مقالة منهجية

داخل الحرقفي حقن الشريان للنمذجة فعالة وانتقائية مجهرية العظام الانبثاث

DOI:

10.3791/53982

⸱

سبتمبر 26, 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Lester and Sue Smith Breast Center, Baylor College of Medicine, 2Department of Molecular and Cellular Biology, Baylor College of Medicine, 3Graduate Program in Developmental Biology, Baylor College of Medicine, 4Department of Molecular and Human Genetics, Baylor College of Medicine, 5McNair Medical Institute, Baylor College of Medicine, 6Dan L. Duncan Cancer Center, Baylor College of Medicine

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توفر هذه المخطوطة الإجراء التفصيلي لحقن الشريان الحرقفي (IIA) ، وهي تقنية لتوصيل الخلايا السرطانية على وجه التحديد إلى أنسجة الأطراف الخلفية بما في ذلك العظام لإنشاء نقائل العظام التجريبية. على الرغم من أنه تم إنشاؤه في البداية باستخدام نماذج أورام الثدي ، إلا أنه يمكن توسيع هذا البروتوكول بسهولة ليشمل أنواع السرطان الأخرى.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

حقن الشريان الحرقفي (IIA) هو نهج فعال لإدخال آفات نقيلية للخلايا السرطانية المختلفة في. بالمقارنة مع الحقن داخل القلب وداخل الظنبوب المستخدمة على نطاق واسع ، فإن حقن IIA يجلب العديد من المزايا. أولا ، يمكنه توصيل كمية كبيرة من الخلايا السرطانية على وجه التحديد لعظام الأطراف الخلفية ، وبالتالي توفير أحداث استعمار متزامنة مكانيا في المراحل المبكرة والسماح بالقياس الكمي القوي والكشف السريع عن الخلايا السرطانية المنتشرة. ثانيا ، يحقن الخلايا السرطانية في الدورة الدموية دون الإضرار بالأنسجة المحلية ، وبالتالي تجنب العمليات الالتهابية والتئام الجروح التي تربك عملية استعمار العظام. ثالثا ، يسبب حقن IIA نموا نقيليا ضئيلا جدا في الأعضاء غير العظمية ، وبالتالي يمنع من الاستسلام للنقائل الحيوية الأخرى ، ويسمح بالمراقبة المستمرة لآفات العظام البطيئة. هذه المزايا مفيدة بشكل خاص لفحص التقدم من الخلايا السرطانية المفردة إلى النقائل الدقيقة متعددة الخلايا ، والتي كانت بعيدة المنال إلى حد كبير في الماضي. عند دمجها مع الأساليب المتطورة للتصوير البيولوجي وأنسجة العظام ، يمكن تطبيق حقن IIA على أغراض بحثية مختلفة تتعلق بالنقائل العظمية.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

حساب الانبثاث لأكثر من 90٪ من الوفيات الناجمة عن الأورام الصلبة. العظم هو الجهاز الأكثر شيوعا تتأثر الانبثاث من أنواع السرطان المختلفة، وخاصة سرطان الثدي وسرطان البروستات. عندما تم تشخيصها في العيادة، الانبثاث العظام عادة قد دخلت مراحل متقدمة مع إما الحالة للعظم أو بانية العظم تغيرات في العظام، وغالبا ما يترافق مع أعراض عصبية.

الدراسات السابقة ركزت في معظمها على العلنية الانبثاث العظام عظمية 1-3، ولكن نحن حاليا محدودة فهم micrometastases في العظام قبل بداية عملية الحالة للعظم. هذا هو على الأقل جزئيا بسبب عدم وجود نماذج والنهج التجريبية المناسبة. نماذج الماوس المعدلة وراثيا من سرطان الثدي غالبا ما metastasize إلى الرئتين، ولكن بكفاءة أقل بكثير من العظام 4. وبالمثل، فإن الأورام المزروعة orthotopically نادرا ما تتطور الانبثاث العظام عفوية، مع بعض العظام الاستوائية 4T1 carcinom الثدييةلاستنساخ الفرعية وMSP overexpressed PyMT نموذج الفأر وراثيا كما استثناءات 5-7. داخل عظام الساق الحفر يمكن أن يحقق الخلايا السرطانية في العظام 10/08، لكنها تتحمل أيضا الضرر والتهاب الأنسجة المحلية. حاليا تم الحقن داخل القلب من خطوط خلايا سرطان الثدي النهج الرئيسي تحقيق العظام الاستعمار 11-13. ومع ذلك، بعد أن يتم إدخال الخلايا السرطانية في البطين الأيسر فقط ونسبة محدودة تصل أخيرا العظام ونخاع العظام، مما يجعل من الصعب تتبع الانبثاث المجهري بطريقة قابلة للقياس الكمي.

في هذه الدراسة، ونحن إنشاء تقنية، وهي شريان داخل الحرقفي (IIA) حقن 14، لتقديم انتقائي الخلايا السرطانية في الأنسجة هند أطرافهم، وبالتالي إثراء الخلايا السرطانية في العظام ونخاع العظم دون أن تسبب الضرر لأنسجة المحلية. نظرا لخصوصية العظام، وهذا النهج أيضا يسمح الوقت الكافي لخلايا السرطان كسلان لاستعمار في نهاية المطاف قبل لimals تستسلم لالأورام الأولية أو الانبثاث في الأعضاء الحيوية الأخرى. عندما جنبا إلى جنب مع مجموعة متنوعة من التقنيات الأخرى، مثل التصوير تلألؤ بيولوجي، وتلطيخ المناعي وhistomorphometry العظام، حقن IIA مفيد محتملة لنطاق واسع من أغراض البحوث المتعلقة الانبثاث العظام، وخاصة لتتبع التقدم من الخلايا السرطانية واحدة إلى متعددة الخلايا micrometastases. على وجه الخصوص، أثبتنا أن حقن IIA تمكننا من تصور التفاعلات بين الخلايا السرطانية وأنواع مختلفة من الخلايا المحيطة في المكروية العظام.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد تم كل عمل الحيوانية وفقا للمبادئ التوجيهية رعاية الحيوان من كلية بايلور للطب.

1. خلية التحضير

ملاحظة: خطوط الخلايا السرطانية مختلفة يمكن استخدامها لحقن IIA باختلاف أغراض البحث. وقد استخدمنا خطوط خلايا سرطان الثدي MCF7، 4T1، 4T07، MDA-MB-361، MDA-MB-231، MDA-MB-436 وسرطان البروستاتا خط الخلية C4-2 في بحثنا. ونحن عادة استخدام كل GFP- واليراع الخلايا السرطانية المسمى وسيفيراز لدراستنا وتظهر بعض البيانات هنا من خط خلية MCF7 المسمى GFP-luciferase المراسل.

  1. الحفاظ على الخلايا في DMEM تحتوي على 10٪ FBS و 0.1 ملغ / مل البنسلين ستربتومايسين عند 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2.
  2. قبل الحقن IIA، يعرض للتريبسين الخلايا في 80-90٪ التقاء مع 0.25٪ التربسين حل / EDTA. استخدام برنامج تلفزيوني البارد لغسل خلايا مرتين، وإعادة تعليق الخلايا في 10 مل برنامج تلفزيوني لمدة عد الخلايا. لإزالة برنامج تلفزيوني، وخلايا الطرد المركزي في 800 x ج لمدة 5 دقائق.
  3. إعادة تعليق الخلايابتركيز 5 × 10 6 خلية / مل في الجليد الباردة برنامج تلفزيوني.
  4. استخدام 100 ميكرولتر GFP- ويراعة الخلايا السرطانية المسمى وسيفيراز للحقن IIA من الماوس واحد.
    ملاحظة: ولذلك، فإن عدد الخلايا التي كتبها كل حيوان تلقى هو 5 × 10 5 قد تحتاج إلى تغييرها بناء على عدوانية من خطوط الخلايا هذا العدد.
  5. حافظ على تعليق خلية على الجليد.
    قد تكون هناك حاجة الاهتزازات لمنع تراكم الخلايا كل بضع دقائق حتى انها مستعدة للحقن: ملاحظة. بالنسبة لبعض خطوط الخلايا (مثل MDA-MB-231)، قد تكون هناك حاجة إلى إجراءات أكثر صرامة (على سبيل المثال، ويمر من خلال 45 ميكرومتر مصفاة الخلية) لمنع التجميع. يرجى ملاحظة أن تسد الأوعية قد يسبب نخر الأنسجة، وبالتالي ارباك التجارب.

2. إعداد الحيوان

  1. لإدارة الألم الحيوان، وإعطاء 5 ملغ / كغ / يوم كاربروفين (أو غيرها من مسكن) مع المكملات الغذائية للفئران ما لا يقل عن 24 ساعة قبل الجراحة. إدارةجرعة من 0.1 ملغ / مل تحت الجلد البوبرينورفين 60 دقيقة قبل الجراحة. ملاحظة: إجراء اختياري هو زرع استراديول البليت في الجزء الخلفي من الحيوانات لتوفير استراديول إضافية. هذا وسوف تسريع تنمو من خلايا ER + السرطان (على سبيل المثال، قدم مكعبة-7 خلايا) 9.
  2. تخدير 4-6 الاسبوع الماوس القديم (حوالي 20 غراما) مع الكيتامين (80-100 ملغ / كلغ) وزيلازين (10 -12.5 ملغم / لتر) عن طريق الحقن داخل الصفاق.
  3. تأكيد المستوى المناسب من التخدير على فأرة الحاسوب 20 غراما من قرصة أخمص قدميها، ومراقبة وتخفيض 50٪ في معدل التنفس وردي الأغشية المخاطية (مثل الجلد الماوس الأذن والجلد مخلب). حافظ على مراقبة هذه العلامات الحيوية كل 15 دقيقة أثناء الجراحة. ملاحظة: لا حركة الحيوانات تشير إلى أن هذا الحيوان هو تخدير بما فيه الكفاية وعلى استعداد لإجراء عملية جراحية.
  4. استخدام البيطري مرهم على العينين لمنع جفاف.
  5. حلق الماوس على أسفل البطن، وبخاصة في منطقة الفخذ اليمنى حيث سوف الجراحة وحقنتجري.
    ملاحظة: هذا ليس من الضروري إذا تم استخدام الفئران عارية athymic.
  6. ضع الماوس على ظهرها، ونشر الساقين في مواقعها الطبيعية والتمسك أصابع القدم إلى الكرتون تشريح المحمول مع الشريط.
  7. مسح منطقة الفخذ اليمنى مع 70٪ من الإيثانول الأيسوبروبيل غارقة قطعة قطن معقمة، ثم مع betadine فرك الجراحية عدة مرات.

3. الوريد الحرقفي المشترك والشريان الموقع والفصل

  1. جعل شق الجلد من 1،0-1،2 سم طويلة بين ال 4 و 5 تشرين الحلمات في البطن السفلي الأيمن باستخدام العقيمة، # 10 الكربون الصلب ريش مشرط الذي عقد في مقبض رقم 3. ثم استخدام ثنى الجراحية المعقمة لتغطية جسم الحيوان باستثناء موقع شق.
  2. نقل الحيوانات إلى مقاعد البدلاء القياسية كبار تشريح المجهر. استخدام التكبير من 4X للحقن.
  3. تحت 4X التكبير للمجهر التشريح، وإدراج ملقط فصل حادة بين الأنسجة الدهنية وperitoneuم، ودفع الأنسجة الخارج على كلا الجانبين لفضح الأوعية الحرقفية والأعصاب (انظر الشكل 1).
    ملاحظة: يسمى الشريان الأبهر بين من خط الوسط والجزء السفلي من فروع الشريان الشريان الحرقفي المشترك. هذا هو المكان الذي يأخذ حقن مكان.
  4. استخدام زوج واحد من ملقط غرامة على التوالي لاختراق النسيج الضام (مثل غشاء) بين السفن والأعصاب، وأقرب إلى السفن.
  5. تبديل ملقط غرامة على التوالي في اليد اليسرى. الاستيلاء على زوج من ملقط غرامة الزاوية باستخدام اليد اليمنى. إدراج ملقط اليد اليمنى في نفس الموقف حيث تم كسر الأنسجة الضامة. وبعد ذلك عصا ملقط اليد اليمنى من خلال، تحت السفن.
  6. في نفس الوقت، إدراج ملقط اليد اليسرى في الأنسجة الضامة على الجانب الأيسر من السفن لتوجيه ملقط اليد اليمنى يمر بها.
  7. مرة واحدة ملقط اليد اليمنى يحصل تحت السفن، في محاولة للفصل بين السفن من منظمة الشفافية الدولية المحيطةssue أكثر قليلا، ثم الاحتفاظ بها على رأس ملقط اليد اليمنى.
  8. استخدام ملقط اليد اليسرى لتقديم غيض من خياطة 4-0 الحرير إلى ملقط اليد اليمنى، ثم سحب الخيط بلطف وببطء من خلال تحت السفن. ملاحظة: الآن يتم رفع كل من الوريد والشريان السفن المشتركة من قبل خياطة (انظر الشكل 2).

4. حقن وبعد حقن العناية

  1. إعداد الخلايا لحقن الأنسولين في حقنة 31 G. استخدام 100 ميكرولتر من تعليق خلية في برنامج تلفزيوني في الحقن. تأكد من ماصة صعودا وهبوطا عدة مرات لفصل الخلايا وتجنب التجميع بحيث حقن الخلايا لا تسد ومنع تدفق الدم.
  2. مع ملقط الزاوية في اليد اليسرى، ووضع ملقط تحت السفن على طول توجيهات خياطة، ثم قم بفتح الأسلحة اثنين من ملقط، وجود سفن عقد بلطف على ملقط.
    ملاحظة: ستكون الفترة الزمنية الفاصلة بين أحضان ملقط يكون طموقع njection.
  3. عقد إبرة G 31 مع 100 تعليق خلية ميكرولتر في اليد اليمنى، مع شطبة من الإبرة إلى أعلى، وعلى استعداد للحقن.
  4. ادخال الإبرة في تجويف الشريان (لن يدخل الدم طرف الإبرة). ثم دفع تعليق خلية ببطء في لحقن الخلايا. سوف تعليق خلية دفع بعيدا الدم الحمراء في وعاء. ليس محاولة لكسر الأوعية أو تسرب تعليق خلية بها.
  5. عند الانتهاء من الحقن، وسحب بلطف الى الوراء الإبرة وإبقاء السفن التي تصل على ملقط اليد اليسرى لوقف النزيف. ثم سحب بعيدا خياطة.
  6. سحب بعيدا ملقط اليد اليسرى، وبسرعة استخدام قطعة من القطن للضغط على منطقة شق الشريان لوقف النزيف.
    ملاحظة: عادة 5-10 دقيقة الضغط المستمر هو ما يكفي لوقف النزيف.
  7. عندما يتوقف النزيف، استخدام الغراء الجلد لإغلاق حواف الجلد من منطقة الجراحة. جعل الأذن علامة، والتحقق من تلألؤ بيولوجي يشير إلى دراسة توزيع حقن الخلايا. <ر /> ملاحظة: حقن ناجحة سيؤدي في صورة مشابهة الشكل 3.
    1. تحقق تلألؤ بيولوجي الإشارات عن طريق الحقن من 100 ميكرولتر 15 ملغ / مل وسيفيرين في برنامج تلفزيوني في 75 ملغم / كغم من تركيز الماوس عن طريق الجيوب الأنفية داخل المداري.
      1. للحقن داخل المداري، وضع الأصابع على جانبي العين الفأر، واستخدام الضغط لجعل كرة العين البوب ​​قليلا الخروج من إطار العين، إدراج 28 G إبر حقنة الأنسولين بين كرة العين والأنف، ثم دفع حقنة لحقن وسيفيرين ببطء .
        ملاحظة: في الموضع الصحيح، وينبغي أن تكون الإبرة قادرة على الوصول إلى عمق 2-3 ملم قبل أن تصل الأنسجة الصلبة (العظام).
      2. ضع الماوس في نظام التصوير في الجسم الحي التصوير الحيوانية كامل ل10-60 ثانية في 5 دقائق (انظر الشكل 3).
        ملاحظة: لإجراء اختياري هو زرع استراديول بيليه في الجزء الخلفي من الحيوانات لتوفير استراديول إضافية. هذا وسوف تسريع نمو الخلايا ER + السرطان (على سبيل المثال، قدم مكعبة-7خلايا) 15.
  8. ترك الماوس على وسادة التدفئة الحارة حتى يستيقظ. مراقبة النزيف، تورم، علامات تفزر والألم خلال فترة ما بعد الجراحة. وضع الفئران إلى قفص مع تغطية مسكن (اقترح المكملات الغذائية carprofin) نظرا لإدارة الألم حتى لا علامات الألم. إيلاء اهتمام وثيق والرعاية لهذه الحيوانات خلال 7 أيام بعد الجراحة.

5. رصد النقيلي النمو

  1. Histomorphometry:
    1. حصاد الورم تحمل أنسجة العظام، وإصلاح العظام في 4٪ امتصاص العرق لمدة 24 ساعة، ثم يزيل الكلس عليها في الرقم الهيدروجيني 7.0 14٪ حل EDTA لمدة 3 - 5 ايام، ويعرضهم لالبارافين تضمين كما سبق وصفه (14).
    2. قسم الأنسجة العظمية تضمين البارافين في سمك 3 ميكرون وتنفيذ طريقة النسيجي القياسية من الهيماتوكسيلين / يوزين تلطيخ كما هو موضح سابقا (14).
  2. Immunohistochemisمحاولة:
    1. يخضع جزءا لا يتجزأ من البارافين الورم تحمل العظم الشرائح لالمناعية تلطيخ لأغراض مختلفة كما هو موضح سابقا (14). لفترة وجيزة، immunostain الخلايا السرطانية MCF7 بواسطة أضداد GFP، والخلايا المكونة للعظم immunostain (قبل بانيات وبانيات) بواسطة أضداد Osterix وأضداد الفوسفاتيز القلوية (ALP)، على التوالي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويوضح الشكل 1 الموقع التشريحي وعلاقة الشريان الحرقفي المشترك (الأحمر) والوريد (الأزرق).

ويبين الشكل 2 الموقف النسبي للسفن الحرقفي والأعصاب تحت المجهر تشريح. كما هو مبين في الشكل 2A، والأوعية والأعصاب هي حق تحت الجدار البريتوني ويمكن كشفت بعد إجراء شق الجلد ويتم الضغط على الغشاء البريتوني بعيدا. الو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

على الرغم من أن فقط الشريان الحرقفي هو الهدف من حقن للخلايا السرطانية، ونحن نوصي فصل كل من الوريد الحرقفي والشريان من الأنسجة المحيطة بها، ورفع لهم معا كحزمة واحدة. وذلك لأن الوريد والشريان الاتصال على نطاق واسع مع بعضها البعض، وجدار الوعاء الدموي الوريدي رقيقة وسهلة للكسر. ولذلك، من أجل حقن ناجحا، فإنه يوفر الوقت والجهد لاستيعاب ما يصل السفينتين معا، على الرغم من أن يتم حقن الخلايا السرطانية فقط إلى الشريان. ويستخدم خياطة 4-0 الحرير للمساعدة في هذه العملية كما هو موضح في ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم البحث في مختبر Zhang بواسطة X. H.-F. CA151293 Z. NCI ، CA183878 ، مؤسسة أبحاث سرطان الثدي ، وزارة الدفاع الأمريكية DAMD W81XWH-13-1-0195 ، جائزة تجريبية من CA149196-04 ، معهد ماكنير الطبي ومن قبل وزارة الدفاع الأمريكية DAMD W81XWH-13-1-0296.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
<قوي>المواد< / قوي>
DMEMHyCloneSH30022.01
FBSGibco16000
القلم / البكتيريا الأمفاتيريسين بلونزا بيوهيتاكر17-745E
PBSلونزا بيوهيتاكر17-516F
محلول التربسين / EDTAHyCloneSH30042.01
45 و مو ؛ مصفاة الخلايا Mمختبر VWR الدولي195-2545
MediGel CPF مع كاربروفين   ؛عنصر خاضع للرقابة من الرعاية البيطرية في BCMلإدارة الألم
بوبرينورفين   ؛عنصر خاضع للرقابة من الرعاية البيطرية في BCMلإدارة الألم
Estradiol PelletInnovative Research of AmericaSE-121
Ketamine و xylazineعنصر خاضع للرقابة من الرعاية البيطرية في BCM
مرهم بيطريعنصر خاضع للرقابة من الرعاية البيطرية في BCMتجنب جفاف العين
ماكينة حلاقةOster78005-050ل الفئران المفروة
الأيزوبروبيل الإيثانولACROS67-63-0
مقشر جراحي للبيتادينعنصر خاضع للرقابة من الرعاية البيطرية في BCM
# 10 شفرات مشرطTed Pella، Inc549-3CS-10مقبض متعدد
رقم 3Ted Pella، Inc541-31تحتاج إلى تعقيم
الستارة الجراحية المعقمةتقنيةSai InfusionPSS-SD1
ملقط مستقيم أداة Roboz الجراحيةRS-5132تحتاج إلى التعقيم
ملقط دقيق مستقيمأدوات العلوم الدقيقة11253-20تحتاج إلى التعقيم
ملقط دقيق ذو حوافأدوات العلوم الدقيقة11253-25تحتاج إلى التعقيم
4-0 خياطة حرير فيكريلجونسون & جونسون هيلث كيرJ214H
31 G محاقن الإنسولينBD328418
مسحات قطنية متعددة Q-tips (معقمة)مختبر VWR الدولي89031-272
غراء الجلدهنري شاين لصحة31477لموقع الجراحة إغلاق الجلد
قضيب علامة الأذنأدوات العلوم الدقيقة24220-00
علامات الأذنأدوات العلوم الدقيقة24220-50
D-luciferinGold BiotechnologyLUCKتجنب الضوء ووضعها على الثلج
28 جرام محاقن الأنسولينBD329410للحقن داخل الحجاج
ParaformadehydeAlfa Aesar30525-89-4لتثبيت الأنسجة
EDTAOmniPur4050لإزالة الأنسجة
العظمية< قوي>الاسم<قوي>الشركة رقم الكتالوجتعليقات
Equipment
تشريح المجهرLeica LeicaS6E ستيريو
IVIS Lumina II نظام التصويرالرؤية
الجزيئية المتقدمةnameCompany Catalog NumberComments
Antibodies
Anti-GFP (JL-8)Clontech632381
الأجسام المضادة المضادة ل ALPAbcamab108337
Anti-Osterix الأجسام المضادةAbcamAB22552

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kang, Y., et al. A multigenic program mediating breast cancer metastasis to bone. Cancer cell. 3 (6), 537-549 (2003).
  2. Lu, X., et al. VCAM-1 promotes osteolytic expansion of indolent bone micrometastasis of breast cancer by engaging alpha4beta1-positive osteoclast progenitors. Cancer cell. 20 (6), 701-714 (2011).
  3. Ell, B., Kang, Y. SnapShot: Bone Metastasis. Cell. 151 (3), 690-690 (2012).
  4. Kretschmann, K. L., Welm, A. L. Mouse models of breast cancer metastasis to bone. Cancer Metastasis Rev. 31 (3-4), 579-583 (2012).
  5. Lelekakis, M., et al. A novel orthotopic model of breast cancer metastasis to bone. Clin Exp Metastasis. 17 (2), 163-170 (1999).
  6. Rose, A. A., et al. Osteoactivin promotes breast cancer metastasis to bone. Mol Cancer Res. 5 (10), 1001-1014 (2007).
  7. Welm, A. L., et al. The macrophage-stimulating protein pathway promotes metastasis in a mouse model for breast cancer and predicts poor prognosis in humans. Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (18), 7570-7575 (2007).
  8. Li, X., et al. Loss of TGF-beta Responsiveness in Prostate Stromal Cells Alters Chemokine Levels and Facilitates the Development of Mixed Osteoblastic/Osteolytic Bone Lessions. Mol. Cancer. Res. 10 (4), 494-503 (2012).
  9. Gregory, L. S., Choi, W., Burke, L., Clements, J. A. Breast Cancer Cells Induce Osteolytic Bone Lesions In vivo through a Reduction in Osteoblast Activity in Mice. PLoS ON. 8 (9), e68103(2013).
  10. Waning, D. L., et al. Excess TGF-β mediates muscle weakness associated with bone metastases in mice. Nat Med. 21 (11), 1262-1271 (2015).
  11. Simmons, J. K., et al. Animal Models of Bone Metastasis. Vet Pathol. 52 (5), 827-841 (2015).
  12. Werbeck, J. L., et al. Tumor microenvironment regulates metastasis and metastasis genes of mouse MMTV-PymT mammary cancer cells in vivo. Vet Pathol. 51 (4), 868-881 (2014).
  13. Xiang, J., et al. CXCR4 Protein Epitope Mimetic Antagonist, POL5551, Disrupts Metastasis and Enhances Chemotherapy Effect in Triple Negative Breast Cancer. Mol Cancer Ther. 14 (11), 2473-2485 (2015).
  14. Wang, H., et al. The osteogenic niche promotes early-stage bone colonization of disseminated breast cancer cells. Cancer Cell. 27 (2), 193-210 (2015).
  15. Hoffmann, J., et al. Characterization of new estrogen receptor destabilizing compounds: effects on estrogen-sensitive and tamoxifen-resistant breast cancer. J Natl Cancer Inst. 96 (3), 210-218 (2004).
  16. Tannehill-Gregg, S. H., Levine, A. L., Nadella, M. V., Iguchi, H., Rosol, T. J. The effect of zoledronic acid and osteoprotegerin on growth of human lung cancer in the tibias of nude mice. Clin Exp Metastasis. 23 (1), 19-31 (2006).
  17. Slyfield, C. R., Tkachenko, E. V., Wilson, D. L., Hernandez, C. J. Three-Dimensional Dynamic Bone Histomorphometry. J Bone Miner Res. 27 (2), 486-495 (2012).
  18. Koba, W., Jelicks, L. A., Fine, E. J. MicroPET/SPECT/CT imaging of small animal models of disease. Am J Pathol. 182 (2), 319-324 (2013).
  19. Simmons, J. K., et al. Canine prostate cancer cell line (Probasco) produces osteoblastic metastases in vivo. Prostate. 74 (13), 1251-1265 (2014).
  20. Amend, S. R., et al. Thrombospondin-1 regulates bone homeostasis through effects on bone matrix integrity and nitric oxide signaling in osteoclasts. J Bone Miner Res. 30 (1), 106-115 (2015).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة