مقالة منهجية

الكمية قاع العين تألق ذاتي لتقييم أمراض الشبكية

DOI:

10.3791/53577

⸱

مارس 11, 2016

 ,  , 
1Department of Ophthalmology, NYU School of Medicine, 2Harkness Eye Institute, Columbia University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تدعم ظهارة صبغة الشبكية (RPE) شبكية العين الحسية من خلال إعادة تدوير المنتجات الثانوية للدورة البصرية ، والتي تتراكم على شكل ليبوفوسين. هذه المنتجات ذاتية الفلورسنت ويمكن تصويرها نوعيا في الجسم الحي. هنا ، نصف طريقة لتصوير ليبوفوسين RPE كميا باستخدام تنظير العين بالليزر المسح الضوئي متحد البؤر.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتم وضع ظهارة صبغة الشبكية (RPE) جنبا إلى جنب مع شبكية العين الحسية العلوية ، وتدعم وظيفة النظام البصري. من بين المهام التي يؤديها RPE البلعمة ومعالجة أجزاء المستقبلات الضوئية الخارجية من خلال العضيات المشتقة من الجسيمات الليزوسيا. تتكون منتجات التحلل هذه ، المخزنة والمشار إليها باسم حبيبات ليبوفوسين ، جزئيا من البيسريتينويدات ، التي لها امتصاص مضان واسع وأطياف انبعاث يمكن اكتشافها سريريا على أنها تألق ذاتي لقاع العين مع تنظير العين بالليزر المسح الضوئي متحد البؤر (cSLO). يرتبط تراكم ليبوفوسين بزيادة العمر ، ولكنه يوجد أيضا في أنماط مختلفة في كل من الأمراض التنكسية المكتسبة والوراثية في شبكية العين. وبالتالي ، فإن دراسة نمط تراكمها وربط هذه الأنماط بالتغيرات في شبكية العين الحسية المغطاة أمر ضروري لفهم الفيزيولوجيا المرضية وتطور أمراض الشبكية. هنا ، نصف تقنية يستخدمها مختبرنا وآخرون تستخدم cSLO من أجل تحديد مستوى RPE lipofuscin في كل من العيون السليمة والمريضة.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الظهارة الصبغية الشبكية (RPE) تدعم وظيفة شبكية العين الحسية من خلال العديد من العمليات 1. ، الضمور البقعي المرتبط بالعمر (AMD) هو أهم سبب للعمى غير قابل للعلاج في الدول الصناعية ويتميز بالتغيرات التي تطرأ على RPE، بما في ذلك فقدان الصباغ، وفقدان الوظيفة وضمور. في أيه إم دي وفي الشيخوخة الطبيعية، وRPE يتراكم الفلورسنت، والعضيات المستمدة يحلول تحتوي على شظايا مبصرة المبتلعة، ويشار إلى حبيبات يبوفوسين. وقد ظن تراكم يبوفوسين RPE للإشارة الأكسدة اختلال وظيفي 1، ولكن أظهرت الدراسات الحديثة أن التشكل RPE لا تزال طبيعية في عيون الذين تتراوح أعمارهم بين مع مستويات عالية يبوفوسين 2. علامات ومع ذلك، أنماط غير طبيعية من توزيع يبوفوسين، في خسارة معينة من يبوفوسين، موثقة لأيه إم دي وأيه إم دي تقدم، سواء تشريحيا وسريريا 3،4

بروسس المعيبةالغناء من يبوفوسين RPE كما ثبت أن يحدث في بعض الإنحطاط في شبكية العين الموروثة. المرضى الذين يعانون من مرض ستارغاردت (STGD) تتراكم يبوفوسين في RPE في سن مبكرة، في نهاية المطاف تطوير فقدان رؤية مماثلة لتلك التي شوهدت في AMD 5. وتشير هذه النتائج إلى أن تراكم يبوفوسين نفسها قد تكون سامة ودفع RPE ضعف 6،7. ومع ذلك، فإن دراسة التصوير مفصلة من الموضوعات مع STGD مع مرور الوقت لم يؤكد أن تراكم يبوفوسين التنسيق أدى إلى فقدان RPE اللاحقة 8. وبالتالي، على الرغم من تشوهات يبوفوسين هي علامات لالإنحطاط في شبكية العين، وهو دور لسمية مباشرة لليبوفوسين لا تزال غير مثبتة.

وRPE هو معظم طبقة الخلايا الخلفي للشبكية، ولكن يولد غالبية إشارة الفلورسنت من قاع العين. جيل والكشف عن تألق ذاتي (AF) المستمدة من RPE يمكن القيام بها باستخدام متحد البؤر المسح بالليزر تنظير العين (cSLO)، والذي يسمح لالسادسsualization من التوزيع المكاني للAF قاع. بعض الإنحطاط الشبكية تظهر أنماط متميزة من قاع AF، وAF المساعدات التصوير في تشخيص ورصد هذه الظروف. على الرغم من أن معيار التصوير AF مهم سريريا، أصبح AF الكمي (ق) وسيلة هامة لمعرفة مدى صحة RPE. نحن وآخرون قد وضعت نهج موحد التي يمكن أن تحدد بشكل موثوق مستويات ق في مواقع شبكية محددة 9. ق لها تطبيقات محتملة في تشخيص ورصد الأوضاع في شبكية العين، وربما أيضا أداة في التشخيص وخطر التقسيم الطبقي. وبالإضافة إلى ذلك، كما تم وصفه القدرات التشخيصية للق لبعض اضطرابات الشبكية 10-12. هنا، ونحن نقدم تفاصيل تدريجي لأداء أسلوبنا يرافقه مظاهرة البصرية لتطبيقها في تقييم صحة العينين والمريضة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أخلاقيات الإعلان: تم القيام به جميع المرضى المسجلين في هذه الدراسات ذلك وفقا افق مجلس الرقابة المراجعة المؤسسية في جامعة نيويورك كلية الطب.

1. اختيار المريض والتحضير الأولي للتصوير

ملاحظة: يطلب من المواد التالية: 0.5٪ تروبيكاميد حل العيون، و 2.5٪ فينيليفرين حل العيون، cSLO مجهزة نطاق الطيفي الضوئي المقطعي التماسك (SD-أكتوبر)، وإشارة مضان الداخلية.

  1. قبل التصوير، حددت بشكل مناسب حتى cSLO للحصول على البيانات وفقا لتعليمات الشركة الصانعة.
  2. جبل إشارة الفلورسنت الداخلية في cSLO. ملاحظة: إشارة الفلورسنت الداخلية، كما تم شراؤها من الشركة المصنعة، وتقع في حلقة معدنية ويتم وضعها مباشرة وراء عدسة الكاميرا. إذا تم استخدام cSLO من مصنع آخر، قد يكون هناك تكوين مختلف من تلك التي وصفت فيهذا البروتوكول.
    1. من أجل إدراج إشارة إلى cSLO، تحريف عدسة لإزالته، فك حلقة معدنية على الجهاز، والاستعاضة عنها مع حلقة معدنية جديدة تحتوي على إشارة.
      ملاحظة: الإشارة الفلورسنت الداخلية أمر ضروري لتقنية ق، لأنها تتيح تصحيح التباين في قوة الليزر وكشف عن حساسية / ربح.
  3. لدينا مرضى معينين للتصوير الخضوع لفحص العين المتوسعة الروتيني والحصول على معلومات أساسية تتعلق بتاريخ العين الماضي والحالات الطبية الأساسية التي قد تظهر مع نتائج العين.
  4. تمدد التلاميذ مع 0.5٪ و 2.5٪ تروبيكاميد فينيليفرين. خطوة حاسمة: تمدد التلاميذ إلى 6 مم على الأقل. ملاحظة: هذا أمر ضروري لمرور دون انقطاع الضوء، وبالتالي لرؤية الأمثل وقياس قاع العين.
  5. قبل التصوير، وضع المريض بشكل صحيح على cSLO، مع الذقن يستريح على chinrest، وضعت الجبهة ضد foreheaد الراحة، وحاظان الجانبي محاذاة بشكل صحيح مع مؤشرات.

2. الأساس التصوير لقاع العين بصري

  1. أولا، صورة قاع العين مع قرب انعكاس الأشعة تحت الحمراء (IR) ضوء (الطول الموجي 820 نانومتر) من أجل تركيز الكاميرا على البقعة والحصول على تركيز الخام.
    1. مع المريض في وضع صحيح، تبديل الإعداد الأجهزة على لوحة التحكم لوضع الأشعة تحت الحمراء والتصوير، وكاميرا الموقع يدويا حتى قاع العين هو في التركيز الكامل، وتأخذ صورة
    2. ضبط الإعداد على لوحة التحكم ل"IR-أكتوبر"، والذي يستخدم الطيفي المجال البصري المقطعي التماسك (SD-أكتوبر) بالتزامن مع التصوير الأشعة تحت الحمراء لتقييم البقعة لمرض كامن.
    3. استخدام الأدلة الموجودة في نافذة التصوير لتوجيه أكتوبر إلى صورة الأشعة تحت الحمراء من قاع بشكل صحيح. لتحقيق أفضل-أكتوبر SD الجودة، ضع الكاميرا مثل أن الصورة أكتوبر هي في الثلث العلوي من نافذة التصوير فيها. الحصول على واحد على الأقل الشوري خط أفقيوخلال النقرة والتي تغطي مجال التصوير بأكمله.

3. إعداد ق التصوير

  1. استخدام "عالية السرعة" الحصول على الصور. ملاحظة: هذا الإعداد يسمح لسرعة الحصول على الصور، مما يقلل خطر فقدان إشارة بسبب حركة المريض وأدى انسداد للضوء عن طريق قزحية العين أو الجفون.
  2. استخدام "يعني من 9" الإطارات. ملاحظة: هذا الإعداد يسمح للالسريع، التقاط متتابع من 9 إطارات الصور، التي يمكن أن تكون في وقت لاحق "المتوسط" للحد من الضوضاء والقطع الأثرية (أنظر أدناه).
  3. استخدام الحقل "30 × 30 درجة". ملاحظة: هذا يشير إلى درجة من منطقة الشبكية استولي عليه خلال الحصول على الصور.
  4. قبل التصوير، تحذير المريض حول الضوء الأزرق، وهذا يمكن أن تكون مثيرة للقلق في البداية.
  5. تشغيل وضع AF ومواءمة محور الكاميرا مثل أن الشاشة هي الحد الأقصى "ملأ" مع AF قاع (الحد الأدنى من سواد من جوانب وزوايا الصورة).
    1. إذا كان المرضى حصعوبة افي التسامح ضوء زرقاء لامعة، يبدأ التصوير مع الكاميرا بعيدا عن العين ومن ثم جلب الكاميرا ببطء نحو المريض حتى قاع هو على مرأى ومسمع.
      خطوة حاسمة: إذا ضوء دخول إلى أو الخروج من العين وإعاقة، وانخفاض سوف إشارة ينتج. انخفاض المترجمة مرئيا كما سواد غير المتماثلة من جانب صورة أو زاوية. ويعتبر فقدان معممة من إشارة عندما حركات العين عرقلة وحده مرور الضوء.
  6. محاذاة الكاميرا بحيث إشارة AF هي في أعلى مستوى له في جميع أنحاء الميدان. تهدف للإشارة القصوى بدلا من صورة حادة، إلا أنها ترتبط تقريبا. ضبط التركيز الكاميرا عن طريق تحريك cSLO لإعادة الكاميرا إما يدويا أو باستخدام عصا التحكم منظار العين.
  7. ضبط حساسية / ربح بحيث قاع AF مرئيا بسهولة، ولكن تجنب الإفراط في التشبع. خلال الحصول على الصور، بكسل ملونة واضحة سواء في المرجعية الداخلية (الموجود في الجزء العلوي منالصورة) أو قاع تشير الإفراط في التشبع وبالتالي فقدان الإشارة.

4. الحصول على الصور

ملاحظة: خطوة حاسمة: إن الهدف في الحصول على الصور يجب أن تكون الحصول 2 جودة عالية 9 الإطار مداخن صورة في كل دورة للسيطرة على التباين بين الصور في جلسة واحدة. بعد اعادة تموضع المريض والكاميرا، للحصول على الدورة الثانية من الصورتين لتقييم ومراقبة للتقلب. في نهاية المطاف سوف تكون محسوبة جميع الصور إلى المرجعية الداخلية (هو موضح أدناه).

  1. الحصول على صور فقط بعد لا يقل عن 20 ثانية من "تبيض" (التعرض الكامل من شبكية العين للضوء AF) لتقليل امتصاص الضوء من رودوبسين في شبكية العين الحسية 9.
    1. استخدام هذه الفترة لتحسين المواءمة الكاميرا، والتركيز والحساسية.
  2. هل لديك الموضوعات وميض قبل كل الحصول على الصور كفيلم المسيل للدموع الطازج يحسن من جودة الإشارة.
  3. تجنب الجفون في الطائرة من الاستحواذ.
    ملاحظة: قد يكون من المفيد أن الجفون مفتوحة يدويا للمرضى أكثر تحديا. يوصي الباحثون إلى أن مساعد يؤدي هذه المهمة.
  4. تحسين التوافق قبل كل اقتناء الصور للتأكد من أن الضوء لا يتم عرقلة من قبل القزحية مما يؤدي إلى انخفاض إشارة.
    ملاحظة: كما على الأقل قاصر حركة شائعة جدا، يوصي الكتاب إعادة غرامة اللازمة كما كان من قبل كل الحصول على الصور. توجيه وتشجيع المريض أثناء التصوير يساعد حركة الانخفاض. يوصي الكتاب أيضا استخدام الجهاز دواسة القدم باسم "زر الاستحواذ" وذلك للتقليل عامل الهاء.
  5. تنفيذ معالجة مرحلة ما بعد الصورة عن طريق حساب "يعني" المكدس 9 الإطار إلى زيادة نسبة الإشارة إلى الضوضاء. حساب متوسط ​​كومة باستخدام برنامج cSLO عن طريق اختيار الخيار لحساب الوسط.
    ملاحظة: قد يكون هناك أكوام حيث بعض إطارات ليست ذات نوعية أفضل (أي، وموضعية أو معممة انخفضت الاشتراكيةgnal بالنسبة إلى الأطر المثلى)، لذلك تفتيش بعناية كل كومة وإلغاء تحديد الأطر دون المستوى الأمثل قبل احتساب المتوسط.
    ملاحظة: الصور متوسط ​​مع نسب الإشارة إلى الضوضاء مقبولة يمكن معالجتها من لا يقل عن 3 الإطارات. فمن الطبيعي للجوانب وزوايا كل صورة أن يكون إشارة أقل من 20 درجة المركزية بسبب القيود داخل cSLO نفسها.
    1. إذا كان البرنامج يسأل ما إذا كان المشغل يرغب في تطبيع مستويات الرمادي (أي، وتمتد الرسم البياني) بين 0 و 255، حدد "لا". هذا يحافظ على مستويات الرمادي دون تغيير لتحليلها.

تحليل 5. صورة

  1. تحليل الصور AF كما سبق وصفها باستخدام برمجيات تحليل الصور المتقدمة لتقنية ق (ايغور، 9). ويرد وصف موجز لتحليل صورة نموذجية باستخدام هذا البرنامج أدناه.
    1. تحميل برنامج ق في ايغور واستيراد الصور (في شكل .BMP) المصدرة منبرنامج cSLO مع نسبة البيكسل 768 × 768 (إخراج المعلمة الافتراضية).
    2. حدد الصورة في القائمة المنسدلة والشروع في التحليل.
    3. إعادة المؤشرات المعايرة على الصورة بحيث "مرمى" علا النقرة و "قوس" يتاخم القرص البصري (تستخدم هذه المؤشرات على نطاق ووضع رويس). عند وضعه بشكل صحيح، واستخدام البرمجيات مطالبات ثم ملء الصورة مع رويس كفافي المحيطة النقرة (أنظر الشكلين 1 و 2).
    4. حدد الخيار في ايغور لمعايرة مستويات الرمادي الشاملة لكل صورة لتلك المستويات الحالية في إشارة الفلورسنت الداخلية. ملاحظة: هذه الخطوة تتيح للمعايرة من العوامل المرتبطة بالآلات، بما في ذلك مستوى الإلكترونية الصفر من كل صورة والداخلي للعامل المعايرة المرجعية لكل آلة، وكذلك العوامل ذات الصلة المريض، بما في ذلك السن، والانكسار وانحناء القرنية.
      ملاحظة: برامج التحليل ثم يعرض ص الثابتةويتجلى egions على الصورة الناتجة وقيمة ق داخل كل منطقة. كما دخلت القيم ق تلقائيا إلى تنسيق البيانات في نافذة منفصلة ".
    5. توليد ق "خرائط الحرارة" عن طريق تحديد الخيار ضمن المطالبات الأوامر. كل الصور والبيانات يمكن تصديرها من برنامج ايغور في جداول اكسل عن طريق تحديد الخيارات المناسبة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد استخدمت هذه التقنية لدراسة ق في كلا صحية 13 والمرض الدول 10-12. في عيون صحية (الشكل 1)، وتوزع AF المنبعثة من RPE موحد نسبيا في جميع أنحاء قاع (الشكل 1A). ويعتبر انخفاض كثافة في منطقة البقعة المركزية بسبب حجب الضوء عن طريق الصباغ البقعي، وعلى جوانب وزوايا الصورة بسبب البصريات من العين والكاميرا. سفن تظهر مظلمة وينبغي أن تكون في تركيز واضح في الصور المكتسبة جيدا. 1B الشكل يد...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

غير طبيعي توزيع يبوفوسين RPE، سواء زيادة أو نقصان، هو علامة الحساسة من مرض شبكية العين ويترافق عادة مع فقدان وظيفة شبكية العين الحسية. هنا، نحن تصف تطبيق ق لتقييم يبوفوسين RPE. إدراج إشارة الفلورسنت الداخلية لتصحيح متغير قوة الليزر وكشف عن حساسية 9 جنبا إلى جنب مع تقنية التصوير موحدة لدينا تسمح الكميات موثوقة من مستويات AF. ذلك هو هدفنا من شأنها أن تساعد هذه الطريقة في تشخيص ورصد مرض شبكية العين، وأخيرا في تقييم فعالية التدخلات العلاجية، مثل المخدرات أو العلاج الجيني. ق...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

STA: لا إفصاحات ، JPG: لا إفصاحات ، RTS: مستشار ، Ocata Therapeutics.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ونود أن نشكر المتعاونين لدينا، فرانسوا Delori، توماس بورك، وتوبياس Duncker.

دعم البحوث: المعاهد الوطنية للصحة / نيى R01 EY015520 (RTS، JPG)، والأموال غير المقيدة من البحوث للوقاية من العمى (RTB).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
Spectralis HRA + OCTHeidelberg Engineering
0.5٪ محلولاستخدام أي علامة تجارية
2.5٪ محلولاستخدام أي علامة تجارية
مرجع فلورسنت داخليهايدلبرغ الهندسية
IGOR ProWaveMetrics
تروبيكاميد للعيون يمكن فينيل إيفرين للعيون يمكن برنامج

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Strauss, O. The retinal pigment epithelium in visual function. Physiological reviews. 85, 845-881 (2005).
  2. Ach, T., et al. Quantitative autofluorescence and cell density maps of the human retinal pigment epithelium. Investigative ophthalmology & visual science. 55, 4832-4841 (2014).
  3. Ach, T., et al. Lipofuscin redistribution and loss accompanied by cytoskeletal stress in retinal pigment epithelium of eyes with age-related macular degeneration. Investigative ophthalmology & visual science. 56, 3242-3252 (2015).
  4. Schmitz-Valckenberg, S., Jorzik, J., Unnebrink, K., Holz, F. G., Group, F. A. M. S. Analysis of digital scanning laser ophthalmoscopy fundus autofluorescence images of geographic atrophy in advanced age-related macular degeneration. Graefe's archive for clinical and experimental ophthalmology = Albrecht von Graefes Archiv fur klinische und experimentelle Ophthalmologie. 240, 73-78 (2002).
  5. Weng, J., et al. Insights into the function of Rim protein in photoreceptors and etiology of Stargardt's disease from the phenotype in abcr knockout mice. Cell. 98, 13-23 (1999).
  6. Holz, F. G., et al. Inhibition of lysosomal degradative functions in RPE cells by a retinoid component of lipofuscin. Investigative ophthalmology & visual science. 40, 737-743 (1999).
  7. Sparrow, J. R., Nakanishi, K., Parish, C. A. The lipofuscin fluorophore A2E mediates blue light-induced damage to retinal pigmented epithelial cells. Investigative ophthalmology & visual science. 41, 1981-1989 (2000).
  8. Smith, R. T., et al. Lipofuscin and autofluorescence metrics in progressive STGD. Investigative ophthalmology & visual science. 50, 3907-3914 (2009).
  9. Delori, F., et al. Quantitative measurements of autofluorescence with the scanning laser ophthalmoscope. Investigative ophthalmology & visual science. 52, 9379-9390 (2011).
  10. Burke, T. R., et al. Quantitative fundus autofluorescence in recessive Stargardt disease. Investigative ophthalmology & visual science. 55, 2841-2852 (2014).
  11. Duncker, T., et al. Quantitative fundus autofluorescence and optical coherence tomography in best vitelliform macular dystrophy. Investigative ophthalmology & visual science. 55, 1471-1482 (2014).
  12. Duncker, T., et al. Quantitative fundus autofluorescence distinguishes ABCA4-associated and non-ABCA4-associated bull's-eye maculopathy. Ophthalmology. 122, 345-355 (2015).
  13. Greenberg, J. P., et al. Quantitative fundus autofluorescence in healthy eyes. Investigative ophthalmology & visual science. 54, 5684-5693 (2013).
  14. Delori, F. C., Goger, D. G., Dorey, C. K. Age-related accumulation and spatial distribution of lipofuscin in RPE of normal subjects. Investigative ophthalmology & visual science. 42, 1855-1866 (2001).
  15. Sparrow, J. R., et al. Quantitative fundus autofluorescence in mice: correlation with HPLC quantitation of RPE lipofuscin and measurement of retina outer nuclear layer thickness. Investigative ophthalmology & visual science. 54, 2812-2820 (2013).
  16. Delori, F. C., Webb, R. H., Sliney, D. H. American National Standards Institute. Maximum permissible exposures for ocular safety (ANSI 2000), with emphasis on ophthalmic devices. Journal of the Optical Society of America. A, Optics, image science, and vision. 24, 1250-1265 (2007).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Fundus AutofluorescenceRetinal Pigment EpitheliumConfocal Scanning Laser OphthalmoscopyLipofuscin QuantificationAge Related Macular DegenerationGeographic Atrophy AnalysisHigh Speed Image AcquisitionMean of 9 FramesInternal Fluorescent ReferencePupil Dilation Protocol

مقالات ذات صلة