ويبين التقييم في وقت واحد ديناميكا الدم الدماغي وخصائص تشتت الضوء في الجسم الحي الفئران أنسجة المخ يستخدم منتشر متعدد الأطياف نظام الانعكاس التصوير التقليدي.
Method Article
ويبين التقييم في وقت واحد ديناميكا الدم الدماغي وخصائص تشتت الضوء في الجسم الحي الفئران أنسجة المخ يستخدم منتشر متعدد الأطياف نظام الانعكاس التصوير التقليدي.
يتم توضيح التقييم المتزامن لديناميكا الدم الدماغية وخصائص تشتت الضوء لأنسجة دماغ الفئران في الجسم الحي باستخدام نظام تصوير انعكاس منتشر تقليدي متعدد الأطياف. تم إنشاء هذا النظام من مصدر ضوء أبيض عريض النطاق ، وعجلة مرشح آلية مع مجموعة من مرشحات التداخل ضيق النطاق ، ودليل الضوء ، وعدسة تجميع ، وعدسة تكبير الفيديو ، وكاميرا أحادية اللون مقترنة بالجهاز المشحون (CCD). يتم عمل نافذة قحفية بيضاوية الشكل في عظم جمجمة الفئران تحت تخدير الأيزوفلوران لالتقاط صور انعكاس منتشرة متعددة الأطياف في الجسم الحي للسطح القشري. يتيح تنظيم جزء الأكسجين الملهم باستخدام جهاز خليط الغاز تحريض حالات تنفسية مختلفة مثل نورموكسيا وفرط التأكسج ونقص الأكسجين. ثم يتم إجراء تحليل انحدار متعدد قائم على محاكاة مونت كارلو لصور الانعكاس المنتشر متعدد الأطياف المقاسة بتسعة أطوال موجية (500 و 520 و 540 و 560 و 570 و 580 و 600 و 730 و 760 نانومتر) لتصور الخرائط ثنائية الأبعاد لديناميكا الدم وخصائص تشتت الضوء لدماغ الفئران في الجسم الحي.
التصوير الانعكاسي المنتشر متعدد الأطياف هو الأسلوب الأكثر شيوعا للحصول على خريطة مكانية للإشارات البصرية الذاتية (يوس) في الأنسجة القشرية. يوس يراقب في الدماغ في الجسم الحي وتعزى أساسا إلى ثلاث ظواهر: الاختلافات في امتصاص الضوء وخصائص تشتت بسبب ديناميكا الدم القشرية، والاختلاف في امتصاص اعتمادا على الحد من أو أكسدة السيتوكرومات في الميتوكوندريا، والاختلافات في خصائص تشتت الضوء الناجمة عن التعديلات المورفولوجية 1 -
يتم امتصاص الضوء في المرئية (فيس) إلى المدى الأشعة تحت الحمراء القريبة (نير) بشكل فعال ومنتشرة من قبل الأنسجة البيولوجية. يتميز الطيف الانعكاسي المنتشر للدماغ في الجسم الحي عن طريق امتصاص وتشتت الأطياف. انخفاض معامل الانتثار μ s ' من أنسجة المخ في نطاق الطول الموجي فيس إلى الجرد الوطني ينتج في معرض رتابة نثر رتابةجي مقادير صغيرة في الموجات الأطول. الطيف μ انخفاض معامل تشتت الصورة "(λ) يمكن أن يقترب ليكون في شكل وظيفة قانون الطاقة 2، 3 كما μ S '(λ) = أ × λ -b. ويرتبط نثر السلطة ب لحجم عدسات البيولوجية في الأنسجة 2، 3 الحية. التعديلات الشكلية من الأنسجة والحد من قابلية الأنسجة الحية القشرية يمكن أن تؤثر على حجم عدسات البيولوجية 4، 5، 6، 7، 8، 9.
نظام بصري لمتعدد الأطياف التصوير منتشر الانعكاس يمكن بناؤها بسهولة من لى وهاجمصدر GHT، المكونات البصرية البسيطة، وأحادية اللون جهاز اتهم جانب (CCD). لذلك، وقد استخدمت العديد من الخوارزميات وأنظمة البصرية لمتعدد الأطياف التصوير منتشر الانعكاس لتقييم ديناميكا الدم القشرية و / أو التشكل الأنسجة 10، 11، 12، 13، 14، 15، 16، 17، 18.
يتم استخدام الأسلوب الموصوفة في هذه المقالة لتصور كل من ديناميكا الدم وخصائص تشتت الضوء من الأنسجة الدماغية الفئران في الجسم الحي باستخدام منتشر متعدد الأطياف نظام الانعكاس التصوير التقليدي. مزايا هذه الطريقة على التقنيات البديلة هي القدرة على تقييم التغيرات الزمانية المكانية في كل ديناميكا الدم الدماغي والأنسجة القشريةالتشكل، وكذلك تطبيقها على مختلف النماذج الحيوانية اختلال وظيفي في المخ. ولذلك، فإن الطريقة يكون مناسبا لتحقيقات من الإصابات في الدماغ، نوبة الصرع والسكتة الدماغية ونقص التروية.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
تمت الموافقة على رعاية الحيوانات، وإعداد، والبروتوكولات التجريبية قبل لجنة الأبحاث الحيوان من جامعة طوكيو للزراعة والتكنولوجيا. لهذه المنهجية، وتقع الفئران في بيئة تسيطر عليها (24 ° C، 12 ساعة دورة الضوء / الظلام)، مع الطعام والمياه المتاحة الإرضاع بحسب الرغبة.
1. بناء نظام التقليدية المتعددة الأطياف منتشر الانعكاس التصوير
2. إعداد الحيوان
ملاحظة: في هذا البروتوكول، وعدم استخدام الفئران في التجارب المستقبلية والتضحية على الفور بعد قياسات الصور متعددة الأطياف.
3. تنظيم جزء من الأوكسجين من وحي
ملاحظة: كوندي التنفسينشوئها يمكن تغيير من خلال تنظيم جزء من الأوكسجين مستوحاة (قوة المراقبة الدولية 2).
4. الاستحواذ على الانعكاس الصور المتعددة الأطياف منتشر
5. تصور المحتوى الهيموجلوبين وتشتت الضوء معلمة
يتم حفظ مجموعة من الصور متعددة الأطياف منتشر الانعكاس على القرص الصلب لجهاز كمبيوتر شخصي وتحليلها حاليا: ملاحظة. تحليل الانحدار المتعدد وساعد على ذلك محاكاة مونت كارلو 19 من متعددة الأطياف الصور الانعكاس منتشر في تسع موجات (500، 520، 540، 560، 570، 580، 600، 730، و 760 نانومتر) ثم يتم تنفيذ لتصور ثنائي الأبعاد خرائط تركيز الهيموغلوبين المؤكسج، وتركيز الهيموغلوبين غير المؤكسج، ومجموع تركيز الهيموجلوبين والإقليمي تشبع الأكسجين الدماغي، وسكتtering السلطة. وقد تم نشر خوارزمية مفصلة في الآداب 17 و 18.
(1)
(2)
(3)
(4) Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
وتظهر الصور الطيفية تمثيلية من الانعكاس منتشر تم الحصول عليها من الجسم الحي في أدمغة الفئران في الشكل 3. الصور في 500، 520، 540، 560، 570، و 580 نانومتر تصور واضح شبكة كثيفة من الأوعية الدموية في القشرة الدماغية. تدهور التباين بين الأوعية الدموية والأنسجة المحيطة التي لوحظت في الصور في 600، 730، و 760 نانومتر يعكس امتصاص أقل من الضوء من قبل الهيموغلوبين في أطول وموجات الجرد الوطني.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
الخطوة الأكثر أهمية في هذا البروتوكول هو إزالة منطقة الجمجمة ضعيفة لجعل نافذة في الجمجمة. هذا يجب أن يتم تنفيذ بعناية لتجنب نزيف غير متوقع. هذه الخطوة مهمة للحصول على جودة عالية متعددة الأطياف نشر صور الانعكاس بدقة عالية. من المستحسن استخدام مجهر تشريحي لإجراء العمليات الجراحية إن أمكن. قطع صغيرة من الإسفنج الجيلاتين مفيدة لالارقاء.
النظام البصري الموضحة في هذه المقالة يمر ضوء أحادي اللون من خلال مرشح تدخل تقع أم...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
تم دعم جزء من هذا العمل من خلال منحة المساعدة للبحث العلمي (C) من الجمعية اليابانية لتعزيز العلوم (25350520 ، 22500401 ، 15K06105) ومشروع البحث والتطوير التابع للجيش الأمريكي ITC-PAC (FA5209-15-P-0175).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 150 واط مصباح الهالوجين مصدر الضوء | Hayashi Watch Works Co.، Ltd ، طوكيو ، اليابان | LA-150SAE | |
| دليل الضوء | Hayashi Watch Works Co.، Ltd ، طوكيو ، اليابان | LGC1-5L1000 | |
| تجميع عدسة | Hayashi Watch Works Co.، Ltd ، طوكيو ، اليابان | مرشحات التداخل SH-F16 | |
| l@ 500 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 65088 | |
| مرشحات التداخل l@ 520 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 65093 | |
| مرشحات التداخل l@ 540 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 65096 | |
| مرشحات التداخل l@ 560 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 67766 | |
| مرشحات التداخل l@ 570 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 67767 | |
| مرشحات التداخل l@ 580 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 65646 | |
| مرشحات التداخل l@ 600 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 65102 | |
| مرشحات التداخل l@ 730 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 65115 | |
| مرشحات التداخل l@ 760 نانومتر | Edmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان | # 67777 | |
| عجلة الفلتر الآلية | شركة أندوفر ، نيو هامبشاير ، الولايات المتحدة الأمريكية | FW-MOT-12.5 | |
| كاميرا CCD أحادية اللون 8 بت | مصدر التصوير ، ألمانيا | DMK21BU618. | |
| إدموند بصريات اليابان المحدودة ، طوكيو ، اليابان | VZMTM< / sup>300i | ||
| معيار أبيض طيفي مع انعكاس منتشر بنسبة 99٪ | Labsphere Incorporated، نورث ساتون ، نيو هامبشاير ، الولايات المتحدة الأمريكية | SRS-99-020 |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission