يمكن قياس تأثير الجينات والبيئة على الفضاء الاجتماعي ذبابة الفاكهة السوداء من خلال نموذج تحليلي قوي ولكنه مباشر. نعرض هنا عوامل مختلفة يمكن أن تؤثر على هذا الفضاء الاجتماعي ، وبالتالي يجب أخذها في الاعتبار عند تصميم التجارب في هذا النموذج.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
مقايسة الفضاء الاجتماعي وصفها هنا يمكن أن تستخدم لقياس التفاعلات الاجتماعية من ذبابة الفاكهة melanogaste ص - أو الحشرات الصغيرة الأخرى - بطريقة مباشرة. كما سبق أثبتنا 1، في غرفة ثنائية الأبعاد، ونحن أول قوة الذباب لتشكيل مجموعة ضيقة، مما يسمح لهم بعد ذلك أن تأخذ مسافة المفضل لديهم عن بعضها البعض. بعد أن استقر الذباب، نقيس المسافة إلى أقرب جار (أو الفضاء الاجتماعي)، وتجهيز صورة ثابتة مع البرمجيات عبر الإنترنت مجانا (يماغيج). تحليل المسافة إلى أقرب جار يسمح للباحثين لتحديد تأثير العوامل الوراثية والبيئية على التفاعل الاجتماعي، في حين السيطرة على عوامل خارجية محتملة. ويمكن لعوامل مختلفة مثل قدرة التسلق، والوقت من اليوم، والجنس، وعدد من الذباب، تعديل التباعد الاجتماعي من الذباب. ومن ثم نقترح سلسلة من الضوابط التجريبية للتخفيف من هذه الآثار المربكة. هذا الاختبار يمكنأن تستخدم لغرضين على الأقل. أولا، يمكن للباحثين تحديد كيفية التحول البيئي المفضلة لديهم (مثل العزلة، ودرجة الحرارة، والإجهاد أو السموم) سوف يؤثر التباعد الاجتماعي 1،2. ثانيا، يمكن للباحثين تشريح الأسس الجينية والعصبية من هذا الشكل الأساسي للسلوك الاجتماعي 1،3. على وجه التحديد، ونحن استخدامه كأداة تشخيصية لدراسة دور orthologous الجينات يعتقد أن تشارك في السلوك الاجتماعي في الكائنات الحية الأخرى، مثل الجينات المرشحة لمرض التوحد لدى البشر (4).
المقدمة
التفاعلات الاجتماعية ضرورية لتنمية سليمة وصحة الأفراد داخل المجموعة ككل، ويمكن ملاحظة عبر أنواع عديدة من البشر (الإنسان العاقل) للكائنات أبسط مثل ذبابة الفاكهة (ذبابة الفاكهة السوداء البطن) 5،6. ذبابة الفاكهة الفردي أو الوسائل الشائعة سهم الإنسان لمعالجة المعلومات الحسية خلال هذه التفاعلات، سواء كان ذلك: السمعية والبصرية، وحاسة الشم، واللمس، أو ذوق حاسة. نحن وغيرنا نفترض أن هناك العصبية عن يحتمل المشتركة الكامنة وراء الاستجابات السلوكية للتفاعلات الاجتماعية وأن الخلايا العصبية والجينات المسؤولة قد تكون تطورية الحفظ 7. وبمجرد حدوث التفاعل الأولي، الفضاء الاجتماعي بين الأفراد والتفاعل إما أن الزيادة (تجنب الاجتماعي 8) أو نقصان (تشكيل مجموعة / التجميع 5). تفاعلات أكثر تعقيدا، مثل العدوان أو الخطوبة، ويمكن بعد ذلك أن يحدث.
معشوقة = "jove_content"> لا أدوات وأساليب متطورة، ولا استثمارات كبيرة في الوقت والتدريب اللازم لتحديد هذا نموذج بسيط من السلوك الاجتماعي، مما يجعله أداة تحليلية قوية. هنا، نحن شرح بروتوكول بسيط يحدد مقدار المسافة بين ذبابة، أو الفضاء الاجتماعي، لتقييم التفاعل الاجتماعي في مجموعات مستقرة من ذبابة الفاكهة، كما تستخدم في الدراسات التالية 1-4،9. يشير الفضاء الاجتماعي لقياس المسافة بين ذبابة وأقرب جارتها 10. الفضاء الاجتماعي هو ثابت لعدد معين من السكان من D. البطن عندما يتم الاحتفاظ ظروف تجريبية (في المتوسط حوالي غضون 1-2 الجسم أطوال)، ويختلف فيما يتعلق التجربة الاجتماعية للذباب، وزيادة إذا ظلت الفرد في عزلة 1. الرؤية المناسبة أمر ضروري للحفاظ على المسافة الاجتماعية العادية، ولكن لا عطر الكلاسيكية أو الأنغولي التصور 1. وبالتالي يمكن قياس الفضاء الاجتماعي أن يكونتستخدم كأداة تشخيصية لتحليل التفاعلات الاجتماعية وتحديد السلوك الاجتماعي في D. البطن 1. وصفنا هنا في تفاصيل كيفية تنفيذ هذه الكمي، وإلى أي مدى تؤثر المتغيرات التجريبية المشتركة هذا السلوك.
وتبين لنا أن التوجه للغرفة التي يتم تنفيذ الفحص، فضلا عن عدد من الذباب - إلى حد ما - هل يؤثر الفضاء الاجتماعي. وقد تبين في وقت سابق أن الهندسة غرفة تؤثر حركة استكشافية عفوية من الذباب 11،12، وهذه الظاهرة قد تؤثر في نهاية المطاف حيث قرروا تسوية. ومع ذلك، طالما أن كثافة الطيران (الطيران / سم 2) والتوجه غرفة تحفظ نفسها، والفضاء الاجتماعي من الذباب لا يزال أيضا مستمر. ويتضح مدى متانة هذا الاختبار من خلال حقيقة أن مختبرات مستقلة باستخدام أحجام غرفة مختلفة، والشكل، والتوجه يمكن تكرار النتائج المعروضة من قبل المسوخ من ذوي الخوذات البيضاءالجينات الفنار (التي تؤثر على تصبغ العين)، وهو الفضاء الاجتماعي الزيادة (مثلث الرأسي أو الأفقي في دائرة 1، مربع الأفقي مع تدفق الهواء في 3).
تشير نتائجنا أيضا أن الحفاظ على الوقت الذي يتم تنفيذ التجربة الفضاء الاجتماعي أمر حاسم لاتساق النتائج، كما وتبين لنا أن الذكور، ولكن ليس الإناث، وبصرف النظر كذلك في المساء. ومع ذلك، فإن الاختلافات ينظر بين النهار والمساء ساعات ليست بسبب الخلافات النشاط من الذباب، ونحن نناقش الحجج تشير إلى أن مستويات النشاط لا ترتبط مع الفضاء الاجتماعي.
وأخيرا، هناك الأسس الجينية لتحديد الفضاء الاجتماعي، كما يدل على ذلك المسخ الأبيض التي سبق وصفها 1،3، والخلافات بين مختلف السلالات الفطرية والبرية وصيدها من الذباب التي نقدمها هنا.
لذلك، هذا الاختبار يجعل أداة ممتازة وأو دراسة آثار الوراثية وكذلك العوامل البيئية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
معدات 1. والكواشف مكون في منزل (انظر قائمة مواد أخرى)
- إعداد ذبابة الفاكهة جهاز التخدير البارد كما هو موضح سابقا 8.
- إعداد الشافطة ذبابة كما هو موضح سابقا (13).
- إعداد غرف مساحة الاجتماعية وأصحاب.
- النظام أو جعل الألواح الزجاجية والفواصل الاكريليك لإنشاء غرف مساحة الاجتماعية. وتتكون كل غرفة مساحة الاجتماعية اثنين من الألواح الزجاجية مربع (17.6 سم في 17.6 سم، بسمك 0.3 سم)، وهما حق الفواصل مثلث الاكريليك (مع ارتفاع 16.5 سم، وقاعدة من 8.9 سم، بسمك 0.3 سم )، واثنين من المساحات المستطيلة (9 سم في 1.5 سم بسمك 0.3 سم) (الشكل 1A).
- تجميع الزجاج والاكريليك غرفة الفضاء الاجتماعي بحيث أنه مطابق للغرفة في الشكل 1B. للقيام بذلك، تبدأ من خلال وضع فاصل الثلاثي شقة واحدة على رأس واحد جزء مربع من الزجاج بحيث الزاوية اليمنىلهل الثلاثي يتماشى مع واحدة من زوايا الجزء مربع. بعد ذلك، ضع الثانية هل شقة الثلاثي على أعلى جزء مربع، وهو ما يعكس أول هل الثلاثي.
ملاحظة: تأكد من ارتداء القفازات حتى لا تلوث القطع مع الزيوت والروائح من اليدين. - وضع اثنين من الفواصل مستطيلة صغيرة مسطحة فوق جزء مربع، على طول الجانب من الجزء الذي لم تتم تغطيتها. يجب الفواصل الاكريليك على الجزء العلوي من الطائرة مربع حاليا تشكيل الساحة الثلاثي.
- وضع الجزء الثاني مربع من الزجاج على الجزء العلوي من الفواصل الاكريليك بحيث يتم محاذاة فوق الجزء الأصلي من الزجاج أدناه.
- استخدام أربعة مقاطع الموثق لتأمين الأجزاء والفواصل معا لتشكيل غرفة الفضاء الاجتماعية. وضع مقطع واحد بالقرب من الزاوية، على الجانب الطويل من كل من الفواصل الثلاثي، وتأمين لهم داخل الألواح الزجاجية. على هذه الاطراف نفسها، وضع مقطع في الزاوية المجاورة، على كل من الفواصل مستطيلة، وتأمين لهم فيجانب الألواح الزجاجية.
- تجميع موقف الدعم والمشبك قارورة بحيث يكون المشبك سوف تحافظ على غرفة الفضاء الاجتماعية في وضع مستقيم، كما تقع غرفة الفضاء الاجتماعي على حافته على أعلى من سطح العمل.
- لكل تكرار في التجربة، تجميع غرفة الفضاء الاجتماعية ودعم الوقوف.
- إعداد جهاز تسلق استجابة فحص للتحقق من قدرة التسلق من الذباب اختبارها.
- استخدام جهاز المعاكس، كما هو موضح سابقا 14،15.
- ضمان ظروف الإضاءة متجانسة من خلال إجراء التجربة على سطح العمل مع تغطية مقعد غطاء أبيض وأمام خلفية بيضاء.
2. إعداد الذباب قبل التجربة
- الحفاظ على الذباب في زجاجات تحتوي القياسية ذبابة الفاكهة تطير الطعام. الاحتفاظ بها في غرفة الحضانة عند 25 درجة مئوية على 12 ساعة ضوء / دورة الظلام.
- واحد إلى يومين قبل البريدxperiment، وجمع والذباب الجنس تحت التخدير الباردة، كما هو موضح سابقا 8.
- البرد جهاز التخدير البارد في -4 ° C. مكان الذباب في 50 مل أنابيب بلاستيكية. يغرق بالكامل الأنابيب البلاستيكية التي تحتوي على الذباب في الجليد في دلو الجليد معزولة، انتظر 5 دقائق على الأقل لالذباب لتصبح قادرة على الحركة.
- وضع الذباب على ورقة البولي اثيلين جهاز التخدير البارد. في RT، واستخدام stereomicroscope لفصل الذكور عن الإناث. الحفاظ على الذباب، في مجموعات، في قارورة تحتوي القياسية ذبابة الفاكهة الطيران الطعام، لا تتجاوز 40 الذباب في قارورة.
- قبل ساعتين من بداية التجربة، تأكد من أن درجة حرارة الغرفة حيث سيتم تنفيذ التجربة ما بين 24-25 درجة مئوية والرطوبة 50٪ تقريبا.
- نقل الذباب في قوارير جديدة تحتوي على المواد الغذائية، ووضعها لمدة 2 ساعة على سطح العمل حيث سيتم تنفيذ التجربة.
ملاحظة: للحصول على هذه التجربهالخبر، كانت سلالات ذبابة تستخدم ذبابة الفاكهة سلالات البطن: كانتون-خاصة أو كانتون-S (CS)، ث 1118 جيم (10 أو W - ث 1118 outcrossed 10 مرات لكانتون-S)، وكانت ولاية أوريغون وسمرقند الذباب كل من مختبرنا أسهم 16؛ تم جمع الذباب إلووود في خريف 2011 في حي إلوود من هنتنغتون، في لونغ آيلاند، نيويورك، الولايات المتحدة الأمريكية (8). وبصرف النظر عندما ينص على خلاف ذلك، تم الحصول على النتائج المقدمة مع كانتون-S الذباب (في ظلال من اللون الأحمر).
3. إجراء التجربة
- أداء التجربة 12:00 حتي 03:00 (بتوقيت Zeitgeber - الوقت في ساعات بعد ظهور الضوء - من ZT 4-7).
- إعداد غرفة الفضاء الاجتماعية لنقل الذباب.
- وضع الاجتماعية غرفة مساحة مسطحة على سطح العمل، مع الجانب التي تحتوي على الفواصل مستطيلة أقرب إلى جسمك.
- إزالة سمقطع شمال شرق أقرب جسمك وتنزلق هل مستطيل واحد إلى الخارج، وخلق فجوة من حوالي 1 سم بين الفواصل مستطيلة.
- باستخدام الشريط وعلامة، تسمية الغرفة مساحة الاجتماعية في الزاوية العليا مع الجنس، السلالة، وتكرار الرقم. الحرص على ضمان الشريط لا يغطي جزءا من الساحة الثلاثي الداخلية.
- نقل الذباب في غرفة الفضاء الاجتماعية.
- نقل الذباب من القنينة التي تحتوي على المواد الغذائية إلى ذلك، قارورة فارغة جديدة. نضح الذباب من القنينة الفارغة ونقلها الى غرفة الفضاء الاجتماعية.
- يستنشق رسم الذباب إلى غيض من الشافطة. ضع طرف إلى الفجوة 1 سم بين الفواصل مستطيلة من الغرفة مساحة الاجتماعية والزفير بمعدل ثابت لإجبار الذباب في الساحة الثلاثي الداخلية.
- الانزلاق على الفور هل مستطيلة العودة الى المكان، وإغلاق قاعدة الساحة الثلاثي الداخلية، ووضع مقطع الموثق مرة أخرى.
- نقل الذباب من القنينة التي تحتوي على المواد الغذائية إلى ذلك، قارورة فارغة جديدة. نضح الذباب من القنينة الفارغة ونقلها الى غرفة الفضاء الاجتماعية.
- على وسادة القصف، الذي يقع على مقاعد البدلاء مختلفة من حيث يأخذ العمل التجريبي مكان، مع الاستمرار على غرفة الفضاء الاجتماعية تستقيم ان هذه الفواصل مستطيلة على الجانب السفلي. وتراجعت الليرة ثلاث مرات للتأكد من كل الذباب على الجزء السفلي من الساحة.
ملاحظة: نظرا لهل الاكريليك تخرج من أصغر حجم الغرفة (الشكل 1D)، فرقعة مرفقيه على سطح العمل مع الحفاظ على سيطرة آمنة على جهاز لضمان انخفضت الذباب إلى أسفل. - بدء الموقت.
- ضع دائرة الفضاء الاجتماعية على سطح العمل واستخدام موقف الدعم وقارورة المشبك لإبقائه في وضع مستقيم. وضع حاكم أو ملصقا من طول يعرف شقة مقابل غرفة الفضاء الاجتماعية، ولكن لا تغطي أي جزء من الساحة الثلاثي الداخلية.
- للتجارب وضعه أفقيا، لا تضع غرفة الفضاء الاجتماعية في موقف الدعم؛ بدلا من ذلك وضع الاجتماعية شقة غرفة مساحة على سطح العمل.
- عندما استقروا الذباب، وعادة بعد حوالي 30 دقيقة، والتقاط صورة للغرفة الفضاء الاجتماعية. ضمان أن الإطار يحتوي على الساحة الداخلية برمتها الثلاثي، والحاكم، والتسمية.
- تكرار التجربة لكل الوراثي وحالة (المثالية 3 مكررات الداخلية و3 يكرر مستقلة).
4. تحليل البيانات الفضاء الاجتماعي
- استيراد وحدات الماكرو التالية في يماغيج 17
- يماغيج هو متاح هنا: http://rsbweb.nih.gov/ij/.
- يمكنك إنشاء الأمر 'قياس المسافات "في قائمة الإضافات عن طريق توفير وحدات الماكرو أدناه في ملف اسمه' Measure_Distances.txt" في المجلد يماغيج / الإضافات، في المجلد الفرعي الكلي، وباستخدام تعليمات> الأمر القوائم تحديث '.
- نسخة في ملف. TXT وحدات الماكرو التي تم توفيرها في البيانات التكميلية ونشرت أصلا في 3.
- تحميل الصور إلى جهاز الكمبيوتر، وفتح pictu واحدإعادة استخدام يماغيج.
- إنشاء نطاق عن طريق رسم خط من 0 سم إلى 1 سم علامات على المسطرة في الصورة، وتحت علامة التبويب تحليل واختيار مجموعة ميزة مقياس لتحديد مقياس من 1 سم لتلك المسافة (نفس النهج لاصق ل طول معروفة). اختر الخيار العالمية قبل تطبيق مقياس للصورة.
- اقتصاص الصورة باستخدام ميزة المحاصيل تحت علامة التبويب صورة من النوع الذي يشمل كل من الذباب، في حين إزالة أكبر قدر من الراحة للصورة ممكنة.
- جعل الصورة بالأبيض والأسود عن طريق اختيار 8-بت من خيار نوع ضمن علامة التبويب صورة.
- إزالة كل الضوضاء الخلفية من الصورة عن طريق الذهاب الى ميزة عتبة تحت خيار ضبط من علامة التبويب صورة. اسحب المنزلق لتعزيز أو إزالة التناقض حتى يتسنى للهيئة من كل ذبابة يمكن رؤيتها بوضوح من دون أي علامات أخرى في الصورة. إذا كانت هناك علامات ليست الذباب، قبض عليهم مع أداة مستطيلة وحذفها.
- تعيينالقياسات باستخدام مجموعة أداة القياسات تحت علامة التبويب تحليل. حدد المساحة، المركز الجماهيري، النقطة الوسطى، والعرض التسمية. المقبل، واختيار ميزة تحليل الجسيمات تحت علامة التبويب تحليل لإنشاء قائمة مرقمة من كل البقع السوداء التي تمثل الذباب.
- عند استخدام تحليل الجزيئات. مجموعة حجم ،01-0،1 (لا تختار وحدة بكسل)؛ دائرية 0،00-1،00؛ الخطوط المعرض. عرض النتائج، وإضافة إلى المدير.
- تأكد من أن كل بقعة سوداء (كل الجسيمات) هي تمثيل دقيق من الذباب التي هي في الصورة الأصلية، وذلك بمقارنة قائمة ذات تعداد رقمي للصورة الأصلية.
ملاحظة: إذا كان بعض الذباب التي هي قريبة جدا من بعضها يجري تحسب جسيم واحد، رسم الخط الأبيض للفصل بين الذباب اثنين على صورة ثنائية يدويا.
- في حين تم تحديد قائمة، استخدم أقرب الجار - ماكرو قائمة المسافات تحت خيار وحدات الماكرو الثاني في علامة التبويب الإضافات لإنشاء قائمة جديدة تحتوي على مسافات بالسنتيمتر، من EAالفصل يطير إلى أقرب جيرانهم.
- نسخ أقرب المسافات جار من يماغيج ولصقها في عمود من برنامج جدول بيانات.
- تجميع كافة البيانات من كل تكرار على نفس البيانات وتنظيم من قبل الوراثي والشرط.
- لتحليل البيانات باستخدام البرامج الإحصائية. في هذه التجربة، تم استخدام الرسم البياني الوسادة بريزم (النسخة 6 لماكوسكس، GraphPad البرمجيات في سان دييغو كاليفورنيا الولايات المتحدة الأمريكية، www.graphpad.com) لإجراء باتجاه واحد ANOVA، والاختبارات كروسكال واليس، وتوكي وبعد المخصص الاختبارات Dunnet ل.
- توزيع المسافات يتبع التوزيع غير حدودي 1، ويتم تمثيل البيانات مربع وشعيرات توكي و(للقضاء على القيم المتطرفة)، و.
5. تسلق الفحص (مراقبة السلوك)
- استخدام فحص تسلق كعنصر تحكم على الذباب اختبار قدرة التسلق 14،15،18.
- استخدام جهاز المعاكس بحيث ثلاث محاكمات جويتم تشغيلها في نفس الوقت.
- نقل 50-100 الذباب ساذجة (الذباب الذي لم يتم اختباره من قبل) في ثلاث قنينات الاختبار المختلفة، والمفاجئة لهم في 1 ش، 3 الثالثة وفتحات مشاركة في الجزء السفلي من الجهاز المعاكس، مع قارورة فارغة جديدة في المواقع المعاكس.
- مكان، قارورة فارغة جديدة في الفتحات الفارغة في الجزء السفلي من الجهاز.
- نزولا الجهاز ثلاث مرات، بحيث كل الذباب هي في الجزء السفلي من كل أنبوب، لبدء التجربة.
- بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت لمدة 15 ثانية (الوقت الكافي لل~ 100٪ من 3-7 أيام من العمر كانتون-S للوصول إلى أعلى قارورة - انظر الشكل 3F).
- حرك الجزء العلوي من جهاز مكافحة الحالي، لتهجير أعلى قارورة بواسطة فتحة واحدة.
- جمع الذباب من خلال الاستفادة من الجهاز إلى أسفل، لتحقيق كل الذباب في قارورة القاع.
- 1 و 2 ش أنابيب الثانية (أو 3 و 4 الجاري، الموافق 5 و 6 عشر) تتوافق على التوالي على الذباب الذي لم يصل لأعلى والذباب التي وصلت القارورة العليا.
- حساب مؤشر الأداء (PI).
- حساب عدد الذباب في كل قارورة.
- وPI هو النسبة المئوية من الذباب قادرة على تسلق على أنبوب العلوي.
- وسائل للPI تتبع التوزيع الطبيعي 1، ويتم تمثيل البيانات والرسوم البيانية عمود متوسط زائد أو ناقص الخطأ المعياري للمتوسط (SEM).
ملاحظة: بدلا من ذلك، يمكن حساب PI كنسبة مئوية من الذباب قادرة على الوصول إلى الجزء العلوي من أسفل القارورة (لالذباب القديمة، 5 ثانية هو الوقت الكافي لتحديد الفرق في قدرة التسلق بين المصابين وغير المصابين 12 يوما من العمر كانتون-S كميا من صورة ثابتة: انظر النتائج). وقد استخدم آخرون تدابير مختلفة من الأداء في انجذاب بالجاذبية السلبية التي يسببها جفل، التي هي أيضا مناسبة لقياس قدرة التسلق 19-22.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
غرفة الفضاء الاجتماعية يمكن أن تستخدم كأداة لتحديد السلوك الاجتماعي للذبابة الفاكهة السوداء البطن. يتم قص الفواصل الاكريليك والألواح الزجاجية معا لتشكيل الساحة الثلاثي الداخلية التي توفر مساحة ثنائية الأبعاد التي الذباب يمكن أن تشكل جماعات مستقرة دون وجود العديد من الإشارات يحتمل أن تكون مربكة. عند نقل الذباب إلى الساحة العمودية، والدهشة من قبل تستغل أسفل، ويردون سلوك الهروب: انجذاب بالجاذبية السلبية. هم الصعود إلى قمة المثلث مستقيم، يجبرن على مجموعة ضيقة، ومن ثم يتم توفي...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في هذا البروتوكول، وقد وصفت إجراءات تفصيلية لتقدير حجم الفضاء الاجتماعي. بعض الخطوات الحاسمة لضمان تجربة ناجحة هي: 1) دائما استخدام قفازات عند تنظيف وإعداد الجهاز، للحفاظ على الزيوت الخاصة بك والروائح خارج الغرفة الداخلية للجهاز، 2) ضمان جمع الذباب قبل يوم واحد على الأقل التجربة للحد من أي آثار محتملة للتخدير البارد، 3) 2 ساعة قبل التجربة توفر قارورة جديدة تحتوي على المواد الغذائية الطازجة لضمان عدم تجويع الذباب، وقد تنظيف أنفسهم، 4) وخلال هذه الساعة 2، والسماح للذباب التأقل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.
شكر وتقدير
يريد المؤلفون أن يشكروا الدكتور تادميري فينكاتيش على تشجيعه على إعداد هذه المخطوطة ، ودوفا برينمان وسيلوين تشوي على تعليقاتهم البناءة ، وإليسا بورغ وواين راسباند لتصميم الماكرو في ImageJ لجميع مسافات الذبابة وأقرب مسافات الجيران. يريد المؤلفون أيضا أن يشكروا المراجعين على تعليقاتهم البناءة.
< p class = 'jove_content'>A.A.A و MCC و A.F.S كانت مسؤولة عن تصميم البحث. أجرى S.N.J. و AAA و M.N. و ZR و A.J.M. التجارب. A.A.A, M.N., A.J.M. و M.C.C و A.F.S. حلل البيانات. A.R.M. و A.F.S. كتب المخطوطة.تم دعم هذا العمل من خلال جوائز أبحاث PSC-CUNY ، بتمويل مشترك من مؤتمر الموظفين المحترفين وجامعة مدينة نيويورك إلى A.F.S. ؛ بتمويل داخلي من جامعة ويسترن إلى AFS. ؛ من خلال منحة دراسية في تخصصات الرياضيات وعلم الأحياء والكيمياء والجيولوجيا للمعلمين المتدربين ومنحة تحالف لويس ستوكس لمشاركة الأقليات إلى AAA.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مجهر تكبير ستيريو | نيكون | SMZ-645 | أي نطاق قياسي آخر للتعامل مع الذباب سيعمل |
| فرش الطلاء الصغيرة ؛ | لدفع الذباب | ||
| الجاز مزيج | فيشر | 33545 | أي طعام ذبابة الفاكهة القياسية الأخرى سيعمل |
| مؤقت إنذار صغير / ساعة توقيت | |||
| أقلام | |||
| شريط لاصق | |||
| مقاطع موثق متوسطة الحجم | دبابيس | لتثبيت الغرف معا: 1-1 / 4 "(32 مم) مشابك متوسطة بسعة 5/8 | |
| "دعم صغير | SupportStands Carolina & nbsp ؛ | 707161 | لعقد الغرف في الاتجاه الرأسي |
| السحاحة المشابك | كارولينا | 707362 | |
| كاميرا رقمية | نيكون | Coolpix S8000 | لالتقاط الصور الثابتة |
| مسطرة | لتكون قادرة على توسيع نطاق لوحة | ||
| الصورة ثلاثية الطيات وغطاء | لتوفير خلفية بيضاء ، وضوء متجانس. | ||
| لوحة | أي لوحة ماوس تعمل. | ||
| المنشور 6 | GraphPad Software Inc. | Prism 6 لنظام التشغيل Mac OS X | سيعمل أي برنامج تحليل إحصائي مزود باختبار t و أحادي الاتجاه و ANOVA |
المراجع
- Simon, A. F., et al. A simple assay to study social behavior in Drosophila.: measurement of social space within a group. Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).
- Kaur, K., Simon, A. F., Chauhan, V., Chauhan, A. Effect of bisphenol A on the behavior of Drosophila melanogaster. - Potential use of Drosophila as a model in the study of neurodevelopmental disorders. Behavioural Brain Research. , (2015).
- Burg, E. D., Langan, S. T., Nash, H. A. Drosophila social clustering is disrupted by anesthetics and in narrow abdomen ion channel mutants. Genes Brain Behav. 12, 338-347 (2013).
- Wise, A., et al. The autism candidate gene Neurobeachin (Rugose) mutants in Drosophila exhibit neuro-developmental disorders, aberrant synaptic properties, altered locomotion, impaired adult social behavior and activity patterns. J Neurosci. , 1-9 (2015).
- Parrish, J. K., Edelstein-Keshet, L. Complexity, pattern, and evolutionary trade-offs in animal aggregation. Science. 284, 99-101 (1999).
- Sokolowski, M. B. Social interactions in ‘‘simple’’ model systems. Neuron. 65, 780-794 (2010).
- Rittschof, C. C., Robinson, G. E. Genomics: moving behavioural ecology beyond the phenotypic gambit. Animal Behaviour. 92, 263-270 (2014).
- Fernandez, R. W., et al. Straightforward assay for quantification of social avoidance in Drosophila melanogaster. JoVE. (94), e52011(2014).
- Hahn, N., et al. Monogenic heritable autism gene neuroligin impacts Drosophila. social behaviour. Behav Brain Res. 252, 450-457 (2013).
- Mogilner, A., Edelstein-Keshet, L., Bent, L., Spiros, A. Mutual interactions, potentials, and individual distance in a social aggregation. J Math Biol. 47, 353-389 (2003).
- Liu, L., Davis, R. L., Roman, G. Exploratory activity in Drosophila requires the kurtz nonvisual arrestin. Genetics. 175, 1197-1212 (2007).
- Soibam, B., et al. Open-field arena boundary is a primary object of exploration for Drosophila. Brain Behav. 2, 97-108 (2012).
- Ejima, A., Griffith, L. C. Ch. 30. Drosophila Neurobiology - A laboratory Manual., Ch. , Cold Spring Harbor Press. 475-481 (2010).
- Benzer, S. Behavioral mutants of Drosophila melanogaster. isolated by countercurrent distribution. PNAS. 58, 1112-1119 (1967).
- Connolly, J. B., Tully, T. Drosophila: A practical approach. Roberts, D. B. 1, 2nd, IRL Press. 265-317 (1998).
- Simon, A. F., Shih, C., Mack, A., Benzer, S. Steroid control of longevity in Drosophila melanogaster. Science. 299, 1407-1410 (2003).
- Rasband, W. S. ImageJ. , US National Institutes of Health. Maryland, U.S.A. (1997).
- Simon, A. F., et al. Drosophila, vesicular monoamine transporter mutants can adapt to reduced or eliminated vesicular stores of dopamine and serotonin. Genetics. 181, 525-541 (2009).
- Barone, M. C., Bohmann, D. Assessing neurodegenerative phenotypes in Drosophila .dopaminergic neurons by climbing assays and whole brain immunostaining. JoVE. (74), e50339(2013).
- Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila. models of neurodegeneration. JoVE. , e2504(2011).
- Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila. Exp Gerontol. 40, 386-395 (2005).
- Simon, A. F., Liang, D. T., Krantz, D. E. Differential decline in behavioral performance of Drosophila melanogaster. with age. Mech Ageing Dev. 127, 647-650 (2006).
- Khalil, S., Jacobson, E., Chambers, M. C., Lazzaro, B. P. Systemic bacterial infection and immune defense phenotypes in Drosophila melanogaster. JoVE. , (2015).
- Fernandez, R. W., Akinleye, A. A., Nurilov, M., Rouzyi, Z., Simon, A. F. 54th Annual Drosophila Research Conference, Washinton D.C., , (2013).
- Suh, G. S. B., et al. A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila. Nature. 431, 854-859 (2004).
- Helfrich-Förster, C. Differential control of morning and evening components in the activity rhythm of Drosophila melanogaster.--Sex-specific differences suggest a different quality of activity. J. Biol. Rhythms. 15, 135-154 (2000).
- Fujii, S., Krishnan, P., Hardin, P. E., Amrein, H. Nocturnal male sex drive in Drosophila. Curr Biol. 17, 244-251 (2007).
- Pellegrino, A. C., et al. Weather forecasting by insects: modified sexual behaviour in response to atmospheric pressure changes. PLoS One. 8, e75004(2013).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
