يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
وقد صممت هذه الدراسة لتقييم تأثير وقائي من سلالة العصوية الرقيقة ضد مضاعفات للإجهاد الحراري. واستخدمت اثنان وثلاثون الفئران سبراغ داولي في هذه الدراسة. تم علاج الحيوانات شفويا مرتين في اليوم لمدة يومين مع B. الرقيقة BSB3 سلالة أو برنامج تلفزيوني. في اليوم التالي بعد العلاج الاخير، تم تقسيم كل مجموعة وضعت مجموعتين تجريبيتين (معاملة واحدة مع برنامج تلفزيوني ومعاملة واحدة مع B. الرقيقة) في 45 درجة مئوية لمدة 25 دقيقة. بقيت مجموعات المراقبة اثنين لمدة 25 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. الموت الرحيم كانت جميع الفئران وجرى تحليل العوامل المختلفة في جميع الفئات. يتم تسجيل الآثار الضارة للإجهاد الحراري من انخفاض ارتفاع الزوائد ومجموع سمك الغشاء المخاطي في ظهارة الأمعاء. النبات من البكتيريا من التجويف. زيادة تحوصل من كريات الدم الحمراء ورفع مستوى عديدات سكر شحمية (LPS) مستوى في الدم. يتم تقييم فعالية وقائية من العلاج قبلمداخلة تكلم فيها متكلم من هذه الآثار الجانبية. تم تعيين بروتوكول يصل لعلاج عن طريق الفم للجرذان مع البكتيريا للوقاية من مضاعفات الإجهاد الحراري، ولكن هذا البروتوكول يمكن تعديلها واستخدامها لطرق أخرى للإدارة وتحليل مركبات مختلفة.
تؤثر الضغوطات المختلفة على صحة الإنسان. تعد درجة الحرارة واحدة من أكثر العوامل إرهاقا ، حيث تسبب أمراضا مزمنة وحادة وحتى مميتة1. تم توثيق التغييرات في مورفولوجيا الأمعاء وفقدان سلامة حاجز الأمعاء بعد الإجهاد الحراري في كثير من الحالات2،3. هذا الحاجز الواقي مسؤول عن الدفاع ضد انتقال بكتيريا الأمعاء وسمومها ، ولا سيما عديدات السكاريد الدهنية (LPS) ، من التجويف إلى الدورة الدموية الداخلية4،5. يؤثر استقرار ميكروبات الأمعاء بشكل كبير على وظيفة الحاجز المعوي ، والاستجابة المناعية للمضيف ، وتحمل ظروف الإجهاد6. وبالتالي ، فإن تعديل الجراثيم المعوية يمكن أن يوفر نهجا جديدا للوقاية من الآثار الضارة المرتبطة بالإجهاد.
تم استخدام البكتيريا المفيدة كاستراتيجية واعدة لتعديل ميكروبات الأمعاء للإدارة الناجحة للحالات السريرية المختلفة ، مثل الإسهال ومرض التهاب الأمعاء والتهاب الجلد التأتبي واضطرابات التمثيل الغذائي7-10. وتشمل آثار بروبيوتيك للبكتيريا المفيدة إنتاج نواتج الأيض الأساسية لدعم صحة الأمعاء, تحفيز الجهاز المناعي, تعزيز تحمل اللاكتوز, استعادة الخلل الوظيفي الظهاري. كانت البروبيوتيك فعالة في الوقاية من المضاعفات المرتبطة بالإجهاد في المختبر وفي النماذج الحيوانية11،12.
أعطى الباحثون مزيدا من الاهتمام لبكتيريا Bacillus كبروبيوتيك لأن هذه البكتيريا تدعم التوازن المعوي13 ولها تأثيرات مفيدة على المضيف14. أظهرت بياناتنا السابقة فعالية عالية من بروبيوتيك Bacillus ضد مسببات الأمراض في المختبر15،16 وفي التجارب السريرية17،18. هنا ، نهدف إلى تقييم التأثير الوقائي لسلالة B. subtilis BSB3 ضد المضاعفات بعد الإجهاد الحراري.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وقد وافق جميع الإجراءات التجريبية التي IACUC جامعة أوبورن، صحراء، ولاية ألاباما.
1. إعداد الثقافة وسائل الإعلام، صحون والبكتيرية الثقافة
2. الحيوانات
3. تصميم تجريبي
4. إجراء العمليات الجراحية
5. تحليل إزفاء الجرثومي
6. تحليل النسيجي
7. خلوى الفحص
8. lipopolysaccharide في الفحص
9. عالية الدقة المجهر الضوئي من الدم
10. Statisالعرات
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وكانت درجة حرارة الجسم يعني من الحيوانات قبل ومباشرة بعد الإجهاد الحراري 36.7 ± 0.07 درجة مئوية و40.3 ± 0.17 درجة مئوية على التوالي (P <0.05). أدى تعرض الفئران للحرارة (المجموعة 3) في إعاقة واضحة في ارتفاع الزغب ومجموع سمك الغشاء المخاطي (الشكلان 2 و 3). تناوله عن طريق الفم من سلالة BSB3 قبل الإجهاد حماية الأمعاء من الأثر الضار للحرارة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يؤدي التعرض إلى ارتفاع درجة الحرارة في ظروف صحية خطيرة 29. الوقاية والكشف المبكر عن المضاعفات المتصلة بالإجهاد الحراري هي ذات أهمية حيوية 30. بروتوكول المعروضة يمكن استخدامها لتقييم فعالية من الطرق المختلفة للوقاية من الإجهاد الحراري الآثار السلبية.
خطوات حاسمة في هذا البروتوكول ما يلي: إجراء المعالجة الحرارية (45 درجة مئوية و 25 دقيقة)؛ استخدام المواد apyrogeni...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب تعلن أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.
تم دعم هذا العمل من قبل صندوق جامعة أوبورن FOP 101002-139294-2050.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) | سيجما ألدريتش ، ؛ سانت لويس ، ميزوري | P4417 | |
| كحول إيثيلي ؛ | فارمكو للمنتجات بروكفيلد ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ | 64-17-5 | |
| Agar | VWR | 97064-334 | |
| لوحات أجار ماكونكي | VWR | 470180-742 | |
| 5٪ لوحات أجار الدم | VWR | 89405-024 | |
| لوحة أجار الدم Brucella مع Hemin ، وفيتامين K | VWR | 89405-032 | |
| Bouin ' علوم | المجهر الإلكتروني المثبت ، هاتفيلد ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 15990 | |
| IL-10 Rat ELISA kit | Invitrogen ، كاماريلو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | KRC0101 | |
| IL-1beta Rat ELISA Kit | Invitrogen ، Camarillo ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية | KRC0011 | |
| IL-6 Rat ELISA Kit | Invitrogen ، كاماريلو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | KRC0061 | |
| INF-gamma Rat ELISA Kit | Invitrogen ، كاماريلو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | KRC4021 | |
| TNF-alpha Rat ELISA Kit | Invitrogen ، كاماريلو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | KRC3011 | |
| Rat LPS ELISA Kit | NeoBioLab ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية | RL0275 | |
| الغرفة البيئية 6020-1 | Caron ، Marietta ، OH ، الولايات المتحدة الأمريكية | 6020-1 | |
| أجهزة الطرد المركزي ؛ | بيكمان كولتر ، إنديانابوليس ، إنديانا ، الولايات المتحدة الأمريكية | Optima L-90K | |
| Ultra Centrifuge | |||
| نظام بصري مجهر ضوئي | CitoViva Technology Inc. ، أوبورن ، AL | ||
| Colony counter | Fisher Scientific ، بيتسبرغ ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | RE-3325 | |
| فريزر | هاير ، بروكلين ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية | HCMO50LA | |
| Ultra microplate قارئ | Bio-Tek Instrument, Winooski, VT, الولايات المتحدة الأمريكية | ELx 808 | |
| Auto Strip Washer | Bio-Tek Instrument, Winooski, VT, USA | ELx50 | |
| Pipettes | Gilson, Pipetman, France | P100, P200, P1000 | |
| C24 Incubator Shaker | New Brunswick Scientific, Enfield, CT, USA | Classic C24 | |
| Rocking Shaker | Reliable Scientific، Inc. ، Nesbit ، MS ، الولايات المتحدة الأمريكية | 55 | |
| أطباق بتري | فيشر ساينتفيك ، بيتسبرغ ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 875713 | 100 مم × 15 مم |
| SterilGard III Advance | The Baker Company ، سانفورد ، ME ، الولايات المتحدة الأمريكية | SG403 | |
| قوارير زراعة | الثقافة Corning Incorporated ، Corning ، NY ، الولايات المتحدة الأمريكية | 4995 | PYREX 250 مل قوارير Erlenmeyer |
| مقياس الطيف البصري Genesys 20 | ثيرمو ساينتيف ، والثام ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية. | 4001 | |
| Sony DXC-33 كاميرا فيديو | سوني | ||
| ريتشاردسون اختبار الشريحة | علم المجهر الإلكتروني ، هاتفيلد ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية | 80303 | |
| نظام تنقية المياه Millipore | Direct-Q | ||
| Image-Pro Plus البرمجيات | Media Cybernetics ، MD ، الولايات المتحدة الأمريكية | ||
| Triple Beam Balance | OHAUS Corporation ، Parsippany ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية | ||
| مخالط الأنسجة ، Dounce | VWR | 71000-518 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.