مقالة منهجية

تحفيز العصب المبهم كأداة للحث على اللدونة في مسارات ذات الصلة من أجل التعلم الانقراض

23.6K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/53032

⸱

أغسطس 21, 2015

 ,  ,  , 
1School of Behavioral and Brain Sciences, The University of Texas at Dallas

في هذه المقالة

ملخص

وقد برز تحفيز العصب المبهم (VNS) كأداة للحث على اللدونة متشابك المستهدفة في الدماغ الأمامي لتعديل مجموعة من السلوكيات. يصف هذا البروتوكول كيفية تنفيذ VNS لتسهيل توطيد الذاكرة الخوف الانقراض.

الملخص

يصف

Extinction عملية تخفيف الاستجابات السلوكية للمنبهات المحايدة عندما لا توفر التعزيز الذي يحافظ على السلوك. هناك تطابق وثيق بين الخوف والقلق البشري ، وبالتالي فإن دراسات التعلم من الانقراض قد توفر نظرة ثاقبة للطبيعة البيولوجية للاضطرابات المرتبطة بالقلق مثل اضطراب ما بعد الصدمة ، وقد تساعد في تطوير استراتيجيات لعلاجها. يهدف البحث قبل السريري إلى المساعدة في تعلم الانقراض والحث على اللدونة المستهدفة في دوائر الانقراض لتوحيد الذاكرة المشكلة حديثا. تحفيز العصب المبهم (VNS) هو نهج قوي يوفر إطلاقا زمنيا ومحددا للدائرة للناقلات العصبية ، مما يؤدي إلى تعديل الشبكات العصبية المنخرطة في مهمة مستمرة. يعزز VNS توحيد الذاكرة في كل من الفئران والبشر ، كما أن إقران VNS مع التعرض للإشارات المشروطة يعزز توحيد تعلم الانقراض في الفئران. هنا ، نقدم بروتوكولا مفصلا لإعداد الأجزاء المصنوعة حسب الطلب والإجراءات الجراحية المطلوبة ل VNS في الفئران. باستخدام هذا البروتوكول ، نوضح كيف يمكن ل VNS تسهيل انقراض استجابات الخوف المشروطة في مهمة تكييف الخوف السمعي. بالإضافة إلى ذلك ، نقدم دليلا على أن VNS يعدل اللدونة المشبكية في المسار الفاصل الجبهي الإنسي تحت الحوفي (IL) والمركب القاعدي الجانبي للوزة (BLA) ، والذي يشارك في التعبير عن ذاكرة الانقراض وتعديلها.

المقدمة

يوفر تكييف الخوف الكلاسيكية نموذج حيواني تستخدم على نطاق واسع لدراسة الأساس البيولوجي للاضطرابات القلق. خلال تكييف الخوف، ويقدم حافز مكره (المثير غير الشرطي، الولايات المتحدة، على سبيل المثال، وهو footshock) بالتزامن مع التحفيز محايد، مثل لهجة و / أو سياق (التحفيز مكيفة، CS). خلال تكييف الخوف، تتشكل جمعيات بين CS والولايات المتحدة. في نهاية المطاف تقديم CS يتسبب وحده استجابة الخوف (استجابة مشروطة؛ CR). في خوف الانقراض، وقدم CS مرارا وتكرارا في غياب الولايات المتحدة، مما تسبب في CR للحد تدريجيا 1. وبالتالي، انقراض الخوف مشروط هو عملية نشطة التي يتم الموهن الاستجابات السلوكية مخيفة للمثيرات محايدة عندما لم يعد التنبؤ بالنتائج مكره. انقراض الردود مشروطة يتطلب ثبات الذكريات الجديدة التي تتنافس مع الجمعيات المستفادة. ومن السمات المميزة لاضطرابات القلق هي IMPAانقراض IRED 2-4. وبالتالي، انقراض الخوف مشروط في النماذج الحيوانية تعد بمثابة نموذج هام لكل من التعلم المثبطة وكنموذج من العلاج السلوكي لاضطرابات القلق الإنسان 5،6.

لأن هناك تطابقا وثيقا بين الخوف والقلق البشري، ويعتقد أن هذه الدراسات يمكن أن توفر نظرة ثاقبة لطبيعة بيولوجية من الاضطرابات المتعلقة القلق مثل اضطراب ما بعد الصدمة، وسوف تساعد على وضع استراتيجيات للتعامل معها. هدف مهم من البحوث قبل السريرية هو لمساعدة التعلم والانقراض للحث على اللدونة المستهدفة في الدوائر الانقراض لتعزيز التعلم الانقراض. تحفيز العصب المبهم (VNS) هو نهج neuroprosthetic الغازية الحد الأدنى التي يمكن استخدامها لتوفير التشكيل الزماني ودائرة محددة ضيقة من مناطق الدماغ ونقاط الاشتباك العصبي تشارك في مهمة مستمرة. وكانت سلسلة من الدراسات التي أجريت مؤخرا من مجموعة مايكل Kilgard في جامعة تكساس في دالاس ديكأظهرت أن الاقتران VNS مع منفصلة المنبهات الحسية أو الحركية (على سبيل المثال، لهجة أو سحب رافعة) فعالة للغاية في تعزيز اللدونة القشرية لعلاج طنين 7، أو للتغلب على العجز الحركي التالية السكتة الدماغية 10/08. بالإضافة إلى ذلك، غير الوحدة VNS أن يحدث في غضون فترة زمنية قصيرة النافذة بعد التعلم يعزز بالمثل اللدونة القشرية ويعزز توطيد الذاكرة في الفئران والبشر 11-13.

النظر في دور العصب المبهم في مسار غير المتجانسة، فإنه ليس من المستغرب أنه يمكن أن تشارك في تحوير الذكريات واللدونة متشابك. درجة عالية من الأحداث العاطفية تميل إلى إنتاج ذكريات أقوى من ذكريات غير عاطفية. هذا هو الأرجح بسبب تأثير هرمونات التوتر على توطيد الذاكرة. Posttraining إدارة هرمون التوتر الأدرينالين يعزز توطيد الذاكرة في الحيوانات البشرية وغير البشرية، ولكن الأدرينالين لا يعبر الدم في الدماغ من العوائق 14، 15 . لذلك، يجب أن الإجهاد الناجم عن إطلاق الأدرينالين يؤثر على الدماغ بطريقة غير مباشرة لتعزيز توطيد الذاكرة. وتشير أدلة قوية على أن العصب المبهم قد يكون الرابط بين تعميم الأدرينالين والدماغ. وجدت مياشيتا ويليامز 16 أن إدارة النظامية من الأدرينالين زيادة المبهم اطلاق العصبية، وزيادة مستويات بافراز في اللوزة 17. إدارة النظامية من الأدرينالين لا يعزز توطيد الذاكرة عندما يتم حظر مستقبلات β الأدرينالية في اللوزة 18 مما يدل على أن العصب المبهم يلعب دورا في مسار الذي يحول التجارب إثارة عاطفيا إلى الذاكرة الطويلة الأمد.

وبالتالي، الاقتران VNS مع التدريب لديه القدرة على تعزيز تغيرات في الدماغ التي تدعم تعزيز الذاكرة والتعرض للمنبهات مكيفة في غياب التعزيز يعزز توطيد التعلم الانقراض في الفئران 19،20. نحن هنا وصف استخدام VNS لأداة سا لتعزيز اللدونة القشرية وتسهيل انقراض استجابة الخوف مشروطة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تتم جميع الإجراءات الموضحة في هذا البروتوكول وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية، والتي وافق عليها لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي من جامعة تكساس في دالاس.

1. بناء VNS الكفات

  1. إنشاء أداة الحفر بالنشر قبالة نهاية حادة من إبرة 22 ½ G.
  2. تشغيل نهاية حادة الآن من 22 ½ G إبرة على ملف المعدنية عدة مرات لتمهيدها. عقد الإبرة بزاوية 45º إلى ملف وتشغيله عدة مرات خلال الملف في حين تناوب عليه. سيؤدي هذا المعدن لتصبح أرق ولف الداخل. تنبيه: إدراج غيض من مشرط في نهاية قطع من إبرة وتناوب مع بعض قوة الهبوط في فض المعدن.
  3. استخدام مناظير مكبرة لتنفيذ الخطوات المتبقية في القسم 1.
  4. باستخدام مشرط (10 أو 15 شفرة) قطع 4 مم شرائح من الأنابيب.
  5. مكان واحد قطعة 4 مم علىمثقاب صغير أو أداة أخرى مماثلة في الشكل. هذا ومن المقرر أن يعقد الأنابيب في المكان في حين يتم التلاعب بها.
  6. حفر 4 ثقوب في أنابيب (الشكل 1A). يجب أن الثقوب جعل أربع نقاط من 2 مم 2 مم مربع وينبغي أن تكون نظيفة من دون حواف خشنة.
    ملاحظة: أداة الحفر يحتاج إلى resharpened (الخطوة 1.2) كل 2 أو 3 ثقوب. صعوبة مع هذه الخطوة يكاد يكون من المؤكد بسبب أداة الحفر غير حاد بما فيه الكفاية.
  7. مع الأنابيب لا تزال على قمة الحفر، واستخدام مشرط لقطع الأنابيب بالطول بين الثقوب بحيث اثنين من الثقوب في نهاية المطاف على جانبي قطع (الشكل 1B).
  8. باستخدام إبرة خياطة وخيوط الجروح، وتمرير الخيط من خلال الثقوب لإنشاء تزوير لوضع النهائي للصفعة حول العصب المبهم. نبدأ مع إبرة داخل الكفة وتمريرها من خلال واحدة من الثقوب، ثم انتقل مرة أخرى من خلال ثقب المجاور من الخارج (الشكل 1C). ربط الخيوطد معا ~ 2 سم من البلاستيك بحيث أنابيب وخيط جعل مثلث. السماح ~ 8 سم من الخيط بعد عقدة وتقليم. كرر العملية الثقوب على الجانب الآخر من الخفض. الأنبوب هو الآن على استعداد ليكون السلكية.
  9. إعداد الأسلاك لالأصفاد.
    1. قطع البلاتين الايريديوم الأسلاك إلى 70 ملم القطاعات.
    2. باستخدام أفضل نصيحة للشعلة والمجوهرات، وإنشاء لهب حاد مع مركز الأزرق الذي هو المكرر قدر الإمكان، واستخدامها لتجريد ~ 1 سم من الطلاء البلاستيكي من الأسلاك. تطبيق مركز الأزرق الشعلة إلى نهاية تجريده من السلك لإنشاء كرة صغيرة. تطبيق مركز الزرقاء من اللهب لعدة نقاط من الجزء العاري لدمج فروع سبعة معا. وسلك في هذه البقع تظهر على شبك.
    3. على الطرف الآخر من السلك، تطبيق مركز الزرقاء من اللهب حتى النهاية لإنشاء كرة صغيرة. تقليل تجريد البلاستيك على تحقيق هذه الغاية.
  10. سلك الكفة (1D الشكل).
    ملاحظة: سانتويجب أن يتم ملاحظة في القسم 1.10 تحت مناظير مكبرة.
    1. الشريط الكفة أسفل باستخدام الخيوط بحيث يتم توجيه ذلك مع خفض يعمل أفقيا. سحب المواضيع ضيق بحيث يتم سحبها الكفة مفتوحة ثم شريط أسفل المواضيع.
    2. فهم في نهاية تكور من الجانب تجريده من السلك استعداد مع # 5 ملقط، ودفع من خلال ثقب أسفل اليمين. سحب ملقط للخروج من الحفرة، وترك في نهاية السلك في وسط الكفة.
    3. إعادة فهم نهاية تكور من سلك تجريد (الآن في منتصف صفعة) ودفعها من خلال ثقب العلوي الأيمن. سحب ملقط للخروج من الحفرة، وترك السلك مرت تماما من خلال الكفة وفضفاضة على الجانب العلوي من صفعة.
    4. إعادة فهم نهاية تكور من سلك تجريد (الآن خارج صفعة على الجانب العلوي)، ودفع مرة أخرى من خلال ثقب العلوي الأيمن من الداخل. مواصلة القيام بذلك حتى السلك هو في مكان آمن: الاختبار عن طريق الجر على الطرف الآخر من السلك.
      ملاحظة:خلال هذه العملية من الأهمية بمكان التفريق بين جردت / أجزاء معزولة من السلك. يجب تجريد السلك الذي يتوضع في نهاية المطاف في "الحوض" من الكفة، ولكن يجب أن تكون معزولة كل شيء دون ثقوب أسفل (خارج صفعة على الطرف السفلي). وهذا يضمن إيصال التيار فقط إلى العصب المبهم.
    5. فهم في نهاية تكور من الجانب معزول ودفعها من خلال ثقب الأيمن السفلي من الداخل من الكفة، حلقات حولها مرة واحدة.
    6. كرر الخطوات 1.10.2 - 1.10.5 على الجانب الأيسر من صفعة بحيث سلكين في نهاية المطاف الثابتة للأنابيب، واحد على الجانب الأيمن والآخر على الجانب الأيسر.
    7. وضع دبوس من الذهب في ذراع يد العون مع فتحة مواجهة. ملء الحفرة مع تدفق.
    8. لحام نهاية معزول من السلك (مرفق الآن إلى صفعة) في دبوس.
    9. السماح للجندى لتبريد، ومن ثم تذوب مرة أخرى. وهذا يضمن وجود اتصال جيد بين نهاية السلك وطnside من دبوس. تطبيق المزيد من جندى إذا لزم الأمر. تكرار للسلك الثاني.
    10. مع الخيوط التي تعمل للحق، بمناسبة قمة الكفة مع علامة دائمة. بمناسبة أيضا دبوس من الذهب تعلق على الرصاص العلوي.

2. بناء مترسة الرأس لتنشيط العصب الحائر الإدخال الموقع

  1. قطع 30 مم شرائح 26 AWG الأسلاك النحاسية. تجريد جزء صغير على كل نهاية.
  2. قطع في نهاية ضيقة من دبابيس الذهب فضفاضة وحام نهاية تجريده من السلك إلى نهاية قطع من الذهب دبوس. إنشاء مجمعين سلك / دبوس لكل موقع المدخلات المطلوبة. وضع الموصل في يد العون وحام نهاية السلك من مركب سلك / دبوس إلى كل من اثنين من الأسنان fluxed الموصل (الشكل 2G).
  3. علامة واحدة من الأسلاك مع sharpie. أثناء الجراحة، وضع الغرسة مع السلك منقاري ملحوظ إلى سلك غير المراقب.

3. VNS جراحة

  1. إنشاء الأدوات الزجاجية المخصصة لمعالجة vaguالصورة الأعصاب أثناء الجراحة.
    1. استخدام الزجاج البورسليكات لسحب micropipette بحيث يكون لها طرف مدبب طويل. إذا لم مجتذب ماصة متاح، وكسر الزجاج لإنشاء حافة أطول.
    2. عقد نهاية غير مدبب من ماصة بقطعة قماش سميكة (لمنع الحروق) واضغط على كسر نهاية مدبب / إلى سطح مقاوم للحريق على نحو سلس أثناء تطبيق اللهب الأزرق من شعلة المجوهرات إلى نهاية مدبب. الزجاج سوف ينحني كما يتم الضغط عليه إلى السطح. تطبيق اللهب حتى ربط أو أشكال شكل J.
  2. العمليات الجراحية VNS
    1. جمع وتعقيم جميع الأدوات. إعداد، منطقة العمليات الجراحية ساخنة الصحية.
    2. تخدير الحيوانات مع الكيتامين / زيلازين (85 ملغ / كغ، 5mg / كغ، IP). تقييم عمق الطائرة التخدير عن طريق مراقبة الالفاظ الحيوان والانسحاب ردود الفعل في الاستجابة إلى أخمص القدمين و / أو الذيل معسر.
    3. يحلق أعلى الرأس والجانب الأيسر من الرقبة الحيوان. حماية العينين الحيوان مع شركة التعدينالنفط القاعدة أو مرهم للعين. تطبيق محلول اليود التطهير بشاش ثم الكحول بشاش إلى المناطق حلق. أكرر مرة واحدة.
    4. حقن 0.05 مل marcaine تحت الجلد في الجزء العلوي من الرأس والسماح للبلعة لتفريق حين وضع الحيوان في الصك التجسيمي.
    5. استخدام مشرط لجعل شق في الجلد على الجمجمة لفضح كل من امدا وbregma. إعداد مسار الكفة باستخدام الملقط حادة لنفق تحت الجلد من موقع شق من الناحية اليسرى في الجبهة من الأذن إلى الجانب الأيسر من الرقبة.
    6. سحب موقع شق مفتوح مع المرقأة. باستخدام قطعة قطن، وتطبيق بيروكسيد الهيدروجين في الجمجمة يتعرض لإزالة أي نوع من الأنسجة المتبقية.
    7. باستخدام مشرط، حفر اثنين من الثقوب بداية الضحلة في الجمجمة لوضع مسامير الربط. وينبغي أن توضع بعيدا بما فيه الكفاية الى جانب اتاحة الفرصة غرفة للزرع، ولكن ليست قريبة جدا من الأنسجة المحيطة بها. تجنب وضع مسامير مباشرة على خط الوسط.
      1. مع قوةملاحظة ومفك، حملة لولب العظام في كل من الثقوب. يجب أن تكون مسامير ضيق في الثقوب، مع قبعات 2-3 مم فوق سطح الجمجمة للسماح للغرفة لالاكريليك لملء تحت وحول مسامير.
    8. ملء الفراغ تحت، حولها، وبين مسامير مع كمية صغيرة من الاكريليك، وتجنب الأنسجة المحيطة بها. ثم ضع كمية أكبر من الاكريليك في وسط الجمجمة بين المسمارين.
    9. الاستيلاء على الزرع حتى يتم توجيه الأسلاك ملحوظ منقاري إلى سلك تحمل علامات ومكان بسرعة عملية الزرع في الاكريليك، مع الحرص على عدم الحصول على الاكريليك إلى دبابيس الذهب، ومنطقة قفل، أو موقع الإدخال على القمة. مرة واحدة في وضع السماح لضبط ~ 5 دقائق حتى تجف. ويمكن أيضا أن يتم ذلك باستخدام ذراع التجسيمي للحصول على الدعم. ملء أي شقوق أو فجوات بين الزرع والجمجمة مع مزيج اللزوجة المنخفضة من الاكريليك. السماح ليجف.
    10. استخدام مناظير مكبرة لتنفيذ الخطوات المتبقية في القسم 3.2.
    11. إزالة عشرالبريد الحيوان من الصك التجسيمي. وضع الحيوان على جانبها الأيمن، وتناوب عليه قليلا نحو موقف بطني.
    12. إجراء شق صغير حوالي أكثر من حبل الوريد الأيسر. وينبغي أن يكون عظم الفك والترقوة مسافة واحدة تقريبا لموقع شق. توسيع شق باستخدام تشريح حادة حتى يتم الوصول إلى الطبقة العضلية. يجب أن يكون قصي خشائي، قصي لامي، واللامية الكتفية العضلات مرئية. استخدام الكامشات العضلات للحفاظ على موقع مفتوحة.
    13. يواصل تشريح حادة على طول الشقوق الطبيعية بين العضلات. ابحث عن النبض من الشريان السباتي. سوف يتوجه من خلال العضلات نحو ينبض كشف الشريان السباتي. سحب عضلات الظهر مع ضام العضلات. غمد تحتوي على الشريان السباتي يحتوي أيضا على العصب المبهم. فظة بعناية تشريح غمد مع مقص.
    14. تحديد العصب المبهم. وهو أكبر عصب في غمد السباتي وعادة ما تكون الى جانب والحيوان الأيسر من الشريانولكن يمكن العثور على أي من الجانبين. التبديل إلى الأدوات الزجاجية المخصصة وفصل العصب المبهم من الشريان السباتي. وينبغي أن يكون العصب خالية من أي نوع من الأنسجة الأخرى لا يقل عن 5 مم.
    15. من شق على رأسه، وذلك باستخدام الخيوط على جانب الكفة المقابلة ليؤدي، وسحب الكفة من خلال نفق تحت الجلد التي سبق بالملقط أو المرقأة الصغيرة. دفع من خلال الأنسجة في موقع شق على الرقبة.
    16. رفع بلطف العصب حتى باستخدام الأدوات الزجاجية ودفع المواضيع على جانب الكفة المقابلة ليقود تحت العصب. سحب المواضيع على طول الطريق من خلال، مع الحرص على عدم فرك ضد العصبية. يجب أن تكون الكفة متاخم لالعصبية.
    17. التأكد من أنها موجهة الكفة مع 'رأس' الجانب ملحوظ متفوقة. إسقاط الأعصاب في منتصف الكفة. يجب أن العصب الآن تكمن في كلا الأسلاك في القاع الكفة (الشكل 2B). ربط الخيوط معا لإغلاق الكفة.
    18. على مترسة الرأس، والمكونات دبابيس تعلق على الكفة إلى دبابيس الذهب على موقع مدخلات التحفيز. المكونات دبوس ملحوظ في دبوس من الذهب تعلق على الأسنان الأكثر الأمامي على موقع مدخلات المحاكاة.
    19. للتحقق من أن الكفة يحفز بشكل صحيح العصب المبهم، نفذ وقف التنفس الاختبار من قبل، وربط مشجعا للموقع مساهمة التحفيز على مترسة الرأس وتشغيل التحفيز (0.2 مللي أمبير، 60 هرتز، تصل إلى 10 ثانية). يجب أن يتوقف التنفس لفترة وجيزة، وينبغي أن ينخفض ​​معدل ضربات القلب، والتحقق من وظيفة الكفة.
    20. تأمين العلامات على موقع مدخلات التحفيز مع الاكريليك. تغطية الأسلاك وتحقق من أن يتعرض دبابيس وأسلاك لا تؤدي إلى دوائر قصيرة. استخدام الاكريليك لضمان سلاسة على أي عقبات أو لملء أي ثغرات. السماح ليجف.
    21. خياطة أغلقت كلا الموقعين شق. حقن 0.05 مل marcaine تحت الجلد بالقرب من موقع شق الرقبة. تطبيق مرهم مضاد حيوي لشق المواقع. اختياريا، وترك موصل الذكور في مكان على موقع مدخلات التحفيز لمنع تلف أو انسداد أثناء عملية الشفاء.
    22. علاج مع المضادات الحيوية ومتابعة الرعاية القياسية بعد العمليات الجراحية بما في ذلك التسكين المناسب. عودة الحيوانات إلى مرفق إيواء الحيوانات بعد أن تستعيد الحركة. سماح 5 أيام للتعافي. لضمان طول العمر الأقصى وظيفة مترسة الرأس، حيوانات المنزل منفردة للفترة المتبقية من التجربة.
      ملاحظة: الفئران الشام VNS الخضوع لعملية جراحية نفسها، ومع ذلك تم تصميم الدائرة لقصيرة في مستوى مترسة الرأس (أي، هو مزروع في مترسة الرأس ويتم فصل العصب المبهم من الشريان السباتي، ولكن يتم وضع أي صفعة الكهربائي في جميع أنحاء العصب).

4. السمعية تكييف الخوف

ملاحظة: هذا البروتوكول تكييف الخوف هو أكثر كثافة من أكثر 21 لأن الهدف من هذه التجارب هو تعزيز الانقراض. معتدلا مع تكييف الخوف من أن تنطفئ بسهولة، ويمكن لها تأثير الكلمة يحجب هذا التعزيز.

  1. حيوانات المنزل على 12 ساعة ضوء / دورة الظلام مع إعلان بالمال وبالشهرة أيضا الحصول على الغذاء والماء. التعامل مع الحيوانات يوميا خلال التعافي من الجراحة.
  2. إعداد جهاز تكييف والاختبار، والتي تتكون من مربع هواء فعال يضم في الغرفة-الموهن الصوت (الشكل 2C). مربع هواء فعال له جدران من البلاستيك الشفاف، 20 × 20 × 20 سم، ويحتوي على الفولاذ المقاوم للصدأ شبكة الكلمة التي يتم توصيلها إلى مولد صدمة القدم. استخدام البيت الأبيض ضوء لإلقاء الضوء على غرفة لتسجيل الفيديو. استخدام كيلوهرتز 9، 85 ديسيبل SPL النغمة مثل التحفيز مشروط.
  3. السلوك سجل باستخدام الكاميرا الرقمية الموجودة داخل الغرفة، فوق مربع هواء فعال. عرض ورصد الدورة على جهاز كمبيوتر تقع خارج الغرفة السلوك. حفظ ملفات الفيديو لتحليلها لاحقا.
  4. مسح غرف مع الايثانول 70٪ قبل وبعد كل دورة للقضاء على العظة الشمية.
  5. الخوف شرط الفئران لمدة 2 يوم (الشكل 3A). تأكد من أن الفئران ليست فييخشى الحظ من لهجة من خلال تقديم 5 طن (9 كيلو هرتز، 85 ديسيبل، 30 ثانية) في اليوم الأول. تأكد من أن مستويات تجميد تكاد لا تذكر.
    1. اتبع هذه العروض لهجة الأولية مع 8 لهجة footshock (1 ثانية، و 0.5 مللي أمبير) حدودا على كل من 2 أيام متتالية. تكرار حدودا لهجة footshock مرة أخرى في اليوم الثاني. تختلف بين التحفيز الفاصلة (ISI) بين 2 و 4 دقيقة، بمتوسط ​​3 دقائق لكل المحاكمة. بطريقة عشوائية النقطة التي الصدمة يحدث خلال لهجة.
  6. في اليوم الثالث، اختبار قوة للرابطة لهجة / الصدمة. لعب 4 طن مع ISI 3، 4، أو 5 دقائق (4 دقائق في المتوسط) في غياب footshocks وتسجيل سلوك الحيوانات تجميد خلال العروض لهجة وخلال فترة ما بين التحفيز-فترات باعتبارها تدابير للاستجابة الخوف مكيفة (CFR).
  7. في يوم 4، يبدأ التدريب الانقراض مع VNS أو الشام VNS.
    1. المكونات الفئران في مشجعا عن طريق إدخال موصلات للذكور من stimulatoص في ​​موقع مدخلات التحفيز. مكان الحيوانات في الغرفة (الشكل 2A، 2C). تعيين مشجعا إلى 0.4 مللي أمبير، و 500 ميكرو ثانية عرض النبض في 30 هرتز. تعيين التحفيز لمدة إجمالية قدرها 30.15 ثانية، بدأ 150 ميللي ثانية قبل ظهور لهجة. الحيوانات لعب 4 نغمات (كما في الخطوة 4.6) وإقران كل عرض لهجة مع VNS أو الشام VNS.
  8. اختبار دوري للسلامة الكهربائية من صفعة ومدخلات الموقع باستخدام الذبذبات.
    1. المكونات الحيوان في وضعها الطبيعي كما وتقسيم الإخراج من التحفيز والتشجيع لالذبذبات.
    2. تعيين مجموعة على الذبذبات كما -20 V إلى +20 V وتشغيل التحفيز. الموجي من التحفيز 30 هرتز يجب أن يكون مرئيا على الذبذبات. التحفيز تتجاوز 10 V في حجم تشير مقاومة عالية وصفعة يعمل بشكل غير صحيح أو اتصال في موقع مدخلات التحفيز.
  9. لاختبار تأثير VNS على التدريب الانقراض تشغيل اختبار CFR الثاني (كما في الخطوة 4.6)في يوم 5. تسجيل الوقت الذي يقضيه تجميد أثناء العروض التقديمية لهجة ومقارنة لتجميد خط الأساس المسجل خلال اختبار CFR الأول (الخطوة 4.6).
  10. تحليل أشرطة الفيديو باستخدام مراقب مستقل وهو أعمى لظروف العلاج. قياس الوقت الذي يقضيه تجميد أثناء العروض التقديمية لهجة باستخدام ساعة توقيت. تجميد يعرف بأنه الجمود الكامل، وخلالها الفئران يسلك التنفس السريع، رئيس خفضت، ونشر الكفوف 22. يمكن تقسيم تحليل السلوك تجميد إلى مرحلتين: خلال عرضه لهجة وأثناء الفاصل الزمني بين التحفيز.

5. في فيفو تسجيلات مستدعى امكانات الحقل

ملاحظة: هذه الخطوة اختيارية. يتم تسجيل امكانات الحقل أثار للدروع 24 ساعة بعد اختبارات الإعادة (يوم 5) في الفئران تخدير الأيزوفلورين التي تقام في جهاز التجسيمي، وفقا للإجراءات القياسية 23،24.

  1. جمع وتعقيم جميع الأدوات.
  2. لحث التخدير مع isoflurane (5٪ في الأكسجين 100٪، معدل التدفق 1L / دقيقة) في غرفة البلاستيك الشفاف. تقييم عمق الطائرة التخدير عن طريق مراقبة الالفاظ الحيوان والانسحاب ردود الفعل في الاستجابة إلى أخمص القدمين و / أو الذيل معسر. استخدام الزيوت المعدنية أو مرهم للعين لحماية العينين.
  3. حقن 0.05 مل marcaine تحت الجلد في الجزء العلوي من الرأس والسماح للبلعة لتفريق. استخدام مشرط والمرقأة لإزالة مترسة الرأس من الجمجمة. استخدام القوة أقل قدر ممكن لتجنب حجب bregma.
  4. وضع الحيوان في الصك التجسيمي. استخدام مشرط لتوسيع شق لفضح كل من امدا وbregma. الحفاظ على الطائرة التخدير مع isoflurane (3٪ في الأكسجين 100٪، معدل التدفق 1 لتر / دقيقة) عن طريق الرؤوس.
  5. حفر ثقوب في الجمجمة فوق القشرة قبل الجبهية infralimbic (IL) واللوزة basolateral (BLA). يخفض الميكروية الزجاج (2M بوكل؛ 1-2 MOhms المقاومة) في جيش تحرير بلوشستان (D / V: 7.2، A / P: 2.7، M / L: 4.9 من bregma) وstimulatايون الكهربائي في المنطقة IL من قشرة الفص الجبهي وسطي (D / V: 4.6، A / P: 3.0 M / L: 0.7 من bregma) (الشكل 4A).
  6. تحفيز IL لاستحضار العبوات الخارقة للدروع في جيش تحرير بلوشستان. تم الحصول على بيانات هو مبين في الشكل 4 بالإعدادات التالية: A نبض التحفيز من 0.3 مدة ميللي ثانية، وذلك باستخدام كثافة التحفيز التي تتوافق مع 40٪ من الكثافة الحالية الحد الأدنى الذي أثار رد فعل ميدان القصوى (على أساس منحنى المدخلات والمخرجات تحديدها قبل جمع البيانات الأساسية)، تسليم كل 15 ثانية.
  7. جمع البيانات الأساسية لمدة لا تقل عن 10-15 دقيقة قبل تحريض اللدونة متشابك.
    ملاحظة: بروتوكول يستخدم لاستحضار اللدونة متشابك سوف تختلف مع متطلبات التجارب، ويجب أن يتم اختيار بعناية من قبل كل مجرب. وتظهر بيانات في الشكل 4C التغييرات في EFP التالية 3 رشقات نارية من 100 البقول في 50 هرتز (2 ثانية)، مع فترات بين انفجار 20 ثانية في شدة التيار الدنيا التي تستثيرد أقصى قدر من الاستجابة الميدانية.
  8. قياس السعة من المتفجرات المخترقة للدروع والتي تمثل الفرق بين متوسط ​​نافذة مللي ثانية 5 قبل القطع الأثرية التحفيز ومتوسط ​​نافذة 5 ميللي ثانية حول 20-25 ميللي ثانية بعد القطع الأثرية التحفيز، الموافق ذروة السلبية للإمكانات المجال. تطبيع البيانات الأساسية وتحديد متوسط ​​خط أساس 10 دقيقة الى 100٪. استخدام سعة EFP بلغ متوسط ​​فترة 10 دقيقة أخرى بعد تحريض اللدونة (على سبيل المثال، 40-50 دقيقة بعد الاستقراء) لتقييم التغيرات على المدى الطويل في EFP السعة.
  9. بعد نهاية تسجيل قطع رأس تخدير الحيوان واستخراج الدماغ. إعداد الأنسجة للتحقق النسيجي للوضع قطب كهربائي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يوضح هذا القسم أمثلة من النتائج التي يمكن الحصول عليها باستخدام VNS في تركيبة مع التعلم الانقراض للحد من التعبير عن استجابة الخوف مكيفة في الفئران. ليوم 1 و 2 (السمعية تكييف الخوف)، تم تدريب الفئران على مهمة تكييف الخوف السمعية التي تم إقران footshocks مع لهجة. في يوم 3 (قبل اختبار العلاج)، وقدمت نغمات في غياب footshocks لقياس مستويات تجميد ويستنتج اكتساب استجابة الخوف مشروطة. في يوم 4 (المعاملة) الفئران تلقوا تدريبا الانقراض مجموعة محددة والعلاج: تم إقران 4 عروض لهجة مع أي VNS أو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

نقدم هنا البروتوكول الذي يستخدم لتسهيل انقراض الخوف مشروط خلال جلسة واحدة من التعرض للمنبهات مشروطة 19 و لتعديل اللدونة في مسار بين القشرة infralimbic واللوزة basolateral التي قد توسط الانقراض التعلم 20. خطوة حاسمة لنجاح هذا البروتوكول هو تسليم مناسب من VNS خلال التدريب الانقراض. ولذلك، ينبغي إيلاء عناية خاصة لبناء الأقطاب صفعة ووضع الكفة حول العصب المبهم. في عملية البناء من القطب صفعة من المهم للتأكد من أن الجزء الظاهر من الأسلاك في المكان الصحيح. وبالمثل، أ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس للمؤلفين مصالح أو صراعات متنافسة.

شكر وتقدير

< p class = 'jove_content'>تم دعم هذا البحث من قبل المعهد الوطني للصحة العقلية MH 086960-01A1 (كريستا ك. ماكنتاير).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الكحول
الأتروبينفيشرA0132-5G
البيتادينهنري شاين69066950
بيروكسيد الهيدروجين  CVS209478
الكيتامينهنري شاين 1129300
ماركينهنري شاين6312615
زيت معدنيCVS152355
نيوسبورينCVS629451
مستودع الأكسجينالمنزلي304179
بينيسيلينفيشرPENINNA-10MU
مستودع البروبانالمنزلي304182
زيلازينهنري شاين4019308
أدوات
المجوهرات الشعلةسميث المعدات23-1001D
إبرة الخياطةWalgreens441831
# 5 ملقط (2)أدوات العلوم الدقيقة11254-20
لحام الحديدهوم ديبوت 203525863
AmScope SM-4TX-144A 3.5X-45X مجهر ستيريو بوم لوحة الدوائر + 144 LEDAmScopeSM-4TX-144A
أنظمة مساعدة الأيديA-M 726200
مشرط بليد حاملأدوات العلوم الدقيقة10003-12
ملفمعدني هوم ديبوت6601
حاكمالمنزل الاعتماد202035324
المرقئ المنحني أدوات العلوم الدقيقة130009-12
أدوات العلوم الدقيقة14058-09
ملعقةأدوات
مفك براغي صغيرهوم ديبوت646507
نظام سحب المثبت المغناطيسيأدوات العلوم الدقيقة18200-04 ، 18200-01 ، 18200-05
وسادة تسخينWalgreens30294
كليبرزWalgreens277966
دبابيسSharpie125328
ملقط دائريأدوات العلوم الدقيقة11103-09
أدوات زجاجية مخصصة للماصات الدقيقة (شكل J ومستقيم) - أداة Sutter الزجاجية البورسليكاتB150-110-10
أدوات العلوم الدقيقة ملقط Adson11006-12
الأصفاد
أنابيبBraintree Scientific IncMRE-065
سلك إيريديوم البلاتينيMedwire10IR9 / 49T
دبابيس الذهبمطحنة-ماكس1001-0-15-15-30-27-04-0
خياطة الخيطهنري شاين100-5797
22 جم إبرفيشر & nbsp ؛14-815-525
شريط ورقيفيشر   ؛03-411-602
مستودع منزلي اللحام327793
Flux هوم ديبوت300142
شفرة مشرط, 10 أو 15Stoelting52173-10
أنابيب مختبر السيلاستيك .51 مم معرف × .94 مم ODفيشر & nbsp ;508-002
أغطية
الرأس (ذكر)Omnetics Connector CorporationA25001-004
قطع غطاء الرأس (أنثى)Omnetics Connector CorporationA24001-004
Teets أنظمة الأكريليك والسائل والمسحوق للأسنان525000 ، 526000
26 مقياس دبابيس الأسلاك النحاسية الصلبة1016882  
مسامير العظام الجراحية
Stoelting + CB33: C6151457
شفرات مشرط ، 10 أو 15Stoelting52173-10
1 مل محاقنفيشر14-826-261
22 جم إبرفيشر   ؛14-815-525
27 جرام إبرفيشر14-826-48
2 "× 2" شاشفيشر22-362-178
مسحاتفيشر19-120-472
وسادات جروPetCo1310747
كيم مناديلفيشر06-666-A
غرفة والإعداد السلوكي 
خزانة قاعدة أمامية معدنية أجش (30WX19DX34H)هوم ديبوت100607961
حاجز هادئ وخجول ؛ مادة عازلة للصوت عالية الدقة (ورقة) (PSA)soundproofcow.com10203041
لوحة رغوة صوتية ملتويةsoundproofcow.comمحفز
موديل 2100A-M Systems720000
كاميرا رقمية - كاميرا ويب لوجيتك C210لوجيتكB003LVZO88
MatLabMathworks.com
مقياس السيوب 10 ميجاهرتز مقياس الذبذبات أحادي القناةCQ5010C
OxyLED T-01 DIY Stick-on Anywhere 4-LED Touch Tap LightOXYLEDB00GD8OKY0
5k ohm potentiomterAlphaElectronics B00CTWDHIO
Extech 407730 40 إلى 130 ديسيبل مقياس مستوى الصوت الرقميExtech InstrumentsB000EWY67W
DSCK-C إخراج مزدوج ، مشوش شركة ShockerKinder Scientific
العلوم الدقيقة قطع موصل نبض معزول 10432400 Co

المراجع

  1. Quirk, G. J., Mueller, D. Neural mechanisms of extinction learning and retrieval. Neuropsychopharmacol. 33 (1), 56-72 (1038).
  2. Milad, M. R., Orr, S. P., Lasko, N. B., Chang, Y., Rauch, S. L., Pitman, R. K. Presence and acquired origin of reduced recall for fear extinction in PTSD: results of a twin study. J Psychiat Res. 42 (7), 515-520 (2008).
  3. Jovanovic, T., Norrholm, S. D., Blanding, N. Q., Davis, M., Duncan, E., Bradley, B., Ressler, K. J. Impaired fear inhibition is a biomarker of PTSD but not depression. Depress Anxiety. 27 (3), 244-251 (2010).
  4. Norrholm, S. D., et al. Fear extinction in traumatized civilians with posttraumatic stress disorder: relation to symptom severity. Biol Psychiat. 69 (6), 556-563 (2011).
  5. Phelps, E. A., LeDoux, J. E. Contributions of the amygdala to emotion processing: from animal models to human behavior. Neuron. 48 (2), 175-187 (2005).
  6. Pape, H. C., Paré, D. Plastic synaptic networks of the amygdala for the acquisition, expression, and extinction of conditioned fear. Physiol Rev. 90 (2), 419-463 (2010).
  7. Engineer, N. D., et al. Reversing pathological neural activity using targeted plasticity. Nature. 470 (7332), 101-104 (2011).
  8. Porter, B. A., et al. Repeatedly pairing vagus nerve stimulation with a movement reorganizes primary motor cortex. Cereb Cortex. 22 (10), 2365-2374 (2012).
  9. Hays, S. A., et al. Vagus nerve stimulation during rehabilitative training improves functional recovery after intracerebral hemorrhage. Stroke. 45, 3097-3100 (2014).
  10. Khodaparast, N., et al. Vagus nerve stimulation delivered during motor rehabilitation improves recovery in a rat model of stroke. Neurorehab Neural Re. 28 (7), 698-706 (2014).
  11. Clark, K. B., Krahl, S. E., Smith, D. C., Jensen, R. A. Post‐training unilateral vagal stimulation enhances retention performance in the rat. Neurobiol Learn Mem. 63 (3), 213-216 (1995).
  12. Clark, K. B., Smith, D. C., Hassert, D. L., Browning, R. A., Naritoku, D. K., Jensen, R. A. Posttraining electrical stimulation of vagal afferents with concomitant vagal efferent inactivation enhances memory storage processes in the rat. Neurobiol Learn Mem. 70 (3), 364-373 (1998).
  13. Clark, K. B., Naritoku, D. K., Smith, D. C., Browning, R. A., Jensen, R. A. Enhanced recognition memory following vagus nerve stimulation in human subjects. Nat. Neurosci. 2, 94-98 (1999).
  14. McGaugh, J. L. amygdala modulates the consolidation of memories of emotionally arousing experiences. Annu Rev Neurosci. 27, 1-28 (2004).
  15. McGaugh, J. L., Roozendaal, B. Role of adrenal stress hormones in forming lasting memories in the brain. Curr Opin Neurobiol. 12, 205-210 (2002).
  16. Miyashita, T., Williams, C. L. Epinephrine administration increases neural impulses propagated along the vagus nerve: Role of peripheral beta-adrenergic receptors. Neurobiol Learn Mem. 85 (2), 116-124 (2006).
  17. Williams, C. L., Men, D., Clayton, E. C., Gold, P. E. Norephinephrine release in the amygdala after systemic injection of epinephrine or escapable footshock: contribution of the nucleus of the solitary tract. Behavioral Neurosci. 112 (6), 1414-1422 (1998).
  18. Liang, K. C., Juler, R. G., McGaugh, J. L. Modulating effects of post-training epinephrine on memory: involvement of the amygdala noradrenergic system. Brain Res. 368 (1), 125-133 (1986).
  19. Peña, D. F., Engineer, N. D., McIntyre, C. K. Rapid remission of conditioned fear expression with extinction training paired with vagus nerve stimulation. Biol Psychiat. 73 (11), 1071-1077 (2013).
  20. Peña, D. F., Childs, J. E., Willett, S., Vital, A., McIntyre, C. K., Kroener, S. Vagus nerve stimulation enhances extinction of conditioned fear and modulates plasticity in the pathway from the ventromedial prefrontal cortex to the amygdala. Front Behav Neurosci. 8 (327), (2014).
  21. Maren, S. Overtraining does not mitigate contextual fear conditioning deficits produced by neurotoxic lesions of the basolateral amygdala. J Neurosci. 18 (8), 3088-3097 (1998).
  22. Blanchard, R. J., Blanchard, D. C. Crouching as an index of fear. J Comp Physiol Psych. 67 (3), 370-375 (1969).
  23. Maroun, M. Stress reverses plasticity in the pathway projecting from the ventromedial prefrontal cortex to the basolateral amygdala. Eur J Neurosci. 24 (10), 2917-2922 (2006).
  24. Moussawi, K., et al. N-Acetylcysteine reverses cocaine-induced metaplasticity. Nat Neurosci. 12, 182-189 (2009).
  25. Paintal, A. S. Vagal sensory receptors and their reflex effects. Physiol. Rev. 53 (1), 159-227 (1973).
  26. Aalbers, M., Vles, J., Klinkenberg, S., Hoogland, G., Majoie, M., Rijkers, K. Animal models for vagus nerve stimulation in epilepsy. Exp Neurol. 230 (2), 167-175 (2011).
  27. Ricardo, J. A., Koh, E. T. Anatomical evidence of direct projections from the nucleus of the solitary tract to the hypothalamus, amygdala, and other forebrain structures in the rat. Brain Res. 153, 1-26 (1978).
  28. Takigawa, M., Mogenson, G. J. A study of inputs to antidromically identified neurons of the locus coeruleus. Brain Res. 135 (2), 217-230 (1977).
  29. Groves, D. A., Bowman, E. M., Brown, V. J. Recordings from the rat locus coeruleus during acute vagal nerve stimulation in the anaesthetised rat. Neurosci Lett. 379 (3), 174-179 (2005).
  30. Manta, S., Dong, J., Debonnel, G., Blier, P. Enhancement of the function of rat serotonin and norepinephrine neurons by sustained vagus nerve stimulation. J Psychiatr Neurosci. 34 (4), 272-280 (2009).
  31. Manta, S., El Mansari, M., Debonnel, G., Blier, P. Electrophysiological and neurochemical effects of long-term vagus nerve stimulation on the rat monoaminergic systems. Int J Neuropsychoph. 16 (2), 459-470 (2013).
  32. Dorr, A. E., Debonnel, G. Effect of vagus nerve stimulation on serotonergic and noradrenergic transmission. J Pharmacol Exp Ther. 318, 890-898 (2006).
  33. Follesa, P., et al. Vagus nerve stimulation increases norepinephrine concentration and the gene expression of BDNF and bFGF in the rat brain. Brain Res. 1179 (7), 28-34 (2007).
  34. Biggio, F., et al. Chronic vagus nerve stimulation induces neuronal plasticity in the rat hippocampus. Int J Neuropsychoph. 12 (9), 1209-1221 (1017).
  35. Nichols, J. A., Nichols, A. R., Smirnakis, S. M., Engineer, N. D., Kilgard, M. P., Atzori, M. Vagus nerve stimulation modulates cortical synchrony and excitability through the activation of muscarinic receptors. Neuroscience. 189, 207-214 (2011).
  36. Peters, J., Kalivas, P. W., Quirk, G. J. Extinction circuits for fear and addiction overlap in prefrontal cortex. Learn Memory. 16, 279-288 (2009).
  37. Ji, J., Maren, S. Hippocampal involvement in contextual modulation of fear extinction. Hippocampus. 17 (9), 749-758 (2007).
  38. Roosevelt, R. W., Smith, D. C., Clough, R. W., Jensen, R. A., Browning, R. A. Increased extracellular concentrations of norepinephrine in cortex and hippocampus following vagus nerve stimulation in the rat. Brain Res. 1119 (1), 124-132 (2006).
  39. Hassert, D. L., Miyashita, T., Williams, C. L. The effects of peripheral vagal nerve stimulation at a memory-modulating intensity on norepinephrine output in the basolateral amygdala. Behav Neurosci. 118 (1), 79-88 (2004).
  40. Ura, H., et al. Vagus nerve stimulation induced long-lasting enhancement of synaptic transmission and decreased granule cell discharge in the hippocampal dentate gyrus of urethane-anesthetized rats. Brain Res. 1492, 63-71 (2013).
  41. Zuo, Y., Smith, D. C., Jensen, R. A. Vagus nerve stimulation potentiates hippocampal LTP in freely-moving rats. Physiol Behav. 90 (4), 583-589 (2007).
  42. Shen, H., Fuchino, Y., Miyamoto, D., Nomura, H., Matsuki, N. Vagus nerve stimulation enhances perforant path-CA3 synaptic transmission via the activation of β-adrenergic receptors and the locus coeruleus. Int J Neuropsychophl. 15 (4), 523-530 (2012).
  43. Fibiger, H. C., Mason, S. T. The effects of dorsal bundle injections of 6-hydroxydopamine on avoidance responding in rats. Bitr J Pharmacol. 64 (4), 601-605 (1978).
  44. Mason, S. T. Fibiger H.C. 6-OHDA lesion of the dorsal noradrenergic bundle alters extinction of passive avoidance. Brain Res. 152, 209-214 (1978).
  45. McGaugh, J. L. Memory consolidation and the amygdala: a systems perspective. Trends Neurosci. 25 (9), 456-461 (2002).
  46. LaLumiere, R. T., Niehoff, K. E., Kalivas, P. W. The infralimbic cortex regulates the consolidation of extinction after cocaine self-administration. Learn Memory. 17, 168-175 (2010).
  47. Mueller, D., Cahill, S. P. Noradrenergic modulation of extinction learning and exposure therapy. Behav Brain Res. 208 (1), 1-11 (2010).
  48. Smith, R. J., Aston-Jones, G. α(2) Adrenergic and imidazoline receptor agonists prevent cue-induced cocaine seeking. Biol Psychiat. 70 (8), 712-719 (2011).
  49. Buffalari, D. M., Baldwin, C. K., See, R. E. Treatment of cocaine withdrawal anxiety with guanfacine: relationships to cocaine intake and reinstatement of cocaine seeking in rats. Psychopharmacol. (Berl). 223 (2), 179-190 (2012).
  50. De Ridder, D., Vanneste, S., Engineer, N. D., Kilgard, M. P. Safety and efficacy of vagus nerve stimulation paired with tones for the treatment of tinnitus: a case series). Neuromodulation. 17 (2), 170-179 (2014).
  51. Hays, S. A., et al. The timing and amount of vagus nerve stimulation during rehabilitative training affect poststroke recovery of forelimb strength. Neuroreport. 25, 676-682 (2014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة