الذوق هو عملية حسية مهمة تسهل الانجذاب إلى المواد المفيدة وتجنب المواد السامة. يصف هذا البروتوكول مقايسة ابتلاع بسيطة لتحديد ذبابة الفاكهة التفضيل الذوقي لمركب كيميائي معين.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يعد الإدراك الشمي والذوقي للبيئة أمرا حيويا لبقاء. التطبيق الأكثر وضوحا لهذه الحواس الكيميائية هو القدرة على التمييز بين مصادر الغذاء الجيدة ومصادر الغذاء التي يحتمل أن تكون خطرة. يتطلب Gustation الاتصال الجسدي بمركب كيميائي قادر على الإشارة من خلال مستقبلات التذوق التي يتم التعبير عنها على سطح الخلايا العصبية. في الحشرات ، يمكن أن تكون هذه الخلايا العصبية الذوقية موجودة في جميع أنحاء جسم مما يسمح للذوق بلعب دور مهم في العديد من السلوكيات المختلفة. تفضل الحشرات عادة المركبات التي تحتوي على السكريات ، بينما يتم تجنب المركبات التي تعتبر ذات مذاق مر. نظرا للأهمية البيولوجية الأساسية للذوق ، هناك اهتمام شديد بفهم الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه الطريقة الحسية. نصف اختبار طعم ذبابة الفاكهة البالغ الذي يعكس تفضيل لمركب تاستانت معين. يمكن تطبيق هذا الاختبار على من أي خلفية وراثية لفحص تفضيل الذوق للمركب القابل للذوبان المطلوب.
المقدمة
الحيوانات تستخدم chemosensation للتمييز الشروط المواتية بصرف النظر عن ظروف الحرمان. هذا التصور يمكن أن تكون حاسمة لأشياء مثل تحديد أفضل المصادر الغذائية، وتجنب المواد السامة أو تحديد أفضل التزاوج شريك 1. وغالبا ما تنقسم Chemosensation إلى عنصرين الحسية: حواس الشم والحواس الذوقية. وهناك سمة مميزة الرئيسية لهذه الحواس هي أن الشم (الرائحة) يستخدم لأخذ عينات من البيئة الكيميائية الغازية المحيطة بينما ذوق حاسة (طعم) يتطلب اتصال جسدي مع الركيزة غير قلق. كلا طرائق الحسية تحفز الاستجابات العصبية التي يتم تجهيزها وفك الشفرة في الدماغ لإنتاج جذابة أو مثير للاشمئزاز السلوك المناسب 2. هذه الحواس هي بالتالي حاسمة لبقاء....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. المجاعة
- إعداد يطير قارورة المجاعة التي تشبع القطن الكرة مع 18.2 MΩ الماء في قاع القارورة الطيران القياسية. بدلا من ذلك، تشبع بالمثل شريط صغير من ورق الترشيح مع 18.2 MΩ المياه ومكان في زاوية داخل القارورة.
- جمع الذباب في مجموعات من ~ 100 الحيوانات على وسادة CO 2 ثم قم بإضافة الذباب إلى قارورة المعدة.
ملاحظة: يتم الحصول على أفضل النتائج مع الحيوانات التي هي أقل من 5 أيام من العمر. ومع ذلك، فإن العمر الدقيق للحيوانات يمكن التحكم كمتغير تجريبي لتحديد التغيرات في تفضيل طعم م....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
وأظهرت بعض النتائج نموذجية من المقايسات تفضيل طعم أدناه. في معظم التجارب سوف ينظر بعض الاختلاف في شدة التلوين البطن (الشكل 1). يعتبر أي التلوين في البطن سواء مكثفة أو ضعيفة على ابتلاع إيجابي. ولذلك فمن المستحسن للباحثين ليسجل الحيوانات في حين الطرف عن حالة تجريبية وذلك للحد من أي تحيز محتملة.
ومن المهم أيضا اختيار تركيز الأصباغ الغ.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وصفناها بروتوكول بسيطة لكنها فعالة لتحديد طعم الأفضلية في ذبابة الفاكهة. وتستخدم إصدارات هذا الفحص بشكل روتيني في التجارب لتحديد مساهمات من المستقبلات الذوقية (الموارد الوراثية) إلى إدراك نوعيات مختلفة (المر والحلو والحامض والمالح، وأومامي) من المركبات الذوق. جينوم ذبابة الفاكهة يحتوي على حوالي 60 الجينات التي تشفر 68 مستقبلات الذوقية التي تم تحديدها عن طريق الربط البديل 8،9. ومع ذلك، كما تم أظهرت البروتينات الأخرى مثل مستقبلات الغلوتامات ionotropic وق.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.
شكر وتقدير
نود أن نشكر أعضاء مختبر Tessier على القراءة النقدية لهذه المخطوطة والاقتراحات المفيدة أثناء إعداد هذا البروتوكول.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| تلوين الطعام الأزرق (ماء ، بروبيلين جلايكول ، FD & C أزرق 1 وأحمر 40 ، بروبيل بارابين) | ماكورميك | N / A | |
| صناديق التبريد / الفريزر بدون فواصل | فيشر | 03-395-455 | |
| دومون # 5 ملقط | أدوات العلوم الدقيقة | 11251-20 | |
| حمض الخليك الجليدي | فيشر | BP2401-500 | |
| Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X مجهر | W. Nuhsbaum، Inc. | 10446294 | |
| طبق بتري (100 مم × 15 مم) | BD Falcon | 351029 | قابلة لإعادة الاستخدام إذا تم غسلها وتجفيفها |
| جيدا Quick-Snap Microtubes | Alkali Scientific Inc. | C3017 | |
| تلوين الطعام الأحمر (ماء ، بروبيلين جلايكول ، FD & سي ريدز 40 و 3 ، بروبيل بارابين) | ماكورميك | N / A | |
| السكروز | IBI | IB37160 |
المراجع
- Herrero, P. Fruit fly behavior in response to chemosensory signals. Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).
- Vosshall, L. B., Stocker, R. F. Molecular architecture of smell and taste in Drosophila. Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).
- Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullane....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
