مقالة منهجية

الآلية الروبوتية الاستغناء عن تقنية لتوجيه السطحية وBioprinting من الخلايا

DOI:

10.3791/54604

⸱

نوفمبر 18, 2016

 ,  ,  , 
1School of Materials Science and Engineering, Nanyang Technological University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف هذا البروتوكول منهجية الطباعة الحيوية باستخدام نظام إيداع آلي آلي يشتمل على إشارات التوجيه الطبوغرافية المحفورة مع الترسيب الدقيق للحبر الحيوي الهيدروجيل الذي يحمل الخلية. يتم تسليم الخلايا المطبوعة مباشرة إلى الميزات المحفورة وتكون قادرة على الإحساس بها والتوجيه معها.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توضح هذه المخطوطة إدخال ميزات التوجيه خلية تليها التسليم المباشر للخلايا إلى هذه الميزات في bioink هيدروجيل باستخدام نظام صرف الآلي الآلي. تم اختيار bioink خاص لأنها تتيح الخلايا الرواسب نحو والشعور الميزات. نظام صرف bioprints خلايا قابلة للحياة في bioinks هيدروجيل باستخدام احداهما بمساعدة رأس الطباعة. ومع ذلك، من خلال استبدال رأس الطباعة مع قلم شحذ أو مشرط، ونظام صرف يمكن أيضا أن تستخدم لخلق العظة الطبوغرافية من خلال النقش السطح. حركة القلم يمكن برمجتها في الخطوات من 10 ميكرون في X، Y والاتجاهات Z. كانت قادرة على توجيه الخلايا الجذعية الوسيطة، التأثير عليهم لاعتماد الصرف ممدود في محاذاة مع اتجاه أخاديد "أخاديد نمط. ويمكن تصميم الزخرفة باستخدام البرمجيات بالتآمر في خطوط مستقيمة، دوائر متحدة المركز، وموجات جيبية. في إجراء لاحق، الليفيتوقفت الانفجارات والخلايا الجذعية الوسيطة في 2٪ الجيلاتين bioink، لbioprinting في احداهما مدفوعة قذف رأس الطباعة. ثم طباعة bioink تحمل الخلية باستخدام نفس الإحداثيات المبرمجة المستخدمة في الحفر. كانت قادرة على الإحساس والتفاعل مع الميزات محفورا كما يتضح من التوجه ممدود على طول اتجاه الأخاديد محفورا الخلايا bioprinted.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الزخرفة متعمدة من وضع الخلية تتيح تشكيل الثقافات التي تحاكي في الجسم الحي منظمة الخلوية 1. في الواقع، والبحث في التفاعل بين أنواع الخلايا متعددة يمكن أن يحصل على مساعدة تنظيم 2،3 وضع المكاني. معظم أنظمة الزخرفة تعتمد على إجراءات تعديل السطح لتعزيز أو منع التصاق الخلية مع خلية لاحقة ترسب السلبي. تقدم Bioprinting السيطرة المكانية والزمنية على توزيعات خلية 1. وبالإضافة إلى هذه الوظائف، وقد وصفت bioprinting باعتبارها وسيلة واضحة من الناحية الفنية وسريع وفعالة من حيث التكلفة لتوليد السقالات معقدة هندسيا 4. فإنه يستخدم تصميم البرمجيات الكمبيوتر ويسمح إدخال الخلايا في عملية التصنيع (4).

وقد نظم Bioprinting تصنيفها على أساس مبادئ عملها وفقا ليزر مقرها، على أساس النافثة للحبر أو قذف على أساس 4. وقد وصفت قذف bioprinting كما الواعدة لأنها تتيح للتصنيع التركيبات المنظمة من الأحجام ذات الصلة سريريا ضمن إطار زمني واقعي 4-6. يتم تنفيذ ذلك إما عن طريق الضغط الميكانيكي أو الخلفي قذف بمساعدة من تأثير الخلايا هيدروجيل bioink. في الطريقة المعروضة هنا، كان يعمل الضغط مرة أخرى. كما ذكرنا، يتم تسليم الخلايا في bioink cytocompatible. هذا bioink ينبغي أن تدعم إيصال الخلايا دون إنتاج إجهاد القص ضار، وتكون ذات اللزوجة الكافية للاحتفاظ سلامة التتبع المطبوعة، دون أن تنهار أو نشر (المشار إليها باسم "نزف الحبر") 7-10.

ومن المعروف أن تفاعل الخلايا مع سطحها ملتصقة في التأثير على سلوك الخلوية. تضاريس السطح يمكن التحكم في شكل الخلية، والتوجه 11، وحتى في النمط الظاهري. على وجه الخصوص، وقد ثبت تلفيق الأخاديد والقنوات للحثامتدت، مورفولوجيا ممدود على أنواع خلايا متعددة. تم العثور على اعتماد هذا التشكل للتأثير على النمط الظاهري للخلايا متعدد القدرات والمحفزة. على سبيل المثال، عندما الانحياز في الأخاديد، والخلايا الجذعية الوسيطة (MSC) تظهر أدلة على التمايز نحو العضلية 12،13 وخلايا العضلات الملساء الوعائية اعتماد النمط الظاهري مقلص خلال الاصطناعية 10،14-17.

الخلية التوفيق بين القنوات أو الأخاديد يمكن أن تتولد على سطح البوليمر عبر عدد من الطرق، على سبيل المثال، عميق الحفر أيون رد الفعل، شعاع الالكترون الطباعة الحجرية، والطباعة بالليزر مباشرة، ليزر الفيمتو ثانية، ضوئيه والبلازما الحفر الجاف 18. هذه الطرق غالبا ما تستغرق وقتا طويلا، وتتطلب أجهزة معقدة، ويمكن أن يكون مقيدا في شكل نمط إنشاؤها. وبالإضافة إلى ذلك، فإنها لا مزامنة الزخرفة مع bioprinting وعدم السماح لcellularization فوري. مراقبة حركة coordinately لالآلينظام الاستغناء يمكن اتباع أنماط معقدة لترسب الحلول. نحن هنا لشرح كيف يمكن أن تستغل الحركة التي تسيطر عليها الميكروسكيل إلى خلق قنوات لتوجيه الخلية. ومرفق القلم شحذ أو مشرط لرأس الطباعة في مكان الحقنة قذف، ويمكن أن المعدات ثم احفر سطح البوليمر بتوجيه من البرنامج التآمر. يوفر طريقة براعة في تصميم نمط وينطبق على المواد البوليمرية التي يشيع استخدامها في الهندسة الحيوية مثل البوليسترين، PTFE، وpolycaprolactone. وكخطوة لاحقة لالنقش، وخلايا يمكن bioprinted مباشرة إلى الأخاديد خدش. كان bioink الجيلاتين المستخدمة هنا قادرة على حد سواء الحفاظ على التتبع وتسمح للخلايا المودعة ليشعر ملامح محفورا. وقد أظهرت الخلايا الجذعية الوسيطة bioprinted إلى أخاديد محفورة إلى استطال على طول لهم في خطوط متميزة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ملاحظة: يصف هذا البروتوكول استخدام الخلفي الضغط بمساعدة نظام صرف الآلي (الشكل 1A) باعتباره الحفر السطحية (الشكل 1B) وbioprinter القائم البثق (الشكل 1C) 10.

1. تعديل سطح البوليستيرين

  1. استخدام ورقة 1 مم البوليسترين منذ زراعة الأنسجة لوحات البوليسترين تميل إلى الرضوخ صعودا في الوسط، تخريب الاتساق ارتفاع كل من الحفر والطباعة.
    ملاحظة: كما لم يتم تعديل ورقة من البوليستيرين للالتصاق الخلايا، يتم إجراء العلاج البلازما.
  2. الأكسجين العلاج البلازما.
    1. أولا، حدد ضغط 2 بار على منظم للاسطوانة أكسجين مرتبطة إلى الجهاز البلازما. ثم تبديل آلة البلازما على وإدخال الشروط التالية في لوحة التحكم للجهاز: 150 W، 30 SSCM من الأكسجين، و 10 دقيقة (من أجل السلطة، وتدفق الغاز والوقت على التوالي).
    2. وضع substrat البوليسترينالبريد الى غرفة البلازما، وختم الباب واضغط على زر البداية على لوحة التحكم. نقع الأكسجين البلازما البوليسترين تعامل الركيزة في المصل البقري الجنين واحتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 2 ساعة قبل غسل ثلاث مرات 1X الفوسفات مخزنة المالحة (PBS).

2. أنماط البرمجة طباعة

  1. استخدام البرنامج لأول حفر السطح مع قلم أو المبضع.
    1. عند استخدام القلم، اضافة الى وجود إبرة النسيج 1.5 مم (من الداخل بعناية كبيرة) في فوهة حقنة صرف (5 أو 10 مل) حتى يصبح مثبتة والمضمون. في حالة استخدام مشرط، واختيار مشرط التعامل جولة بحيث يمكن تثبيتها في آلية المشبك الذراع الطباعة.
      ملاحظة: القلم يحفر أنماط منحني أفضل من شفرة المشرط.
    2. عندما تحاول أولا إلى وضع ترتيب bioprinted، رسم نمط المطلوب على ورقة الرسم البياني مع محاور مرقمة لتوليد تنسيق XY. ثم اناnput إحداثيات محفورا نمط / bioprinted في برنامج جداول البيانات (الشكل 2).
      ملاحظة: "النمط المطلوب" يمكن أن يكون في العديد من الأشكال مثل خطي، S الشكل، أو التعميم. ويتوقف الاختيار على النموذج التجريبي المطلوبة، مثل خطوط خطية متوازية للتمايز اللجان الدائمة لالعضلية كما هو موضح هنا. وتسمح وظيفة مبعثر الرسم البياني التصور للنمط مؤامرة المقترحة.
    3. فتح طباعة / الاستغناء عن البرنامج. حدد "البرنامج> إضافة برنامج" تليها "تحرير> إضافة نقطة" لإعداد البرنامج. تصدير x و y تنسيق القيم التي تم الحصول عليها من جدول البيانات إلى الطباعة / توزيع البرامج باستخدام "نسخ ولصق" وظيفة.
    4. معايرة "ض" ارتفاع الروبوت قبل كل المدى من أجل وضع فوهة القلم / طباعة على السطح.
      1. في المطبوعة / الاستغناء عن البرنامج، حدد الخيار "روبوت"، انقر على "تغيير الوضع و# 34؛ وتمكين خيار "الوضع التعليمي". وبمجرد اختيار، فإن هذه البرمجيات تتيح وظيفة "هرول" للروبوت.
      2. لهرول، أولا تهيئة الروبوت إلى موقعه الافتراضي عن طريق تحديد الأوامر التالية من شريط القوائم. "روبوت> ميكا تهيئة"، ثم حدد "روبوت> هرول". إدخال القيم العددية (مم) في "فتحات X و Y" اللازمة لوضع القلم بالضبط على أصل النموذج.
      3. بعد ذلك، إدخال قيمة عددية (مم) في "فتحة Z" لوضع القلم أو فوهة الطباعة في اتصال مع السطح ولكن لا المرن أو البادئة السطح. يتم تعيين هذه النقطة "Z" قيمة البداية.
        ملاحظة: عمق كل أخدود يمكن أن تختلف بسهولة باستخدام Z-ارتفاع النظام. وقد أثبت الأخاديد من 40، 80، و 170 ميكرون لقطع في سطح 1 مم صحائف البوليسترين سميكة (الشكل 4 والجدول 1).
    5. حدد عتعليمات rint لكل من تنسيق نقطة، أي "بداية الخط الاستغناء" لتحديد النقطة الأولى وبدء الطباعة، "الخط يمر" للدلالة على نقاط وسيطة و "نهاية الخط الاستغناء" للإشارة إلى الروبوت لإنهاء الطابعة قيد التشغيل.
    6. التواصل برنامج لالروبوت عن طريق تحديد الأوامر متابعة من شريط القائمة العلوية: "روبوت> إرسال C & T البيانات".
    7. بدء تشغيل / طباعة الحفر، عن طريق تغيير الروبوت إلى وضع "تشغيل". هل هذا عن طريق اختيار "روبوت> تغيير الوضع> تبديل وضع تشغيل" من شريط القائمة العلوية.
    8. بدء إجراء الطباعة عن طريق الضغط على زر "البدء" الأخضر على وحدة الروبوت موزع.

3. إعداد وطباعة الجيلاتين Bioink التي تحتوي على خلية

  1. حل 2٪ الجيلاتين في الحد الأدنى الضروري المتوسطة ألفا المتوسطة (αMEM) (تستكمل مع FBS 10٪ و 2٪ مضاد حيوي / antimycotجيم) عند 60 درجة مئوية لمدة 2 ساعة لإعداد الحلول bioink.
  2. قبل ثقافة البروتين الأحمر نيون معربا عن الخلايا الجذعية الوسيطة (RFP-اللجان الدائمة) إلى 70٪ التقاء في أطباق زراعة الأنسجة 10 سم باستخدام αMEM / 10٪ FBS. الافراج عن خلايا تعلق في تعليق عن طريق إزالة المتوسطة وطلاء مع 1X حل التربسين-EDTA لمدة 5 دقائق عند 37 درجة مئوية.
  3. بيليه الخلايا بواسطة الطرد المركزي في 1000 x ج لمدة 5 دقائق وإزالة طاف. resuspend الكرية خلية في 0.5 مل من برنامج تلفزيوني 1X والاعتماد على كثافة الخلايا باستخدام عدادة الكريات.
  4. بعد السماح للbioink ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة، وتخلط بلطف في حجم كاف لتعليق طلب تقديم العروض-اللجان الدائمة في bioink لتحقيق تركيز النهائي من 5 × 10 6 خلايا مل -1.
  5. صب bioink تحمل الخلية إلى حقنة الطباعة مع فوهة مختومة. هدئ حقنة تحميلها إلى 4 درجات مئوية وذلك لتحقيق اللزوجة للطباعة.
  6. وضع حقنة تحميلها على المؤتمتةنظام صرف الآلي وإرفاق خطوط الضغط الجوي. إزالة محقنة لور ختم وإرفاق فوهة الطباعة.
  7. بثق bioinks cellularized إلى خطوط رقيقة باستخدام 0.05 ميجا باسكال الضغط مرة أخرى، في 5 ملم / ثانية سرعة الكتابة من حقنة 10 مل عبر 27 إبرة G / فوهة (مدبب أوصى خلال أسطواني) على سطح فيلم البوليسترين، بعد ترسب مبرمجة مسبقا النمط هو موضح في الخطوة 2.1 لوضع bioink cellularized على الأخاديد قبل محفورا.
  8. بعد مرور فترة الحضانة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة، إضافة 10 مل وسائط النمو (تستكمل مع 10٪ FBS والمضادات الحيوية)، واحتضان الخلايا لمدة 24 ساعة (للسماح للخلايا ليشعر ويتفاعل مع الميزات محفورا) قبل عرض باستخدام مجهر مضان مقلوب في 10X التكبير.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توضح نتائج ممثل أن احداهما بمساعدة نظام صرف الآلي يمكن أن تستخدم بمثابة bioprinter القائم على قذف لأداء كل من الحفر على سطح والطباعة bioink (الشكل 1). ويمكن استخدامه لتوليد أخاديد محفورة في سطح البوليمر، وبعد ذلك طباعة bioink تحمل الخلية مباشرة إلى ميزات (الشكل 1 B و C).

يتم تحديد كل من الحفر والطباعة من قبل الإحدا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في خطوة حاسمة من هذا الإجراء هو التسليم bioprinting الفعلي للخلايا الجذعية بأنها عملية يجب أن تسمح الترسيب الخلية إلى الميزات، طباعة بدون تنتشر bioink / النزيف، وتقديم الخلايا دون القص موت الخلايا التوتر ولا يؤدي التمايز نحو النسب غير المرغوب فيها.

إذا فشلت المحاذاة خلية من المتوقع أن يحدث، ثم اللزوجة bioink ينبغي تقييم لمدى ملاءمتها للطباعة. من المهم أن bioink يسمح للخلايا الرواسب على سطح البوليمر نمط. تركيز الب...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصلحة مالية متنافسة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

العمل المقدم هنا مدعوم من قبل مؤسسة سنغافورة الوطنية للبحوث في إطار برنامج CREATE (NRF-Technion): مبادرة الطب التجديدي في برنامج أبحاث علاج استعادة القلب وتمويل القطاع العام (PSF) 2012 من مجلس أبحاث العلوم والهندسة (SERC) تحت إشراف وكالة العلوم والتكنولوجيا والبحوث (A * STAR).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
<قوي > معدات < / قوي >
نظام الاستغناء الآليJanome2300N
آلة البلازمافيمتو ساينسكوفانس
USB مجهر
بصريأوليمبوسIX71
<قوي>الاسم < / قوي ><قوي> الشركة< / strong> رقم الكتالوج< / strong>تعليقات< / strong>
Software< / strong>
SpreadsheetExcel
برنامج تنسيق الطباعةJanomeJR C-Points
ImagingSoftware المعاهد الوطنية للصحة (NIH)ImageJ
<قوي>الاسم<قوي>الشركة رقم الكتالوجتعليقات
Equipment
Stylus (Blade)OLFAAK-5
5 مل حقنةطباعة San-ei TechSH10LL-B
30 G إبرة الطباعةSan-ei TechSH30-0.25-B
1 مم صفائحتم شراؤها محليا
مصل الأبقار الجنينInvitrogen   ؛10270-098
محلول ملحي مخزن بالفوسفاتInvitrogen
الجيلاتين من جلد الخنازير ، قوة الجل 300 ، النوع ASigma Aldrich9000-70-8
& alpha ؛ MEMInvitrogen41061-029
مضادات حيوية مضادة للفطرياتSigma AldrichA5955-100ML
الخلايا الجذعية الوسيطة بالبروتين الفلوري الأحمر (RFP-MSCs)Cyagen Biosciences IncorporationRASMX-01201
البوليسترين

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ma, Z., et al. Cell and Organ Printing. Ringeisen , R. B., Spargo, J. B., Wu, K. P. , Springer. Netherlands. 137-159 (2010).
  2. Kaji, H., Camci-Unal, G., Langer, R., Khademhosseini, A. Engineering systems for the generation of patterned co-cultures for controlling cell-cell interactions. Biochim Biophys Acta. 1810 (3), 239-250 (2011).
  3. Goubko, C. A., Cao, X. Patterning multiple cell types in co-cultures: A review. Materials Science and Engineering: C. 29 (6), 1855-1868 (2009).
  4. Pati, F., Jang, J., Lee, J. W., Cho, D. W. Essentials of 3D Biofabrication and Translation. Yoo, J. J. , Academic Press. 123-152 (2015).
  5. Derby, B. Printing and prototyping of tissues and scaffolds. Science. 338 (6109), 921-926 (2012).
  6. Malda, J., et al. 25th anniversary article: Engineering hydrogels for biofabrication. Adv Mater. 25 (36), 5011-5028 (2013).
  7. Billiet, T., Vandenhaute, M., Schelfhout, J., Van Vlierberghe, S., Dubruel, P. A review of trends and limitations in hydrogel-rapid prototyping for tissue engineering. Biomaterials. 33 (26), 6020-6041 (2012).
  8. Skardal, A. Essentials of 3D Biofabrication and Translation. Yoo, J. J. , Academic Press. 1-17 (2015).
  9. Irvine, S. A., et al. Printing cell-laden gelatin constructs by free-form fabrication and enzymatic protein crosslinking. Biomed Microdevices. 17 (1), 16(2015).
  10. Bhuthalingam, R., et al. A novel 3D printing method for cell alignment and differentiation. International Journal of Bioprinting. 1, 57-65 (2015).
  11. Curtis, A., Wilkinson, C. Topographical control of cells. Biomaterials. 18 (24), 1573-1583 (1997).
  12. Tay, C. Y., et al. Micropatterned matrix directs differentiation of human mesenchymal stem cells towards myocardial lineage. Exp Cell Res. 316 (7), 1159-1168 (2010).
  13. Tay, C. Y., et al. Bio-inspired micropatterned platform to steer stem cell differentiation. Small. 7 (10), 1416-1421 (2011).
  14. Li, H., et al. Direct laser machining-induced topographic pattern promotes up-regulation of myogenic markers in human mesenchymal stem cells. Acta Biomater. 8 (2), 531-539 (2012).
  15. Kolind, K., Leong, K. W., Besenbacher, F., Foss, M. Guidance of stem cell fate on 2D patterned surfaces. Biomaterials. 33 (28), 6626-6633 (2012).
  16. Agrawal, A., et al. Smooth Muscle Cell Alignment and Phenotype Control by Melt Spun Polycaprolactone Fibers for Seeding of Tissue Engineered Blood Vessels. International Journal of Biomaterials. 2015, (2015).
  17. Chang, S., et al. Phenotypic modulation of primary vascular smooth muscle cells by short-term culture on micropatterned substrate. PLoS One. 9 (2), e88089(2014).
  18. Li, Y., et al. Engineering cell alignment in vitro. Biotechnol Adv. 32 (2), 347-365 (2014).
  19. Blaeser, A., et al. Controlling Shear Stress in 3D Bioprinting is a Key Factor to Balance Printing Resolution and Stem Cell Integrity. Adv Healthc Mater. 5 (3), 326-333 (2016).
  20. Nery, A. A., et al. Human mesenchymal stem cells: From immunophenotyping by flow cytometry to clinical applications. Cytometry Part A. 83A (1), 48-61 (2013).
  21. Guvendiren, M., Lu, H. D., Burdick, J. A. Shear-thinning hydrogels for biomedical applications. Soft Matter. 8 (2), 260-272 (2012).
  22. Markstedt, K., et al. 3D Bioprinting Human Chondrocytes with Nanocellulose-Alginate Bioink for Cartilage Tissue Engineering Applications. Biomacromolecules. 16 (5), 1489-1496 (2015).
  23. Kolesky, D. B., et al. 3D bioprinting of vascularized, heterogeneous cell-laden tissue constructs. Adv Mater. 26 (19), 3124-3130 (2014).
  24. Merceron, T. K., Murphy, S. V. Essentials of 3D Biofabrication and Translation. Yoo, J. J. , Academic Press. 249-270 (2015).
  25. Carrow, J. K., Kerativitayanan, P., Jaiswal, M. K., Lokhande, G., Gaharwar, A. K. Essentials of 3D Biofabrication and Translation. Yoo, J. J. , Academic Press. 229-248 (2015).
  26. Lee, K. V., et al. Bioprinting in Regenerative Medicine. Turksen, K. , Springer International Publishing. 33-66 (2015).
  27. Ozbolat, I. T., Hospodiuk, M. Current advances and future perspectives in extrusion-based bioprinting. Biomaterials. 76, 321-343 (2016).
  28. Li, M., Tian, X., Schreyer, D. J., Chen, X. Effect of needle geometry on flow rate and cell damage in the dispensing-based biofabrication process. Biotechnol Prog. 27 (6), 1777-1784 (2011).
  29. Nikkhah, M., Edalat, F., Manoucheri, S., Khademhosseini, A. Engineering microscale topographies to control the cell-substrate interface. Biomaterials. 33 (21), 5230-5246 (2012).
  30. Khademhosseini, A., et al. Microfluidic patterning for fabrication of contractile cardiac organoids. Biomed Microdevices. 9 (2), 149-157 (2007).
  31. Chelli, B., et al. Neural cell alignment by patterning gradients of the extracellular matrix protein laminin. Interface Focus. 4 (1), 20130041(2014).
  32. Aubin, H., et al. Directed 3D cell alignment and elongation in microengineered hydrogels. Biomaterials. 31 (27), 6941-6951 (2010).
  33. Béduer, A., et al. Engineering of adult human neural stem cells differentiation through surface micropatterning. Biomaterials. 33 (2), 504-514 (2012).
  34. Bian, W., Jackman, C. P., Bursac, N. Controlling the structural and functional anisotropy of engineered cardiac tissues. Biofabrication. 6 (2), 024109(2014).
  35. Chen, P. Y., et al. Fabrication of large perfusable macroporous cell-laden hydrogel scaffolds using microbial transglutaminase. Acta Biomater. 10 (2), 912-920 (2014).
  36. Bertassoni, L. E., et al. Direct-write bioprinting of cell-laden methacrylated gelatin hydrogels. Biofabrication. 6 (2), 024105(2014).
  37. Zhao, X., et al. 3D patterned substrates for bioartificial blood vessels - The effect of hydrogels on aligned cells on a biomaterial surface. Acta Biomater. 26, 159-168 (2015).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة