ونحن لشرح تأثير يشابك الصلبة مع الريبوفلافين وUVA على محوري استطالة أرنب العين. وكان المستحث استطالة المحورية في الأرانب نيوزيلندا القديمة يوم 13 (الذكور والإناث) عن طريق خياطة الجفون العين اليمنى، (رفو الترص).
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الصلبة عبر ربط طريق ريبوفلافين والأشعة فوق البنفسجية-A الإشعاع للوقاية من قصر النظر المحورية في نموذج الأرنب
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الأفراد قصير النظر، ولا سيما مع قصر النظر الشديد، معرضون لخطر أعلى من المعتاد من إعتام عدسة العين، والزرق، وانفصال الشبكية والمشيمية و الشبكية تشوهات. وبالإضافة إلى ذلك، قصر النظر المرضية هو السبب الذي لا رجعة فيه شيوعا لضعف البصر والعمى 1-3. توضح دراستنا تأثير يشابك الصلبة باستخدام ريبوفلافين والأشعة فوق البنفسجية-A الإشعاع على تطوير قصر النظر المحوري في نموذج أرنب. وقد تم قياس طول محوري من مقلة العين بواسطة A-مسح بالموجات فوق الصوتية في نيوزيلندا الأرانب البيضاء الذين تتراوح أعمارهم بين 13 يوما (ذكور وإناث). العين ثم خضع 360 درجة peritomy الملتحمة مع يشابك الصلبة، تليها رفو الترص. وكان المستحث استطالة المحورية في الأرانب نيوزيلندا القديمة يوم 13 من خياطة الجفون العين اليمنى، (رفو الترص). تم تقسيم العينين في الأرباع، وكان كل ربع منطقتين التشعيع الصلبة، مع كل مساحة 0.2 سم مربع ودائرة نصف قطرها 4 مم. تم تنفيذ يشابك من خلال إسقاط 0.1٪فيتامين بي 5-فوسفات على مناطق التشعيع 20 ثانية قبل الأشعة فوق البنفسجية-A أشعة وكل 20 ثانية خلال فترة التشعيع 200 ثانية خالية من ديكستران. تم تطبيق UVA الإشعاع (370 نانومتر) عمودي على الصلبة في 57 ميغاواط / سم ² (الجرعة الكلية ضوء UVA، 57 J / سم ²). أزيلت Tarsorrhaphies في يوم 55، تليها قياسات طول المحورية المتكررة. وتوضح هذه الدراسة أن يشابك الصلبة مع ريبوفلافين والأشعة فوق البنفسجية-A الإشعاع تمنع بشكل فعال الناجم عن انسداد محوري استطالة في نموذج أرنب.
المقدمة
قصر النظر هو الأكثر شيوعا من اضطرابات الانكسار. وذكر أن معدل انتشار قصر النظر في الولايات المتحدة الأمريكية وأوروبا إلى أن حوالي 30٪، والدول الآسيوية فإنه يؤثر على ما يصل إلى 60٪ من 1،2 عامة السكان. يحدث تطور قصر النظر في ما يصل الى 50٪ من myopes، عادة بمعدل حوالي -0.5 dioptres على مدى فترة مدتها سنتان 3. التكاليف الصحية التي تفرضها قصر النظر هي كبيرة، بما في ذلك نفقات النظارات والعدسات اللاصقة والجراحة الانكسارية والتكاليف ذات الصلة لزيادة المخاطر الصحية الناجمة عن الزرق، الساد، انفصال الشبكية وضعف البصر 4-6.
في الدراسات الحيوانية من قصر النظر، وبفعل انخفاض حاسة البصر من قبل خياطة الجفن 7-10 والتنسيب من مطبق على مسافة قصيرة من العين والقرنية الوشم 11. ومع ذلك، لقصر النظر الاصطناعي تحدث في هذه الدراسات، وعملية انسداد لابد من القيام بها على الحيوانات الصغيرة جدا، إذ لم يكن تجارب الحرمان البصر كارالعبوات الناسفة خارج على عينات الكبار قد أثبتت نجاحها.
واحدة من السمات الهامة لقصر النظر الشديد هو تغيير المرضي للالصلبة مع ترقق التدريجي للالصلبة، وربما يرجع ذلك إلى آلية ردود الفعل المضطربة من emmetropization بعد الحرمان البصري 12 أو بسبب بعض اضطراب التمثيل الغذائي للالصلبة، كما هو الحال في Ehlers- متلازمة دانلوس 13. في نهاية المطاف، على حد سواء آليات تؤدي إلى التمدد وترقق الصلبة، شبكية العين والمشيمية بسبب التشوهات الهيكلية الصلبة قصر النظر مثل تناقص الكولاجين والألياف قطرها 14،15 والاضطرابات في اللييفات 16.
وقد أظهرت العديد من الدراسات أن ضعف الكولاجين يشابك هو عامل مهم في عملية إضعاف الصلبة قصر النظر 17-18. Wollensak آخرون 19-21 بفعل الكولاجين يشابك من خلال تطبيق الضيائي الريبوفلافين والأشعة فوق البنفسجية-A (UVA) التشعيع (370 نانومتر)وأشار إلى كبيرة، وزيادة 157٪ في صلابة من الخنازير والصلبة الإنسان في المختبر 19 وزيادة 465٪ في أرنب صلابة الصلبة في الجسم الحي (معامل يونغ) 20. كان يشابك أيضا تأثير طويل الأجل على الصلبة أرنب في الجسم الحي: زيادة صلابة من 320.4٪ بعد 3 أيام، 277.6٪ بعد 4 أشهر، و 502٪ بعد 8 أشهر (معامل يونغ) 22.
وقد نشرت المحاولات العلاجية لإلقاء القبض على تطور قصر النظر 23-26 ولكن نجاح هذه الطرق هو المثير للجدل. لم يتم العثور على وسيلة فعالة لمنع قصر النظر التدريجي حتى الآن.
مسببات قصر النظر لا تزال مثيرة للجدل، ومعاملتها تحديا. على أساس هذه النتائج، والافتراض بأن يشابك الصلبة يمكن أن تكون بمثابة وسيلة للعلاج القائم الصلبة من تطور قصر النظر. والغرض من هذه الدراسة هو دراسة crosslinki الكولاجين صلبوينانوغرام تأثير على تطوير قصر النظر المحوري الناجم عن انسداد محور البصري.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم علاج الحيوانات وفقا للقرار ARVO على استخدام الحيوانات في البحوث. وتمت الموافقة على بروتوكول الدراسة من قبل اللجنة المؤسسية لمختبر أبحاث الحيوان (موافقة أي 022-4598-2؛ 021211).
1. إعداد لجراحة # 1
- وزن وتخدير نيوزيلندا الأرنب الأبيض القديم يوم 13 مع الحقن العضلي الكيتامين هيدروكلوريد 100 ملغ / مل (100 ملغ / كلغ) وزيلازين هيدروكلوريد 25 ملغ / مل (12.5 ملغ / كلغ). وتستخدم تلك الجرعات بسبب طول العملية الجراحية. ضمان مستوى مناسب من التخدير بسبب عدم وجود رد فعل الألم.
- باستخدام قطعة من القطن المعقم، وتطبيق كمية صغيرة من مرهم للعين للعين غير تشغيلية لمنع القرنية من الجفاف. تطبيق 0.9٪ قطرات محلول ملحي على القرنية العين تشغيلها أثناء العملية لمنع القرنيات من الجفاف.
- أداء ثلاثة قياسات طول محوري في كل عين بعد التخدير الموضعي (oxybuprocainالبريد هيدروكلوريد 0.4٪) باستخدام الموجات فوق الصوتية A-الماسح الضوئي ومن ثم متوسط القياسات. تطبيق التحقيق عموديا إلى القرنية المركزية.
2. جراحة # 1 - مرحلة ما قبل الصليب الربط بين الخطوة
- باستخدام ملقط ومقص العيون الجراحية تحت مجهر التشغيل العيون، وجعل peritomy الملتحمة 360 درجة مع ملقط ومقص العيون الجراحية.
- باستخدام ملقط الزاوية أو ربط العضلات تحديد أربعة العضلات المستقيمة المقلة وعزلهم مع 2-0 الحرير مضفر خيوط غير اذعا.
ملاحظة: سوف الغرز الحرير تساعد في تحريك العالم في الاتجاه المطلوب. وتنقسم مقلة العين في الأرباع بين العضلات المستقيمة أربعة (أربعة أجزاء).- علامة مع علامة الجلد منطقتين في كل رباعي، واحدة في الصلبة الاستوائية واحد على الصلبة الخلفي. وهذه هي المناطق التشعيع.
- إعداد 3 مل إلى حقنة 5ML تحتوي على 0.1٪ خالية من ديكستران فيتامين بي 5-الفوسفاطه. ربط حقنة لقنية الدمعية 26 G أو 25 G hydrodelineator مدبب.
- إعداد جهاز تشعيع الذي يتضمن مصدر ضوء الأشعة فوق البنفسجية ألف (370 نانومتر) متصلة مشطوف أسفل حسب الطلب الألياف البصرية. بعد قياس قوة الطاقة والمعايرة (انظر الملاحظة أدناه)، ضبط الجهاز إلى 57 ميغاواط / سم ².
ملاحظة: أجريت معايرة خارج تجاريا من قبل الشركة المصنعة. يوفر هذا الأسلوب الجرعة الكلية ضوء الأشعة فوق البنفسجية من 57 J / سم ². (57 ميغاواط / سم 2 على 0.2 سم 2 11.4 ميغاواط / 0.2 سم 2 باستخدام 11.4 ميغاواط / 0.2 سم 2 لمدة 200 ثانية هو الحمل التراكمي من 2.2 J في 0.2 سم 2 البقعة)
3. جراحة # 1 - الصليب ربط
- تحرك مقلة العين عن طريق سحب خيوط الحرير في الاتجاه المعاكس من الربع اختارت أن تعامل (على سبيل المثال، سحب والأنف عند معالجة الربع الزمني أقل). أداء حركة مقلة العين باستخدام خياطة 2-0 الحرير مضفر غير اذعا التي طsolates كل العضلات المستقيمة.
- تطبيق حل الضيائي تحتوي على 0.1٪ خالية من ديكستران فيتامين بي 5-فوسفات على إشعاع منطقة 20 ثانية قبل أن يبدأ إشعاع.
- أشرق منطقة التشعيع باستخدام مشطوف أسفل حسب الطلب الألياف البصرية لفترة التشعيع من 200 ثانية. قياس مساحة كل منطقة 0.2 سم ² مع دائرة نصف قطرها 4 مم.
- تطبيق حل الضيائي تحتوي على 0.1٪ خالية من ديكستران فيتامين بي 5-فوسفات على منطقة التشعيع كل 20 ثانية خلال فترة التشعيع 200 ثانية.
ملاحظة: إجراء أشعة وإسقاط الريبوفلافين في وقت واحد من قبل اثنين من الجراحين. - كرر الخطوات من 3،1-3،4 لكل من الأرباع مقلة العين الأربعة.
4. جراحة # 1 - المشاركة الصليب الربط بين الخطوة
- حلق الفراء حول العين. خفض هامش غطاء باستخدام مقص العيون الجراحية ثم خياطة بلطف العليا والسفلى الجفون باستخدام 4-0 مضفر لون الحرير والعاج - 3/8 دائرة إعادةالآية التفصيل طول 13 مم C-3 إبرة (رفو الترص). تنطبق على كمية صغيرة من مرهم للعين على حافة الجفن في نهاية الإجراء (الكلورامفينيكول 5٪).
5. جراحة # 1 - المشاركة العناية المنطوق
- الحفاظ على الحيوانات تحت مصباح التدفئة خلال الانتعاش. لا تترك حيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه كافية للحفاظ على الاستلقاء القصية.
- وضع الحيوانات في قفص نظيفة مع أسرة جديدة حتى يتم الشفاء منها تماما. بعد الشفاء، سيتم إرجاع الحيوان إلى غرفة الحيوان. عودة الحيوان إلى أمه فقط عندما يستيقظ.
- خلال ساعة 48 الأولى، لفحص الحيوانات بشأن الحالة العامة وعلامات المرض أو العدوى. إدارة التسكين حسب القسم 1. تسكين إدارة حسب الحاجة إذا لوحظ تغير في سلوك الأرنب. (ميتاميزول قطرات 50mg / كغ كل 6 ساعات).
6. جراحة # 2
- بعد خمسة وخمسين يوما الصورةurgery # 1، تزن وتخدير الأرنب مع الحقن العضلي الكيتامين هيدروكلوريد 100 ملغ / مل (100 ملغ / كلغ) وزيلازين هيدروكلوريد 25 ملغ / مل (12.5 ملغ / كلغ).
- باستخدام مقص العيون الجراحية تحت مجهر التشغيل العيون، وإزالة رفو الترص. أداء ثلاثة قياسات طول محوري في كل عين بعد التخدير الموضعي (oxybuprocaine هيدروكلوريد 0.4٪) باستخدام الموجات فوق الصوتية A-الماسح الضوئي ومن ثم متوسط القياسات. تطبيق التحقيق عموديا إلى القرنية المركزية.
- الموت ببطء الأرانب مع الصوديوم الفينوباربيتال داخل الصفاق (200 ملغ / 1.5 كجم من وزن الجسم).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
الأرقام 1 و 2 تظهر بوضوح القياسات طول المحورية للمجموعتين. خضعت المجموعة 1 الأرانب يشابك الصلبة ورفو الترص على عينه اليمنى بينما لم تعمل في العين اليسرى على (الشكل 1). خضعت المجموعة 2 الأرانب فقط peritomy ورفو الترص على عينه اليمنى بينما لم تعمل العين اليسرى على (الشكل 2).
في مجموع...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
نقدم لأول مرة في الدراسة المجراة من الوقاية من قصر النظر المحوري في نموذج أرنب باستخدام ربط عبر التكنولوجيا مع الريبوفلافين وUVA التشعيع. على الرغم من أن حيوانات المختبر مختلفة يمكن استخدامها في هذا النوع من الدراسة، اخترنا الأرانب ويرجع ذلك أساسا إلى حجم العينين والحاجة إلى إجراء يشابك على سطح الصلبة.
وجدنا أن تعريض الصلبة الأرانب وخياطة الجفون العليا والسفلى لتكون الإجراءات الصعبة. ونحن نوصي ت...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب تعلن أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.
شكر وتقدير
الكتاب ممتنون للسيدة داليا سيلا والسيد إيمي شارون للعمل الفني المهنية وممتازة في المختبر.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 2-0 خيوط حريرية مضفرة بدون إبرة ؛ | ETHICON | W193 | |
| 4-0 لون عاجي حريري مضفر | ETHICON | W816 | |
| 0.1٪ ريبوفلافين 5-فوسفات خال من ديكستران 1 مجم: 1 مل | مفهوم الصيدلة المحدودة | D2-5025 | |
| الأشعة فوق البنفسجية A (370 نانومتر) مصدر الضوء | O / E LAND Inc | NCSU033B | |
| مشطوفة أسفل الألياف البصرية المصنوعة حسب الطلب ؛ | Prizmatix Ltd | ||
| 26 G قنية دمعية ؛ | بيفر ویزيتيك الدولية المحدودة | REF581276 | |
| 25 جرام محدد مائي مدبب [بلومنتال] | بيفر ویزيتيك الدولية المحدودة | REF585107 | |
| أرانب عمرها 13 يوما Harlan | & nbsp ؛ | 1NZWR40 | |
| مقياس حيوي بالموجات فوق الصوتية | Allergan-Humphrey | 820-519 | |
| علامة الجلد | ديفون | 4237101664X |
المراجع
- McBrien, N. A., Gentle, A. Role of the sclera in the development and pathological complications of myopia. Prog. Retin. Eye Res. 22, 307-338 (2003).
- Saw, S. M., Gazzard, G., Au Eong, K. -G., Tan, D. T. H. Myopia: attempts to arrest progression. Br. J. Ophthalmol. 86, 1306-1311 (2002).
- Bullimore, M. A., Jones, L. A., Moeschberger, M. L., Zadnik, K., Payor, R. E. A retrospective study of myopia progression in adult contact lens wearers. Invest Ophthalmol Vis Sci. 43, 2110-2113 (2002).
- Rose, K., Smith, W. E., Morgan, I., Mitchell, P. The increasing prevalence of myopia: implications for Australia. Clin. Exp. Ophthalmol. 29, 116-120 (2001).
- Saw, S. M., Gazzard, G., Shih-Yen, E. C., Chua, W. H. Myopia and associated pathological complications. Ophthal. Physiol. Opt. 25, 381-391 (2005).
- Tano, Y. Pathologic myopia - where are we now. Am. J. Ophthalmol. 134, 645-660 (2002).
- Greene, P. R., Guyton, D. L. Time course of rhesus lid-suture myopia. Exp. Eye Res. 42, 529-534 (1986).
- McBrien, N. A., Norton, T. T. The development of experimental myopia and ocular component dimensions in monocularly lid-sutured tree shrews (Tupaia belangeri). Vision Res. 32, 843-852 (1992).
- McKanna, J. A., Casagrande, V. A. Reduced lens development in lid-suture myopia. Exp. Eye Res. 26, 715-723 (1978).
- Shapiro, A. Experimental visual deprivation and myopia. Doc. Ophthalmol. Proc. Ser. 28, 193-195 (1981).
- Wiesel, T. N., Raviola, E. Increase in axial length of the macaque monkey eye after corneal opacification. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 18, 1232-1236 (1979).
- Weiss, A. H. Unilateral high myopia: optical components, associated factors and visual outcomes. Br J Ophthalmol. 87, 1025-1031 (2003).
- Mechanic, G. Crosslinking of collagen in a heritable disorder of connective tissue: Ehlers-Danlos syndrome. Biochem. Biophys. Res. Com. 47, 267-272 (1972).
- Curtin, B. J., Iwamoto, T., Renaldo, D. P. Normal and staphylomatous sclera of high myopia. An electron microscopic study. Arch. Ophthalmol. 97, 912-915 (1979).
- Liu, K. R., Chen, M. S., Ko, L. S. Electron microscopic studies of the scleral collagen fibre in excessively high myopia. J. Formosan Med. Assoc. 85, 1032-1038 (1986).
- Funata, M., Tokoro, T. Scleral change in experimentally myopic monkeys. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 228, 174-179 (1990).
- McBrien, N. A., Norton, T. T. Prevention of collagen cross-linking increases form deprivation myopia in tree shrew. Exp. Eye Res. 59, 475-486 (1994).
- Iomdina, E. N., Daragan, V. A., Ilyina, E. E. Certain biomechanical properties and cross linking of the scleral shell of the eye in progressive myopia. Proceedings of XIVth Congress on Biomechanics. Paris: International Society of Biomechanics. , 616-617 (1993).
- Wollensak, G., Spörl, E., Seiler, T. Riboflavin / ultraviolet-A-induced collagen crosslinking for the treatment of keratoconus. Am. J. Ophthalmol. 135, 620-627 (2003).
- Wollensak, G., Spörl, E. Collagencrosslinking of human and porcine sclera. J. Cataract Refract. Surg. 30, 689-695 (2004).
- Wollensak, G., Iomdina, E., Dittert, D. -D., Salamatina, O., Stoltenburg, G. Cross-linking of scleral collagen in the rabbit using riboflavin and UVA. Acta Ophthalmol. Scand. 83, 477-482 (2005).
- Wollensak, G., Iomdina, E. Long-term biomechanical properties of rabbit sclera after collagen crosslinking using riboflavin and ultraviolet (UVA). Acta Ophthalmol. 87, 193-198 (2009).
- Wildsoet, C. F., Norton, T. T. Toward controlling myopia progression. Optom. Vis. Sci. 76, 341-342 (1999).
- Avetisov, E. S., Tarutta, E. P., Iomdina, E. N., Vinetskaya, M. I., Andreyeva, M. I. Nonsurgical and surgical methods of sclera reinforcement in progressive myopia. Acta Ophthalmol. Scand. 75, 618-623 (1997).
- Thompson, F. B. A simplified sclera reinforcement technique. Am. J. Ophthalmol. 86, 782-790 (1978).
- Whitmore, W. G., Curtin, B. J. Scleral reinforcement: two case reports. Ophthalmic Surg. 18, 503-505 (1987).
- Dotan, A., Kremer, I., Livnat, T., Zigler, A., Weinberger, D., Bourla, D. Scleral cross-linking using riboflavin and ultraviolet-A radiation for prevention of progressive myopia in a rabbit model. Exp Eye Res. 127, 190-195 (2014).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
