تشريح البنكرياس الماوس للتحليل النسيجي والتنميط الأيضية

ملخص

توفر هذه المقالة الفيديو مظاهرة تفصيلاً الإجراءات اللازمة لإزالة البنكرياس بنجاح من ماوس بتشريح للتحليل النسيجي والتنميط الأيضية.

الملخص

لقد تم التحقيق عامل النسخ المحددة البنكرياس، 1a cre-ريكومبيناسي؛ ساركومه لوكس-توقف-لوكس-كريستين الفئران، جليكاين لحمض الأسبارتيك في كودون 12 (Ptf1a^cre/+؛ لسلكراس^G12D/+) الفأر سلالة كنموذج للبشرية سرطان البنكرياس. لدينا الدراسات الحالية يهدف إلى تحديد المؤشرات الحيوية الأيضية رواية لتطور سرطان البنكرياس. وقد أجرينا التنميط الأيضية للبول، والبراز، والدم، ومقتطفات أنسجة البنكرياس، فضلا عن تحليلات النسيجي لمرحلة تطور سرطان البنكرياس. البنكرياس الماوس ليس جهازا صلبة محددة تحديداً جيدا مثل البشر، ولكن بدلاً من ذلك هو أنسجة ناعمة تصطبغ موزعة التي لم تحدد بسهولة من الأفراد غير مألوف مع الماوس التشريح الداخلي أو عن طريق الأفراد التي لديها القليل أو لا القيام بتجربة تشريح جهاز الماوس. والغرض من هذه الوثيقة تقديم مفصل المجوعات مظاهرة البصرية دليل المبتدئين في إزالة البنكرياس الماوس بالتشريح. ينبغي أن تكون هذه المادة ذات قيمة خاصة للطلاب والباحثين جديدة للبحوث التي يتطلب الحصاد البنكرياس الماوس بتشريح للتنميط الأيضية أو تحليلات النسيجي.

المقدمة

وبرز الماوس حيوان نموذجا هاما لسرطان البنكرياس البشرية^1،2. في Ptf1a^cre/+؛ LSL-كراس^G12D/+ طراز الماوس، كريستين السرطاني كابوزي (ك-Ras) الفئران يتم تنشيط حصرا في البنكرياس، أسفر عن البدء بأورام في البنكرياس، المعروف باسم نيوبلاسياس للسيتولوجيا البنكرياس (بانينس)، أن التقدم للبنكرياس adenocarcinomas الأقنية، يشار إليها باسم بدأكس³. ويتيح هذا النظام النموذجي الماوس واحدة من أفضل النماذج الحيوانية المتاحة لسرطان البنكرياس البشرية^4،5، مع ميزة إضافية التي تظهر بانينس خلال الأشهر الخمسة الأولى من الحياة، وكثيراً ما....

البروتوكول

الإجراءات التي نفذت في شريط الفيديو وهو موضح أدناه عليها "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) في جامعة ميامي-

1-إعداد واختبار التحفيز

1. تأسيس اثنين مجالات متميزة لإجراء العمليات الجراحية وطاولة العمليات والجدول بعد انتهاء العملية. المرحلة كلا المجالين مع جميع المواد والأدوات اللازمة. الجدول
   1. المرحلة تعمل تحت غطاء التهوية. ترتيب الجدول بالمعدات بطريقة تسمح بأداء الإجراء مستمر ودون عوائق.
   إنشاء
   2. جدول بعد العملية الجراحية في نفس الغرفة والقرب من الجدول الرئيسي للعملية. الحفاظ على كلا الجدولين بيئات معقمة طوال فترة الإجراءات.
2. مكان ما يلي اللوازم على طاولة العمليات: جرة زجاج واحد مع غ....

النتائج

ويبين الشكل 1 نظرة عامة مجال البيئة التشغيلية، ويبين الشكل 2 في مجال تشغيل وظيفة. وبينما يوفر هذا الإعداد الحد الأدنى من المعدات والتدريج، يجوز اختيار الأفراد لتغيير هذا لتناسب الاحتياجات الفردية. ينبغي أن يكون الأمثل في البروتوكول وفقا للاحتياجات المحددة للتجربة. ويجري هذا الإجراء بطريقة ينهي حياة الفأر، التي تتطلب يوثانيزيشن السليم⁹. عند الباحث جاهزاً، يتم وضع الماوس في غرفة التخدير مع منصات غارقة في إيس.......

المناقشة

أهمية فيما يتعلق بالأساليب القائمة
على الرغم من وجود أشرطة فيديو أخرى غير رسمية لتشريح الفأر، توفر هذه المقالة الفيديو الجودة الفنية الأولى، واستعراض النظراء، مظاهرة البصرية لجميع الخطوات التفصيلية المطلوبة للاستخراج وحصاد البنكرياس الماوس بتشريح¹⁰ . مع البنكرياس جهاز الرئيسي للنشاط الأيضي والإنسولين ويجري إنتاج وتشريح وحصاد البنكرياس يسمح للحفاظ على الخصائص الفسيولوجية¹¹. بعزل البنكرياس، يمكن إجراء التحليل في المستقبل على العينة. يسمح هذا الإجراء للمقار.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
جرة زجاجية	Corning	3140-150	تم إيقاف الجرة الزجاجية المستخدمة في الفيديو. هذا هو بديله.
غطاء جرة زجاجية	Corning	9985-150	إيقاف غطاء البرطمان الزجاجي المستخدم في الفيديو. هذا هو بديله.
15 مل Falcon Tubes	Fisher Scientific	339650
مقص جراحي	Fisher Scientific	9201
زجاجة ضغط   ؛	فيشر ساينتفيك	03-409-10DD
100٪ إيثانول	فيشر ساینتفيك	22-032-103
فورمالين	فيشر Scientific	245-684
ألواح الرغوة	Therapak	562908
ملقط	فيشر Scientific	200205SHN
1 مل 21G محاقن	BD Biosciences	309624
50 مل Falcon Tubes	Fisher Scientific	339652
2.0 مل أنابيب الطرد المركزي الدقيقة   ؛	فيشر ساينتفيك	02-681-258
منصات جراحية	فيشر Scientific	S67011
T-Pins الطول:  2"	منتجات المتجر المتقدم	X32T-05
مناديل التعقيم	المهنية للمستهلكات الدولية	Q85084
حاويات الأدوات الحادة	فيشر Scientific	14-827-122
الميزان التحليلي	مارشال Scientific	ME-AE200
4L ديوار	تايلور وارتون	4LD
ضحل واسع الفم ديوار	فيشر Scientific	F3087-V
رف Microtube عائم	VWR	60986-100
قارورة مبردة 1.2 مل ، فيشر	علمي	معقم 10-500-25
Isothesia (Isoflurane)   ؛	هنري شاين صحة	050033
النيتروجين السائل	رايت براذرز	NIT-60-XX
ماوس كراس سلالة	مختبر جاكسون	OO8179
Mouse Cre سلالة	MMRRC	OOO435-UNC

تم