مقالة منهجية

والسكتة الدماغية تنوعا فأري موديل تحت القشرية الأبيض المسألة لدراسة محور عصبي تنكس والأبيض المواد بيولوجيا الأعصاب

DOI:

10.3791/53404

⸱

مارس 17, 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نقدم هنا منهجية لإنتاج السكتة الدماغية البؤرية في المادة البيضاء للفئران عن طريق الحقن الموضعي لمثبط سينسيز أكسيد النيتريك البطاني (eNOS) الذي لا رجعة فيه (L-Nio). يتم تقديم نوعين من الاختلافات التجسيمية ، التتبع العصبي الرجعي ، ووضع العلامات على الأنسجة الطازجة وتشريحها التي توسع التطبيقات المحتملة لهذه التقنية.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

السكتة الدماغية تؤثر على حسابات المادة البيضاء لمدة تصل إلى 25٪ من العروض السكتة الدماغية السريرية، ويحدث بصمت بمعدلات قد تكون أكبر 5-10 أضعاف، ويساهم بشكل كبير في تطوير الخرف الوعائي. نماذج قليلة من التنسيق السكتة الدماغية المادة البيضاء موجودة وهذا النقص في نماذج مناسبة أعاق فهم الآليات neurobiologic العاملة في مجال الاستجابة الإصابة وإصلاح بعد هذا النوع من السكتة الدماغية. القيد الرئيسي من نماذج السكتة الدماغية تحت القشرية الأخرى هو أنها لا تقيد الوزراء البريطانى واحتشاء إلى المادة البيضاء أو تم التحقق من صحتها في المقام الأول في الأنواع غير الفئران. وهذا يحد من القدرة على تطبيق مجموعة واسعة من الأدوات البحثية الفئران لدراسة بيولوجيا الأعصاب من السكتة الدماغية المادة البيضاء. هنا نقدم منهجية لإنتاج موثوق من السكتة الدماغية التنسيق في المادة البيضاء الفئران باستخدام حقن المحلي لالمانع أنوش لا رجعة فيه. نقدم أيضا العديد من الاختلافات على بروتوكول عام من بينهم اثنان من اللمسي فريدة من نوعهاالاختلافات، وتتبع الوراء العصبية، فضلا عن وضع العلامات الأنسجة الطازجة وتشريح تزيد كثيرا من التطبيقات المحتملة لهذه التقنية. هذه الاختلافات تسمح للمناهج متعددة لتحليل الآثار neurobiologic من هذا النوع الشائع ودراسة سلوكه من السكتة الدماغية.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

السكتة الدماغية التي تؤثر على المادة البيضاء تحت القشرية هي كيان سريري شائع ، حيث تمثل ما يصل إلى 25٪ من السكتات الدماغية السريرية سنويا في الولايات المتحدة 1. يحدث الضرر الإقفاري للمادة البيضاء أيضا بصمت بمعدل أعلى بكثير ويساهم في تطور الخرف الوعائي 2،3. في الوقت الحاضر ، لدى المرضى الذين يعانون من هذا النوع من نقص التروية الدماغية خيارات علاجية قليلة ، إن وجدت. على الرغم من الأهمية السريرية لهذا المرض ، يوجد عدد قليل من النماذج الحيوانية ذات الصلة سريريا 4،5.

الهدف من هذا البروتوكول هو إنتاج آفة إقفارية بؤرية داخل المادة البيضاء الفئرانية. يسمح نموذج الفئران هذا للأمراض البشرية بدراسة محددة لاستجابة الإصابة المحورية للسكتة الدماغية وكيف تستجيب العناصر الخلوية للمادة البيضاء ، وهي الخلايا قليلة التغصن والخلايا النجمية جنبا إلى جنب مع المحاور ، وإصلاحها بعد السكتة الدماغية.

وصفت التقارير السابقة نموذجا لسكتة دماغية المادة البيضاء تحت القشرية باستخدام endothelin-1 (ET-1) 6 مشابه للنموذج الموصوف هنا. تم إجراء العديد من التغييرات الرئيسية على البروتوكول التجريبي وبالتالي توسعت الاستخدامات المحتملة لهذا النموذج 7,8. يوفر هذا البروتوكول استراتيجية موثوقة وقابلة للتعديل لإنتاج سكتة دماغية بؤرية داخل المادة البيضاء في دماغ الفأر.

< p class = 'jove_content'> تتمثل المزايا الرئيسية لهذا النموذج في استخدام مثبط كيميائي لأكسيد النيتريك البطاني (eNOS) N (5) -(1) -iminoethyl-L-ornithine HCl (L-Nio) 9 مع عدم وجود تأثيرات باراكرين معروفة على العناصر الخلوية للمادة البيضاء والتي كانت من تعقيد النماذج التي تستخدم endothelin-1 10. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الاستهداف التجسيمي للمادة البيضاء في الفأر يسمح باستخدام أي مجموعة متنوعة من السلالات المعدلة وراثيا أو بالضربة القاضية ، مما يوسع بشكل كبير الأدوات المتاحة لتحديد تأثير السكتة الدماغية على المادة البيضاء في الدماغ. هنا ، يتم وصف نوعين مختلفين في هذه التقنية ويظهران بعض الاختلافات الإضافية التي يمكن استخدامها لتعزيز فهم تلف المادة المحورية والبيضاء وإصلاحها بعد السكتة الدماغية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد تم تنفيذ استخدام الحيوانات في هذا البروتوكول وفقا للإجراءات المعتمدة من قبل جامعة كاليفورنيا في لوس انجليس رعاية الحيوان واللجنة الاستخدام.

ملاحظة: تبدأ من خلال تحديد الهدف السكان الفئران. وفي دراسات سابقة، وقد استخدمت فقط الذكور من النوع البري C57 / BL6 الفئران، ولكن العديد من الفئران المعدلة وراثيا أو خروج المغلوب يمكن أن تستخدم أيضا. لاحظ أن الإحداثيات المجسم تقوم على C57 / BL6 التشريح. فمن المستحسن أن كل مستخدم التحقق في البداية توطين السكتة الدماغية إلى المادة البيضاء.

1. الأبيض المواد السكتة الدماغية التعريفي - الإنسي نهج بزاوية

  1. البدء بإعداد ماصة الزجاج سحبت باستخدام 0.5 ملم الأنابيب الشعرية بحيث قطر البعيدة ما بين 15-25 ميكرون 11.
  2. إعداد العقيمة قسامة 10 ميكرولتر من L-بظاهرة (N (5) - (1) -iminoethyl-L-الأورنيثين حمض الهيدروكلوريك) في 27.4 ملغ / مل (130 ميكرومتر) في العقيمة ملحي 0.9٪.
  3. قبل ملء ماصة الزجاج انسحبتمع كمية صغيرة من L-بظاهرة (2-5 ميكرولتر) عن طريق لصق ماصة الزجاج لأنابيب متصلة خط فراغ. وضع شقة ماصة على أعلى مقاعد البدلاء، وإدراج نهاية سحبت في حل L NIO.
    1. تطبيق فراغ حتى يمتلئ لا يقل عن 2 ملم من الجزء 0.5 ملم من ماصة. إيقاف الفراغ وسحب ماصة. وضعه جانبا حتى الخطوة 1.12.
  4. ضع الماوس في غرفة تحريض وتحفيز التخدير من الفأرة باستخدام معيار 32٪ الأيزوفلورين تدفقت من خلال المرذاذ (5 L / استنشاق دقيقة مع 5 لتر أكسجين / دقيقة و 0.5 لتر / دقيقة N 2) لمدة 1 دقيقة أو حتى anesthesized بعمق. نقل الماوس لجهاز المجسم مجهزة المجهر المجسم. توفير التخدير الصيانة باستخدام 32٪ الأيزوفلورين تدفقت من خلال المرذاذ (2 L / استنشاق دقيقة مع 5 لتر أكسجين / دقيقة و 0.5 لتر / دقيقة N 2) ومخروط الأنف. تحقق عمق التخدير مع قرصة أخمص قدميه.
  5. ضبط الذراع حقن إلى 36 درجة.
  6. افىسحبت XA الزجاج حامل ماصة للنهاية البعيدة للنظام حقن الضغط المنخفض حجم وإرفاقه الذراع حقن الإعداد المجسم.
  7. معطف شعيرات تخدير الحيوان مع الفازلين ومكان الاصطناعي مرهم المسيل للدموع على كلتا العينين. إعداد الجراحي الميداني معقمة عن طريق وضع ثنى العقيمة على رأس الحيوان مع افتتاح 5-10 سم على رأسه. إعداد سطح الجراحية aspetic عن طريق حلق الفراء المغطي الجمجمة. تنظيف فروة الرأس بالتناوب مع betadine و 70٪ مسحات الكحول.
  8. جعل 1.5 سم خط الوسط فروة الرأس شق مع مقص غرامة معقمة لفضح سطح الجمجمة. تجفيف الجمجمة مع مسحة القطن المعقم واستخدام المجهر المجسم في 1-3X التكبير، وإزالة أي نوع من الأنسجة السمحاق المغطي باستخدام أداة نقطة متناهية الصغر معقمة.
  9. بمناسبة Bregma كنقطة مرجعية باستخدام علامة غرامة نقطة.
  10. حفر حج القحف ellipitical 2 مم باستخدام معقم جيد ستيب الجراحية مثقاب0؛ ابتداء من الخلف في Bregma وتوسيع الأمامية غادر لتوه من خط الوسط. إزالة شظايا العظام والأنسجة اللينة التي تغمر بحيث يمكن تصور القشرة المخية.
  11. الحفاظ على الجراحي الميداني والسطح القشري رطبة عن طريق تطبيق بشكل متقطع قطرات من محلول ملحي معقم.
  12. يلصق ماصة الزجاج انسحبت إلى الذراع حاقن لجهاز المجسم. محاذاة نهاية البعيدة للماصة مع Bregma والصفر الإحداثيات المجسم.
  13. دفع ماصة للالأمامية الأولى / الخلفي (A / P) وسطي / الوحشي (M / L) الإحداثيات الواردة في الجدول 1.
  14. دفع ماصة إلى السطح القشري والصفر ظهري / بطني (D / V) القياس.
  15. ببطء تمرير ماصة في الدماغ حتى تصل إلى D الأول / V التنسيق في الجدول 1.
  16. باستخدام انخفاض حجم نظام حقن ضغط وضعت في 20 رطل لمدة 20 نبضة ميللي ثانية، وضخ 100 نيكولا لانغ من L-النينيو في الدماغ والانتظار 5 دقائق لمنع ارتداديصل المسار ماصة.
    1. استخدام الشبيكة معايرة في العدسة من المجهر المجسم والتكبير من 3X.
    2. وفقا لذلك، تهجير ما مجموعه 0.100 مم 3 (طول 0.5 مم في القطر ماصة 0.5 ملم، أي ما يعادل 100 نيكولا لانغ) من ماصة الزجاج انسحبت لكل مجموعة من الإحداثيات. باستخدام شبيكة الشعر، وقياس ومعايرة منذ تعيين كل ما يصل يختلف اعتمادا على التكبير والمقاييس المستخدمة.
    3. لقياس حجم دقيقة خلال كل حقنة، الاقتراب من ماصة الزاوية مع المجهر من الجانب بحيث الغضروف المفصلي-السوائل الهواء وجهة نظر سهمي. يجب أن تظهر في الغضروف المفصلي في الطائرة الاتصال نفسه كل من الجدار الداخلي والخارجي للماصة.
  17. سحب ببطء ماصة وكرر الخطوات من 1.13-1.16.3 في المجموعة الثانية والثالثة من الإحداثيات الواردة في الجدول 1.
  18. بعد الحقن النهائي، وإزالة ماصة ووضع ما يكفي من الشمع العظام لملء موقع حج القحف. اpproximate حواف الجرح فروة الرأس وربط بمادة لاصقة الجلد.
  19. ضخ 0.1 مل من 0.5٪ Marcaine في الهوامش الجرح باستخدام معقم 30 G إبرة لمنع لمنع الألم المحلية المرتبطة شق فروة الرأس.
  20. عودة الحيوان في السكن والعرض المضادات الحيوية بعد العملية (0.48 ملغ / مل ميثوبريم-سلفاميثوكسازول، أو 0.5 ملغ / مل الليفوفلوكساسين) في مياه الشرب لمدة 5 أيام.

2. أبيض المواد السكتة الدماغية التعريفي - الخلفي نهج بزاوية

  1. تنفيذ الخطوات 1،1-1،12 كما هو الحال في وسطي بروتوكول نهج الزاوية، باستثناء ضبط الذراع حقن الإعداد المجسم الى 45 درجة الموجه الأمامي إلى الخلفي.
  2. دفع ماصة لأول A / P و M / L الإحداثيات الواردة في الجدول 2.
  3. الخطوات المتبقية كاملة 1،14-1،20 كما هو الحال في جانبي بروتوكول نهج الزاوية.

3. الوراء العصبية وصفها

  1. إعداد عقيمة 10قسامة ميكرولتر من L-النينيو في 54.8 ملغ / مل في محلول ملحي 0.9٪.
  2. إعداد قسامة معقمة من 20٪ Fluororuby (أو 20٪ أمين ديكستران المعقدة البيروكسيديز أو 2٪ Fluorogold) في محلول ملحي 0.9٪.
  3. تمييع معا 1: 1 لتركيزات النهائي من 27.4 ملغ / مل L-بظاهرة و 10٪ Fluororuby.
  4. أداء بروتوكول السكتة الدماغية على النحو الوارد أعلاه في خطوات 1،3-1،23.
  5. تصور التتبع الفلورسنت أصلا في قسم الأنسجة عن طريق تثبيت نضح، cryosectioning والفحص المجهري كما هو موضح سابقا 8.

4. معالجة الأنسجة لالمناعي

  1. في الفترة الفاصلة ما بعد السكتة الدماغية المناسب تتراوح بين 3 ساعة إلى 14 يوما بعد السكتة الدماغية، والموت ببطء وافقت الفئران عن طريق جرعة زائدة الأيزوفلورين أو IACUC المحلي الداخلي.
  2. فتح التجويف الصدري باستخدام مقص الزاوية وإدراج 23 G فراشة الإبرة في البطين الأيسر.
  3. وضع قطع صغيرة في الأذين الأيمن باستخدام مقص غرامة للسماح مسار تدفق للسائل الإرواء.
  4. يروي Transcardially مع 30-40 مل من الباردة المالحة الفوسفات مخزنة تليها 30-40 مل من البرد 4٪ امتصاص العرق بمعدل 10 مل / دقيقة في RT.
  5. قطع رأس الماوس وإزالة المخ باستخدام مقص العقيمة لفتح الجمجمة من الخلف ثم إزالة بلطف الجمجمة المغطي مع ملعقة، وضع الدماغ في الباردة PFA 4٪ لمدة 24 ساعة، ثم نقل إلى 30٪ سكروز في برنامج تلفزيوني لمدة 48 ساعة .
  6. إعداد أربعين أقسام ميكرون العائمة باستخدام ناظم البرد وتنفيذ معالجة الأجسام المضادة كما هو موضح سابقا 6-8. في هذه الدراسة، استخدم الأجسام المضادة التالية: أرنب المضادة للخيط عصبي 200 (1: 500 تمييع). أرنب مكافحة فيمنتين (1: 500)؛ الماعز مكافحة GFAP (1: 500)؛ أرنب مكافحة إيبا-1 (1: 1000).

5. معالجة الأنسجة للبروتين أو تحليل الحمض النووي الريبي

  1. في الفترة الفاصلة ما بعد السكتة الدماغية المناسب تتراوح بين 3 ساعة إلى 14 يوما بعد السكتة الدماغية، والموت ببطء عبر جرعة زائدة الأيزوفلورين أو وافق IACUC المحلي الداخلي.
  2. قطع رأسالماوس وإزالة المخ باستخدام مقص العقيمة لفتح الجمجمة من الخلف ثم إزالة بلطف الجمجمة المغطي مع ملعقة.
  3. إدراج معقمة 4 مم ملعقة في الجزء الأمامي من الدماغ لقطع البصلة الشمية والأعصاب البصرية. رفع بلطف الدماغ من القبة ومكان في المخزن تشريح المثلج (1X هانك المتوازن محلول الملح، 25 ملي HEPES-كوه، ودرجة الحموضة 7.4، 35 ملي الجلوكوز، 4 ملي بيكربونات الصوديوم، و 0.01 ملغ / مل cyclohexamide).
  4. باستخدام كتلة الدماغ ومعقمة شفرات الحلاقة الجديدة، وإعداد 2-3 ألواح ملم تحتوي على السكتة الدماغية والمكان إلى عازلة تشريح الباردة.
  5. تحت المجهر تشريح، وتحديد مسألة القشرة الحركية الأساسية البيضاء في نصف الكرة حقن. على فترات أطول بعد السكتة الدماغية، والمنطقة قد تكون بصريا التي حددها تنخر وشحوب المايلين.
    ملاحظة: في فترات سابقة بعد السكتة الدماغية، حقن L-بظاهرة مختلطة مع 1 ميكرولتر من 10٪ يمكن سريع الأخضر يمكن التعرف البصري من السكتة الدماغية ( الشكل 4A).
  6. تحت إشراف المجهر تشريح وباستخدام مشرط جديد، تشريح بعناية المنطقة من المادة البيضاء التي تحتوي على السكتة الدماغية، حدد إما عن طريق وضع العلامات الأخضر السريع أو فقدان الأنسجة. إزالة القشرة الفوقية والمخطط الأساسي كما تريد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

باستخدام النموذج المقدم، والمادة البيضاء forelimb الأساسي الحسية القشرة يمكن ان يعول عليه تكون مستهدفة. هذا النموذج السكتة الدماغية التي يسببها كيميائيا ينتج محور عصبي بؤري وفقدان المايلين، كثرة الخلايا النجمية، وكثرة الدبيقيات (الشكل 1)، وعادة ما ينظر إليها في عوائق الجوبي الإنسان. باستخدام ثلاث حقن، يتم تأسيس نموذجا مفيدا سريريا مع انخفاض في وقت مبكر على مهام forelimb السيارات 7 و جزء صغير لكنه مهم من التجارب أنسجة الم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد وصف عدد من النماذج السابقة من السكتة الدماغية تحت القشرية بما في ذلك حقن محورية في endothelin-1 في الكبسولة الداخلية، المادة البيضاء تحت القشرية والمخطط في الفئران 12-14 والفأر 6،15. وقد استخدمت المزيد من النماذج الأخيرة من السكتات الدماغية التنسيق صغيرة الكولسترول حقن microemboli في الشريان السباتي 16 وانسداد photothrombotic من واحد اختراق شرين 17. كل من هذه النماذج على حد سواء مزايا وعيوب 5. النموذج الذي وصفها في الوقت ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تلقى SN وMDD بدعم من المعاهد الوطنية للصحة K08 NS083740 ووزارة جامعة كاليفورنيا لعلم الأعصاب. يعترف AJG الدعم من قبل الدكتورة مريم ومؤسسة شيلدون أديلسون زاي للبحوث الطبية ومؤسسة لاري ل Hillblom. KLN بامتنان بدعم من مركز السكتة الدماغية القلب الأمريكية رابطة 14BFSC17760005 ASA-Bugher. ودعمت سوء، السلع والخدمات البيئية وشركة الاتصالات السعودية من قبل المعاهد الوطنية للصحة R01 NS071481. يعترف JDH بدعم من المعاهد الوطنية للصحة K08 NS083740.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
L-N5- (1-إيمينوإيثيل) أورنيثين ، ثنائي هيدروكلوريدكالبيوكيم400600-20 مجم
إيزوفلورانفينيكس للأدوية ، وشركةNDC 57319-559-06
الأنابيب الشعريةالدقة50-821-807
PicospritzerParker InstrumentationPicospritzer II
الإعداد التجسيميكينت ScientificKSC51725
مجتذب الماصةKOPFموديل 720
مجهر مجسم SZ51أوليمبوس88-124
مقص ناعمأدوات علمية دقيقة14084-08
ملقطجهاز هارفاردPY2 72-8547
ملقط منحنيهارفاردPY2 72-8598
أداة تشريح حادةأدوات علمية دقيقة10066-15
مثقابDremel8220-1 / 28
لقم الثقبغرامة الأدوات العلمية19007-05
Vetbond3M1469SB 
MarcaineHOSPIRANDC 0409-1610-50
Trimethoprim-SulfamethaxoleSTI PharmacyNDC 54879-007-16
FluororubyFluorochrome Inc30 مجم
بارافورمالديهايدفيشرO4042-500
السكروزفيشرBP220-10
CryostatLeica CM3050 S14047033518
شرائح زجاجيةفيشر12-544-7
سريع أخضر & nbsp ؛مجهر تشريح SigmaF7252-5G
نيكونSMZ1500
23 جرام إبرة فراشةفيشر14-840-35
10x Hank's Balanced SaltSolution LifeTechnologies 14065056
1 M HEPES-KOH ، درجة الحموضة 7.4Affymetrix16924
D-GlucoseSigmaG8270
بيكربونات الصوديومSigmaS5761
CyclohexamideSigma01810
العالمية جهاز

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129, 28-292 (2014).
  2. Saini, M., et al. Silent stroke: not listened to rather than silent. Stroke. 43, 3102-3104 (2012).
  3. Koton, S., et al. Burden and outcome of prevalent ischemic brain disease in a national acute stroke registry. Stroke. 44, 3293-3297 (2013).
  4. Jiwa, N. S., Garrard, P., Hainsworth, A. H. Experimental models of vascular dementia and vascular cognitive impairment: a systematic review. J Neurochem. 115, 814-828 (2010).
  5. Sozmen, E. G., Hinman, J. D., Carmichael, S. T. Models that matter: white matter stroke models. Neurotherapeutics. 9, 349-358 (2012).
  6. Sozmen, E. G., Kolekar, A., Havton, L. A., Carmichael, S. T. A white matter stroke model in the mouse: axonal damage, progenitor responses and MRI correlates. J Neurosci Methods. 180, 261-272 (2009).
  7. Rosenzweig, S., Carmichael, S. T. Age-dependent exacerbation of white matter stroke outcomes: a role for oxidative damage and inflammatory mediators. Stroke. 44, 2579-2586 (2013).
  8. Hinman, J. D., Rasband, M. N., Carmichael, S. T. Remodeling of the axon initial segment after focal cortical and white matter stroke. Stroke. 44, 182-189 (2013).
  9. McCall, T. B., Feelisch, M., Palmer, R. M., Moncada, S. Identification of N-iminoethyl-L-ornithine as an irreversible inhibitor of nitric oxide synthase in phagocytic cells. Brit j pharmacol. 102, 234-238 (1991).
  10. Gadea, A., Aguirre, A., Haydar, T. F., Gallo, V. Endothelin-1 regulates oligodendrocyte development. J Neurosci. 29, 10047-10062 (2009).
  11. Dean, D. A. Preparation (pulling) of needles for gene delivery by microinjection. CSH prot. , (2006).
  12. Hughes, P. M., et al. Focal lesions in the rat central nervous system induced by endothelin-1. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 62, 1276-1286 (2003).
  13. Whitehead, S. N., Hachinski, V. C., Cechetto, D. F. Interaction between a rat model of cerebral ischemia and beta-amyloid toxicity: inflammatory responses. Stroke. 36, 107-112 (2005).
  14. Frost, S. B., Barbay, S., Mumert, M. L., Stowe, A. M., Nudo, R. J. An animal model of capsular infarct: endothelin-1 injections in the rat. Behav Brain Res. 169, 206-211 (2006).
  15. Horie, N., et al. Mouse model of focal cerebral ischemia using endothelin-1. J Neurosci Methods. 173, 286-290 (2008).
  16. Wang, M., et al. Cognitive deficits and delayed neuronal loss in a mouse model of multiple microinfarcts. Neuroscience. 32, 17948-17960 (2012).
  17. Shih, A. Y., et al. The smallest stroke: occlusion of one penetrating vessel leads to infarction and a cognitive deficit. Nat Neurosci. 16, 55-63 (2013).
  18. Jung, K. J., et al. The role of endothelin receptor A during myelination of developing oligodendrocytes. J Korean Med Sci. 26, 92-99 (2011).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

White Matter StrokeMurine ModelSubcortical StrokeFocal InfarctionStereotactic InjectionL Nio InjectionAxonal DegenerationMicroglial ReactivityAstrocyte MorphologyNeuronal Tracing

مقالات ذات صلة