الحليب هو مصدر أساسي لتغذية حديثي الولادة. قد يوفر تحليل مكونات الحليب نظرة ثاقبة لعوامل الأم التي تؤثر على صحة النسل. يصف هذا البروتوكول طريقة يدوية لجمع عينات الحليب من الفئران المرضعة ، والتي يمكن استخدامها بعد ذلك لمزيد من التحليل النهائي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الحليب مجموعة في الفئران عن طريق أنابيب شعرية وتقدير من الحليب الدسم المحتوى من قبل Creamatocrit
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الحليب ، باعتباره المصدر الوحيد لتغذية الثدييات حديثي الولادة ، يوفر العناصر الغذائية والطاقة اللازمة لنمو النسل وتطوره. كما أنه يحتوي على عدد كبير من المركبات النشطة بيولوجيا التي تؤثر بشكل كبير على نمو حديثي الولادة. سيساعد تحليل مكونات الحليب في توضيح العوامل الرئيسية التي تربط عملية التمثيل الغذائي للأم وصحتها بنمو النسل وتطوره. يمثل فأر المختبر كائنا نموذجيا شائعا لدراسات الأم ، ويمكن استخدام حليب الفئران لفحص تأثير مختلف التدخلات الفسيولوجية والتغذوية والدوائية للأمهات على مكونات الحليب ، والتي قد تؤثر بعد ذلك على صحة النسل. هنا يتم وصف طريقة بسيطة لجمع الحليب يدويا من الفئران المرضعة والتي يمكن إجراؤها بواسطة محقق واحد ، ولا تتطلب معدات تفريغ أو شفط متخصصة ، وتوفر حليبا كافيا للتحليل اللاحق للمصب كما يتم تقديم طريقة لتقدير محتوى الدهون في الحليب عن طريق قياس النسبة المئوية للكريمة داخل عينة الحليب ، والمعروفة باسم الكريماتوكريت. يمكن استخدام هذه الأساليب في نهاية المطاف لزيادة البصيرة في صحة الأم والطفل وتوضيح العوامل الأمومية التي تشارك في النمو والتطور السليمين للنسل.
المقدمة
الحليب هو المصدر الوحيد لتغذية الثدييات حديثي الولادة، وتوفير الطاقة والمواد المغذية للنمو الرضع و1،2 التنمية. بينما الحليب يتكون أساسا من الخلايا، والدهون، والبروتين 1، كما أنه يحتوي على عدد كبير من المركبات النشطة بيولوجيا التي تعدل تطوير الحياة في وقت مبكر من ذرية بما في ذلك الإنزيمات، الكربوهيدرات، الهرمونات، والأجسام المضادة، عوامل النمو، السيتوكينات، exosomes، microvesicles، والرنا صغيرة من هذا القبيل كما الرنا الميكروي 1،2. الدور الأساسي للحليب الأم في إنشاء ذرية المناعة، وصحة الأمعاء 3، بالإضافة إلى أدلة على أن الرضاعة الطبيعية الرضع أقل عرضة للإصابة بالأمراض 2، يسل....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل جامعة كالجاري جنة رعاية الحيوان ومطابقة للدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.
1. سد منفصلة من النسل
- فصل السد من نسلها مدة لا تقل عن 5 دقائق قبل الحلب 12.
ملاحظة: يمكن تحلب السد تصل إلى 5-6 ساعة بعد الانفصال 1،6،13، لكن فترات الانفصال أطول من 4 ساعات قد يغير تركيبة حليب 14. في حين لا يظهر الوقت الفاصل للتأثير حليب حجم جمع 12، وينصح أن الوقت الفاصل ثابت أن يستمر طوال فت....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم جمع الحليب كما هو موضح في الفطام من السدود ويستار (حوالي 22 أسابيع من العمر، وزنها 350-400 ز) أن تستهلك التحكم (AIN-93g و، ن = 5)، نسبة عالية من البروتين (40٪ الكازين وزن / وزن، ن = 5) ، أو الألياف تسبق التكوين الجنيني عالية (21.6٪ وزن / وزن، 1: 1 نسبة oligofructose وحبوب، ن = 4) النظام الغذائي طوال فترة الحمل والرضاعة. وكانت جرعة الأوكسيتوسين 2 وحدة دولية. وقد تم جمع الحليب باستخدام الأنابيب الشعرية، ونسج أنبوب واحد باستخدام الدوار الهيماتوكريت لتحديد creamatocrit (الش.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
زادت التحقيقات في مكونات حليب الأم مع زيادة الاهتمام بأبحاث تطوير الحياة المبكرة. باعتبارها المصدر الوحيد للتغذية خلال فترة حديثي الولادة ، فإن المركبات النشطة بيولوجيا في الحليب ضرورية للنمو والتطور المثاليين ، خاصة في سياق صحة الأمعاء والمناعة3. الطريقة المعروضة هنا هي طريقة بسيطة وغير جراحية لجمع الحليب من الجرذ المرضع بكميات كافية لتحليل المصب ، مثل تنميط قليل السكاريد6. لا تتطلب الطريقة أي معدات تفريغ متخصصة ويمكن أن يقوم بها شخص واحد.
في حين أن هذا البروتوكول مخصص .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم تضارب المصالح في الكشف عنها. وأجريت التجارب على الحيوانات فقط وفقا للبروتوكولات CCAC المعتمدة.
شكر وتقدير
وأيد هذا يعمل من خلال المنح المقدمة من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث كندا (RGPIN 238٬382-2011) والمعاهد الكندية لأبحاث الصحة (MOP115076). وأيد هيذر بول من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث كندا للمنح الدراسية للدراسات العليا والمنح ألبرتا ابتكارات حلول الصحة. وأيد ميغان هالام من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث الدراسات العليا للمنح الدراسية، على منحة فريدريك بانتينغ وتشارلز أفضل كندا العليا، وجائزة لألبرتا للأطفال معهد بحوث مستشفى التدريب في علم الوراثة، تنمية الطفل، والصحة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوي >< > معدات - الحلب < / م >< / قوي > | |||
| 1 مل محاقن | BD-Canada | 309602 | |
| 25 G إبر | BD-Canada | 305122 | |
| 18 G إبر | BD-Canada | 305196 | |
| 50 & mu ؛ ل أنابيب الشعيرات الدموية للموزع | الدقيق فيشر سيانتيفيك | 21-169D | |
| أوكسيتوسين (20 وحدة USP / مل) | Bimeda-MTC | 1OXY015 | |
| PPC Vet Isoflurane التخدير الاستنشاقي ، 250 مل | Fresenius Kabi | M60302 | تستخدم بطلب طبيب بيطري |
| وسادة تحضير الكحول المعقمة | Dukal | 853 | |
| مقعد ماص Underpad | VWR | 82020-845 | |
| ماكسي ثيرم هايبر / انخفاض حرارة الجسم بطانية | سينسيناتي Sub-Zero | 274 | |
| آلة تخدير القوارض مع المرذاذ | بنسون للصناعات الطبية Inc. | تخضع للاحتياجات المختبرية | |
| الفردية أقنعة | بنسون للصناعات الطبية ، Inc. | 50100/50102 | |
| أنابيب الطرد المركزي | الدقيقة Axygen | MCT-060-C | |
| ChroMini المهنية الانتهازي | Wahl | ||
| Equipment - Creamatocrit< / em>< / strong> | |||
| StatSpin SafeCrit البلاستيك Microhematocrit (غير المعالجة) | فيشر Scientific | 22-274-914 | |
| Critoseal صينية مانع التسرب الأنبوبي الشعرية | VWR | 470161-478 | |
| StatSpin CritSpin Microhematocrit الطرد المركزي | Beckman Coulter، Inc | X00-004999-001 |
المراجع
- Izumi, H., Kosaka, N., Shimizu, T., Sekine, K., Ochiya, T., Takase, M. Time-dependent expression profiles of microRNAs and mRNAs in rat milk whey. PLoS ONE. 9 (2), e0088843(2014).
- Hsieh, C. C., Hernández-Ledesma, B., Fernández-Tomé, S., Weinborn, V., Barile, D., de Moura Bell, J. M.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
