مقالة منهجية

التي تعتمد على ملوحة سمية الفحص من الفضة Nanocolloids عن طريق الميداكا البيض

DOI:

10.3791/53550

⸱

مارس 18, 2016

 , 
1Graduate School of Life Sciences, Toyo University, 2Research Center for Life and Environmental Sciences, Toyo University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = 'jove_content'> المراحل الجنينية هي الأكثر عرضة للإصابة بالكائنات الغريبة. على الرغم من أن السمية الكيميائية تعتمد على الملوحة ، إلا أنه لا توجد طريقة لاختبار اعتماد السمية على الملوحة للكائنات المائية. هنا ، نصف طريقة جديدة وعالية الإنتاجية لتحديد اعتماد السمية على الملوحة للأجنة المائية.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الملوحة هي من أهم خصائص البيئة المائية. للكائنات المائية أنها تحدد موائل المياه العذبة والمياه المالحة، ومياه البحر. في كثير من الأحيان يتم إجراء اختبارات السمية للمواد الكيميائية وتقييم المخاطر البيئية على الأحياء المائية في المياه العذبة، ولكن سمية المواد الكيميائية للكائنات المائية يعتمد على درجة الحموضة، ودرجة الحرارة، والملوحة. لا توجد طريقة، ومع ذلك، لاختبار الاعتماد ملوحة السمية بالنسبة للكائنات المائية. هنا، كنا الميداكا (Oryzias latipes) لأنها يمكن أن تتكيف مع المياه العذبة والمياه المالحة، ومياه البحر. تركيزات مختلفة من متوسطة تربية جنين (ERM) (1X، 5X، 10X، 15X، 20X، و30X) كانوا يعملون لاختبار سمية الجسيمات nanocolloidal الفضة (الرسائل الوطنية الثانية) لالميداكا البيض (1X ERM و30X ERM ديك الضغوط الأسموزية أي ما يعادل على المياه العذبة ومياه البحر، على التوالي). في لوحات ستة جيدا البلاستيكية، تعرضت 15 بيضة الميداكا في ثلاث نسخ إلى الرسائل الوطنية الثانية في 10 ملغم / لتر و# 8722؛ (1) في تركيزات مختلفة من إدارة مخاطر المؤسسات في الرقم الهيدروجيني 7 و 25 درجة مئوية في الظلام.

كنا المجهر تشريح وميكرومتر لقياس معدل ضربات القلب في 15 ثانية والعين قطر يوم 6 و طول الجسم الكامل للاليرقات على الفقس اليوم (القسم 4). وقد لوحظت الأجنة حتى الفقس أو 14 يوما. نحن ثم عد معدل الفقس كل يوم لمدة 14 يوما (المادة 4). لنرى تراكم الفضة في الأجنة، استخدمنا إضافة بالحث البلازما الطيفي لقياس تركيز الفضة من الحلول اختبار (القسم 5) والأجنة dechorionated (المادة 6). وسمية الرسائل الوطنية الثانية لأجنة الميداكا زيادة الواضح مع زيادة الملوحة. هذا الأسلوب الجديد يسمح لنا لاختبار سمية المواد الكيميائية في درجات الملوحة المختلفة.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

منذ إنشاء منظمة التعاون الاقتصادي والمبادئ التوجيهية للاختبار التنمية (OECD) للمواد الكيميائية الاختبار في عام 1979، تم نشر 38 المبادئ التوجيهية للاختبار في القسم 2 من المبادئ التوجيهية، تأثيرات على الأنظمة الحيوية 1. جميع الكائنات الحية المائية اختبارها كانت من موائل المياه العذبة، وهي محطات المياه العذبة؛ الطحالب. اللافقاريات مثل الغار والهاموش. والأسماك مثل الميداكا، الزرد، وتراوت قوس قزح. بالمقارنة مع بيئات المياه المالحة، وبيئات المياه العذبة أكثر المتضررين مباشرة من الأنشطة الاقتصادية والصناعية الإنسان. ولذلك، فقد تم ترتيب أولوية بيئات المياه العذبة لاختبار لأنهم أكثر عرضة من التلوث.

في المناطق الساحلية، بما في ذلك مصبات الأنهار، الملوحة تختلف بين أوضاع المياه ومياه البحر المالحة، وغالبا ما لوثت هذه المناطق حسب النشاط الصناعي 2. تتميز المناطق الساحلية والأراضي الرطبة المرتبطة بها التي كتبها hالتنوع البيولوجي البيئي IGH والإنتاجية. ولذلك يجب أن النظم الإيكولوجية الساحلية تكون محمية من التلوث الكيميائي. ومع ذلك، هناك كان محدودا البحوث السمية البيئية في موائل المياه ومياه البحر المالحة.

Sakaizumi 3 درس التفاعلات السامة بين ميثيل الزئبق والملوحة في البيض الميداكا اليابانية، ووجدت أن زيادة الضغط الاسموزي لمحلول الاختبار تعزيز سمية ميثيل الزئبق. . Sumitani آخرون 4 يستخدم البيض الميداكا للتحقيق سمية العصارة المكب. وجدوا أن معادلة الاسموزية للالعصارة إلى البيض هو المفتاح لإحداث تشوهات خلال مرحلة التطور الجنيني. وبالإضافة إلى ذلك، ذكرت Kashiwada 5 أن الجسيمات النانوية البلاستيك (39.4 نانومتر في القطر) تغلغلت بسهولة من خلال المشيمه الميداكا البيض في ظل ظروف شديدة الملوحة (15X الجنين تربية المتوسطة (ERM)).

نموذج سمكة صغيرة نموذجية، والميداكا اليابانية (Oryzias latipes ) وقد استخدمت في البيولوجيا الأساسية والسمية الإيكولوجية 6. يمكن الميداكا اليابانية يعيشون في ظروف تتراوح من المياه العذبة إلى مياه البحر بسبب كلوريد الخلايا المتقدمة جدا على 7. وهم بالتالي من المحتمل أن تكون مفيدة لاختبار في ظروف مع مجموعة واسعة من الملوحة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم علاج الميداكا اليابانية المستخدمة في هذه الدراسة إنسانية وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية للجامعة تويو، مع إيلاء الاعتبار الواجب للتخفيف من القلق والانزعاج.

1. الفضة Nanocolloids (الرسائل الوطنية الثانية)

  1. شراء الرسائل الوطنية الثانية النقاء (20 ملغ / لتر -1، 99.99٪ النقاء، الجسيمات يعني قطرها حوالي 28.4 ± 8.5 نانومتر العالقة في الماء المقطر).
  2. التحقق من نقاء وتركيز على الميدالية الفضية عن طريق إضافة بالحث البلازما الطيفي (ICP-MS) يحلل وفقا لدليل التشغيل 8. التحليلات وصفت طريقة المعالجة لICP-MS في قسم 7.

2. إعداد SNC حلول (خليط من الفضة الغروية وحج +) مع الملوحة المختلفة

  1. إعداد 60 ERM × تتألف من 60 ز كلوريد الصوديوم، 1.8 ز بوكل، 2.4 غ CaCl 2 · 2H 2 O، و9.78 ز MgSO 4 · 7H 2 O في 1 لتر من الموجrapure المياه؛ ضبط درجة الحموضة إلى 7.0 مع 1.25٪ NaHCO 3 في الماء عالى النقاء.
  2. تحريك حل ERM عند 25 درجة مئوية خلال الليل.
  3. مزيج الرسائل الوطنية الثانية مع ERM المخفف. إعداد 40 مل من كل حل SNC-ERM مختلطة. التركيز النهائي هو 10 ملغ / لتر -1 من الرسائل الوطنية الثانية في تركيزات مختلفة من ERM (1X، 5X، 10X، 15X، 20X، أو 30X).
  4. ضبط درجة الحموضة في حل مختلط SNC-ERM إلى 7.0 مع 0.625٪ NaHCO 3 في الماء عالى النقاء. ضبط الأس الهيدروجيني مهم جدا في إعداد الحل SNC، ليتم تسهيل الإفراج حج + من الظروف الحمضية 9.
  5. استخدام AGNO 3 كمركب مرجعية للالرسائل الوطنية الثانية.
    1. مزيج AGNO 3 مع ERM المخفف. إعداد 40 مل من AGNO 3 -ERM حل مختلط في تركيز AGNO 3 من 15.7 ملغم / لتر -1 (10 ملغ / لتر -1 الفضة) في تركيزات مختلفة من ERM (1X، 5X، 10X، 15X، 20X، أو 30X) .
      ملاحظة: لدراسة سمية الغروانية الفضة، AGNO 3الحل، الذي هو مصدر من الفضة القابلة للذوبان، ويستخدم كمركب مرجعية للالرسائل الوطنية الثانية، والتي هي خليط من المواد الغروية الفضة والفضة القابلة للذوبان.

3. الميداكا الثقافة وحصاد البيض

  1. الحصول على الميداكا (latipes O.) (سلالة البرتقالي والأحمر) (60 ذكور و 60 إناث).
  2. ثقافة الميداكا كمجموعات (20 ذكور و 20 إناث كمجموعة واحدة) في 1X ERM في 3 دبابات L باستخدام نظام زراعة التدفق من خلال الميداكا.
    1. الثقافة في الحالات التالية:
      مجموعة الرقم الهيدروجيني للمستنبت: 6،2-6،5
      ضوء: دورة الظلام: 16: 8 ساعة
      درجة حرارة متوسطة الثقافة: 24 ± 0.5 درجة مئوية
      الضغط الاسموزي من مستنبت: 257 الميلي أسمول
  3. تغذية الميداكا على يرقات الأرتيميا سالينا الساعة 10:00 (مرة واحدة يوميا) وإطعام الجاف النظام الغذائي الاصطناعي الأسماك في الساعة 09:00، 11:00، 13:00، 15:00، 17:00 و (خمس مرات في اليوم).
    1. الحصول A. سالينا يرقات.
      2. <لى> إعداد 5 لترات من محلول ملحي 3.0٪ في كوب من البلاستيك.
    2. إضافة 30 غرام من البيض الأرتيميا إلى محلول الملح في كوب.
    3. احتضان البيض عند 25 درجة مئوية لمدة 48 ساعة مع السطح (4 لتر ​​/ دقيقة -1) باستخدام مضخة التهوية.
    4. بعد 48 ساعة، ووقف محتدما.
    5. يسمح الحل للوقوف لمدة 5 إلى 10 دقيقة لفصل A. تحاك سالينا يرقات (الجزء السفلي من الحل) من البيض لم يفقس البيض و(الجزء العلوي من الحل).
    6. إزالة الطبقة العليا من الحل عن طريق الترقيد.
    7. ابحث في الجزء السفلي من الحل من خلال غربال بفتحات من 283 ميكرون، وجمع يرقات التي تمر عن طريق شبكة مع فتحات من 198 ميكرون.
    8. تغذية يرقات إلى الميداكا في غضون 6 ساعة.
  4. بعد الميداكا الإناث قد ولدت، وإزالة كتل البيض الخارجية بلطف من أجساد الإناث أو جمع البيض من الجزء السفلي من حوض للأسماك باستخدام سمكل صافي (صافي حجم 5 سم × 5 سم، حجم ثقب 0.2 مم × 0.2 مم).
  5. شطف الكتلة البيض مع تدفق مياه الصنبور لمدة 5 ثوان.
  6. إضافة كافة مجموعات البيض تشطف إلى 30X حل إدارة مخاطر المؤسسات.
  7. إزالة مجموعات من الحل بعد 1 دقيقة ووضع مجموعات البيض بين المناشف الورقية الجافة ولفة بلطف.
  8. وضع البيض مرة أخرى إلى إدارة مخاطر المؤسسات 30X.
  9. حدد البيض المخصب تحت المجهر تشريح.
  10. مكان مختار 810 بيضة في 1X إدارة مخاطر المؤسسات في ستة جيدا لوحات بلاستيكية باستخدام ملقط.
  11. احتضان البيض عند 25 ± 0.1 درجة مئوية في حاضنة حتى المرحلة التنموية 21. (تم تحديد مراحل تطور الأجنة الميداكا من عمل Iwamatsu 10).
  12. انتقاء البيض المحتضنة في مرحلة التطوير 21 تحت المجهر تشريح.
  13. شطف البيض المحددة مع 1X إدارة مخاطر المؤسسات.
  14. إخضاع البيض تشطف إلى تجارب التعرض (القسم 4).

4. سمية اختبار الرسائل الوطنية الثانية أو AGNO 3 في الملوحة إدارة مخاطر المؤسسات المختلفة

  1. شطف البيض الميداكا (المرحلة 21) ثلاث مرات مع حل اختبار [الرسائل الوطنية الثانية (10 ملغ / لتر -1) أو AGNO 3 (15.7 ملغم / لتر -1 إلى 10 ملغم / لتر -1 الفضة) في كل تركيز إدارة مخاطر المؤسسات (1X، 5X ، 10X، 15X، 20X، أو 30X) في الرقم الهيدروجيني 7]. والضوابط، واستخدام البيض في 1 × 30 × ERM في الرقم الهيدروجيني 7.
  2. إضافة 15 بيضة تشطف إلى 5 مل من كل حل الاختبار في ستة جيدا لوحات بلاستيكية. (تنفيذ التجارب تعرض ثلاث مرات لSNC أو AGNO 3 سمية اختبار باستخدام كل حل الاختبار.)
  3. التفاف على لوحات في رقائق الألومنيوم.
  4. احتضان لوحات ملفوفة عند 25 درجة مئوية في الظلام حتى الفقس أو لمدة 14 يوما.
  5. مراقبة البيض يتعرض كل 24 ساعة لإجراء تغييرات بيولوجية والبيض الميتة (الشكلان 1 و 2).
  6. تبادل الحلول اختبار كل 24 ساعة.
  7. أداء الملاحظات على النحو التالي.
    1. في يوم 6 من التعرض، والاعتماد على معدل ضربات القلب (في 15 ثانية) سالأجنة و الميداكا تحت المجهر تشريح باستخدام ساعة توقيت (الشكل 3A).
    2. في يوم 6 من التعرض، وقياس حجم العين (قطر) من الأجنة الميداكا تشريح تحت المجهر باستخدام ميكرومتر (الشكل 3B).
    3. على الفقس اليوم، وقياس أطوال الجسم الكاملة من اليرقات تحت المجهر تشريح باستخدام ميكرومتر (الشكل 3C).
    4. عد عدد من البيض يتعرضون أن يفقس خلال 14 يوما (الشكل 3D).

5. عزل الفضة القابلة للذوبان من SNC الحل، وتحليل الفضة

  1. عزل الفضة القابلة للذوبان من كل حل SNC (خليط من المواد الغروية الفضة والفضة القابلة للذوبان) من خلال تصفية من خلال مرشح 3 كيلو دالتون غشاء على 14000 س ز و 4 درجات مئوية لمدة 10 دقيقة. استخدام 3 كيلو دالتون غشاء عزل الفضة القابلة للذوبان من الرسائل الوطنية الثانية، لأن ذكرت قطر متوسط ​​من الرسائل الوطنية الثانية المجمعة في 1X ERM هو 67.8 نانومتر 11 لالثانية أن من حج + هو 0.162 نانومتر 12؛ وكيلو دالتون غشاء 3 يستبعد جزيئات بأقطار من 2 نانومتر أو أكثر (13).
  2. قياس تركيز الفضة في 50 ميكرولتر من حل تصفيتها (= تركيز الفضة القابلة للذوبان) من خلال تحليل ICP-MS (الشكل 3E) وفقا لدليل التشغيل ICP-MS 8. التحليلات وصفت طريقة المعالجة لICP-MS في قسم 7.

6. قياس الفضة التراكم في الميداكا الأجنة

  1. كشف البيض الميداكا (المرحلة 21) إلى الرسائل الوطنية الثانية أو AGNO 3 كما هو موضح في قسم 4.
  2. في يوم 6 من التعرض، وإزالة المشيماء من البيضة (أي dechorion) باستخدام الميداكا الفقس انزيم وفقا للبروتوكول وصفها في كتاب الميداكا 14.
  3. قياس تركيز الفضة من البيض dechorioned عن طريق تحليل ICP-MS وفقا لICP-MS العاملة دليل 8 (الشكل 3F). والمعالجةالتحليلات وصفت طريقة لICP-MS في قسم 7.

7. قياس تركيز الفضة التي كتبها ICP-MS تحليل

  1. إضافة عينات [50 ميكرولتر من محلول الفضة (للتأكد من صحة تركيز الفضة، القسم 1)؛ ثلاثة أجنة dechorionated (القسم 5). أو 50 ميكرولتر من حل تصفيتها (القسم 5)] إلى تفلون دورق 50 مل.
  2. إضافة 2.0 مل من حمض النيتريك عالى النقاء إلى الدورق 50 مل.
  3. تسخين الخليط على طبق ساخن على 110 درجة مئوية حتى قبل أن يجف (حوالي 3 ساعات).
  4. حل مسألة العضوية بشكل كامل، إضافة 2.0 مل من حمض النيتريك عالى النقاء و 0.5 مل من بيروكسيد الهيدروجين إلى الدورق.
  5. تسخين الخليط مرة أخرى على صفيحة ساخنة حتى قبل أن يجف (حوالي 3 ساعات).
  6. حل هذه البقايا في 4 مل من 1.0٪ محلول عالى النقاء حمض النيتريك.
  7. نقل 4 مل من محلول لأنبوب الطرد المركزي.
  8. كرر 7،6-7،7 مرتين (أي ما مجموعه ثلاث مرات). الحجم النهائي هو 12.0مل.
  9. قياس تركيز الفضة من العينة (المنحلة في 1.0٪ عالى النقاء حمض النيتريك) باستخدام تحليل ICP-MS وفقا لدليل التشغيل 8.
    1. استخدام الداخلي وحل معيار خارجي (انظر قائمة المواد) لقياس تركيز الفضة. وقد تم اعتماد الحل المعيار الداخلي والخارجي من قبل الجمعية الأمريكية لاعتماد المختبرات (A2LA). وكانت حدود الكشف من الفضة 0.0018 نانوغرام / مل -1 (الحل) و0.016 نانوغرام ملغ الوزن -1 (هيئة الجنين).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وكان تأثير الملوحة على سمية SNC اضح جدا: كان تحريض تشوه أو موت الملوحة تعتمد (الشكلان 1 و 2). قمنا بقياس المؤشرات الحيوية المظهرية (معدل ضربات القلب، وحجم العين، طول كامل الجسم، ومعدل الفقس) في SNC (10 ملغ / لتر -1) الأجنة -exposed. وكشفت هذه المؤشرات الحيوية المظهرية التي تعتمد على ملوحة SNC سمية.

وتراو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الميداكا هو أسماك المياه العذبة التي هي متسامح للغاية لمياه البحر. ليس من المعروف جيدا أن الموائل الطبيعية الأصلية لهذه الأسماك والمياه المالحة قبالة الساحل الياباني 6. وبالتالي، الأسماك الميداكا وضعت بشكل جيد خلايا كلوريد 7. هذه الخاصية الفريدة توفر العلماء طريقة جديدة لاختبار سمية المواد الكيميائية في البيئة بوصفها وظيفة من الملوحة (المياه العذبة إلى مياه البحر) باستخدام سوى نوع واحد من الأسماك.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نحن ممتنون للسيدة كاوري شيميزو والسيد ماساكي تاكاسو من كلية الدراسات العليا لعلوم الحياة بجامعة تويو على دعمهما الفني. تم دعم هذا المشروع بمنح بحثية من مؤسسة البحوث الخاصة ومركز أبحاث الإلكترونيات الحيوية النانوية بجامعة تويو (إلى SK). من قبل صندوق تعزيز البحوث العلمية التابع لمؤسسة الترويج والمساعدة المتبادلة للمدارس الخاصة في اليابان (إلى SK)؛ من قبل صندوق المشاريع الجديد لتقييم المخاطر، من وزارة الاقتصاد والتجارة والصناعة (إلى SK)؛ من خلال منحة في المعونة للبحوث الاستكشافية الصعبة (23651028 جائزة ل SK) ؛ من خلال منحة المعونة للبحث العلمي (ب) و (ج) (جائزة 23310026 و 26340030 إلى SK) ؛ ومن خلال مشروع منحة للبحث الاستراتيجي للجامعات الخاصة (منح S1411016 لجامعة كوريا السعودية) من وزارة التعليم والثقافة والرياضة والعلوم والتكنولوجيا في اليابان.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
غرويات الفضة النانويةيوتوبيا مكملات
NaClNacalai Tesque، Inc.31319-45لصنع ERM
KClNacalai Tesque، Inc.28513-85لصنع ERM
CaCl2· 2H2ONacalai Tesque، Inc.06730-15لصنع ERM
MgSO4< / sub>· 7H2ONacalai Tesque، Inc.21002-85لصنع ERM
NaHCO3 شركة Nacalai Tesque، Inc.31212-25لصنع ERM
AgNO3Nacalai Tesque, Inc.31018-72
مقياس الأس الهيدروجينيHORIBA، Ltd.F-51S
بالانسMettler-Toledo International Inc.MS204S
medaka (Oryzias latipes< / em>) سلالة برتقالية حمراءالمعهد الوطني للدراسات البيئية
Medaka نظام زراعة التدفقMeito Suien Co.MEITOsystem
Artemia salina naupliiبيض اليابان تصميم الأليفة المحدودةمضخة تهوية 4975677033759
اليابان تصميم الأليفة المحدودةغير الضوضاء w300
يرقات Otohime & beta ؛ -1Marubeni Nissin Feed Co. LtdOtohime يرقات & beta ؛ -1الأسماك الجافة الاصطناعية
الغذائي تشريح المجهرLeica microsystemsM165FC
ميكرومترفوجيكوجاكو المحدودةحاضنة 10450023
NksystemTG-180-5LB
شاكرELMI Ltd.Aizkraukles 21-136
ألواح بلاستيكية ذات 6 آبارGreiner CELLSTARM8562-100EA
رقائق الألومنيومAS ONE Co.6-713-02
ساعة توقيتDRETEC Co. Ltd.SW-111YE
3 كيلو دالتون مرشح غشائيEMD Millipore Corporation0.5 مل فلتر
50 مل دورق تفلونAS ONE Co.33431097
معيار كلاريتاس مخصصSPEXertificateZSTC-538للمعيار الداخلي
معيار كلاريتاس مخصصSPEXertificateZSTC-622للمعيار الخارجي
حمض النيتريك فائق النقاءKanto Chemical Co.28163-5B
بيروكسيد الهيدروجين شركة كانتو للكيماويات18084-1Bلقياس طيف الامتصاص الذري
ICP-MSThermo ScientificThermo Scientific X Series 2 & nbsp ؛
لوحة ساخنةشركة تايجرCRC-A300
الفضة من خلال النظام من نوع الطرد المركزي شركة

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 2 Effects on Biotic Systems. , OECD. Available from: http://www.oecd-ilibrary.org/environment/oecd-guidelines-for-the-testing-of-chemicals-section-2-effects-on-biotic-systems_20745761 (2015).
  2. National Coastal Condition Report. , Environmental Protection Agency, Office of Water and Office of Research and Development. Washington, DC. (2001).
  3. Sakaizumi, M. Effect of inorganic salts on mercury-compound toxicity to the embryos of the Medaka, Oryzias latipes. J. Fac. Sci. Univ. Tokyo. 14 (4), 369-384 (1980).
  4. Sumitani, K., Kashiwada, S., Osaki, K., Yamada, M., Mohri, S., Yasumasu, S., et al. Medaka (Oryzias latipes) Embryo toxicity of treated leachate from waste-landfill sites. J. Jpn. Soc. Waste Manage. Exp. 15 (6), 472-479 (2004).
  5. Kashiwada, S. Distribution of Nanoparticles in the See-through Medaka (Oryzias latipes). EHP. 114 (11), 1697-1702 (2006).
  6. Iwamatsu, T. The Integrated Book for the Biology of the Medaka. , University Education Press. Japan. (2006).
  7. Miyamoto, T., Machida, T., Kawashima, S. Influence of environmental salinity on the development of chloride cells of freshwater and brackish-water medaka, Oryzias latipes. Zoo. Sci. 3 (5), 859-865 (1986).
  8. XSERIES 2 ICP-MS Getting Started Guide Revision B - 121 9590. , Thermo Fisher Scientific Inc.. Available from: http://202.127.146.37/eWebEditor/uploadfile/20130314161434190.pdf (2007).
  9. Kashiwada, S., Ariza, M. E., Kawaguchi, T., Nakagame, Y., Jayasinghe, B. S., Gartner, K., et al. Silver nanocolloids disrupt medaka embryogenesis through vital gene expressions. ES & T. 46 (11), 6278-6287 (2012).
  10. Iwamatsu, T. Stages of normal development in the medaka Oryzias latipes. Mech. Dev. 121, 605-618 (2004).
  11. Kataoka, C., Ariyoshi, T., Kawaguchi, H., Nagasaka, S., Kashiwada, S. Salinity increases the toxicity of silver nanocolloids to Japanese medaka embryos. Environ. Sci.: Nano. 2, 94-103 (2014).
  12. Shannon, R. D. Revised effective ionic radii and systematic studies of interatomic distances in halides and chalcogenides. Acta Cryst. 32, 751-767 (1976).
  13. Pore size chart. , Spectrum Laboratories, Inc.. Available from: http://jp.spectrumlabs.com/dialysis/PoreSize.html (2015).
  14. Wakamatsu, Y. Medaka Book, 6.1: Preparation of hatching enzyme. , National BioResource Project (NBRP) Medaka. Available from: [cited 2015] https://shigen.nig.ac.jp/medaka/medakabook/index.php?6.1%20preparation%20of%20hatching%20enzyme (2015).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

ICP MS

مقالات ذات صلة