يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

المضادة للسرطان فعالية من العلاج الضوئي مع النانوية المستهدفة السرطان والرئة

8.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/54865

⸱

ديسمبر 1, 2016

 ,  , 
1Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Seoul National University Bundang Hospital, 2College of Pharmacy, Kangwon National University, 3Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Seoul National University College of Medicine

في هذه المقالة

ملخص

العلاج الضوئي الديناميكي (PDT) هو خيار بديل لعلاج سرطان الرئة. لزيادة التأثير العلاجي ل PDT ، تم تطوير جزيئات نانوية تستهدف سرطان الرئة جنبا إلى جنب مع العلاج الكيميائي. تم تقييم كل من الكفاءة المضادة للسرطان في المختبر وفي الجسم الحي ل PDT مع الجسيمات النانوية المحضرة.

الملخص

العلاج الضوئي الديناميكي (PDT) هو طريقة غير جراحية وغير جراحية تمثل خيارا بديلا جذابا لعلاج سرطان الرئة. تتراكم المحسسات الضوئية بشكل انتقائي في أنسجة الورم وتؤدي إلى موت الخلايا السرطانية في وجود الأكسجين والطول الموجي المناسب للضوء.

لزيادة التأثير العلاجي ل PDT ، قمنا بتطوير كل من الجسيمات النانوية المستهدفة بسرطان الرئة المحملة بالمحسسات الضوئية والمضادة للسرطان. تم تطبيق كل من الاستهداف السلبي القائم على تأثير النفاذية والاحتفاظ المحسنة (EPR) والاستهداف النشط القائم على التفاعل بحمض الهيالورونيك CD44. CD44 هو مستقبل حمض الهيالورونيك المعروف الذي غالبا ما يتم تقديمه كمؤشر حيوي لسرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة.

بالإضافة إلى ذلك ، تم اعتماد مزيج من PDT والعلاج الكيميائي في هذه الدراسة. هذا المفهوم الجمع قد تزيد من الآثار العلاجية المضادة للسرطان والحد من ردود الفعل السلبية.

اخترنا hypocrellin B (HB) كمحسس ضوئي جديد في هذه الدراسة. تم الإبلاغ عن أن HB يسبب فعالية أعلى المضادة للسرطان من PDT مقارنة بمشتقات الهيماتوبورفيرين1. تم اختيار باكليتاكسيل كدواء مضاد للسرطان لأنه أثبت أنه علاج محتمل لسرطانالرئة 2. < p class = 'jove_content'> تمت مقارنة الكفاءة المضادة للأورام لمحلول المحسس الضوئي (HB) ، والجسيمات النانوية المغلفة بحمض الهيالورونيك والسيراميد (HB-NPs) ، وكل من الجسيمات النانوية المغلفة بحمض الهيالورونيك والسيراميد (HB-P-NPs) بعد PDT تمت مقارنتها في المختبر وفي الجسم الحي. تم تقييم السمية الضوئية في المختبر في خلايا A549 (سرطان الرئة البشري) والفعالية المضادة للأورام في الجسم الحي في الفئران الحاملة للورم A549.

أظهرت مجموعة علاج HB-P-NP التأثير الأكثر فعالية المضاد للسرطان بعد PDT. في الختام ، تمثل HB-P-NPs التي تم إعدادها في هذه الدراسة نظاما محتملا وجديدا لتوصيل المحسس الضوئي في علاج سرطان الرئة باستخدام PDT.

المقدمة

يتكون العلاج الضوئي الديناميكي < p class = 'jove_content'> (PDT) من ثلاثة عوامل رئيسية: المحسسات الضوئية والضوء والأكسجين. تم الإبلاغ عن PDT كعلاج واعد لأنواع مختلفةمن السرطان 3. عندما يتم إعطاء المحسسات الضوئية في مريض السرطان ، فإنها تتراكم بشكل انتقائي في أنسجة الورم. عندما يتم تطبيق الطول الموجي المناسب للضوء ، يؤدي الأكسجين المفرد عالي التفاعل والجذور الحرة الأخرى إلى تلف الخلاياالسرطانية 4.

تم تقديم

سرطان الرئة كواحد من أولى التطبيقات ل PDT في أوائل الثمانينيات5. يوفر PDT العديد من المزايا في علاج سرطان الرئة. نظرا لأن PDT هو علاج غير جراحي وغير جراحي ، فهو خيار بديل جذاب للمرضى الذين يكون الاستئصال الجراحي غير مناسب.

كانت هناك العديد من التحديات لتعزيز فعالية استهداف السرطان للحساسات الضوئية. تعد زيادة تراكم المحسسات للضوء في مواقع السرطان وتقليل التراكم في الأنسجة الطبيعية من الأهداف المتطابقة للدراسات التي تستهدف السرطان. يتم اعتماد مجموعة متنوعة من أنظمة توصيل الأدوية المستهدفة ، مثل البوليمرات والجسيمات الشحمية والجسيمات النانوية كناقلات للحساسية الضوئية6-8. في دراساتنا السابقة ، زادت الجسيمات النانوية بشكل فعال من قدرات استهداف السرطان للحساساتالضوئية 9،10. تعتبر الجسيمات النانوية ناقلات مثالية لاستهداف السرطان لأنها تمتلك قدرات استهداف سلبية ونشطة. توفر الأوعية السرطانية المتسربة فرصة للناقلات ذات الحجم النانوي لتتراكم بسهولة في الأورام ، وهو ما يعرف باسم تأثير النفاذية والاحتفاظ المعزز (EPR)11،12. يتيح التفاعل بين الجسيمات النانوية والمستقبلات المحددة على الخلايا السرطانية استهداف السرطان النشط. في هذه الدراسة ، قمنا بإعداد الجسيمات النانوية القائمة على حمض الهيالورونيك للتفاعل مع CD44 ، مستقبل حمض الهيالورونيك الرئيسي الذي يتم التعبير عنه بشكل مفرط في خلايا سرطان الرئة13.

< p class = 'jove_content'> لتعظيم الفعالية المضادة للسرطان ، تم اعتماد مزيج من PDT والعلاج الكيميائي في هذه الدراسة. هذا المفهوم الجمع قد يسمح بزيادة التأثير العلاجي. علاوة على ذلك ، يمكن أن تقلل الجرعات المنخفضة من كل من المحسس الضوئي والدواء المضاد للسرطان من الآثار الضارة. اخترنا هيبوكريلين ب (HB) كمحسس ضوئي جديد في الدراسة الحالية. HB معزول عن الفطريات الطبية الصينية Hypocrella bambuase. أفاد Shang et al. أن PDT القائم على HB يمتلك فعالية أعلى مضادة للسرطان عند مقارنته ب PDT1 القائم على مشتق الهيماتوبورفيرين. تم اختيار باكليتاكسيل كدواء مضاد للسرطان لأنه أثبت أنه علاج محتمل لأنواع مختلفة من السرطانات ، بما في ذلك سرطان الرئة2.

< p class = 'jove_content'>هنا ، قمنا بمقارنة الكفاءة المضادة للسرطان لمحلول المحسس الضوئي (hypocrellin B ، HB) ، وجسيمات حمض الهيالورونيك النانوية المغلفة بالمحسس الضوئي - سيراميد (HB-NPs) ، وكل من الجسيمات النانوية المغلفة بحمض الهيالورونيك والسيراميد (paclitaxel) بعد PDT. تم تقييم السمية الضوئية في المختبر في خلايا A549 (سرطان الرئة البشري) والفعالية المضادة للأورام في الجسم الحي في الفئران الحاملة للورم A549.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ملاحظة: تمت الموافقة على جميع البروتوكولات دراسة أجريت على الحيوانات من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي من مستشفى جامعة سيول الوطنية بوندانج (BA1308-134 / 072-01).

1. تخليق حمض الهيالورونيك-ميلنيوم (هير)

  1. إذابة 12.21 مليمول من حمض الهيالورونيك (ها) قليل وحدات و9.77 مليمول من رباعي ن -butylammonium هيدروكسيد (TBA) في 60 مل من الماء المقطر المزدوج (أحواض دبي الجافة العالمية). يحرك المزيج لمدة 30 دقيقة.
  2. لتجميع رابط DS-Y30، ويحل 8.59 مليمول من سيراميد DS-Y30 و9.45 مليمول من ثلاثي الإيثيلامين في 25 مل من رباعي هيدرو الفوران (THF). خلط مع 8.59 ملمول من كلوريد 4 chloromethylbenzoyl في THF. تحرك المكونات لمدة 6 ساعات في 60 درجة مئوية.
  3. حل 8.10 توليفها مليمول من HA-TBA و0.41 مليمول من رابط DS-Y30 في خليط من THF والأسيتونتريل (4: 1، ت / ت). يحرك المزيج لمدة 5 ساعة عند 40 درجة مئوية.
  4. إزالة الشوائب من خلال تصفية مع وكيل مرشح، والقضاء على المذيبات العضوية عن طريق التبخر فراغ. تنقية المنتج باستخدام غشاء غسيل الكلى (الوزن الجزيئي قطع: 3.5 كيلو دالتون) ويجفد.

2. إعداد النانوية

  1. حل 1 ملغ من HB و 1 ملغ من باكليتاكسيل في 0.5 مل من ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) ومزج مع 0.5 مل من أحواض دبي الجافة العالمية من دوامة خلط لمدة 5 دقائق. ثم، إذابة HACE في هذا الخليط من دوامة خلط لمدة 5 دقائق إضافية.
  2. للقضاء على المذيبات، الحرارة عند 70 درجة مئوية لمدة 4 ساعات تحت تيار لطيف من غاز النيتروجين.
  3. Resuspend والفيلم يتكون من HACE، HB، وباكليتاكسيل مع 1 مل من أحواض دبي الجافة العالمية. تصفية مع فلتر حقنة (0.45 ميكرون حجم المسام) لإزالة المخدرات unencapsulated.

3. في المختبر الضيائية

  1. امتصاص الجسيمات النانوية في خطوط الخلايا السرطانية في الرئة
    1. إعداد 10٪ التي تحتوي على المتوسطة RPMI-1640 (ت / ت) مصل بقري جنيني و 1٪ (ث / ت) البنسلين ستربتومايسين.
    2. خلايا البذور A549 في لوحات ثقافة الخلية 24-جيدا في مناطق ذات كثافة من 1 × 5 10 خلايا / جيد (يثلث لكلتجمع). احتضان لمدة 24 ساعة على 37 درجة مئوية في ترطيب 5٪ جو الهواء CO 2 و 95٪.
    3. بعد التعلق الخلية، وإزالة المتوسطة وغسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من الفوسفات مخزنة المالحة (PBS).
    4. حل النانوية في برنامج تلفزيوني لتركيز النهائي من 2 ميكرومتر / مل HB. ثم، احتضان الخلايا مع 1 مل من برنامج تلفزيوني، مصادر القدرة النووية فارغة، HB-مصادر القدرة النووية، أو HB-P-المصادر في كل بئر لمدة 4 ساعة في الظلام.
    5. إزالة جميع من الحل وغسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني الباردة. كرر الخطوة الغسيل مرة أخرى. إضافة مستنبت الطازجة.
  2. بقاء الخلية مقايسة
    1. وضع لوحة زراعة الخلايا تحت الألياف PDT (مع 1 سم من المسافة من الألياف PDT إلى البئر). ارتداء نظارات السلامة الليزر وتضيء الخلايا مع ليزر PDT (630 نانومتر و 400 ميغاواط / سم 2) في الظلام لفترات مختلفة من الزمن: 0، 5، 10، 20، 30، و 40 ثانية (0، 2، 4 و 8 و 12 و 16 J / سم 2). ثم، احتضان الخلايا لمدة 24 ساعة في الظلام.
    2. نضح المتوسطة وغسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني الباردة. كرر الخطوة الغسيل مرة أخرى.
    3. إضافة 10 ميكرولتر من حل السمية الخلوية القياس على كل جانب. احتضان في الظلام لمدة 2 ساعة.
    4. قياس الامتصاصية في 450 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة.
  3. التحليل المجهري
    1. وضع لوحة زراعة الخلايا تحت الألياف PDT (مع 1 سم من المسافة من الألياف PDT إلى البئر). ارتداء نظارات السلامة الليزر وتضيء الخلايا مع ليزر PDT (630 نانومتر و 400 ميغاواط / سم 2) في الظلام ل0، 20، أو 40 ثانية (0، 8، أو 16 J / سم 2). ثم، احتضان الخلايا لمدة 24 ساعة في الظلام.
    2. نضح المتوسطة وغسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني الباردة. كرر الخطوة الغسيل مرة أخرى.
    3. إضافة 50 ميكرولتر من annexin V-FITC و 50 ميكرولتر من 4، 6 diamidino-2-phenylindole (دابي، و 1.5 ميكروغرام / مل). يهز بلطف لوحة واحتضان لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام.
      ملاحظة: استخدم annexin V-FITC من عدة مضان المجهر.
    4. غسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني الباردة. كرر الخطوة الغسيل مرة أخرى. إبقاء الخلايا في برنامج تلفزيوني جديد. تحديد الخلايا أفكارك باستخدام المجهر الضوئي في التكبير 100X.
  4. مضان خلية تنشيط الفرز (FACS) تحليل
    1. وضع لوحة زراعة الخلايا تحت الألياف PDT (مع 1 سم من المسافة من الألياف PDT إلى البئر). ارتداء نظارات السلامة الليزر وتضيء الخلايا مع ليزر PDT (630 نانومتر و 400 ميغاواط / سم 2) ل 0، 20، أو 40 ثانية (0، 8، أو 16 J / سم 2). ثم، احتضان الخلايا لمدة 24 ساعة في الظلام.
    2. نضح المتوسطة وغسل الخلايا عن طريق إضافة 1 مل من برنامج تلفزيوني الباردة. كرر الخطوة الغسيل مرة أخرى.
    3. Resuspend الخلايا في 1 مل من 1 × العازلة ملزمة (تمييع 1 جزء من العازلة ملزمة 10X؛ 0.1 M HEPES / هيدروكسيد الصوديوم (7.4 درجة الحموضة)، و 1.4 M كلوريد الصوديوم، و 25 ملي CaCl 2-9 أجزاء من الماء المقطر) ونقل 100 ميكرولتر من محلول العينة إلى 5 ملأنبوب الثقافة.
    4. إضافة 5 ميكرولتر من annexin V-FITC و 5 ميكرولتر من يوديد propidium (PI). دوامة بلطف أنبوب واحتضان لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (RT) في الظلام. إضافة 400 ميكرولتر من 1 × العازلة ملزمة.
      ملاحظة: استخدم annexin V-FITC و PI من عدة مضان المجهر.
    5. تحديد الخلايا أفكارك باستخدام نظام مراقبة الأصول الميدانية 14. خطوط الإثارة ليزر من PI وannexin V-FITC هي 488 نانومتر و 635 نانومتر، على التوالي. قياس الانبعاثات مضان من PI وannexin V-FITC في 610 ± 20 نانومتر و 660 ± 20 نانومتر، على التوالي. جمع الخلايا المكتسبة في عداد الكريات تدفق في 10،000 الأحداث.

4. في الجسم الحي المضادة للسرطان فعالية في الفئران الحاملة للورم

  1. الرئة نموذج الفأر التي يسببها السرطان
    1. إعداد 1 × 10 6 خلايا A549 في 0.1 مل المتوسطة RPMI-1640. يبقيه في الجليد.
    2. تخدير الفئران مع حقنة الملكية الفكرية من زيلازين وخليط من تلييتامين وzolazepam (1: 2، 1 مل /كلغ). تأكيد التخدير المناسبة عن طريق معسر بلطف أضعاف صغيرة من الجلد الماوس. استخدام البيطري مرهم على العينين لمنع جفاف بينما تحت التخدير.
      ملاحظة: إذا لوحظ عدم الحركة، وهذا الحيوان هو تخدير بما فيه الكفاية لبدء التجارب.
    3. حقن الخلايا تحت الجلد في جنباته تبقى من BALB / C الذكور الفئران عارية (6-7 أسابيع من العمر، 20-22 غرام).
    4. حافظ على مراقبة الفئران حتى تبدأ في التحرك حول القفص.
      ملاحظة: لا تترك حيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه كافية للحفاظ على الاستلقاء القصية. لا عودة الحيوان الذي خضع لعملية جراحية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما. الحفاظ على الفئران تحت ظروف خالية من اى مرض (SPF).
    5. قياس حجم الورم مع الفرجار كل يوم. حساب حجم الورم (مم 3) ليصبح (الطول × العرض 2) / 2. عندما يصل حجم الورم حوالي 200 مم 3 في حجم، بدء التجربة.
  2. دراسة فعالية المضادة للسرطان
    1. عشوائيا تقسيم الفئران إلى 4 مجموعات (ن = 10 لكل مجموعة).
    2. تخدير الفئران مع حقنة الملكية الفكرية من زيلازين وخليط من تلييتامين وzolazepam (1: 2، 1 مل / كغ). تأكيد التخدير المناسبة عن طريق معسر بلطف أضعاف صغيرة من الجلد الماوس. استخدام البيطري مرهم على العينين لمنع جفاف بينما تحت التخدير.
      ملاحظة: إذا لوحظ عدم الحركة، وهذا الحيوان هو تخدير بما فيه الكفاية لبدء التجارب.
    3. حل النانوية في برنامج تلفزيوني لتركيز النهائي من 2 ملغ / مل HB. حقن برنامج تلفزيوني، مجانا HB، HB-مصادر القدرة النووية، أو HB-P-مصادر القدرة النووية عن طريق الوريد الذيل (2 ملغ / كغ كما HB) مرتين في الأيام 0 و 7.
    4. حافظ على مراقبة الفئران حتى تبدأ في التحرك حول القفص.
      ملاحظة: لا تترك حيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه كافية للحفاظ على الاستلقاء القصية. لا عودة الحيوان الذي خضع لعملية جراحية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى بشكل كاملاستردادها. الحفاظ على أقفاص الظلام وتحت ظروف SPF محددة.
    5. 24 ساعة بعد كل حقنة، تخدير الفئران مع حقنة الملكية الفكرية من زيلازين وخليط من تلييتامين وzolazepam (1: 2، 1 مل / كغ). تأكيد التخدير المناسبة عن طريق معسر بلطف أضعاف صغيرة من الجلد الماوس. استخدام البيطري مرهم على العينين لمنع جفاف بينما تحت التخدير.
      ملاحظة: إذا لوحظ عدم الحركة، وهذا الحيوان هو تخدير بما فيه الكفاية لبدء التجارب.
    6. وضع موقع الورم تحت الألياف PDT (مع 1 سم من المسافة من الألياف PDT للورم). ارتداء نظارات السلامة الليزر، وإيقاف التبديل، وإلقاء الضوء على الورم مع ليزر PDT (630 نانومتر و 400 ميغاواط / سم 2) لمدة 500 ثانية (200 J / سم 2) مرتين في أيام 1 و 8.
    7. حافظ على مراقبة الفئران حتى تبدأ في التحرك حول القفص. لا تترك حيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه كافية للحفاظ على الاستلقاء القصية. لا عودة حيوان الذي لديه undergonجراحة الإلكترونية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما.
    8. الحفاظ على أقفاص في ظل ظروف SPF. الحفاظ على الأقفاص في الظلام لمدة 24 ساعة بعد العلاج بالليزر.
    9. مراقبة بصريا حجم الورم والتغيرات في موقع الورم كل يوم. قياس حجم الورم مع الفرجار، وحساب حجم باسم (الطول × العرض 2) / 2 (مم 3). التقاط صور لمواقع الورم كل يوم للتأكد من التعديلات سطح الورم بعد PDT.
    10. في يوم 16، تضحية خمسة فئران لكل مجموعة من التخدير الطرفية باستخدام الأيزوفلورين.
    11. مع ملقط ومقص، وقطع الجلد الخارجي، وفضح الأورام 15. حصادها بعناية. اصلاحها في 10٪ من الفورمالين، تضمينها في البارافين، وصمة عار لهم الهيماتوكسيلين ويوزين (H & E) للتحليل النسيجي 16.
    12. بعد 45 يوما من الرصد والتضحية الفئران المتبقية التخدير الطرفية باستخدام الأيزوفلورين.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

ونحن على استعداد على حد سواء HB-مصادر القدرة النووية وHB-P-مصادر القدرة النووية مع التقنيات المذكورة أعلاه. وكانت قطر يعني من HB-مصادر القدرة النووية وHB-P-مصادر القدرة النووية 220.9 ± 3.2 نانومتر، و211.9 ± 1.6 نانومتر، على التوالي.

يظهر بقاء الخلية من خلايا A549 بعد 4 ساعات من الحضانة مع برنامج تلفزيوني، مصادر القدرة النووية فارغة، HB-مصادر القدرة...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الخطوة الأكثر أهمية في هذه الدراسة هو اختيار الظروف المناسبة ليزر: الطول الموجي، والطاقة، والوقت التشعيع. الطول الموجي المناسب للضوء مناسبة للالضيائي معين ضروري لPDT. استخدمنا الليزر 630 نانومتر التي كانت مناسبة لhypocrellin B. كانت انتاج الطاقة عامل مهم آخر، التي أنشئت في 400 ميغاواط / سم 2 على أساس العديد من الدراسات التجريبية. قوى الانتاج تزيد على 400 ميغاواط / سم 2 تلف الخلايا أو سطح الجلد من الحيوانات بسبب أشعة نفسها، في حين كانت قوى الانتاج أقل من 400 م...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

وأيد هذه الدراسة من قبل أي منحة. 14-2014-017 من صندوق أبحاث SNUBH.

مدينون الكتاب إلى J. باتريك بارون، أستاذ فخري، جامعة طوكيو الطبية وأستاذ مساعد، مستشفى جامعة سيول الوطنية بوندانج لله تطوعا تحرير هذه المخطوطة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
oligo حمض الهيالورونيكBioland Co.، Ltd._
DS-Y30 (سيراميد 3B ؛ بشكل رئيسي N < / em > -oleoyl-phytosphingosine)Doosan Biotech Co.، Ltd._
حمض أديبيك ثنائي هيدرازيدسيجما ألدريتشA0638
N< / em>-(3-dimethylaminopropyl)-N & prime; < / م > - إيثيل كاربوديميدسيجما ألدريتش39391
4- (كلورو ميثيل) بنزويل كلوريدسيجما ألدريتش270784
توين 80طوكيو للصناعة الكيميائية المحدودة.T0546
مرشح حقنةSartorius Stedim Biotech GmbH1776215 مم ، RC ، PP ، 0.45 & micro ؛ م
triethylamineSigma AldrichT0886
أنابيب Mini-GeBAflexGene Bio-Application Ltd.D070-12-100
شركة باكليتاكسيلتايهوا كوركورس_
RPMI-1640شركة جيبكو لايف تكنولوجيز11875
البنسلين & - - - ستربتومايسينجيبكو لايف تكنولوجيز ، إنك.15070
مصل الأبقار الجنينيGibco Life Technologies، Inc.16140071
Celite (عامل الفلتر)Sigma Aldrich6858انظر الخطوة 1.4

المراجع

  1. Shang, L., Zhou, N., Gu, Y., Liu, F., Zeng, J. Comparative study on killing effect of esophageal cancer cell line between hypocrellin B-photodynamic therapy and hematoporphyrin derivative-photodynamic therapy. Chin J Cancer Prev Treat. 12, 1139-1142 (2005).
  2. Huisman, C., et al. Paclitaxel triggers cell death primarily via caspase-independent routes in the non-small cell lung cancer cell line NCI-H460. Clin Cancer Res. 8 (2), 596-606 (2002).
  3. Dolmans, D. E., Fukumura, D., Jain, R. K. Photodynamic therapy for cancer. Nat Rev Cancer. 3 (5), 380-387 (2003).
  4. Pass, H. I. Photodynamic therapy in oncology: mechanisms and clinical use. J Natl Cancer Inst. 85 (6), 443-456 (1993).
  5. Sutedja, T. G., Postmus, P. E. Photodynamic therapy in lung cancer. A review . J. Photochem. Photobiol. 36 (2), 199-204 (1996).
  6. Peng, C. L., Shieh, M. J., Tsai, M. H., Chang, C. C., Lai, P. S. Self-assembled star-shaped chlorin-core poly(epsilon-caprolactone)-poly(ethylene glycol) diblock copolymer micelles for dual chemo-photodynamic therapies. Biomaterials. 29 (26), 3599-3608 (2008).
  7. Chen, B., Pogue, B. W., Hasan, T. Liposomal delivery of photosensitising agents. Expert Opin Drug Deliv. 2 (3), 477-487 (2005).
  8. Lee, S. J., et al. Comparative study of photosensitizer loaded and conjugated glycol chitosan nanoparticles for cancer therapy. J Control Release. 152 (1), 21-29 (2011).
  9. Chang, J. E., et al. Anticancer efficacy of photodynamic therapy with hematoporphyrin-modified, doxorubicin-loaded nanoparticles in liver cancer. J. Photochem. Photobiol. 140, 49-56 (2014).
  10. Chang, J. E., Cho, H. J., Yi, E., Kim, D. D., Jheon, S. Hypocrellin B and paclitaxel-encapsulated hyaluronic acid-ceramide nanoparticles for targeted photodynamic therapy in lung cancer. J. Photochem. Photobiol. 158, 113-121 (2016).
  11. Wang, A. Z., Langer, R., Farokhzad, O. C. Nanoparticle delivery of cancer drugs. Annu. Rev. Med. 63, 185-198 (2012).
  12. Matsumura, Y., Maeda, H. A new concept for macromolecular therapeutics in cancer chemotherapy: mechanism of tumoritropic accumulation of proteins and the antitumor agent smancs. Cancer Res. 46 (12 Pt 1), 6387-6392 (1986).
  13. Penno, M. B., et al. Expression of CD44 in human lung tumors. Cancer Res. 54 (5), 1381-1387 (1994).
  14. Wilkins, R., Kutzner, B., Truong, M., Sanchez-Dardon, J., McLean, J. Analysis of radiation-induced apoptosis in human lymphocytes: Flow cytometry using Annexin V and propidium iodide versus the neutral comet assay. Cytometry. 48 (1), 14-19 (2002).
  15. Bannas, P., et al. Validation of nanobody and antibody based in vivo tumor xenograft NIRF-imaging experiments in mice using ex vivo flow cytometry and microscopy. J Vis Exp. (98), e52462(2015).
  16. Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections. Cold Spring Harbor Protocols. (5), (2008).
  17. Lam, S. Photodynamic therapy of lung cancer. Semin Oncol. 21 (6 Suppl 15), 15-19 (1994).
  18. Simone, C. B. 2nd, et al. Photodynamic therapy for the treatment of non-small cell lung cancer. J Thorac Dis. 4 (1), 63-75 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

CD44 B A549
المضادة للسرطان فعالية من العلاج الضوئي مع النانوية المستهدفة السرطان والرئة
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.