Method Article

تحفيز التيار المباشر ومتعدد القطب تسجيل صفيف من مثل الاستيلاء آخر في الفئران إعداد شريحة الدماغ

DOI:

10.3791/53709

⸱

June 7th, 2016

 ,  ,  , 
1Institute of Biomedical Sciences, Academia Sinica, 2Department of Anesthesiology, University of Alabama at Birmingham

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
أظهرت الدراسات

أن تحفيز التيار المباشر عبر الجمجمة الكاثودية يمكن أن ينتج عنه تأثيرات قمعية على النوبات المقاومة للأدوية. في هذه الدراسة ، تم وضع إعداد تجريبي في المختبر تم فيه تقييم التحفيز المباشر والتيار المباشر وتسجيل مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية للنشاط الشبيه بالنوبات في تحضير شريحة دماغ الفئران. تم تقييم معلمات تحفيز التيار المباشر.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المهبطي عبر الجمجمة التحفيز التيار المباشر (tDCS) يدفع الآثار القمعية على المضبوطات المقاوم للأدوية. لتنفيذ إجراءات فعالة، والمعلمات التحفيز (على سبيل المثال، والتوجه، والقوة الميدانية، ومدة التحفيز) تحتاج إلى دراسة في الأعمال التحضيرية شريحة الفئران الدماغ. اختبار وترتيب اتجاه القطب المتعلقة موقف شريحة الفئران الدماغ مجدية. هذا الأسلوب يحافظ على مسار thalamocingulate لتقييم تأثير DCS على أنشطة مثل الاستيلاء القشرة الحزامية الأمامية. وأشارت نتائج التسجيلات مجموعة متعددة أن المهبطي DCS انخفضت بشكل ملحوظ في اتساع استجابات أثار التحفيز ومدة 4 aminopyridine والنشاط مثل الاستيلاء الناجم عن bicuculline. وجدت هذه الدراسة أيضا أن التطبيقات DCS المهبطي في 15 دقيقة تسبب الاكتئاب على المدى الطويل في مسار thalamocingulate. الدراسة الحالية تبحث آثار DCS على thalamocingulatالبريد اللدونة متشابك والأنشطة مثل الاستيلاء الحادة. الإجراء الحالي يمكن اختبار المعلمات التحفيز الأمثل بما في ذلك التوجه، والقوة الميدانية، ومدة التحفيز في المختبر في نموذج الفأر. أيضا، يمكن للطريقة تقييم آثار DCS على أنشطة مثل الاستيلاء القشرية على المستويين الخلوية والشبكة.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الصرع هو اضطراب عصبي شائع. يعاني ثلاثون بالمائة من مرضى الصرع من نوبات مقاومة للأدوية1. يوفر تحفيز التيار المباشر عبر الجمجمة (tDCS) نهجا غير جراحي للتحكم في أنشطة الشبكة أو تغييرها عبر مناطق الدماغ الكبيرة ، مثل النوبات. أظهرت الدراسات السريرية أن tDCS يعالج بشكل فعال النوبات المستعصية2 ويمكن أن ينتج عنه تأثيرات قمعية قصيرة وطويلة المدى على النوبات3-5. ومع ذلك ، لا تزال الآلية العلاجية لإجراءات tDCS غير واضحة. نموذج شريحة الدماغ المقدم هو طريقة في المختبر للتحقيق في كيفية تغيير الآلية العلاجية لإجراءات tDCS لأعراض أنشطة الدماغ الشبيهة بالنوبات. وفقا لذلك ، لتحقيق آثارها المثلى ، يجب اختبار معلمات التحفيز المحددة بما في ذلك ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على الإجراءات التي تنطوي على موضوعات الحيوانية رعاية المؤسسية الحيوان واللجنة استخدام، أكاديمية سينيكا، تايبيه، تايوان.

1. إعداد الحل التجريبي والمعدات اللازمة لتسجيل صفيف Multielectrode

  1. إعداد الاصطناعي السائل الشوكي الدماغي (ACSF، 124 مم كلوريد الصوديوم، 4.4 ملي بوكل، 1 ملم ناه 2 ص 3، 2 ملي MgSO 4، 2 مم CaCl 2، 25 مم NaHCO 3، و 10 ملي الجلوكوز، فقاعات مع 95٪ O 2 و 5٪ CO 2).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

إعداد إعداد Thalamocingulate شريحة ونظام تسجيل الشرق الأوسط وأفريقيا

شريحة MT-لجنة التنسيق الإدارية من الفئران هي إعداد شريحة خاص يسمح استكشاف الخصائص الكهربية لمسار thalamocingulate. ويبين الشكل 1A الطريقة التي أعد بها شريحة MT-ACC. تمت إزالة دماغ الفأر بسرعة والاحتفاظ بها في ACSF الاوكسيجين بارد (الشكل 1A، أ، ب)........

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في هذه الدراسة، تم اختبار آثار مدة وتوجه DCS على النشاط مثل مصادرة لجنة التنسيق الإدارية. للحصول على بيانات مستقرة في شرائح دماغ الفأر، وكيفية الحفاظ على سلامة مسار MT-ACC، وتجنب الضرر الذي هو مفتاح الحل، خصوصا الخطوات التي تتم اثنين من التخفيضات بطني الزاوية وقطع ظهري من القشرة. وعلاوة على ذلك، فإن الوقت لإعداد شريحة الدماغ يمكن أن تؤثر أيضا على النشاط من شريحة الدماغ، التي ينبغي أن تكون أقصر وقت ممكن للحفاظ على الدماغ جديدة وقوية. وأظهرت دراسة سابقة أن الضرر الكهروكيميائية إلى ا.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح متضاربة.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نحن ممتنون للدعم الفني من الفيزيولوجيا الكهربية للدائرة العصبية الأساسية في Academia Sinica. تم دعم هذا العمل من قبل المجلس الوطني للعلوم (102-2320-B-001-026-MY3 و 100-2311-B-001-003-MY3) وبرنامج علم الأعصاب التابع للأكاديمية السينية.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
<قوي >مخدر: < / قوي>
منتجات الهالوكربون الأيزوفلوران   ؛NDC 12164-002-254٪
nameCompanyCatalog NumberComments
aCSF (الإجمالي: 1 لتر):
D (+)-GlucoseMERCK1.08337.100010 ملي مولار
كربونات هيدروجين الصوديومMERCK1.06329.050025 ملي
كلوريد الصوديومMERCK1.06404.1000124 ملي مولار
(+) - الصوديوم L-ascorbate ، > = 98٪SIGMAA4034-100G0.15 جم / 2 سم
كبريتات المغنيسيوم ، اللامائية ، ReagentPlusSIGMAM7506-500G2 ملي مولار
هيدرات كلوريد الكالسيومMERCK1.02382.10002 ملي
فوسفات ثنائي هيدروجين الصوديوم أحادي الهيدراتMERCK1.06346.10001 ملي
كلوريد البوتاسيوممايو & بيكر المحدودة داجنهام إنجلتراMS 76164.4 mM
NameCompany>Catalog NumberComments
Drugs:
(+)-BicucullineTOCRIS01305 & micro; M في aCSF
4-AminopyridineTOCRIS0940250 & micro; M في aCSF
NameCompany Catalog NumberComments
Brain Slice Setup:
VibratomeVibratomeSeries 1000Block Cutting إلى 500 & micro; م شرائح سميكة
<قوية>الاسم<قوية>الشركة<قوي>رقم الكتالوج<قوي>تعليقات
<قوي>نظام MEA:
مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية (MEA) مجسات: 6 × 10 أنظمة مستوية متعددة القنوات MEA60MEA500 / 30iR-Ti-pr MEAS 6x10قطر القطب الكهربائي ، 30 وميكرو ؛ m; تباعد الأقطاب الكهربائية ، 500 & الميكرو ؛ m; مقاومة ، 50 كيلو أوميغا ؛ عند 200 هرتز
مجسات مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية (MEA): 8 × 8 MEA Ayanda Biosystems60MEA200 / 10iR-Ti-pr MEAS 8x8كهرمي الشكل ؛ القطر ، 40 وميكرو ؛ m; ارتفاع الطرف ، 50 & ميكرو ؛ m; تباعد الأقطاب الكهربائية ، 200 وميكرو ؛ m; مقاومة ، 1,000 كيلو أوميغا ؛ عند 200 هرتز
، تم استخدام مكبر صوت 60 قناة مع مرشح تمرير النطاق بين 0.1 هرتز و 3 كيلو هرتز عند تضخيم 1,200Xأنظمة متعددة القنواتMEA-1060-BC
برنامج MC Rack بمعدل أخذ عينات 10 كيلولجمعالبيانات
والتحكم في تسجيل مولد النبضمتعددة القنواتSTG 1002
تثبيت الشرائح والضغطوارنر إنسترومنتسSHD-26H / 10 ؛ WI64-0250
مضخة تمعجية-minipuls3GilsomMINIPULS3معدل التروية: 8 مل / دقيقة
<قوي>الاسم< / قوي><قوي>الشركة رقم الكتالوجتعليقات
نظام التحفيز: < / قوي>
محفز معزولأنظمة AM2100كثافة & plusmn ؛ 350 مو ؛ أ ، مدة 200 مو ؛ ثانية
التنغستن القطبأنظمة AM575300الموضوعة في المهاد
شركة مكعب ثنائي قطب هرتز برامج أنظمة مجموعات عليهانموذج الكهربائي

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Schiller, Y., Najjar, Y. Quantifying the response to antiepileptic drugs: effect of past treatment history. Neurology. 70 (1), 54-65 (2008).
  2. Fregni, F., et al. A controlled clinical trial of cathodal DC polarization in patients with refrac....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Direct Current StimulationMulti electrode ArrayBrain Slice PreparationSeizure like ActivityThalamocingulate PathwayAnterior Cingulate CortexField StrengthStimulation DurationElectrode OrientationCathodal DCS

Related Articles