Method Article

طريقة بسيطة لالآلي المرحلة الصلبة استخراج عينات المياه للتحليل المناعية من الملوثات الصغيرة

DOI:

10.3791/53438

⸱

January 1st, 2016

 ,  ,  ,  ,  , 
1Centre Suisse d'Electronique et de Microtechnique, 2Department of Chemistry and Applied Biosciences, ETH Zurich, 3Department of Information Technology and Electrical Engineering, ETH Zurich

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتم تقديم بروتوكول لاستخراج الاستراديول وتركيزه المسبق من عينات المياه باستخدام نظام آلي ومصغر.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويقترح طريقة جديدة لاستخراج المرحلة الصلبة (SPE) من العينات البيئية للمياه. النموذج المتقدمة ودية فعالة من حيث التكلفة وسهلة، ويمكن أن تؤدي SPE السريع، والآلي وبسيط. الحل قبل المركز متوافق مع تحليلها من قبل المناعية، مع نسبة منخفضة من المذيبات العضوية. وصفت طريقة لاستخراج وقبل تركيز الهرمون الطبيعي 17β استراديول في 100 مل عينات المياه. يتم تنفيذ المرحلة العكسية SPE مع octadecyl السيليكا المواد الماصة ويتم شطف مع 200 ميكرولتر من الميثانول 50٪ ت / ت. غير المخفف شاطف بإضافة مياه دي لخفض كمية من الميثانول. بعد إعداد يدويا العمود SPE، يتم تنفيذ الإجراء الشامل تلقائيا في غضون 1 ساعة. في نهاية هذه العملية، يتم قياس تركيز الاستراديول باستخدام انزيم مرتبط التجاري المناعية بالأنزيم (ELISA). ويتحقق 100 أضعاف ما قبل التركيز ومحتوى الميثانول في 10٪ فقط ت / ت. المبالغ المستردة كامل للجزيءتتحقق مع 1 نانوغرام / L ارتفعت عينات مياه البحر غير المتأينة والاصطناعية.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

إعداد نموذج يمثل خطوة مهمة في أي عملية التحليل. على وجه الخصوص، وإزالة آثار مصفوفة، انتقاص من تدخلات، وإثراء الحليلة ضرورية للحصول على نتائج دقيقة وتصل إلى حدود منخفضة من الكشف. الغدد الصماء المركبات (EDCs) تثير القلق بشكل خاص نظرا لعملها على الكائنات الحية حتى عندما الحالية في مستويات منخفضة جدا في البيئة. هرمون الطبيعي 17β استراديول موجود على تلوث المياه الاتحاد الأوروبي قائمة المراقبة وعرضة لتضاف إلى قائمة المواد ذات الأولوية تنظيمها بموجب الإطار التوجيهي للمياه الأوروبي. يتم تطبيق المرحلة الصلبة استخراج (SPE) عادة لتحليل الملوثات الصغيرة في الماء، مع كل الكيميائي 1-5 (اللوني، مطياف الكتلة) والمناعية 6-9

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ملاحظة: يصف بروتوكول التالية إجراء SPE على 100 عينة مل من الماء مع C18 الماصة وشطف مع 50٪ ت / ت الميثانول. يتم تخفيف العينة المخصب لتصل الى 10٪ ت / ت الميثانول قبل التحليل مع انزيم مرتبط المناعي مقايسة (ELISA) عدة.

1. إعداد الكواشف

  1. تحضير عينات المياه
    1. قبل أي خطوة أخرى، تصفية كل عينة 100 مل من الماء مع مرشحات حجم 0.2 ميكرون المسام.
    2. ارتف....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تقييم استنساخ المواد الماصة التعبئة من قبل التجفيف والترجيح والمواد الماصة pipetted في قوارير زجاجية ويتم إظهار النتيجة في الشكل 1. استنساخ وقت الحقن تم اختباره لمدة 100 مل العينات، كما هو مبين في الشكل 2. التركيز في البداية ومرحلة ما قبل ارتفعت المركزة تم تحديد العينات باستخدام مجموعة ELISA التجارية ل17β استراديول وتظهر في الشكل 3.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

واقترح طريقة جديدة لإعداد عينات من المياه تليها التحليل باستخدام المناعية. تمكن أداة لتنفيذ استخراج المرحلة الصلبة بطريقة مؤتمتة وسهلة الاستعمال.

الترشيح من عينة المياه قبل الحقن لها في النظام أمر بالغ الأهمية. فإن أي الجسيمات التي لا تزال موجودة في الحل أن يسبب انسداد في الشبكة الموائعية وعرقلة العمود SPE. خطوة هامة أخرى هي إعداد العمود SPE. كمية من الجسيمات في العمود أمر بالغ الأهمية لتحقيق أفضل أداء ممكن. يجب .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تمويل هذا العمل من قبل برنامج الإطار السابع للاتحاد الأوروبي FP7 / 2007-2013 بموجب اتفاقية المنحة رقم 265721. يشكر المؤلفون معهد RIKILT لسلامة الأغذية (NL) على دعمهم في هذا المشروع.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
غشاء المرشح 0.2 & مو ؛ م حجم المسامMerck MilliporeGNWP04700لترشيح عينة
غشاء النايلون 11 & م حجم المسامMerck MilliporeNY1104700لعمود SPE
لكمة خزعة يمكن التخلص منها 5 ممالميزانية الطبية39302439
Nucleodur C18 ec & nbsp ؛Macherey Nagel713550.0150 & mu; قطر الجسيمات م
مياه البحر الاصطناعيةسيجما ألدريتشSSWS500-500 مل
ميثانولVWR
17 بيتا استراديول قياسيإنزو لايف ساينس300 نانوغرام / مل
17 بيتا استراديول طقم ELISAإنزو لايف ساينسADI-900-00896 بئر ، النطاق 30 - 3,000 نانوغرام / لتر

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chang, H. S., Choo, K. H., Choi, S. J. The methods of identification, analysis and removal of endocrine disrupting compounds (EDCs) in water. J. Hazard. Matter. 172, 1-12 (2009).
  2. Azzouz, A., Souhail, B., Ballesteros, E.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Solid Phase ExtractionAutomated SPEWater Sample AnalysisImmunoassay CompatibilityEstradiol DetectionOctadecyl Silica SorbentMethanol ElutionELISA AnalysisEnvironmental MonitoringPollutant Pre concentration

Related Articles