لدراسة الجمع بين الأعضاء الصلبة وزرع الأوعية الدموية المركبة ، نصف نموذجا جديدا لجدار الصدر غير المتجانس في كتلة ، والغدة الصعترية ، وزرع القلب في الفئران باستخدام تقنية الكفة العنقية غير الخياطة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
لدراسة الجمع بين الأعضاء الصلبة وزرع الأوعية الدموية المركبة ، نصف نموذجا جديدا لجدار الصدر غير المتجانس في كتلة ، والغدة الصعترية ، وزرع القلب في الفئران باستخدام تقنية الكفة العنقية غير الخياطة.
يجب متابعة استكشاف استراتيجيات جديدة في زراعة الأعضاء لإطالة بقاء الطعم الخيفي وتقليل الحاجة إلى الحفاظ على المدى الطويل ، ومنع تثبيط المناعة. أظهر استخدام زرع نخاع العظم الوعائي والزرع المشترك للغدة الصعترية وعدا في هذا الصدد في نماذج حيوانية مختلفة. 1-11 يسمح زرع نخاع العظم الوعائي بالنقل المستمر لخلايا نخاع العظم المانحة داخل البيئة المكروية المحفوظة للمتبرع ، وقد أظهر دمج أنسجة الغدة الصعترية مع زرع نخاع العظم الوعائي أنه يزيد من خيميرية الخلايا التائية التي تلعب في النهاية دورا داعما في تحريض تنظيم المناعة. يمكن أن يجمع الجمع بين العضو الصلب وزرع الأوعية الدموية المركب بشكل فريد بين هذه الاستراتيجيات في شكل نموذج زرع جديد. تعمل نماذج الفئران كنموذج ممتاز لاستكشاف آليات الرفض الحاد والمزمن ، والخيميرية ، وتحريض التسامح ، وبالتالي توفير الأساس لنشر استراتيجيات بقاء الطعم الخيفي الفائقة للنماذج الحيوانية الأكبر والتطبيق السريري المستقبلي. هنا ، قمنا بتطوير نموذج جديد لزرع جدار الصدر غير المتجانس في كتلة ، والغدة الصعترية ، والقلب في الفئران باستخدام تقنية الكفة العنقية غير الخيطة. يتم وصف التجربة في إعدادات الزرع التركيبية والخيفية للتحقيقات المناعية الأوسع نطاقا في المستقبل عبر مخطوطة تعليمية وملحق فيديو.
زراعة القلب هي العلاج المفضل لفشل القلب في المرحلة النهائية. دفعت كل من التطورات التقنية والابتكارات الدوائية المجال إلى معدلات قبول مبكرة للكسب غير المشروع فوق 90٪. 12،13 على الرغم من ذلك ، فإن بقاء الكسب غير المشروع لمدة 5 سنوات بنسبة 60-80٪ في حالة توقف ولا يزال الرفض المزمن ، الذي يتميز باعتلال الأوعية الدموية المزروع ، أمرا لا مفر منه. 14-16 علاوة على ذلك ، يخضع المرضى لعمليات جراحية متعددة وتثبيط المناعة مدى الحياة ، والتي ترتبط بتشوهات جدار الصدر والعقابيل الطبية والسمية ، على التوالي. الحاجة إلى مناهج مبتكرة لإطالة بقاء الطعم الخيفي ، وتقليل المتطلبات المثبطة للمناعة ، وتقديم خيارات ترميمية للتشوهات التشريحية ملحة.
تقدم زراعة الأوعية الدموية المركبة استراتيجية فريدة لتحسين نتائج زراعة القلب من الناحية المناعية وكذلك من المنظور الترميمي. 17 تعتبر الطعوم الخيفية المركبة الوعائية فريدة أيضا من نوعها بطريقة تحتوي على مصدر متأصل للخلايا الجذعية المكونة للدم المشتقة من المتبرع والتي أظهرت قدرة مواتية على تقليل تثبيط المناعة والحث على الوهم المختلط والحفاظ عليه. 1-8 بالإضافة إلى ذلك ، أظهر الزرع المشترك للغدة الصعترية إطالة بقاء كل من عمليات زرع الأعضاء الصلبة والطعوم الخيفية المركبة الوعائية. 2،9-11 يوفر الجمع بين هذه الاستراتيجيات وزراعة القلب حلا جديدا للتحديات المذكورة أعلاه التي تواجه زراعة القلب. 18
تعمل نماذج الفئرانكمنصات ممتازة للتحقيق الميكانيكي في الجسم الحي بسبب توافر الأجسام المضادة والسلالات الفطرية والضربة القاضية المحددة جيدا. 19-21 على الرغم من أن زراعة القلب في الفئران تتم دراستها بشكل شائع باستخدام نموذج زرع خياطة جراحية مجهرية غير متجانسة داخل البطن22-25 ، فقد أظهر نموذج تقنية الكفة غير المتجانسة وعنق الرحم وغير الخياطة أنه قابل للتكرار للغاية وموثوق به ويحمل معدلات أقل من تجلط الدم. 19،26،27 الهدف من هذه الدراسة هو تطوير جدار الصدر العظمي والجلد غير المتجانس في الكتلة ، والغدة الصعترية ، وتقنية زرع القلب في الفئران لدراسة الآليات المناعية للعضو الصلب المشترك وزرع الأوعية الدموية المركب باستخدام تقنية الكفة العنقية غير الخياطة. يتم نشر هذا الطعم الخيفي العنقودي من خلال مفاغرة الشريان الأورطي الهابط للمتبرع إلى الشريان السباتي المشترك الأيمن والشريان الرئوي المتبرع إلى الوريد الوداجي الخارجي الأيمن. يعد الحفاظ على الأوعية الصدرية الداخلية وفروع الغدة الصعترية المرتبطة بها أمرا بالغ الأهمية لاختراق جدار الصدر (القص والأضلاع والعضلات والجلد) والغدة الصعترية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم الانتهاء من جميع الإجراءات المنطوق في الامتثال مع جامعة جونز هوبكنز وزارة الزراعة في الولايات المتحدة ومتطلبات الخدمة الصحية العامة. يتبع هذا البروتوكول لجنة جامعة جونز هوبكنز رعاية الحيوان واستخدام، وافق مجلس المراجعة المؤسسية المبادئ التوجيهية (عدد بروتوكول M013M490). تم تسجيل البيانات بقاء النهائي للإجراءات الجراحية هو موضح أدناه. كل من الحيوانات المانحة والمتلقية تلقي التخدير وقائية باستخدام البوبرينورفين عند 0.1 مغ / كغ الشوري ساعة واحدة قبل الجراحة وفي البوبرينورفين الحيوان المتلقي هو إعادة تدار-في نفس الجرعة بعد زرع وإعادة مداوي حسب الحاجة في أول 48 ساعة بعد الجراحة.
1. المانحة المزروع الانتعاش
ملاحظة: يبدأ الجزء المانحة للزراعة 40 دقيقة في وقت سابق من زرع المتلقية للتقليل من الوقت تخدير المتلقي وتسهيل فترة نهاية في وقت واحد أو الأذن قليلاوقت انتهاء لير مقابل إعداد المتلقي.
2. إعداد مستلم
ملاحظة: لتقليل وقت تخدير المتلقي،بدء إعداد المتلقي في محطة منفصلة المنطوق حوالي 40 دقيقة قبل الانتهاء من حصاد المزروع المانحة.
3. المزروع أقحم
4. بعد العملية الجراحية العناية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
مسانج C57BL / 6 زرع حققت البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل. أثبتت تصميم المزروع (الشكل 1) أن تكون ناجحة من وجهة نظر البقاء على قيد الحياة الحيوانية والقدرة على تقييم بقاء المزروع مستمر. وقد تجلى ذلك من خلال الجلد المغطي قابلة للحياة، ونشط نمو الشعر المزروع المستمر المتبقية، وكانوا قادرين على أن تقيم مع التصور والإصبع جس النبض. يتم تمثيل البيانات بقاء في الشكل 2 لمسانج زرع الفئران. وكان متوسط الوقت البقاء على قيد الحياة أكثر...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
هناك العديد من الظواهر التي تؤثر في التحقيق المناعية من زرع الطعم الخيفي، والتي تشمل ولكن لا تقتصر على آليات الرفض الحاد والمزمن، تقديم المستضد المباشر وغير المباشر، وتوعية المتلقي، أو تحريض الخيمرية مختلطة. وأصبحت 19 النماذج الحيوانية يتم تطبيق معيار الذهب لدراسة زرع المناعة، ونماذج الماوس شعبيا نظرا لانخفاض تكلفتها، وتوافر المعدلة وراثيا وخروج المغلوب الجينات الفئران، الاجسام المضادة المتاحة تجاريا، انخفضت قريب مطالب البيطرية والإسكان، وسهولة النسخ المتماثل. حتى الآن،...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح أو إفصاحات مالية للإعلان عنها.
تم تمويل هذا العمل من قبل جائزة الباحث الأكاديمي للجمعية الأمريكية لجراحي التجميل لعام 2014.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Euro-Collins | لا يتم شراء الحل تجاريا ولكن يتم تحضيره في المختبر. لعمل محلول سعة 500 مل ، أضف المكون المدرج أدناه إلى 330 مل من الماء المقطر المزدوج. تخلط جيدا ، ثم املأ باقي 170 مل من الماء المقطر المزدوج في المحلول إلى حجم نهائي يبلغ 500 مل المكونات: 1.02 جم KH2< / sub>PO4< / sub> ، 3.66 جم K2< / sub>HPO4< / sub> ، 0.56 جم KCl و 0.42 جم NaHCO3< / sub> و 17.52 جم من الجلوكوز. | ||
| خياطة | إثيلون | MWI 72667 | 6-0 إثيلون https://www.mwivet.com (MWI - المستلزمات البيطرية) |
| بوليميد الكفة الوريد (21 جم) Vention | Medical | 141-0043 | http://www.ventionmedical.com/products-and-services/polyimide-tubing/ |
| بوليميد كفة الشريان (24G) | Vention Medical | 141-0027 | http://www.ventionmedical.com/products-and-services/polyimide-tubing/ |
| قسطرة بلاستيكية ناعمة | Terumo | SR *OX2419CA | 24 جيجا × 3/4 بوصة |
| موسع الجراحة المجهرية | S & | D-5a.1 | ، 11 سم، FH، 0.1 مم AT10d |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.