Retroductal تحت الفك السفلي الغدة تقطير والمترجمة مجزأ تشعيع في نموذج الفأر من اللعابية Hypofunction

تدمير جانبية من الأنسجة السليمة حسابات لعدد من الآثار الجانبية الضارة للعلاج السرطان. ودمر جزئيا أو كليا في الغدد اللعابية الرئيسية التي تقع على عاتق مجالات الإشعاع لا محالة. ولذلك، فإن معظم المرضى الذين يخضعون للعلاج بالأشعة لسرطان الرأس والرقبة، وسرطان الغدد الليمفاوية عنق الرحم، أو إشعاع كامل الجسم قبل زرع نخاع العظام يعاني واحد من الآثار السلبية الأكثر شيوعا ومستمرة من الإشعاع، والغدة اللعابية hypofunction ^2-6.

خلايا عنيبية المنتجة للالسوائل من الغدد اللعابية هي شديدة الحساسية للإشعاع. الأضرار التي لحقت الغدد اللعابية يؤدي إلى تناقص حاد في تدفق اللعاب، وهو الشرط المشار إليها hypofunction كما اللعاب. انخفاض مزمن في تدفق اللعاب يضعف الأنشطة عن طريق الفم الأساسية مثل المضغ والبلع والكلام، والذوق، ولكن عقابيل المهووسين من الألم الشديد، والدموع المخاطية وعسر البلع والعدوى الانتهازية، وتسوس الأسنان تسوء لالمريض الرفاه وظيفة ^2،3.

منذ المرتبطة العلاج الإشعاعي فقدان الخلايا اللعابية لا رجعة فيه، لا يوجد علاج التصحيحية من جفاف الفم. العلاج الحالية التي تركز على تهدئة الأعراض مع بدائل اللعاب الاصطناعي والأدوية prosecretory غير فعالة للتخفيف على المدى الطويل ^6. وعلى الرغم من تحسن تقنيات التوصيل الإشعاع ساعدت يقلل من شدة الحالة، سمية الأنسجة الطبيعية ومضاعفاته لا تزال عاملا مقيدا في علاج السرطان ^6،7. تدابير وقائية لمنع المضاعفات المرتبطة العلاج الإشعاعي وبالتالي، أصبحت هي القاعدة. ويجري استكشاف وكلاء الإذاعة واقية أن مسح أنواع الاكسجين الحرة الراديكالية، إعادة تعمير خلية تشجيع، أو تعزيز إصلاح الحمض النووي لتفادي hypofunction اللعاب ^8-11.

إفرازات الغدد اللعابية الإفرازية تصب في الفم من خلال القنوات مطرح الرئيسية. إقناء؛ إدخال القنية داخل الفم من اليتم البريد القنوات مطرح للحقن عوامل التباين بشكل روتيني كما إجراء العيادات الخارجية. استخدام نهج مماثل، الغدد اللعابية يمكن أن تستهدف مباشرة لتلقي العلاج الموضعي ^12. وبصرف النظر عن الحد من مخاطر النظامية الآثار الجانبية، وقد أضاف تقطير الغدة retroductal الفوائد. الترتيب أحادي الطبقة من الخلايا اللعابية حول الشجرة الأقنية يسمح يستهدف جميع الخلايا الظهارية اللعابية، والتغليف ليفية من الأفعال الغدة كحاجز للحد من انتشار العلاجي غير مرغوب فيه. في جوهرها، والغدد اللعابية هي مناسبة بشكل مثالي لتلقي العلاج المستهدفة من الآلام الغدة مثل الإشعاع الناجم عن اللعابية hypofunction.

يتم تسليم الإشعاع التقليدية لعلاج السرطان في جرعات صغيرة (1،8-2،5 غراي / جزء / يوميا، خمسة أيام في الأسبوع) لمدة أسابيع. ولذلك، فإن العلاجية الراديو الواقي الذي يظهر فعالية ضد مخطط الإشعاع التي طال أمدها في نماذج تجريبية له أكبر تأثير سريري. COMPROوقد سجلت mised وظيفة اللعابية بعد الإشعاع مجزأة في الحيوانات الصغيرة، ولكن مصدر الإشعاع، جرعة جزء، والبروتوكولات المستخدمة هي متنوعة ^9،10،13.

يحدد هذا التقرير أساليب للتسليم retroductal لوالإشعاع مترجم من الغدد تحت الفك السفلي الفئران باستخدام مصدر إشعاع المريض المناسب وجزء الجرعة.

وقد وافق جميع الإجراءات التي الصحة لسو]، ويزيانا، رعاية الحيوان واستخدام اللجنة وكانت وفقا للمبادئ التوجيهية المعاهد الوطنية للصحة للرعاية واستخدام حيوانات المختبر.

1. كيفية تركيب الكانيولا من الجرذ تحت الفك السفلي الغدد اللعابية

1. إعداد الحقنة-الأنابيب الجمعية
   1. قطع طول 10 سم من PE10 البولي ايثيلين أنابيب مع مشرط. عقد طرفي الأنبوب بين السبابة والإبهام. تسخين الجزء الأوسط من الأنابيب فوق لهب لطيف، وتمتد برفق الأنبوب اللين لمضاعفة طوله عن طريق سحب كلا الجانبين.
   2. قطع الأنابيب في الوسط مع مشرط بزاوية 45 ^س للحصول على 2 حقنة عادية - مع كل نهاية مدبب. توسيع نهاية غير مدبب من قنية من المناسب أن أكثر من إبرة 29 G 0.5 سم حقنة الأنسولين.
   3. إزالة قنية، ورسم 220 ميكرولتر من محلول ملحي في حقنة. انقر لطرد فقاعات الهواء. تناسب cannulوعلى الإبرة، ودفع المكبس حقنة لطرد الهواء وضمان التدفق الحر للحل من خلال قنية. ضبط مستوى الصوت إلى 200 ميكرولتر.
2. كيفية تركيب الكانيولا داخل الفم من تحت الفك السفلي الغدة القناة
   ملاحظة: أدوات الأوتوكلاف قبل الإجراء، وتعقيم في الفترات الفاصلة بين الإجراءات في حبة تعقيم الساخن.
   1. وزن الفئران سبراغ داولي، والاستغناء عن حجم تحسب من الكيتامين (42 ملغ / كلغ) / زيلازين (8 ملغ / كلغ) / آسيبرومازين (1.4 ملغ / كلغ) المزيج في حقنة تحت الجلد.
   2. كبح جماح الحيوانية استيعاب قاعدة الذيل بين السبابة والإبهام من جهة والانزلاق من جهة أخرى على الجسم لفهم ذلك. ضع السبابة والوسطى على طول جانبي الرأس بينما عقد الجذع مع الإبهام والأصابع المتبقية.
   3. حقن مخدر في عضلات الأطراف الخلفية. تأكيد عمق التخدير عن طريق قرصة أخمص قدميها، ومنعكس الجفن. تطبيق مواد التشحيم العين لمنع جفاف بينماالحيوان تحت التخدير.
   4. وضع الحيوان على منصة صممت خصيصا ل(الشكل 1)، وإشراك القواطع العلوية على شريط عرضية. سحب الفك السفلي بنسبة حلقات الشريط المطاطي حول القواطع السفلية وحصره على المنصة.
   5. تمرير خياطة معقمة من خلال اللسان ورفعه إلى جمع الكلمة من الفم. المشبك الغرز مع مرقئ، وتمريرها فوق العارضة عرضية.
   6. توسيع الخدين مع بني خصيصا الخد الأسمدة (الشكل 1)، وتحت المجهر تشريح تحديد الحليمات تحت اللسان على أرضية الفم.
   7. فهم في نهاية مدبب من أنابيب PE10 متشكلة باستخدام ملقط الحساسة. التعامل بلطف غيض من قنية في فتحة الأقنية على الحليمات تحت اللسان. تأكيد وضع قنية بواسطة خيوط عليه 3-5 ملم في القناة. ضمان أن يمر دون أي إعاقة.
3. تحت الفك السفلي الغدة Instillation
   1. حقن الأتروبين (0.5 ملغ / كلغ) تحت الجلد في القفا من الرقبة، وانتظر 10 دقيقة لخفض إفرازات اللعاب.
   2. تأمين قنية إلى فتحة القناة مع قطرة cyanoacrylate (الغراء)، والسماح ليجف. غرس الحل في الغدة (200 ميكرولتر / غدة) عن طريق الضغط ببطء المكبس حقنة بمعدل ~ 50 ميكرولتر / دقيقة.
   3. سحق أنابيب مع مرقئ، وإزالة بعناية الحقنة. الإبقاء على أنابيب في القناة ل30 - 60 دقيقة حتى يستعيد الحيوان وعيه. إزالة الخيط الذي يحمل اللسان.
   4. نقل الحيوان إلى قفص منفصل، واستخدام مصباح الحرارة لإبقائه دافئا خلال الانتعاش. لا تترك الحيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه للحفاظ على رقود القصية.
   5. بعد هذا الحيوان هو المتنقلة تماما، إيوائها في الحظيرة مع وصول غير مقيد إلى الغذاء والماء.

2. المترجمة مجزأ تشعيعمن الغدد تحت الفك السفلي

1. كبح جماح الحيوانات كما هو موضح من قبل، وتخدير مع إدارة العضلي الكيتامين (33 ملغ / كلغ) / زيلازين (6 ملغ / كغ) / آسيبرومازين (1 ملغ / كلغ) المزيج في أطرافه الخلفية. تأكيد عمق التخدير، وتطبيق مواد التشحيم للعيون.
2. وضع مستلق الحيوان على الطاولة مسرع الخطي، وتمديد العنق عن طريق إمالة الرأس. Collimate مجال الإشعاع (3 سم عرض الشق) لتشمل المنطقة الممتدة من الحدود السفلي من الفك السفلي إلى الجزء العلوي من عظمة القص.
3. ضع 1 سم البلعة الأنسجة تعادل على المنطقة، وضبط المسافة بين مصدر الإشعاع وأعلى من البلعة إلى 100 سم.
4. أشرق الحيوان (2.5 غراي) باستخدام MV شعاع الفوتون 6 من معجل خطي. جرعة معدل وحجم الحقل، والبعد عن مصدر إشعاع لبلعة سطح ستحدد مدة التعرض. في التيار إعداد، والمشع الحيوانات بمعدل جرعة من ~ 1 غراي / دقيقة.
5. تكرار التعرض. 2.5 غراي / يوم ليصبح المجموع 8أيام؛ 4 أيام / أسبوع مع فاصل زمني 2 يوما بينهما. إبقاء الحارة الحيوان خلال فترة الانتعاش. نقل الحيوان إلى الحظيرة بعد أن يتم المتنقلة بشكل كامل.
6. جمع حفز تحت الفك السفلي الغدة اللعاب 8 أسابيع بعد الإشعاع لقياس وظيفة الغدة ^14. الموت ببطء الحيوانات تحت التخدير عن طريق نضح القلب من البرد بارافورمالدهيد 4٪ / الفوسفات مخزنة المالحة درجة الحموضة 7.2. استئصال الغدد تحت الفك السفلي لنسيجية وتحليلات المناعى ^14.

التكيف مع تقنية تصوير القناة اللعابية المناظير والعلاج المحلية من الغدد اللعابية الرئيسية هي مجدية. وقد حاولت إدارة Retroductal في الفئران الغدد اللعابية تحت الفك السفلي عن طريق القسطرة داخل الفم من القنوات وارتون (الشكل 2). القنوات اللعابية وارتون مفتوحة على الحليمات الفرعية اللغات الموجودة على أرضية الفم، ولكن فتحات غير مرئية بسهولة. إدخال قنية كان، لذلك، يتم عن طريق السبر اللطيف. لتجنب النزيف غير مرغوب فيه أو انثقاب القناة، لم يتم استخدام القوة في حين وضع قنية. وأكد السلس مرور المقاومة خالية من قنية في القناة من قبل الظهر لطيف وإيابا حركة الأنبوب.

وأكد كيفية تركيب الكانيولا خلال التجارب الأولية عن طريق غرس الغدة مع الهيماتوكسيلين أو حل التريبان الأزرق، وتقييم تلطيخ الغدة في الحيوانات الموت الرحيم (الشكل 3). GLوملء تم التأكد حجم من خلال وضع تصور تلطيخ الشجرة الأقنية في الغدد استأصل. للحيوانات وزنها 150-250 غرام، وقد تحقق تعبئة كاملة للغدة مع 200-250 ميكرولتر من الحل. التسريب السريع يمكن أن تزيد الضغط الغدة ويزيد من خطر الإصابة وbiospread. لتجنب تدمير الأنسجة، وكانت تدار الحل تدريجيا بمعدل ~ 50 ميكرولتر / دقيقة

الغدد تحت الفك السفلي الفئران مماثلة لالغدد النكفية في حساسيتها للإشعاع 15. درست الغدد تحت الفك لأنها يمكن للإشعاع بشكل انتقائي دون تكبد شديدة آثار خارج الهدف (الشكل 4). تجنيب لتجويف الفم وكمية كبيرة من الغدد النكفية التقليل من تأثير التهاب الغشاء المخاطي للفم وجفاف الفم الحاد على صحة الحيوان ونتائج التجارب. أجريت دراساتنا السابقة في الفئران مع واحدة، جرعات كبيرة من الإشعاع 11،16، ولكن فارك الجرعات tionated أكثر ذات الصلة إلى الممارسة السريرية. منطقة الرقبة من الحيوان كان، لذلك، تتعرض يوميا لجرعات صغيرة من الإشعاع. لتحقيق تراكم موحد من جرعة الإشعاع داخل الغدد تحت الفك السفلي بالقرب من سطح الجلد، وضعت بلعة الأنسجة تعادل لينة مصنوعة من هلام متجانسة مع كثافة 1.03 جم / سم مكعب على الرقبة خلال الإشعاع.

تأثير مخطط الإشعاع مجزأة على تدفق اللعاب كما هو محدد في 8 أسابيع تظهر بعد الأشعة التي التعرض اليومي لالزيادات من 2.5 غراي يقل تدفق اللعاب بشكل كبير. تم تسجيل القريب تخفيض بنسبة 10 أضعاف في الناتج اللعاب في الحيوانات المعرضة للإشعاع على النقيض من الحيوانات غير المشع (اختبار تي 2 من جانب الطالب، ف <0.01، الشكل 5) 14. وأكدت نتائج إنشاء الإشعاع الناجم عن اللعابية hypofunction في الحيوانات.

الشكل 3. التسريب من الحل الهيماتوكسيلين في الفك السفلي الغدة للتثبت من تقنية. الغدة تلطيخ يشهد على الإدارة الناجحة للحل في الغدة تحت الفك السفلي. لاحظ أن الغدة تحت اللسان في الزاوية اليسرى العليا ليست ملطخة. ويرد الغدة مراقبة غير مصبوب على اليسار.e.com/files/ftp_upload/53785/53785fig3large.jpg "الهدف =" _ فارغة "> الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

وضعت الرقم 4. التنسيب من الحيوان للإشعاع. الحيوان مستلق على طاولة معجل خطي، ورئيس بعنوان العودة إلى تمديد العنق. وكان عرض الشق موازى 3 سم. يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

وقد غرست الرقم 5. تأثير الإشعاع مجزأ على تحت الفك السفلي الغدة وظيفة. المالحة في الغدد تحت الفك السفلي قبل الإشعاع. وقد المشع رقبة الحيوان في أجزاء من 2.5 غراي / يوم لمدة 8 أيام. داتوالمعروضة هي متوسط ​​± SEM من حفز معدل تدفق اللعاب تحت الفك السفلي بعد 8 أسابيع الانتهاء من مخطط الإشعاع. ويرد هذا الرقم بإذن المؤلف من العلاج الجيني الإنسان، ماري آن ليبرت، وشركة الناشر 15. يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.