاق الحاضنة بالتأكيد سوف يسبب التقلبات في درجات الحرارة مما قد يؤدي إلى تغير تركيب الهياكل بمركب متناهي في الصغر.

2. إعداد المواد

  1. إعداد جميع المواد الطازجة قبل بدء التجربة، وذلك بإضافة المواد الصلبة للمذيبات الحق قبل التوليف هو أن تبدأ. حفظ حلول المخزون من المواد السيستين والنحاس الانطلاق في السائل لزمن طويل بefore لا ينصح التجربة وربما يؤدي إلى نتائج متباينة. فتحت مرة واحدة من البائع، والحفاظ على المواد الأولية الجافة عن طريق لف الجزء العلوي من الحاويات مع parafilm.
    ملاحظة: يتم استخدام بروتوكول التالي كمثال لردود الفعل في 25 سم 2 خلية قارورة الثقافة باستخدام 7 ميكرولتر من السيستين، 6643 ميكرولتر من الماء المعقم، و 350 ميكرولتر من CNPS.
  2. إعداد 2 ملغ / مل حل النانوية النحاس وزنها عن طريق لا يقل عن 2 ملغ من CNPS. ارتداء قفازات المتاح خلال هذه الخطوة لمنع اتصال ممكن من CNPS مع الجلد. وضع النانوية في فارغة معقمة 16 مل قارورة زجاجية.
    1. إلى القارورة التي تحتوي على CNPS، إضافة الماء منزوع الأيونات معقمة في حجم مناسب لجعل 2 ملغ / مل حل ودوامة الحل لمدة 20 ثانية لتوفير تشتت الجسيمات النانوية قبل بدء التوليف (يوصى 1 مل على الأقل إجمالي حجم). لا تملأ أكثر من نصف الطريق قنينة بالماء وهذا سوف تمنع الاختلاط من قبل vortexing. CNPS فيلل يستقر بسرعة إلى قاع القارورة وسوف تظهر داكنة اللون (الرمادي إلى الأسود).
    2. يصوتن الحل CNP لمدة 17 دقيقة في RT لتوفير التشتت القصوى من CNPS قبل بداية التوليف. فحص دوري للتأكد من أن CNPS خلط المقرر أن صوتنة. بعد صوتنة ناجحة، CNPS تظل معلقة في حل لمدة 30 دقيقة على الأقل، وسوف يكون الحل داكنة اللون.
  3. تزن خارج كتلة كافية من السيستين لجعل الحل / مل 72.9 ملغ لتوليف. منذ سيستين ليست قابلة للذوبان في الماء مباشرة، ضع السيستين وزنه في سفينة وزنها التحجر.
    1. إلى وزنها عاء يحتوي سيستين، إضافة كمية كافية من عقيم، 1 M هيدروكسيد الصوديوم، بحيث سيستين يذوب تماما. على سبيل المثال، ويحل 7.29 ملغ من السيستين تماما في 100 ميكرولتر من 1 M هيدروكسيد الصوديوم، لجعل 72.9 ملغ / مل حل.
    2. للحفاظ على ظروف معقمة، تنفيذ هذه الخطوة في العقيمة الأنسجة تدفق الثقافة غطاء محرك السيارة.
      تنبيه: هيدروكسيد الصوديومفي 1 M التركيز هو الكاوية، وحتى ارتداء القفازات القابل للتصرف خلال هذه الخطوة لمنع الاتصال من المركز هيدروكسيد الصوديوم مع الجلد
  4. العمل في نسيج الثقافة العقيمة غطاء محرك السيارة، إضافة 7 ميكرولتر من سيستين مع 6643 ميكرولتر من الماء المعقم لتركيب قارورة معقمة أولا، واسمحوا احتضان لمدة 30 دقيقة في الحاضنة عند 37 درجة مئوية مع غطاء القارورة تنفيس (فضفاضة) لتوفير فعالة الاختلاط. Resuspend و2 ملغ / مل حل CNP قبل vortexing لمدة 30 ثانية، منذ CNPS واستقروا بعد خطوة صوتنة.
    1. إضافة حلا كافيا CNP إلى قارورة التوليف (باستخدام تقنية معقمة) للحفاظ على نسب المكون التالي: الجمع بين 1 أجزاء سيستين، 50 أجزاء CNPS، و 949 أجزاء من الماء المعقم في 25 سم 2 خلية قارورة الثقافة لبدء عملية التجميع. على سبيل المثال، لحجم التوليف 7 مل، والجمع بين 7 ميكرولتر من محلول المخزون السيستين، و 350 ميكرولتر من CNPS، و6643 ميكرولتر من الماء المعقم. استبدال الغطاء على القارورة وتشديد بحيث يكون SECURه.
    2. بعد الجمع بين جميع المكونات لتركيب، مزيج برفق في قارورة من قبل يحوم 4-5 مرات. ضع قارورة في الحاضنة CO 2 وتنفيس القارورة من خلال تخفيف الغطاء بحيث يكون هناك تبادل الغازات داخل وخارج القارورة خلال التوليف.
  5. السماح التوليف لتشغيل في الحاضنة لمدة ما يقرب من 24 ساعة. خلال التوليف، يمكن للمرء أن يلاحظ، مع المجهر والعين، وتشكيل المركبة الخطية للغاية.
    ملاحظة: عملية تشكيل الهياكل قد يحدث فجأة، بمعنى أن الهياكل من الصعب في البداية للكشف، ثم ظهور العائدات بسرعة إلى الكثافة المتزايدة. ولذلك قد يحدث قبل تشكيل 24 ساعة. ويمكن أيضا ملاحظة هذه العملية عن طريق العين مرة واحدة تصبح هياكل أكبر ويزيد من كثافتها. بينما جيل من الهياكل يمكن ملاحظتها على مر الزمن تحت المجهر والعين في نقطة زمنية لاحقة، انقطاع مستمر للشروط التوليف ودرجة الحرارة سوف يؤدي إلى الفقراءالنتائج التوليف.
  6. إنهاء توليف biocomposites التي كتبها السد بإحكام القارورة تجميع وتخزين وعاء في الثلاجة (4 ° C). الهياكل، مرة واحدة ولدت، وتظل مستقرة في هذا النموذج لمدة سنة على الأقل. تسمية قارورة مع الظروف التوليف، بما في ذلك مكونات المستخدمة، تاريخ التوليف، وفترة حضانة من التوليف قبل الإنهاء.

3. تجميع عن طريق كبريتات النحاس

  1. تنفيذ التوليف التجميع الذاتي عن طريق استبدال CNPS مع كبريتات النحاس والملح. باستخدام تقنية معقمة، ويحل على الأقل 2 ملغ من كبريتات النحاس بكميات كافية من الماء منزوع الأيونات عقيمة لجعل 2 ملغ / مل حل. بلورات كبريتات النحاس تذهب بسهولة إلى حل في هذا التركيز، ولكن دوامة القارورة إذا لزم الأمر، وتفتيش من قبل العين لضمان تذاب كل البلورات.
  2. بعد إعداد كبريتات النحاس وتنفيذ التوليف كما هو موضح سابقا، ولكن استبدال CNPS مع كبريتات النحاس.
    ملاحظة: تم العثور على nanocomposites الذاتي تجميعها باستخدام كبريتات النحاس كمادة أولية ليكون أكثر اتساقا في شكل نهائي من لهياكل توليفها من CNPS.
  3. إنهاء تركيب biocomposites كبريتات النحاس بالنسبة للمركبات CNP (الخطوة 2.6) وتخزينها على المدى الطويل في 4 ° C.

4. توصيف والتعامل مع Biocomposites بعد التوليف

  1. تميز biocomposites المستمدة من CNPS ومن كبريتات النحاس التي كتبها الضوء الأبيض المجهر 9 والإلكترون المجهري 9.
    1. لتوصيف والتفتيش على biocomposites بعد التوليف عن طريق المجهر الضوئي الأبيض، واستخدام مجهر مقلوب كما المركبة سوف تستقر في السطح السفلي من القارورة في غضون بضع دقائق من وضع قارورة شقة، ويمكن بعد ذلك جلبت الى التركيز. استخدام الإعداد حقل مشرق على المجهر لتحقيق أقصى قدر من التناقض بين biocomposites والمتوسطة السائل. المركبات المشتقة من CNPS وشرطيفي كبريتات سوف يظهر كل منهما واضحا للمبهمة في اللون، ولكن سوف المجاميع CNP غير المتفاعل تظهر مظلمة جدا في اللون.
      1. استخدام كاميرا رقمية متصلة المجهر لالتقاط الصور من المركبة. وسيراعى مجموعة من أطوال لهياكل الفردية.
    2. لتوصيف والتفتيش على biocomposites بعد التوليف وبعد تخزين عند 4 درجات مئوية، والسماح قوارير أن يأتي إلى RT لمدة 15 دقيقة على الأقل كما قوارير سوف تكثف في البداية على إزالة من الثلاجة، والتي سوف تحجب فعالية التركيز أثناء تأدية التصوير المجهري. بعد السماح موازنة لRT، ومسح الأسطح العلوية والسفلية من القارورة مع منشفة ورقية نظيفة لتحقيق أقصى قدر من جودة التصوير المجهري.
    3. عند العمل مع أو التصوير المركبة التي تم تخزينها على المدى الطويل، دوامة القارورة لمدة 30 ثانية إلى فصل كتل من المواد المركبة التي تشكل أثناء وجوده في الثلاجة. بعد vortexing ل، وفحص الهياكل مع هيئة التصنيع العسكري مقلوبroscope لضمان أن المجاميع وفصلها، وكرر vortexing لالضرورة.
    4. استخدام مقلوب المجهر الضوئي الأبيض لتقييم فعالية تجميع لتجربة معينة باستخدام CNPS. على سبيل المثال، وتوثيق وجود أو عدم وجود المتفاعل CNPS في قوارير التوليف تستخدم لbiocomposites CNP المستمدة من قوارير مع معلمات مختلفة مثل الوقت من التوليف.
      ملاحظة: فردية CNPS صغيرة جدا أن نلاحظ مع المجهر الضوئي، ولكن غير المتفاعل CNP المجاميع سوف تظهر مستديرة الشكل والأشياء المظلمة، وعلى النقيض من توليفها بنجاح CNP-المركبة التي سيكون لها نسبة عالية الجانب، شكل خطي، و سيكون لديك مجموعة من أطوال مختلفة. تجنب إجراء توليف لفترة طويلة جدا لفترة من الوقت قبل إنهاء الخدمة، لأن هذا سيؤدي في تشعبت للغاية "قنفذ" الهياكل نوع، التي يصعب تفريق في الهياكل الفردية تشكلت مرة واحدة.
    5. استخدام مقلوب الضوء الأبيض المجهر لتقييم فعاليةمن التوليف لتجربة معينة باستخدام كبريتات النحاس. منذ كبريتات النحاس يذهب تماما في حل باستخدام هذا البروتوكول، فإن الحل يبدو أقل المظلم من الحل من التوليف باستخدام CNPS. توثيق حجم ومدى المركبة كبريتات النحاس من خلال مقارنة قوارير مع الظروف التوليف مختلفة مثل الوقت من التوليف قبل الإنهاء.
      ملاحظة: ستكون المركبة توليفها بنجاح تظهر مجموعة من أطوال مختلفة. تجنب إجراء توليف لفترة طويلة جدا لفترة من الوقت قبل إنهاء الخدمة، لأن هذا سيؤدي في المجاميع تشعبت للغاية من المواد المركبة، وبعضها سيكون "قنفذ مثل" في الهيكل، والتي يصعب تفريق في الهياكل الفردية تشكلت مرة واحدة .
  2. على التركيز biocomposites بعد التوليف، حلول أجهزة الطرد المركزي المركبة في أنبوب الطرد المركزي. إضافة 6 مل من أي هياكل CNP المشتقة أو الهياكل المستمدة من كبريتات النحاس لأنبوب الطرد المركزي 15 مل. أجهزة الطرد المركزي لمدة 10 دقيقةفي 500 x ج في RT لتشكيل بيليه. لأحجام أصغر، إضافة 500 ميكرولتر من الهياكل في حل إلى 0.6 مل أنابيب الحجم. أجهزة الطرد المركزي في 2000 x ج في RT لمدة 10 دقيقة على الأقل لتشكيل بيليه.
    1. بعد الطرد المركزي لمدة ما يكفي من الوقت (10 دقيقة على الأقل لmicrofuges)، حفظ بيليه يمكن ملاحظتها في الجزء السفلي من الأنبوب حيث تتركز الهياكل عن طريق إزالة بعناية السائل طاف فوق بيليه. ويبدو أن الهياكل Biocomposite المستمدة من كبريتات النحاس الأزرق في اللون والهياكل المستمدة من CNPS هي أكثر قتامة (الرمادي إلى الأسود).
    2. إضافة المزيد من المواد المركبة لهذا الأنبوب وتكرار هذه العملية في نفس أنبوب للتركيز هياكل إذا رغبت في ذلك. لتفريق الكريات المركزة، إضافة حجم المطلوب من حل للأنبوب، ودوامة لمدة 10-30 ثانية.
  3. هياكل يصوتن بمجرد تشكيلها، لنقل متوسط ​​حجم السكان (أطوال) من هياكل لخفض القيم. هياكل مكان في الماء منزوع الأيونات معقمة ويصوتن لفي LeAST 10 دقيقة. باستخدام هذه العملية، مع مرور الوقت، والهياكل تصبح مجزأة وأصغر في متوسط ​​طول (انظر الشكل 6 من النص). تغييرات الوثيقة في أحجام المركبة مع أوقات صوتنة مختلفة باستخدام الأبيض مقلوب المجهر الضوء والكاميرا الرقمية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

ويبين الشكل 1 تخطيطي تدفق الرسم البياني للخطوات تركيب لتشكيل biocomposites الخطية الموصوفة في هذا العمل. CNPS أو كبريتات النحاس عن بدء مواد وجنبا إلى جنب مع الماء المعقم لتشكيل 2 ملغ / مل حل، وهذا الحل هو مختلطة وsonicated لتوفير حتى الخليط، ثم يتم خلط هذا الحل النحاس في نسبة التالية لتخليق: 949 أجزاء عقيمة الماء: 50 أجزاء خليط النحاس: 1 جزء محلول المخزون سيستين. وحدات التخزين الفعلية قد يزيد أو ينقص وفقا لهذه النسب لزيادة أو خفض العائد التجميع النهائي. بعد مرور ف...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أثناء تقييم الآثار السامة المحتملة للمواد متناهية الصغر بما في ذلك CNPS، لوحظ أن أكثر على المدى الطويل، تحولت CNPS من توزيع الجسيمات في البداية أكثر تشتتا ل، مجمعة أكبر (الشكل 2). في بعض الحالات، وهذه التشكيلات شديدة التجميع التي أنتجت في طبق زراعة الخلايا، في ظل ظروف البيولوجية، شكلت التوقعات الخطية للغاية من مجموع المركزي، تذكرنا نحاسية الموصوفة سابقا تحتوي على "قنافذ" 6. وينبغي الإشارة إلى أنه في ظل الظروف هو موضح هنا، وتركيز CNPS تضاف إلى ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

يود المؤلفون أن يعرب عن تقديرهم للمساعدة الفنية لألفريد جوناسيكاران في دراسات الفحص المجهري الإلكتروني في معهد التصنيع الدقيق في جامعة لويزيانا للتكنولوجيا ، والدكتور جيم ماكنمارا للمساعدة في دراسات الفحص المجهري الإضافية. تم دعم العمل الموصوف جزئيا من قبل مجلس حكام لويزيانا PKSFI رقم العقد. LEQSF (2007-12) -ENH-PKSFI-PRS-04 وأستاذ جيمس إي ويتشي الثالث من جامعة لويزيانا للتكنولوجيا (إلى دكتوراه في الطب).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
Mini VortexerVWR (https://us.vwr.com)58816-121
CO2< / sub> نموذج الحاضنة # 2425-2VWR (https://us.vwr.com)اتصل بالبائعالنموذج الحالي calalog # 98000-360
جهاز طرد مركزي Eppendorf (جهاز طرد مركزي دقيق مبرد)Labnet (http://labnetinternational.com/)C2500-Rنموذج Prism R
لثقافة الخلايا الطرد المركزي موديل Z323KLabnet (http://labnetinternational.com/) اتصلبالبائعكتالوج الطراز الحالي Z206A # C0206-A
Sonicator (منظف بالموجات فوق الصوتية)برانسون للموجات فوق الصوتية (http://www.bransonic.com/) 1510R-MTH
BalanceSartorius (http://dataweigh.com) نموذجCP225D نموذج مماثل CPA225D
أوليمبوس IX51 مجهر الضوء المقلوبأوليمبوس ( http://olympusamerica.comاتصل بالبائع
أوليمبوس DP71 المجهر الكاميرا الرقميةأوليمبوس (http://olympusamerica.comاتصل بالبائع
وحدة إمداد الطاقة الخارجية - ضوء أبيض لمجهر أوليمبوسأوليمبوس (http://olympusamerica.comTH4-100
10X و 20X و 40X أهداف المجهرأوليمبوس (http://olympusamerica.comاتصل بالبائع
مجهر إلكتروني ماسحهيتاشي (http://hitachi-hitec.com/global/em/sem/sem_index.html)موديل S-4800
مجهر إلكتروني ناقلزايس (http://zeiss.com/microscopy/en_de/products.html)موديل Libra 120
الطاولة محطة عمل أحادي الاتجاه تدفق مقعد نظيفEnvirco (http://envirco-hvac.com)موديل PNG62675يستخدم لزراعة الخلايا المعقمة تقنيه
شركة الحركة سطح

المراجع

  1. Klinman, J. P. The copper-enzyme family of dopamine beta-monooxygenase and peptidylglycine alpha-hydroxylating monooxygenase: resolving the chemical pathway for substrate hydroxylation. The Journal of biological chemistry. 281, 3013-3016 (2006).
  2. Uauy, R., Olivares, M., Gonzalez, M. Essentiality of copper in humans. The American journal of clinical nutrition. 67, 952S-959S (1998).
  3. Karlsson, H. L., Cronholm, P., Gustafsson, J., Copper Moller, L. oxide nanoparticles are highly toxic: a comparison between metal oxide nanoparticles and carbon nanotubes. Chemical research in toxicology. 21, 1726-1732 (2008).
  4. Parekh, G., et al. Layer-by-layer nanoencapsulation of camptothecin with improved activity. International journal of pharmaceutics. 465, 218-227 (2014).
  5. Harrington, M. J., Masic, A., Holten-Andersen, N., Waite, J. H., Fratzl, P. Iron-clad fibers: a metal-based biological strategy for hard flexible coatings. Science. 328, 216-220 (2010).
  6. Keyson, D., et al. CuO urchin-nanostructures synthesized from a domestic hydrothermal microwave method. Materials Research Bulletin. 43, 771-775 (2008).
  7. Liu, B., Zeng, H. C. Mesoscale organization of CuO nanoribbons: formation of 'dandelions'. J Am Chem Soc. 126, 8124-8125 (2004).
  8. Peng, M., et al. Controllable synthesis of self-assembled Cu2S nanostructures through a template-free polyol process for the degradation of organic pollutant under visible light. Materials Research Bulletin. 44, 1834-1841 (2009).
  9. Deodhar, S., Huckaby, J., Delahoussaye, M., DeCoster, M. A. High-Aspect Ratio Bio-Metallic Nanocomposites for Cellular Interactions. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering. 64, 012014(2014).
  10. Montes-Burgos, I., et al. Characterisation of nanoparticle size and state prior to nanotoxicological studies. Journal of Nanoparticle Research. 12, 47-53 (2010).
  11. Wiogo, H. T., Lim, M., Bulmus, V., Yun, J., Amal, R. Stabilization of magnetic iron oxide nanoparticles in biological media by fetal bovine serum (FBS). Langmuir. 27, 843-850 (2011).
  12. Yunker, P. J., Still, T., Lohr, M. A., Yodh, A. G. Suppression of the coffee-ring effect by shape-dependent capillary interactions. Nature. 476, 308-311 (2011).
  13. Kahler, H., Lloyd Jr, B., Eden, M. Electron Microscopic and Other Studies on a Copper–Cystine Complex. The Journal of Physical Chemistry. 56, 768-770 (1952).
  14. Furia, E., Sindona, G. Complexation of L-cystine with metal cations. Journal of Chemical & Engineering Data. 55, 2985-2989 (2010).
  15. Hawkins, C., Perrin, D. Polynuclear Complex Formation. II. Copper (II) with Cystine and Related Ligands. Inorganic Chemistry. 2, 843-849 (1963).
  16. Hallman, P., Perrin, D., Watt, A. E. The computed distribution of copper (II) and zinc (II) ions among seventeen amino acids present in human blood plasma. Biochem. J. 121, 549-555 (1971).
  17. Jensen, L. S., Maurice, D. V. Influence of sulfur amino acids on copper toxicity in chicks. The Journal of nutrition. 109, 91-97 (1979).
  18. Lee, Y., Choi, J. R., Lee, K. J., Stott, N. E., Kim, D. Large-scale synthesis of copper nanoparticles by chemically controlled reduction for applications of inkjet-printed electronics. Nanotechnology. 19, 415604(2008).
  19. Hume, J., et al. Engineered coiled-coil protein microfibers. Biomacromolecules. 15, 3503-3510 (2014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة