مقالة منهجية

إعداد العينات MALDI متجانسة للتطبيقات الكمية

8.7K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/54409

⸱

أكتوبر 28, 2016

 ,  ,  ,  ,  , 
1Genomic Research Center, Academia Sinica, 2Department of Chemistry, National Taiwan University, 3Department of Chemical Engineering and Biotechnology, National Taipei University of Technology

في هذه المقالة

ملخص

ويتجلى بروتوكول للحد من التغاير المكانية إشارات أيون في مطياف الكتلة MALDI من خلال تنظيم درجة حرارة الركيزة أثناء عمليات تجفيف العينة.

الملخص

يوضح هذا البروتوكول إعدادا بسيطا للعينة لتقليل عدم التجانس المكاني في الإشارات الأيونية أثناء قياس الطيف الكتلي لامتصاص / التأين بالليزر بمساعدة المصفوفة (MALDI). يعد عدم تجانس الإشارات الأيونية مشكلة خطيرة في MALDI ، مما يؤدي إلى ضعف قابلية استنساخ البيانات ويجعل MALDI غير مناسب للتحليل الكمي. من خلال تنظيم درجة حرارة لوحة العينة أثناء تحضير العينة ، فإن التدفقات الهيدروديناميكية المستحثة حراريا داخل قطرات محلول العينة قادرة على تقليل مشكلة عدم التجانس. تسهل غرفة تحضير العينات في درجة حرارة الغرفة المجهزة بكتلة قاعدة نحاسية منظمة لدرجة الحرارة تحتوي على ألواح عينة MALDI التحكم الدقيق في حالة تجفيف العينة. بعد تجفيف قطرات العينة ، يتم إرجاع درجة حرارة ألواح العينة إلى درجة حرارة الغرفة وإزالتها من الغرفة لإجراء تحليل طيفي الكتلة لاحقا. يتم فحص مناطق العينات باستخدام مطياف الكتلة بالتصوير MALDI للحصول على التوزيع المكاني لجميع المكونات في العينة. بالمقارنة مع طريقة القطرات المجففة التقليدية التي تعد العينات في ظل الظروف المحيطة دون التحكم في درجة الحرارة ، تظهر العينات المحضرة بالطريقة الموضحة هنا توزيعا مكانيا وشدة إشارة أفضل بكثير. وفقا للملاحظات التي تستخدم عينات الكربوهيدرات والببتيد ، فإن تقليل درجة حرارة الركيزة مع الحفاظ على البيئة المحيطة في درجة الحرارة المحيطة أثناء عملية التجفيف يمكن أن يقلل بشكل فعال من عدم تجانس الإشارات الأيونية. هذه الطريقة قابلة للتطبيق بشكل عام على مجموعات مختلفة من العينات والمصفوفات.

المقدمة

قياس الطيف الكتلي (MS) هو أحد أهم التقنيات التحليلية لتحليل التركيبات الجزيئية للعينات المعقدة. من بين جميع طرق التأين المستخدمة في مرض التصلب العصبي المتعدد ، يعد الامتصاص / التأين بالليزر بمساعدة المصفوفة (MALDI) الطريقة الأكثر حساسية واستخداما على نطاق واسع في تطبيقات التحليل الحيوي. 1 بالمقارنة مع تقنيات التأين الأخرى ، تتمتع MALDI بأعلى حساسية وتحمل عال لملوثات الملح. هذه الخصائص التحليلية تجعل MALDI الخيار الأول لتحليل الكربوهيدرات والعديد من تطبيقات البروتينات. ومع ذلك ، يعد إعداد العينة خطوة حاسمة للحصول على بيانات عالية الجودة في MALDI-MS.

الطريقة الأكثر استخداما لتحضير العينات ل MALDI-MS هي طريقة القطرات المجففة ، حيث يتم ترسيب قطرات العينة على سطح وتجفيفها في ظل الظروف المحيطة. طريقة التجفيف هذه بسيطة وفعالة بشكل عام. 2-5 ومع ذلك ، فإن المشكلة الشائعة في طريقة القطرات المجففة هي أن بلورات التحليل / المصفوفة الناتجة توزع عادة بشكل غير منتظم. في كثير من الحالات ، تتجمع البلورات في محيط مناطق العينة ، مما يؤدي إلى ما يسمى بتكوين البقع الحلقية. 6-8 تؤثر الأشكال البلورية غير المتجانسة على التوزيع المكاني للجزيئات التحليلية ، مما يؤدي إلى تذبذب شديد في الإشارة الأيونية على مناطق العينة. تعرف تقلبات الإشارة الشديدة وضعف قابلية استنساخ البيانات باسم مشكلة "البقعة الحلوة" في MALDI-MS. 9 وبالتالي ، هناك حاجة كبيرة للحد من عدم التجانس المكاني في تطبيقات القطرات المجففة MALDI-MS.

تلعب التدفقات الهيدروديناميكية في قطرة العينة دورا مهما في تحديد التوزيع المكاني للعينات المحضرة بطريقة القطرات المجففة. 10-12 وجد أن تبخر المذيب يحفز تدفقات الشعيرات الدموية الخارجية داخل القطرات المسؤولة عن تكوين بقعة الحلقة. 7،10 في المقابل ، قد تؤدي تدفقات إعادة التدوير الناجمة عن تدرجات التوتر السطحي العرضية إلى موازنة التدفقات الشعرية الخارجية. 13 إذا كانت سرعات تدفق إعادة التدوير أعلى من تلك الموجودة في التدفقات الشعرية الخارجية ، فيمكن إعادة توزيع العينات بكفاءة لتقليل مشكلة عدم التجانس. 14

في هذا العمل ، نعرض بروتوكولا مفصلا لإعداد العينات بغرفة تجفيف بسيطة للحث على تدفقات إعادة تدوير فعالة أثناء عمليات تجفيف القطرات. يتم التحكم بدقة في ظروف تجفيف القطرات ، بما في ذلك درجات حرارة لوحة العينة ومحيطها ، والرطوبة النسبية داخل الغرفة. تشمل تحليلات النموذج سلسلة المالتوتريوز والبراديكينين (1-7). المصفوفة المستخدمة في العرض التوضيحي هي 2،4،6-trihydroxyacetophenone (THAP). يتم فحص العينات باستخدام وقت الرحلة (TOF) MS ، ويتم تحليل البيانات كميا لإظهار انخفاض عدم التجانس.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ملاحظة: تم تطوير هذا البروتوكول للحد من عدم التجانس المكاني للمالتوتريوز والبراديكينين جزء (1-7) التي أعدت مع أسلوب المجفف قطرة. يتكون البروتوكول من ثلاث خطوات رئيسية، بما في ذلك إعداد وشروط مسبقة، عينة ترسب والتجفيف، وتحليل البيانات مطياف الكتلة. وترد الإجراءات وصفها في مزيد من التفاصيل أدناه:

1. إعداد وشروط مسبقة

  1. تنظيف لوحة عينة
    1. ارتداء قفازات النتريل وغسل اليدين لوحة عينة بلطف مع المنظفات والمقطر، منزوع الأيونات الماء (أحواض دبي الجافة العالمية).
    2. شطف لوحة عينة مع الميثانول (MeOH) وأحواض دبي الجافة العالمية.
    3. إدراج لوحة عينة في مل دورق 600 وملء مع أحواض دبي الجافة العالمية.
    4. يصوتن لوحة عينة في أحواض دبي الجافة العالمية لمدة 15 دقيقة في حمام بالموجات فوق الصوتية (200 واط، 40 كيلو هرتز).
    5. إزالة أحواض دبي الجافة العالمية من الدورق وملء الكأس مع MeOH.
    6. يصوتن لوحة عينة في MeOH لمدة 15 دقيقة في حمام بالموجات فوق الصوتية (200 واط، 40 كيلو هرتز).
    7. ينفخون قطرات المذيبات على لوحة مع غاز النيتروجين والحفاظ على لوحة عينة جافة قبل عينة الترسيب.
  2. تنظم غرفة التجفيف درجة الحرارة
    ملاحظة: إن غرفة التجفيف هو 35 × 20 × 45 سم 3 (العرض × العمق × الارتفاع) غرفة الاكريليك ويبين الشكل 1 صورة من هذا النظام التجفيف. يتم إزالة الغرفة مع غاز النيتروجين درجة حرارة الغرفة من خلال مقياس الجريان الغاز بمعدل تدفق مستمر للحفاظ على انخفاض النسبية الرطوبة حالة رصدها من قبل الرطوبة معايرة مثبتة داخل غرفة التجفيف. ويستخدم كتلة قاعدة من النحاس في غرفة التجفيف مجهزة ثابت دائري درجة حرارة الماء مبرمجة لاستيعاب لوحات عينة الفولاذ المقاوم للصدأ. كتلة قاعدة النحاس قادرة على تنظيم درجة حرارة لوحة عينة 5-25 درجة مئوية. ويتم رصد درجات الحرارة من الهواء، كتلة قاعدة من النحاس، ولوحة عينة من K- نوع المزدوجات الحرارية.
    1. فتح الباب ووضع بسرعة لوحة العينة على النحاسكتلة قاعدة ثم أغلق الباب.
    2. ضبط يدويا الجريان الغاز لضبط معدل تدفق النيتروجين إلى 10 قدم مكعب في الساعة (SCFH).
    3. مراقبة الرطوبة النسبية في غرفة التجفيف من قبل الرطوبة وتهذيب الجريان الغاز لضمان الرطوبة النسبية هي دائما أقل من 25٪.
    4. رصد درجات الحرارة من لوحة عينة من K- نوع المزدوجات الحرارية وضبط درجة الحرارة شكل دائري المياه يدويا حتى تصل لوحة عينة 5 درجة مئوية لمدة التجربة أو درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) من أجل السيطرة.
      ملاحظة: من أجل تحقيق الاستقرار في لوحة العينة عند درجة حرارة تصميم، وعادة ما ضبط درجة الحرارة شكل دائري المياه 0-5 درجة مئوية أقل من عينة تصميم. على سبيل المثال، للحفاظ على 5 درجات مئوية في لوحة عينة، وتحديد درجة الحرارة في شكل دائري المياه في حدود 0-2 درجة مئوية. للحفاظ على لوحة العينة في درجة حرارة 25 درجة مئوية، وتحديد درجة الحرارة في شكل دائري المياه في حدود 23 إلى 25 درجة مئوية.
    5. ضمان وصلت درجات الحرارة المطلوبة والرطوبة النسبية (الجدول 1) قبل عينة الترسيب.
      ملاحظة: يتم عرض جميع المعلمات وكذلك القيم محيطهم لعمليات التجفيف مع مختلف درجات الحرارة عينة لوحة في الجدول 1.
      ملاحظة: في انخفاض درجة حرارة العينة لوحة، قد يحدث تكثف الماء على لوحة عينة إذا كان باب الغرفة مفتوحا لفترة طويلة. في حالة حدوث تكاثف المياه، ويغلق الباب ولا إيداع أي عينة على ذلك حتى يتم تجفيفها تكاثف المياه.
  3. إعداد مصفوفة وتحليلها حلول
    1. إعداد مصفوفة حلول
      1. إعداد 0.1 حل M ثاب مع 50٪ الأسيتونتريل (إيه سي): 50٪ أحواض دبي الجافة العالمية محلول مائي.
    2. إعداد التحاليل
      1. إعداد 10 -4 M حل مالتوتريوز مع أحواض دبي الجافة العالمية.
      2. إعداد 10 -5 M البراديكينين جزء (1-7) حل في 50٪ الأسيتونتريل(إيه سي): 50٪ أحواض دبي الجافة العالمية محلول مائي.

2. ترسب العينة والتجفيف

  1. بريمكس 0.25 ميكرولتر من 0.1 M حل ثاب و 0.25 ميكرولتر من 10 -4 M مالتوتريوز أو 10 حلول في أنبوب microcentrifuge -5 M البراديكينين جزء (1-7).
  2. دوامة حل مختلط لمدة 3 ثانية.
  3. أجهزة الطرد المركزي في حل مختلط لمدة 2 ثانية (2000 x ج) لجمع الحل في الجزء السفلي من أنبوب الطرد المركزي.
  4. فتح باب غرفة التجفيف، بعناية إيداع 0.1 ميكرولتر من الحل على طبق من ذهب العينة مع ماصة وإغلاق الباب على الفور.
  5. انتظر الحبرية عينة لتجف.
    . ملاحظة: تجفيف مرات عادة لاحظت مع مختلف درجات الحرارة عينة لوحة مدرجة في الجدول (1) لدرجة حرارة العينة لوحة من 5 درجات مئوية، ومتوسط وقت التجفيف هو 800 إلى 1000 ثانية؛ لدرجة حرارة العينة لوحة من 25 درجة مئوية، ومتوسط ​​وقت التجفيف هو 100-150 قالمفوضية الأوروبية.
  6. بعد التجفيف، وفتح باب غرفة التجفيف.
  7. ضبط درجة الحرارة شكل دائري المياه إلى درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية).
    ملاحظة: تخطي هذه الخطوة إذا بقيت لوحة عينة باستمرار في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) أثناء عملية التجفيف.
  8. بعد العينة تعود درجة الحرارة لوحة لدرجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية)، وإزالة لوحة عينة من غرفة التجفيف.
  9. دراسة مورفولوجية العينة تحت مجهر تشريحي 5X وأخذ لقطة صورة مشرق الميدان.
    ملاحظة: إذا لم يكن يتوقع مثل الأشكال التضاريسية وضوح الشمس، فمن الضروري إعداد نموذج جديد مع نفس الإجراء. وتظهر الأشكال التضاريسية الكريستال نموذجية في لوحات العلوي من الشكل 2.
    ملاحظة: في الحالات مع انخفاض درجات الحرارة لوحة عينة، مثل 5 درجات مئوية، فمن المهم أن الاحماء لوحة العينة إلى درجة حرارة الغرفة قبل إخراجها من غرفة التجفيف. عند إيداع العينات، لا تبقي لمحلول خلطن في غيض من ماصة أكثر من 10 ثانية. لا تستخدم الحل خلط مرة أخرى بعد إيداع العينات. لوحات العليا من الشكل 2 تظهر الصور مشرق الميدان من عينات أعدت مع مختلف درجات الحرارة عينة لوحة.

تحليل 3. الطيف الكتلي البيانات

  1. الطيف الكتلي الحصول على البيانات
    ملاحظة: بعد التحضير، ويمكن تحليل العينة باستخدام مطياف التصوير كتلة. في الدراسة الحالية، وتجرى التجارب MS التصوير باستخدام مزامنة TOF ثنائي القطبية المدمج مختبر (DP-TOF) مطياف التصوير كتلة 15 التجاري MALDI-TOF الطيف كتلة مع القدرة على التصوير أيضا مناسبة لمثل هذه التجارب. ويتم تشغيل مطياف الكتلة في استخراج الخطي وسائط أيون إيجابية مع تأخير استخراج الأمثل. الطاقة الحركية للأيونات 20 كيلو فولت. حجم شعاع الليزر هو 35 ميكرون في القطر على سطح العينة، وطيف من كل بقعة هو افيالغضب من 5 طلقات الليزر.
    1. إدراج لوحة عينة في مطياف الكتلة MALDI.
    2. أداء التصوير تحليل الطيف الكتلي للعينة أعد الخطوات 2،1-2،9.
    3. حدد ذروة كتلة مميزة من قائمة الكتلة هو مبين في إطار النتيجة وانقر على "2D" إلى رسم صورة أيون ثنائي الأبعاد.
      ملاحظة: للحصول على مالتوتريوز مختلطة مع ثاب، وsodiated القمم مميزة مالتوتريوز، ثاب البروتونية، وsodiated ثاب. لجزء البراديكينين (1-7) مختلطة مع ثاب، وتشمل القمم مميزة البروتونية جزء البراديكينين (1-7)، البروتونية ثاب، وsodiated ثاب.
    4. انقر على أزرار التعديل في نافذة منبثقة لتحديد الحدود العليا والدنيا لشدة الإشارة والنقر على "حفظ الصورة". ويحدد هذا الإعداد على النقيض من الصور أيون.
      ملاحظة: في كل مجموعة من الأفراد من البيانات، يتم استبعاد المناطق متصدع وبقع فارغة تظهر سطوع منخفض.
    5. مراقبة ومقارنة أيونصورة مع صورة مشرق الميدان الذي اتخذ في خطوة 2.9.
      ملاحظة: التصوير قياس الطيف الكتلي وبناء الصور من أيونات معينة يمكن أن يتحقق مع الأوراق التجارية. ويرجع ذلك إلى مجموعة متنوعة من الحصول على البيانات وبرامج التحليل، يجب على المستخدمين متابعة تعليمات البرامج المقدمة من قبل بائع أداة للحصول على صور ذات جودة عالية.
  2. تحليل البيانات
    ملاحظة: يتم تحليل التباين العينات كميا. في هذه المظاهرة، وينقسم كل عينة إلى مناطق مركزية متعددة من قبل البرامج المطورة داخليا لتحليل التوزيع المكاني للأيونات. كما يمكن إجراء التحليل باستخدام برنامج تحليل بيانات قائمة بذاتها.
    1. انقر على بقع فارغة والمناطق تصدع في الصورة أيون هو مبين في إطار النتيجة لإزالة المناطق غير مهم.
      ملاحظة: يعرف هذا الإجراء المنطقة الأساسية للصورة أيون.
    2. انقر على "تجد حافة" الزر للعثور على طبقة قصوى للصورة أيون.
    3. انقر على "خصم" لحفظ المعلومات أيون فرة من طبقة قصوى في قاعدة بيانات وإزالة هذه الطبقة من الصورة أيون في وقت واحد. وهناك خانة الاختيار تمثل هذه الطبقة قصوى تظهر في قائمة "بيانات الناتج" من النافذة نتيجة.
    4. كرر الخطوات من 3.2.2 و 3.2.3 حتى يتم تعريف مركز الصورة أيون.
    5. انقر وتحديد كافة خانات الاختيار في قائمة "بيانات الناتج" وفوق "تصدير" لتصدير البيانات.
    6. فتح البيانات التي تم تصديرها باستخدام برنامج جداول البيانات لحساب متوسط ​​وفرة ايون من كل طبقة للحصول على معلومات التوزيع المكاني للأيونات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

وتظهر الصور مشرق الميدان وكذلك الصور MS من مالتوتريوز والبراديكينين جزء (1-7) التي أعدت مع درجة حرارة العينة لوحة من 5 و 25 درجة مئوية في الشكل 1. وفي حالة مالتوتريوز sodiated، في إشارة أيون أساسا بملء في محيط منطقة العينة عند إعدادها مع درجة حرارة العينة لوحة من 25 درجة مئوية. عن طريق خفض درجة حرارة العينة لوحة إلى 5 درجة مئوية، وإشارة بملء بتجانس فوق منطقة العينة بأكملها. الجانب السلبي الوحيد الملحوظ عند إعداد العينات تحت 5...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

استنادا إلى التنبؤات النظرية السابقة، يمكن أن تدفقات الهيدروديناميكية التي يسببها درجة الحرارة داخل قطرات التغلب الخارج التدفقات الشعرية الناجمة عن تبخر المذيبات. ومما يعزز كفاءة هذا التعميم الداخلي للجزيئات عندما التدرجات درجة الحرارة في زيادة قطرة. ووفقا للنتائج المتوقعة، عندما الحفاظ على درجة حرارة العينة لوحة تحت 5 درجات مئوية مع المحافظة على المناطق المحيطة بها في درجة حرارة الغرفة، ومتوسط ​​سرعة التدفقات إعادة تدوير داخل قطرة حوالي 4 مرات أسرع من التدفقات الشعرية الخارج. إذا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون عدم وجود مصلحة مالية متنافسة.

شكر وتقدير

هذا العمل مدعوم من قبل مركز أبحاث الجينوم ، أكاديميا سينيكا ووزارة العلوم والتكنولوجيا في تايوان ، جمهورية الصين (العقد رقم 104-2119-M-001-014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مسحوق منظف <قوي > كاشف < / قوي >
الكونوكس242985
الميثانولميرك106009
أسيتونيتريلميرك100003
2،4،6-ثلاثي هيدروكسي أسيتوفينون (THAP)سيجما ألدريتشT64602   ؛
جزء براديكينين (1-7)Sigma-AldrichB1651
MaltotrioseSigma-Aldrich47884
نصائح ماصةMettler Toledo17005091
أنبوب الطرد المركزيالدقيق AxygenMCT-150-C
Equipment< / strong>
Milli-Q تنقية المياه نظامMilliporeZMQS6VFT1
قفازات النتريل الخاليةالمسحوق MicroflexSU-690
600 مل دورقDuran2110648
منظف بالموجات فوق الصوتيةDeltaDC300H
مقياس الرطوبةWisewind5330
تدفق غاز النيتروجينDwyerRMA-6-SSV
K-type المزدوجات الحراريةDigitron311-1670
أجهزة الطرد المركزيSelect BioProductsForce Mini & nbsp ؛
ماصةRaininpipet-lite XLS
مجهر مجسمأوليمبوسSZX16
غرفة تجفيف يمكن التحكم في درجة حرارتهاهذا المختبر
مطياف كتلة التصوير المزدوج القطبية المتزامن (DP-TOF IMS)هذا المختبر
عينة من الفولاذ المقاوم للصدأ MALDI-TOF تستهدفهذا المختبر هذا المختبر
من مقياس

المراجع

  1. Karas, M., Hillenkamp, F. Laser Desorption Ionization of Proteins with Molecular Masses Exceeding 10000 Daltons. Anal. Chem. 60, 2299-2301 (1988).
  2. Beavis, R. C., Chait, B. T. Velocity Distributions of Intact High Mass Polypeptide Molecule Ions Produced by Matrix Assisted Laser Desorption. Chem. Phys. Lett. 181, 479-484 (1991).
  3. Beavis, R. C., Chaudhary, T., Chait, B. T. Alpha-Cyano-4-Hydroxycinnamic Acid as a Matrix for Matrix-Assisted Laser Desorption Mass-Spectrometry. Org. Mass Spectrom. 27, 156-158 (1992).
  4. Ehring, H., Karas, M., Hillenkamp, F. Role of Photoionization and Photochemistry in Ionization Processes of Organic-Molecules and Relevance for Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Mass-Spectrometry. Org. Mass Spectrom. 27, 472-480 (1992).
  5. Strupat, K., Karas, M., Hillenkamp, F. 2,5-Dihydroxybenzoic Acid - a New Matrix for Laser Desorption Ionization Mass-Spectrometry. Int. J. Mass Spectrom. Ion Process. 111, 89-102 (1991).
  6. Hu, H., Larson, R. G. Evaporation of a Sessile Droplet on a Substrate. J. Phys. Chem. B. 106, 1334-1344 (2002).
  7. Deegan, R. D., et al. Capillary Flow as the Cause of Ring Stains from Dried Liquid Drops. Nature. 389, 827-829 (1997).
  8. Hu, J. -B., Chen, Y. -C., Urban, P. L. Coffee-Ring Effects in Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry. Anal. Chim. Acta. 766, 77-82 (2013).
  9. Schwartz, S. A., Reyzer, M. L., Caprioli, R. M. Direct Tissue Analysis Using Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry: Practical Aspects of Sample Preparation. J. Mass Spectrom. 38, 699-708 (2003).
  10. Hu, H., Larson, R. G. Marangoni Effect Reverses Coffee-Ring Depositions. J. Phys. Chem. B. 110, 7090-7094 (2006).
  11. Bhardwaj, R., Fang, X., Attinger, D. Pattern Formation During the Evaporation of a Colloidal Nanoliter Drop: A Numerical and Experimental Study. New J. Phys. 11, 075020(2009).
  12. Savino, R., Paterna, D., Favaloro, N. Buoyancy and Marangoni Effects in an Evaporating Drop. J Thermophys Heat Tr. 16, 562-574 (2002).
  13. Probstein, R. F. Surface Tension. in Physicochemical Hydrodynamics : An Introduction. , John Wiley & Sons. Ch. 10 305-361 (1994).
  14. Lai, Y. -H., et al. Reducing Spatial Heterogeneity of MALDI Samples with Marangoni Flows During Sample Preparation. J. Am. Soc. Mass Spectrom. 27, 1314-1321 (2016).
  15. Hsiao, C. -H., et al. Comprehensive Molecular Imaging of Photolabile Surface Samples with Synchronized Dual-Polarity Time-of-Flight Mass Spectrometry. Rapid Commun. Mass Spectrom. 25, 834-842 (2011).
  16. Vorm, O., Roepstorff, P., Mann, M. Improved Resolution and Very High-Sensitivity in MALDI TOF of Matrix Surfaces Made by Fast Evaporation. Anal. Chem. 66, 3281-3287 (1994).
  17. Gabriel, S. J., Schwarzinger, C., Schwarzinger, B., Panne, U., Weidner, S. M. Matrix Segregation as the Major Cause for Sample Inhomogeneity in MALDI Dried Droplet Spots. J. Am. Soc. Mass Spectrom. 25, 1356-1363 (2014).
  18. Mampallil, D., Eral, H. B., van den Ende, D., Mugele, F. Control of Evaporating Complex Fluids through Electrowetting. Soft Matter. 8, 10614-10617 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

MALDI MALDI

مقالات ذات صلة