مقالة منهجية

الموضع الجراحي القسطرة على المدى الطويل القلب والأوعية الدموية ممارسة اختبار في الخنازير

DOI:

10.3791/53772

فبراير 9, 2016

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هنا نقدم بروتوكولا لتقييم وظيفة القلب والرئة في الخنازير المستيقظة ، أثناء الراحة وأثناء تمرين جهاز المشي المتدرج. تسمح الأجهزة المزمنة بقياسات ديناميكية الدم المتكررة التي لا تتأثر بعوامل التخدير الاكتئابية القلبية.

الملخص

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف هذا البروتوكول إجراء العمليات الجراحية لالخنازير أداة المزمن وإجراءات ممارسة الخنازير في حلقة مفرغة بالمحركات. ضعف القلب في وقت مبكر من الصعب تشخيص المرض، لا سيما في النماذج الحيوانية، وغالبا ما يتم قياس وظيفة القلب جراحية، والتي تتطلب التخدير. كما العديد من وكلاء مخدر وcardiodepressive، قد يكون حجب بعض التغييرات الطفيفة في وظيفة القلب والأوعية الدموية. في المقابل، والأجهزة المزمن يسمح لقياس وظيفة القلب في حالة اليقظة، بحيث يمكن الحصول على القياسات في ظل ظروف يستريح هادئة، من دون آثار التخدير والصدمة الجراحية الحادة. وعلاوة على ذلك، عندما يتم تدريب الحيوانات بشكل صحيح، ويمكن الحصول على القياسات أثناء ممارسة مفرغه متدرج.

توضع تحقيقات تدفق حول الشريان الأورطي أو الشريان الرئوي لقياس النتاج القلبي وحول الأمامي الأيسر النازل الشريان التاجي لقياس كورونتدفق الدم آرى. يتم زرع القسطرة مملوءة بسائل في الشريان الأبهر، الشريان الرئوي، الأذين الأيسر، البطين الأيسر والبطين الأيمن لقياس الضغط واخذ عينات من الدم. وبالإضافة إلى ذلك، يتم وضع 20 G قسطرة في الوريد بين البطينين الأمامي للسماح اخذ عينات من الدم الوريدي التاجية.

بعد أسبوع من الانتعاش، وتوضع الخنازير في حلقة مفرغة بالمحركات، وترتبط القسطرة للضغط وتدفق متر، ويتعرضون الخنازير إلى خمسة مراحل بروتوكول ممارسة التقدمية، مع كل مرحلة تدوم 3 دقائق. وتسجل باستمرار إشارات الدورة الدموية ويتم أخذ عينات من الدم خلال 30 ثانية الأخير من كل مرحلة التمرين.

والميزة الرئيسية لدراسة الحيوانات المجهزة بشكل مزمن هو أنه يتيح تقييم المسلسل من وظيفة القلب، وليس فقط في بقية ولكن أيضا خلال الاجهاد البدني مثل ممارسة التمارين الرياضية. وعلاوة على ذلك، وظيفة القلب ويمكن تقييم مرارا وتكرارا أثناء المرض نماءالثانية خلال فترة العلاج المزمنة، وبالتالي زيادة قوة الإحصائية، وبالتالي الحد من عدد الحيوانات اللازمة للدراسة.

المقدمة

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وظيفة القلب كافية أمر ضروري لتزويد الجسم بالأكسجين والمواد الغذائية، وخاصة خلال الظروف لزيادة الطلب الأيض مثل أثناء ممارسة الرياضة 1. يتميز استجابة القلب ولممارسة عدد من التعديلات في وظيفة القلب، أي، زيادة في معدل ضربات القلب، انقباض والسكتة الدماغية وحدة التخزين، وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة، أي توسع الأوعية في الأسرة الأوعية الدموية تزويد العضلات ممارسة وكذلك في الرئة الأوعية الدموية، وتضيق الأوعية في الأسرة الأوعية الدموية تزويد الجهاز الهضمي وكذلك العضلات الخاملة 1. القدرة على ممارسة الرياضة ضعف هي السمة المميزة في وقت مبكر من ضعف القلب، ويستخدم القلب وعملية الاختبار كوسيلة فعالة لتحديد بين ضعف القلب، ضعف الأوعية الدموية و / أو الخلل الوظيفي الرئوي في المرضى الذين يعانون من ضعف القدرة على ممارسة الرياضة 2. ود ضعف القلب في وقت مبكرifficult لتشخيص المرض وخاصة في النماذج الحيوانية، وغالبا ما يتم قياس وظيفة القلب جراحية، والتي تتطلب التخدير، مع العديد من وكلاء مخدر حيازة الممتلكات cardiodepressive 3.

الأجهزة المزمن يسمح لقياس وظيفة القلب في حالة اليقظة، وعندما يتم ضبط الحيوانات بشكل كامل إلى القياسات ظروف المختبر يمكن الحصول في ظل ظروف يستريح هادئة من دون آثار التخدير والصدمة الجراحية الحادة. وعلاوة على ذلك، عندما يتم تدريب الحيوانات بشكل مناسب، كما يمكن الحصول على القياسات أثناء ممارسة مفرغه متدرج 4،5. وبشكل أكثر تحديدا، ترك وظيفة البطين الأيمن يمكن تقييم والمتعلقة نضح عضلة القلب، بينما تنظيم نغمة حركي في دوران الأوعية الدقيقة التاجي، النظامية والرئوي يمكن تحديدها. استخدام القسطرة مملوءة بسائل يسمح قياس الضغط وكذلك أخذ عينات الدم دون فرض الإعلانالإجهاد المشروط على الحيوانات. ميزة أخرى لدراسة الحيوانات المجهزة بشكل مزمن هو أن القلب عملية الاختبار ويمكن تكرار السماح باستخدام حيوان كما سيطرته، سواء أثناء تطور المرض أو أثناء العلاج المزمنة، وبالتالي زيادة قوة الإحصائية، وبالتالي الحد من عدد الحيوانات اللازمة للدراسة .

تشريح القلب من الخنازير يشبه نظيره لدى البشر وأنه من الممكن للحث على أشكال مختلفة من أمراض القلب، مثل مرض السكري 7 احتشاء عضلة القلب وارتفاع ضغط الدم الرئوي 8،9 والناجم عن سرعة قصور القلب 10،11. وعلاوة على ذلك، فإن حجم الخنازير يسمح الأجهزة المزمن، وكرر اخذ عينات من الدم من كمية كافية لتحليل ليس فقط غازات الدم، ولكن أيضا لإجراء قياسات عصبي هرموني و / أو للبحث عن المؤشرات الحيوية للمرض.

يصف هذا البروتوكول الجراحة تستخدم لالمزمنةلاي الخنازير أداة فضلا عن بروتوكول لممارسة الخنازير في حلقة مفرغة بالمحركات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد تمت الموافقة على الإجراءات التي تجرى على الحيوانات من قبل لجنة رعاية الحيوان في ايراسموس روتردام المركز الطبي (NL). الخنازير مع الأوزان ما بين 6 و 80 كغ وقد المجهزة بنجاح باستخدام هذا البروتوكول.

1. التكيف من الحيوانات إلى الإنسان المناولة

  1. بعد وصوله إلى المرفق، إيواء الحيوانات solitarily لكن تمكينهم من التفاعل مع بعضها البعض.
  2. Accustomize الخنازير إلى التعامل الإنساني والنقل من منشأة الحيوان إلى المختبر التجريبي، من خلال التعامل مع الحيوان مرة واحدة على الأقل يوميا لمدة أسبوع واحد.
  3. تدريب الحيوانات بشكل مناسب لإجراء التجارب العملية في حلقة مفرغة بالمحركات التي تمارس بها على جهاز المشي لمدة لا تقل عن ثلاث مرات قبل الجراحة.
  4. يجب أن صام الحيوانات O / N قبل الجراحة لمنع الغثيان والقيء وتطلع بالتالي المحتمل لسوائل المعدة.

2. إعداد لجراحة

  1. سكون
    1. إعداد الدواء للتخدير في حقنة 10 مل. يتكون تخدير من تلييتامين / zolazepam (5 ملغ / كلغ)، زيلازين (2.25 ملجم / كجم) والأتروبين (1 ملغ).
    2. حقن في العضل الدواء في عضلة شبه المنحرفة مع 19 G 1.5 '' إبرة قور خنزير.
    3. انتظر حوالي 10 دقيقة وتحقق للاسترخاء العضلات وفقدان الوعي لتأكيد المستوى المناسب ومستقر من التخدير.
    4. وضع 20 G القسطرة الطرفية السلامة في الوريد الأذن للإدارة عن طريق الوريد لاحقة من التخدير و / أو السوائل.
  2. التنبيب والتهوية
    1. وضع الحيوان على طاولة و / أو عربة في موقف ضعيف.
    2. فتح فم الحيوان مع رش عن طريق الفم.
    3. في حالة من الاسترخاء كافية الفكين أو وجود البلع وردود الفعل، التي تعيق التنبيب وإدارة ثيوبنتال (10 ملغ / كلغ) عن طريق الوريد عن طريق القسطرة الأذن الوريد. بدلا من ذلك، يمكن ملثمين الخنزيرمع isoflurane للحث على التخدير.
    4. استخدام المنظار التقليدي مع الضوء وشفرة ميلر للسماح للاختصاصي تنظير الحنجرة لمشاهدة مباشرة الحنجرة. إذا كان هناك تشنج الحنجرة، وتطبيق 2٪ ليدوكائين إلى الحبال والحنجرة للحد من تشنج والسماح التنبيب.
    5. إدراج مرود تنبيب في أنبوب القصبة الهوائية لجعل أنبوب مطابقة أفضل لتشريح مجرى الهواء العلوي، وتمرير أنبوب عن طريق الفم وبين الحبال الصوتية في القصبة الهوائية.
    6. تضخيم الكفة بالون مع حقنة 10 مل للمساعدة في تأمين في مكانه، لمنع تسرب الغازات في الجهاز التنفسي، وحماية الشعب الهوائية من طموح ممكن من السوائل في المعدة.
    7. قم بتوصيل أنبوب لتصفية التنفس (الحرارة والرطوبة مبادل) وإلى التنفس الصناعي الميكانيكي.
    8. وضع الحيوان على جانبها الأيمن على طاولة الجراحة.
    9. لتحقيق مستويات PO2 من 100-120 مم زئبق، تهوية الحيوان مع خليط من الأكسجين والنيتروجين (1: 2 ت / ت)، النقيبز إعدادات جهاز التنفس الصناعي التالية: وضع التحكم في الضغط: إيجابي ضغط نهاية الزفير (اللمحة) 4 CMH 2 O؛ ذروة الشهيق الضغط 16-18 CMH 2 O؛ التنفس تردد اعتمادا على حجم الحيوان (ل20 كجم الحيوان، وانخفاض التردد مع زيادة وزن الجسم) وهذا ينبغي أن يؤدي إلى حجم المد والجزر من ~ 10 مل / كغ، ومراقبة التهوية مع capnography.
    10. مراقبة درجة الحرارة باستخدام ميزان حرارة المستقيم والحفاظ على درجة حرارة بين 37-39 درجة مئوية باستخدام مصباح الحرارة أو الحرارة حصيرة. وعلاوة على ذلك، رصد معدل ضربات القلب مع القلب الكهربائي.
  3. تخدير
    1. حمل والحفاظ على التخدير يفضل بإضافة 2.0٪ من الأيزوفلورين (ت / ت) لتهوية الغاز خليط أو بدلا من ذلك عن طريق الوريد من الفنتانيل (10 ميكروغرام / كغ / ساعة) عن طريق القسطرة الأذن الوريد.
    2. تحقق عمق كاف من التخدير عن طريق اختبار ردود الفعل الألم مع الخلفيتين قرصة الساق اصبع القدم قبل بدء الجراحة. عند الضرورة، إضافةالتخدير إضافية أو الانتظار لبضع دقائق. تحقق ردود الفعل الألم بانتظام طوال الجراحة.
  4. السوائل والمضادات الحيوية
    1. إدارة الجرعة الأولى من أموكسيسيلين (25 ملغ / كلغ) عن طريق الوريد عن طريق القسطرة الأذن الوريد.
    2. ربط نظام نقل إلى القسطرة الأذن الوريد لتمكين التسريب البطيء من الجلوكوز 10٪ (500 مل) أثناء الجراحة.
  5. تعقيم موقع الجراحة
    1. حلاقة وتنظيف جلد الحيوان على مساحة ما يقرب من 25 سم عرض من العمود الفقري على طول الطريق إلى الإبط الأيسر.
    2. فرك الجلد رطب مع فرك بوفيدون اليود (75 ملغ / مل) لحوالي 5 دقائق.
    3. إزالة الصابون بوفيدون اليود من الجلد مع الشاش المعقم الرطب، قبل تعقيم الجلد مع محلول بوفيدون اليود (100 ملغ / مل).
    4. تغطية الحيوان مع الستائر الجراحية المعقمة للحد من نقل البكتيريا والتلوث اللاحق للموقع الجراحية.
    لى>

3. جراحة

  1. فتح الصدر (بضع الصدر)
    1. إجراء شق في الجلد، اعتبارا من 1 سم الذيلية إلى الزاوية السفلية اليسرى من الكتف وصولا الى الإبط الأيسر (الشكل 1). استخدام الإنفاذ الحراري ليكوي الأوعية الدموية في الجلد لمنع النزيف.
    2. قطع طريق العضلات المنشارية والصدرية العضلات الرئيسية، وذلك باستخدام طريقة القطع من الإنفاذ الحراري. أيضا استخدام الإنفاذ الحراري ليكوي الأوعية الدموية في الطبقة العضلية لمنع النزيف.
    3. استخدام تشريح حادة لتقسيم بعناية العضلات بين الضلوع من الفضاء وربي الأيسر الرابع مع المشبك البعوض. الآن على سطح الساحلي من الرئة اليسرى مغطاة غشاء الجنب الحشوية والجدارية يجب أن يتعرض لها.
    4. للدخول إلى التجويف الجنبي، يخترق بعناية كل من طبقات من غشاء الجنب والمسيل للدموع عليهم مفتوحة.
    5. استخدام ضام الصدري للفصل بين حواف الجرح والأضلاع ولدفع بقوة الأنسجةوبصرف النظر الحصول على التعرض جيدة من التجويف الجنبي.
    6. دفع بعيدا الرئة اليسرى في اتجاه الذيلية والاحتفاظ بها في مكان مع الشاش الرطب. الآن القلب والأوعية الدموية الكبرى يجب أن يتعرض بشكل واضح.
  2. وضع القسطرة وتحقيقات تدفق (الشكل 1)
    1. استخدام تشريح حادة لإزالة ~ 2 سم 2 من النسيج الضام المحيط من الشريان الأورطي الصدري تنازلي.
    2. إجراء خياطة صارة، ويتألف من ثلاث غرز في جدار الشريان الأورطي مع غير قابل للامتصاص USP3-0 خياطة مضفر الحرير (Ø0.2 مم).
    3. اختراق جدار الوعاء الدموي الأبهري مع الفولاذ المقاوم للصدأ 16 G إبرة في منتصف خياطة صارة.
    4. إدراج غيض من القسطرة مملوءة بسائل (حتى عصابة) في الشريان الأورطي، وسحب الخيط محفظة سلسلة معا بحزم وربط السلاسل اثنين من خياطة.
    5. للحفاظ على القسطرة في مكانها، الرياح خياطة 3 مرات حول القسطرة فوق الحلبة ومرة ​​أخرى رأي السلسلتين للخياطة. تأمين مزيد من القسطرة مع غرزة الجديد حوالي 1 سم في الجمجمة من المكان الإدراج.
    6. ربط القسطرة مملوءة بسائل لمحول الضغط معايرة، وهذا مرتبط إلى جهاز الكمبيوتر، لمراقبة الضغط الشرياني يعني أثناء الجراحة. الحصول على غازات الدم الشرياني للتحقق أو ضبط إعدادات التهوية الصحيحة.
    7. فتح التامور مع خفض تجاوزها. كن على علم للحفاظ على العصب الحجابي الذي يمتد على مدى التامور سليمة.
    8. تحديد الشريان الرئوي وتسحبه قليلا في اتجاه الذيلية مع ضام فارابوف. الآن يجب أن يتعرض الأبهر الصاعد وقوس الأبهر. مراقبة الضغط الشرياني يعني في حين يتراجع الشريان الرئوي.
    9. جعل قطع صغيرة (~ 1 سم) في النسيج الضام بين الأبهر الصاعد والشريان الرئوي باستخدام مقص Metzenbaum، لتكون قادرة على تشريح إما الأبهر الصاعد أو الشريان الرئوي مع المنحني كبيرةالمشبك البعوض لوضع مسبار التدفق.
    10. ضع الشريط المطاطي لجنة التحقيق التدفق حول السفينة. لجعل هذا أسهل، وضع الخيط من خلال واحدة من نهاية الشريط المطاطي، ضع هذا الخيط حول السفينة وتسحبه حتى يحيط الشريط المطاطي السفينة.
    11. إصلاح جهاز قياس تدفق التحقيق على الشريط المطاطي. ربط تحقيق تدفق إلى الكمبيوتر والتحقق من إشارة خرج القلب على جهاز الكمبيوتر للتأكد من موضع الصحيح لتحقيق التدفق.
    12. وضع القسطرة مملوءة بسائل في الشريان الرئوي، والبطين الأيمن، البطين الأيسر والأذين الأيسر في نفس الطريقة كما هو موضح في القسطرة مملوءة بسائل الأبهري (3.2.2 - 3.2.5). لاحظ أنه ليس من الضروري إزالة النسيج الضام قبل تنفيذ خياطة صارة في هذه الهياكل.
    13. كشف وتشريح الجزء القريب من الجزء الأمامي الأيسر النازل الشريان التاجي عن طريق رفع لأول مرة الأنسجة مع ملقط وجعل صغيرة (2-3 ملم) قطع مع مقص Metzenbaum، تليها إغاظة بعناية الأنسجة بعيدا من الشريان مع مسحة القطن. ضمان تشريح كامل للشريان التاجي عن طريق تمرير على التوالي المشبك البعوض الزاوية صغيرة تحتها.
    14. جعل مواز غرزة إلى الوريد التاجي الأمامي بين البطينين مع خياطة، وهذا مرتبط إلى القسطرة الوريدية التاجية.
    15. ثقب الوريد التاجي مع إبرة G 20 من القسطرة الوريدية التاجية وإدراج قنية من القسطرة عن طريق الوريد.
    16. إزالة الإبرة وتأمين القسطرة مع غرزة أنجزت بالفعل (3.2.14). تأمين مزيد من القسطرة مع غرزة الجديد حوالي 1CM من مكان ثقب الأولي.
    17. وضع مسبار تدفق التاجي حول الأمامي الأيسر تشريح سابقا تنازلي الشريان التاجي. عندما الشريان هو في حدود ضيقة وبالكاد مرئية، استخدم يدوكائين 10٪ رذاذ للاسترخاء السفينة للحصول على التعرض أفضل من السفينة. تحقق إشارة لتدفق التاجي على الكمبيوتر لأسيوطIRM في موضع الصحيح لتحقيق التدفق (الشكل 2).
  3. نفق
    1. نفق تحقيقات تدفق بشكل فردي من خلال الفضاء وربي الأيسر الثالث تحت العضلات وفوق الأضلاع باستخدام المشبك كبير البعوض المنحني.
    2. نفق القسطرة مملوءة بسائل إما عن طريق ثالث أو مساحة وربي الأيسر الخامس من اختراق العضلات بين الضلوع. المشبك قبالة القسطرة مملوءة بسائل وإزالة ثلاثي محبس لتقليل مساحة ثقب ومنع تسرب القسطرة مملوءة بسائل خلال نفق.
    3. إصلاح تحقيقات تدفق والقسطرة مملوءة بسائل مع غير قابل للامتصاص الحرير USP2-0 مضفر (Ø0.3 مم) عن طريق خياطة سلسلة محفظة على العضلات بين الضلوع. ويقدم خياطة أيضا لمنع تسرب الهواء بعد إعادة التنصيب الضغط داخل الصدر سلبي.
    4. جعل ثلاثة شقوق في الجلد ما يقرب من 2 سم الشريرة وموازية للعمود الفقري، ما يقرب من 3 سم فيطول 3 سم بعيدا عن بعضها البعض.
    5. بيرس على trochar تحت الظهرية اليسرى الظهرية العضلات من موقع شق منقاري إلى الشقوق على ظهره. نفق تحقيقات تدفق والقسطرة السوائل إلى الخلف في هذا trochar.
    6. وضع الصمامات على القسطرة مملوءة بسائل وإزالة المشبك. سحب الدم لإزالة الجلطات وفقاعات الهواء ويملأ القسطرة مملوءة بسائل مع 1000 وحدة دولية / مل الهيبارين. ينبغي أن تملأ القسطرة الوريدية التاجية مع 5000 وحدة دولية / مل الهيبارين.
  4. إغلاق الصدر
    1. إجراء شق بطول حوالي 1.5 سم، 8 سم الذيلية وبالتوازي مع الشق الأول.
    2. تؤدي هجرة من التجويف الجنبي من خلال العضلات الوربية السادسة تحت الجلد إلى هذا الشق مع المشبك كبير البعوض المنحني. ربط استنزاف للجهاز الشفط لإزالة أي السائل المتبقية وإعادة ضغط سلبي في التجويف الجنبي خلال إغلاق القفص الصدري.
    3. تخفيف وتضخيمالرئة مع عقد نهاية الشهيق. ضمان تعبئة كافية في الرئة عن طريق رصد بصرية.
    4. إغلاق الصدر عن طريق سحب أضلاعه من الفضاء وربي الرابع معا في موقعين منفصلين مع غير قابل للامتصاص البوليستر USP6 مضفر (Ø0.8 مم).
    5. إغلاق العضلة المنشارية وعضلة صدرية كبيرة مع غرزة تشغيل والجلد مع خياطة تحت البشرة تشغيل باستخدام غير قابل للامتصاص USP2-0 مضفر الحرير (Ø0.3 مم)
    6. خياطة شقوق على الجانب الظهري مع غير قابل للامتصاص البوليستر USP2-0 مضفر (Ø0.3 مم) بين القسطرة. أولا ربط عقدة مباشرة على الجلد لإغلاق الجرح، ثم يحملق القسطرة للخياطة مع عقدة 1 سم من الجلد. لتحقيقات التدفق، واستخدام امتصاص USP2-0 مضفر polyglactin (Ø0.3 مم) خياطة لمنع قطع الخيط في السلك تدفق التحقيق (الشكل 1).
    7. إزالة بعناية نزيف أثناء تطبيق الضغط على الجانب الجمجمة منشق للحفاظ على الضغط السلبي في التجويف الجنبي. إغلاق شق مع خياطة سلسلة محفظة باستخدام غير قابل للامتصاص USP2-0 مضفر البوليستر (Ø0.3 مم) وختم الجرح مع الفازلين.

figure-protocol-1

الشكل 1. نظرة عامة على جراحة أعلى اللوحة اليسرى: المنطقة المعقمة للحيوان، والتي ينبغي أن يحلق وتعقيمها الأكاذيب بين السطور الأزرق. ويصور موقع شق والخط الأحمر المنقط. أسفل اللوحة اليسرى: صورة القسطرة وتحقيقات تدفق: مملوءة بسائل القسطرة (A)، الشريان الأورطي / تحقيق تدفق الرئوي بما في ذلك الشريط المطاطي (B)، القسطرة الوريدية التاجية بما في ذلك 20 إبرة G (C) وتحقيق تدفق التاجي (D). أعلى اللوحة اليمنى: نظرة عامة تخطيطي لوضع القسطرة وتحقيقات التدفق. MAP، يعني الضغط الشرياني. كو الوريدي، القسطرة الوريدية التاجية. LAP، غادر الضغط الأذيني. LVPالأيسر الضغط البطيني. RVP، والحق الضغط البطيني. PAP، ضغط الشريان الرئوي. CO، خرج القلب. الاتحاد البرازيلي، وتدفق الدم في الشريان التاجي. أسفل اللوحة اليمنى: النفقي القسطرة تخرج الجزء الخلفي المضمون مع غرزة وعقدة في حوالي 1 سم المسافة على طول الدرز الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

  1. انتهاء التخدير والإنعاش من عملية جراحية
    1. وقف التخدير عندما يتم إغلاق كافة مواقع شق.
    2. توفير التسكين من قبل إدارة البوبرينورفين (0.015 ملغ / كلغ) والتراسل الفوري في العضلة الناحلة.
    3. وقف التهوية عند الحيوان يتنفس بشكل مستقل وقطع الأنبوب الرغامي من التنفس الصناعي. تحقق بانتظام إذا كان الحيوان يتنفس بما فيه الكفاية.
    4. ضع قطع من الشاش بين مواقع ظاهرية من القسطرة لاستيعاب الجرح السائل.
    5. لحماية خارجية حد ذاتهاgments من القسطرة، وإعطاء الحيوان سترة مرونة وحزم القسطرة بين قطعتين من جلد الغنم الاصطناعي.
    6. فرغ من بالون لأنبوب القصبة الهوائية وينزع الأنبوب عندما يستعيد الحيوان البلع لها.
    7. توفير تسكين الألم على المدى الطويل عن طريق الفنتانيل بطيئة الافراج عن التصحيح (12 ميكروغرام / ساعة للخنزير 20 كجم، ضبط قوة وفقا لوزن الجسم). وضع التصحيح على جزء رقيقة من الجلد (مثل أسفل البطن) لضمان التسليم المناسب للتسكين.
    8. منزل الحيوان بشكل منفصل عن الفترة اللاحقة للعمليات الجراحية بأكملها. توفير مصباح التدفئة في الأسبوع الأول بعد الجراحة للحفاظ على الحارة الحيوان.
    9. توفير ما يكفي من السوائل الرابع إذا كان الحيوان لا يشربون بشكل مستقل.
    10. تدفق القسطرة مملوءة بسائل يوميا، عن طريق سحب الدم أولا لإزالة جلطات، ثم إعادة ملئها بمحلول ملحي، وأخيرا مع المالحة heparinized (1000 - 5000 وحدة دولية / مل) لمنع تشكيل تجلط الدم. الحرص على عدم ضخ أي برادلي بوب الهواءليه بينما بيغ القسطرة.
    11. إدارة أموكسيسيلين (25 ملغ / كلغ) د يوميا لمدة 6 أيام بعد الجراحة لمنع العدوى بعد الجراحة.
    12. السماح للحيوان لاسترداد لمدة أسبوع قبل بدء التجارب حلقة مفرغة.

4. المطحنة تجربة (الشكل 2)

  1. تدفق القسطرة مملوءة بسائل كما هو موضح (3.5.10) وإرفاق القسطرة مسح للمحولات الضغط. قياس درجة حرارة الجسم لتكون قادرة على الحصول على قيم غاز الدم في درجة الحرارة تصحيحها.
  2. تدفق محولات الضغط بمحلول ملحي لمنع التخميد من الإشارات بسبب فقاعات الهواء. إرفاق محولات الضغط على سترة مطاطي على الجانب الظهري.
  3. ربط محولات الضغط وتحقيقات تدفق إلى مكبر للصوت. بدء قياس في برنامج الكمبيوتر ومعايرة محولات الضغط وتحقيقات تدفق مع 0 مم زئبق الانفتاح على الهواء (ومغلقة أمام الحيوان) و 100 مم زئبق باستخدام مقياس ضغط الدم.
  4. (الشكل 2).
  5. إذا لزم الأمر، قم بتوصيل خط تمديد إما من القسطرة السوائل لأخذ عينات من الدم الوريدي المختلط والشرايين.
  6. قياس ديناميكا الدم عند الحيوان هو الكذب، وكذلك الوقوف بهدوء في حلقة مفرغة. يتم قياس ضغط الدم المتوسط ​​على مدى فترة زمنية من 10 ثانية.
  7. الحصول على الشرايين ومختلطة عينات من الدم الوريدي من خلال سحب أول 5 مل من الدم باستخدام حقنة 10 مل حتى 1 مل من الدم النقي ويمكن الحصول باستخدام heparinized حقنة 1 مل. لعينات الدم الوريدي التاجية، يتم استخدام حقنة 2 مل بدلا من الحقنة 10 مل والانسحاب من 1 مل يكفي للحصول على الدم النقي.
  8. حافظ على مختومة 1 مل الحقن على الجليد قبل معالجة عينات الدم مع محلل غازات الدم لتحديدالأيضية والتهوية حالة من الحيوان.
  9. تعرض الخنازير لبروتوكول ممارسة خمس مراحل على حلقة مفرغة، 3 دقيقة في سرعة، 1-5 كم / ساعة (~ 85٪ من معدل ضربات القلب القصوى). الحصول على ديناميكا الدم والغازات في الدم بعد 1،5-2 دقيقة في السرعة على كل سرعة كما هو الحال في وضع الراحة.
  10. بعد بروتوكول ممارسة إغلاق الصمامات ومعرفة ما اذا كان قد حدث انحراف في معايرة 0 مم زئبق، تقديم مذكرة من هذه المعايرة. إزالة محولات ضغط القسطرة مملوءة بسائل وقطع تحقيقات التدفق.
  11. تدفق القسطرة مملوءة بسائل مع المياه المالحة والهيبارين (1000 - 5000 وحدة دولية / مل). حماية القسطرة وتحقيقات تدفق من خلال وضعها تحت سترة مرنة بين قطعتين من جلد الغنم الاصطناعي. ويمكن الآن أن تعاد الحيوان إلى قفصه.

figure-protocol-2
الشكل 2. المطحنة تجربة. الجزء الأيمنليرة سورية: المجهزة الخنازير في حلقة مفرغة. ترتبط القسطرة مملوءة بسائل لمحولات الضغط، وضعت على الجزء الخلفي من الخنازير. أعلى اللوحة اليمنى: نظرة عامة من إجمالي انشاء التجريبية، بما في ذلك حلقة مفرغة، مكبر للصوت وجهاز تسجيل. لوحة اليمنى السفلى: مثال نموذجي للبيانات الدورة الدموية المسجلة. من أعلى إلى أسفل؛ ضغط الأبهر (اوب، الأزرق) وضغط البطين الأيسر (LVP والأحمر)؛ ضغط الأيسر الأذيني (LAP والأزرق) وضغط البطين الأيسر (الأحمر)؛ ضغط الشريان الرئوي (PAP، الأزرق) وضغط البطين الأيمن (RVP والأحمر)؛ الأبهري تدفق / النتاج القلبي (AOF والأزرق)؛ تدفق الدم في الشريان التاجي (البرازيلي والأحمر). الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أدت ممارسة تصل إلى 5 كلم / ساعة في مضاعفة الانتاج في القلب من 4.3 ± 0،3-8،5 ± 0.7 لتر / دقيقة وهو ما تم تحقيقه أساسا عن زيادة في معدل ضربات القلب من 137 ± 7-256 ± 8 نبضة في الدقيقة في توليفة مع زيادة طفيفة في حجم المخ من 32 ± 2-36 ± 3 مل (الشكل 3). وقد سهلت هذه الزيادة في حجم المخ عن طريق زيادة الأيسر انقباض البطين، كما يتضح من زيادة في الحد الأقصى من أول مشتق من ضغط البطين الأيسر موانئ دبي / dtmax جنبا إلى جنب مع زيادة في نسبة الت...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تصف الدراسة الحالية لعملية جراحية لأجهزة مزمنة من الخنازير فضلا عن بروتوكول لممارسة الخنازير المجهزة في حلقة مفرغة بالمحركات بينما قياس ديناميكا الدم وأخذ عينات من الدم لقياس نسبة الأوكسجين في الدم الوريدي المختلط والدم الوريدي التاجي.

خطوات حاسمة في إطار بروتوكول
هناك العديد من الخطوات الحاسمة في البروتوكول الذي يبدأ بالفعل أثناء إجراء التنبيب. ثيوبنتال (2.1.5) هو عامل الاكتئاب الجهاز التنفسي، وبالتالي يت...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

شكر وتقدير

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأيد هذه الدراسة من قبل هولندا القلب منحة مؤسسة 2000T038 (إلى DJ Duncker) منحة 2000T042 (لD. Merkus)، والمفوضية الأوروبية FP7-الصحة-2010 منحة MEDIA-261409 (إلى DJ Duncker وD. Merkus)، مبادرة أبحاث القلب والأوعية الدموية هولندا: مؤسسة القلب الهولندية والاتحاد الهولندي لمراكز الطب في جامعة ومنظمة هولندا للبحوث الصحية والتنمية والأكاديمية الملكية الهولندية للعلوم   CVON- ARENA CVON 2011-11 (إلى DJ Duncker)، CVON-فيدرا CVON2012-08 (لD. Merkus) وCVON-RECONNECT CVON 2014-11 (إلى DJ Duncker وD. Merkus)، مؤسسة صوفيا (لD. دي Wijs-Meijler، D. Merkus وIKM ريس).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
محبس ثلاثي الاتجاهاتB. Braun16496
خطوط Perfusor PVC (خالية من DEHP) 150 سم / 2.6 مل   ؛B.Braun 8722960يستخدم للقسطرة المملوءة بالسوائل
" بايثون " مطاط أنابيب السيليكونBV1757 ID 1 مم ، OD 2 ممتستخدم للقسطرة المملوءة بالسوائل
كلوريد الصوديوم 0.9٪باكسترTKF7124
الجلوكوز 10٪باكسترWE0163
جهاز
قلم رصاص كهربائي رفيع الخط مع زرينERBE ELEKTROMEDIZIN GMBH20190-066
جهاز التنفس الصناعي المؤازر & نب سب. SV900C سيمنز - Elema AB 
لارينجوسكوبفيريريناري تكنيكس إنترنت11.02.47
قفازات
قناع جراحيمرتبط 3M1818FS
قبعة جراحيةKlinidrape621301
حزمة إجراءMolnlycke للرعاية الصحية97027809الستارة الجراحية ، وسادات الشاش ، والمحاقن ، والدورق ، إلخ
DroptearsAlcon288-28282-01
مقشر البيتادين 75 مجم / مل بوفيدون اليودميدا فارما بي فيRVG08939
محلول البيتادين 100 مجم / مل بوفيدون اليودميدا فارما بي فيRVG01331
أنبوبالحجم يعتمد على حجم
فلتر التنفس Hyrdo therm 3HMEIntersurgical1560000
مقبض منظار الحنجرة + شفرة ميلر مقاس 4كاوي ألمانيا
جهاز الإنعاش اليدوي- CombibagWeinmann6515-12-313-5596
مسبار التدفق المحيطي 3PSعبر الصوتللشريان التاجي ؛ الحجم 2.5 - 4 مم حسب حجم
مسبار تدفق الثقةعبر الأونكرونللشريان الأورطي / الشريان الرئوي ، 16-20 مم ؛ الحجم يعتمد على حجم
Venflon-Venisystem 20 جم × 32 ممBD393224للقسطرة الوريدية التاجية
إبرة حادة 18 جمللقسطرة الوريدية التاجية
Tygon TubingRubber BV2802 معرف 0.8 مم (1/32 بوصة ')، OD 2.4 مم (3/32 ' ')للقسطرة الوريدية التاجية
مقبض شفط 17 سم 6 6/8 " كوبلاند 18/8 مارتينيت مع موصل أنبوبKLS Martin Group18-575-24
شفرة مشرط  
مقبض مشرط 13.5 سم 5 3/8 " فولاذ مقاوم للصدأKLS Martin Group10-100-04
ملقط وعائي 20.2 سم 8 " De Bakey Stainless SteeKLS Martin Group24-388-20& plusmn 14 سم
ملقط خلع الملابس 17 سم 6 6/8 " كوشينغ ستانلسKLS Martin Group12-189-17& plusmn ؛ 18 سم
halsted-musquito مستقيم 12.5 سم - 5 "رودولف ميديكالRU-3100-13& plusmn; 12 سم
halsted-musquito منحني 12.5 سم - 5 "Rudolf MedicalRU-3101-12& plusmn; 12 سم
ملقط تشريح ورباط 13 سم 5 1/8 " Gemini ستانلس ستيلKLS Martin Group13-451-13& plusmn; 12 سم
ملقط تشريح وربطة 18.5 سم 7 2/8 " شنيدت ستانلس ستيل فولاذKLS Martin Group13-363-18
ضام ضلع فينوتشيتو ، ألومنيوم للأطفال -KLS Martin Group24-162-01
ملقط خياطة Mayo-Hegar 3 مم 18 سم - 7 "رودولف ميديكالRU-6050-18
Metchenbaum حاد منحني 14.5 سم - 5 (3/4) "Rudolf MedicalRU-1311-14M
Retrector farabeuf 12 سم - 4 (3/4)"Rudolf ملقط منشفةRU-4497-12
schr & auml ؛ ديل منحني 9 سم - 3,5 بوصةرودولف ميديكالRU-3550-09
مقص جراحي غير حاد 13 سم - 5 "رودولف ميديكالRU-1001-13
Gauzes Cutisoft 10 × 10 سم 4 طبقاتBSN Medical45846-00
Gauzes Cutisoft 5 × 5 سم 4 طبقاتBSN Medical45844-00
مقياس الجريان -CM2 / SF2 - 2 غاز (O2 والهواء)UNO BV180000008
Tec 7 VaporizerDatex-Ohmeda
Acederm جرح التعقيمEcuphar NV
Vaseline AlbumBufa165313
silkam 3-0 الحرير الطبيعي ، غير قابل للامتصاصB. BraunF 1134043خيوط لوضع القسطرة
silkam 2-0 حرير طبيعي ، غير قابل للامتصاصB. BraunF 1134051خيوط لتقريب العضلات
dagrofil 3-0 بوليستر ، غير قابل للامتصاصB. BraunC 0842478خيوط لقسطرة تعبئة السوائل بعد حفر الأنفاق
Vicryl rapide 3-0 ، 1 × 45 سم FS2 ، V2930GDaxtrio medische إنتاج15560خيوط للقسطرة الكهربائية بعد حفر الأنفاق
Vitafil 6 USPSMI6080Ties
10 مل و 2.5 مل
الهيبارين LEO (الهيبارين الصوديوم)  LEO Pharma A / S
ZoletilVirbactiletamine / zolazepam
SedazineAST farma108855زيلازين
TemgesicRB Pharmaceuticals5429بوبرينورفين
TensogripBSN Medical71522-00سترة مرنة
شفطجراحية معقمة القصبة الهوائية المسند ستيل Retrector farabeuf 12 سم - 4 (3/4)"Rudolf Medical RU-1311-14M طبي محاقن

المراجع

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Laughlin, M. H., et al. Peripheral circulation. Compr Physiol. 2, 321-447 (2012).
  2. Datta, D., Normandin, E., ZuWallack, R. Cardiopulmonary exercise testing in the assessment of exertional dyspnea. Ann Thorac Med. 10, 77-86 (2015).
  3. Vatner, S. F., Braunwald, E. Cardiovascular control mechanisms in the conscious state. N Engl J Med. 293, 970-976 (1975).
  4. Duncker, D. J., Bache, R. J. Regulation of coronary blood flow during exercise. Physiol Rev. 88, 1009-1086 (2008).
  5. Tune, J. D., Gorman, M. W., Feigl, E. O. Matching coronary blood flow to myocardial oxygen consumption. J Appl Physiol. 97 (1985), 404-415 (2004).
  6. van den Heuvel, M., et al. Coronary microvascular dysfunction in a porcine model of early atherosclerosis and diabetes. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 302, H85-H94 (2012).
  7. Zhou, Z., et al. Pulmonary vasoconstrictor influence of endothelin in exercising swine depends critically on phosphodiesterase 5 activity. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 306, L442-L452 (2014).
  8. Pereda, D., et al. Swine model of chronic postcapillary pulmonary hypertension with right ventricular remodeling: long-term characterization by cardiac catheterization, magnetic resonance, and pathology. J Cardiovasc Transl Res. 7, 494-506 (2014).
  9. Mercier, O., et al. Endothelin A receptor blockade improves regression of flow-induced pulmonary vasculopathy in piglets. J Thorac Cardiovasc Surg. 140, 677-683 (2010).
  10. Spinale, F. G., et al. Chronic supraventricular tachycardia causes ventricular dysfunction and subendocardial injury in swine. Am J Physiol. 259, H218-H229 (1990).
  11. Yarbrough, W. M., Spinale, F. G. Large animal models of congestive heart failure: a critical step in translating basic observations into clinical applications. J Nucl Cardiol. 10, 77-86 (2003).
  12. Duncker, D. J., Stubenitsky, R., Verdouw, P. D. Autonomic control of vasomotion in the porcine coronary circulation during treadmill exercise: evidence for feed-forward beta-adrenergic control. Circ Res. 82, 1312-1322 (1998).
  13. Stubenitsky, R., Verdouw, P. D., Duncker, D. J. Autonomic control of cardiovascular performance and whole body O2 delivery and utilization in swine during treadmill exercise. Cardiovasc Res. 39, 459-474 (1998).
  14. Zhou, Z., et al. Phosphodiesterase-5 activity exerts a coronary vasoconstrictor influence in awake swine that is mediated in part via an increase in endothelin production. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 306, H918-H927 (2014).
  15. Gross, D. R. Animal Models in Cardiovascular Research. , 3, Springer. (2009).
  16. Merkus, D., Duncker, D. J. Perspectives: Coronary microvascular dysfunction in post-infarct remodelled myocardium. Eur Heart J Suppl. 16, A74-A79 (2014).
  17. de Beer, V. J., de Graaff, H. J., Hoekstra, M., Duncker, D. J., Merkus, D. Integrated control of pulmonary vascular tone by endothelin and angiotensin II in exercising swine depends on gender. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298, H1976-H1985 (2010).
  18. Lautt, W. W. Resistance or conductance for expression of arterial vascular tone. Microvasc Res. 37, 230-236 (1989).
  19. Merkus, D., et al. Phosphodiesterase 5 inhibition-induced coronary vasodilation is reduced after myocardial infarction. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304, H1370-H1381 (2013).
  20. Heusch, G. The paradox of alpha-adrenergic coronary vasoconstriction revisited. J Mol Cell Card. 51, 16-23 (2011).
  21. Merkus, D., Houweling, B., van den Meiracker, A. H., Boomsma, F., Duncker, D. J. Contribution of endothelin to coronary vasomotor tone is abolished after myocardial infarction. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 288, H871-H880 (2005).
  22. Haitsma, D. B., et al. Minimal impairment of myocardial blood flow responses to exercise in the remodeled left ventricle early after myocardial infarction, despite significant hemodynamic and neurohumoral alterations. Cardiovasc Res. 52, 417-428 (2001).
  23. Bender, S. B., van Houwelingen, M. J., Merkus, D., Duncker, D. J., Laughlin, M. H. Quantitative analysis of exercise-induced enhancement of early- and late-systolic retrograde coronary blood flow. J Appl Physiol. 108 (3), 507-514 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة