هنا، نقدم إعداد مغلي إشيان (إكسد) في أربع خطوات، تمرغ، مغلي، والترشيح، والتركيز، وإظهار إدارة مصل يحتوي على إكسد المحضرة إلى الفئران. هذه الأساليب قابلة للتطبيق على الجسم الحي وفي دراسة المختبر من الاستغناء العشبية مثل الأدوية الصينية التقليدية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
هنا، نقدم إعداد مغلي إشيان (إكسد) في أربع خطوات، تمرغ، مغلي، والترشيح، والتركيز، وإظهار إدارة مصل يحتوي على إكسد المحضرة إلى الفئران. هذه الأساليب قابلة للتطبيق على الجسم الحي وفي دراسة المختبر من الاستغناء العشبية مثل الأدوية الصينية التقليدية.
وقد حظيت الأدوية العشبية التقليدية، وهي طب بديل في الإطار السريري، باهتمام متزايد في السنوات الأخيرة. قبل التسليم إلى الجسم، وعادة ما يتطلب إجراء استخراج إضافية للافراج عن المكونات النشطة من الأعشاب الخام. ديكوتيون المياه هو إجراء استخراج الكلاسيكية التي لا تزال تستخدم على نطاق واسع في الإعدادات السريرية. هنا، نقترح بروتوكول مفصل ل إر-زيان مغلي (إكسد) من أجل تطبيق ديكوكتيونس العشبية للدراسات التجريبية. يتم وصف حساب الجرعة المناسبة للحيوان، وكذلك الخطوات الرئيسية الأربعة من إكسد: تمرغ، مغلي الماء، والترشيح، والتركيز. وبالإضافة إلى ذلك، يتم عرض إكسد المصل المحتوية على المصل إلى الفئران كوسيلة للتحقق من صحة المختبر . هنا، كانت الفئران تدار شفويا إكسد لمدة ثلاثة أيام. ثم تم جمع عينات الدم، المعطل، الطرد المركزي، وتصفيتها. المصل، المخفف مع الوسط الثقافي، يمكن أن تستخدم لعلاج الخلايا أو الأنسجة في الخامسإترو. على سبيل المثال، تم تطبيق إكسد على حد سواء في الجسم الحي وفي الدراسات المختبرية وأظهرت أن إكسد يعزز تكوين العظم. هذا البروتوكول يمكن أن تستخدم كمرجع لإعداد وتطبيق الأدوية العشبية.
الاهتمام في دراسة وتطبيق الأدوية العشبية التقليدية ينمو حاليا. على عكس الأدوية الحديثة، التي المكونات الكيميائية هي محددة، الصيغ العشبية لديها بعض المكونات غير معروفة وتتطلب عمليات استخراج لتمكين تسليم المركبات النشطة. على الرغم من أن العديد من الدراسات في محاولة لتحديد مجمع صغير واحد مع بنية معروفة كممثل من عشب كامل أو صيغة العشبية، لا يمكن اعتبار أي فعالية الدوائية أو آليات يعادل 1 ، 2 . في حين أن البصمات تمكن من تحليل مكونات الصيغ العشبية المعقدة، وبعض المكونات لا تزال غير تحليلها بشكل واضح، مما يؤدي إلى تحدي عند الجمع بين جميع مقتطفات للدراسة 3 . التفاعلات من العديد من المكونات / مقتطفات توسط الآثار العلاجية للأدوية العشبية. للحفاظ على هذه الميزة، استخراج التقليدية شكل ديكوكت أيون-لا يزال يستخدم على نطاق واسع في العيادة. منذ إجراء استخراج له تأثير كبير على فعالية العلاجية، وبروتوكول قياسي من مغلي المياه التقليدية ضروري، وخاصة بالنسبة للدراسات في الجسم الحي 4 ، 5 .
من ناحية أخرى، عند استكشاف الآليات الدوائية، وإدارة الاستغناء العشبية أثناء الدراسات في المختبر أو خارج الجسم الحي هو أيضا تحديا. وقد اقترح تاشينو في عام 1988 مفهوم المصل الذي يحتوي على المخدرات 6 . ومنذ ذلك الحين، طبقت أعداد متزايدة من الباحثين على الأدوية العشبية 7 و 8 و 9 . على الرغم من أن طريقة المصل يحتوي على المخدرات لديها بعض القيود، مثل تأثير بعض مكونات المصل، فإنه لا يزال يعتبر أن الطريقة التي تحاكي عن كثب الظروف الفسيولوجية.
"jove_content"> تم تطوير مغلي إير-زيان في أوائل 1950s لتخفيف أعراض انقطاع الطمث 10 ، 11 ، 12 ، 13 . كما تم تطبيقه على علاج فقر الدم اللاتنسجي 14 ، هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث 15 ، 16 ، 17 ، سابق لأوانه فشل المبيض 18 ، سرطان الثدي 19 ، سرطان المبيض 20 ، وتأخر سن البلوغ 21 . هنا، نقدم بروتوكولات مفصلة لإعداد كل من مغلي إشيان (إكسد) والمصل الذي يحتوي على المخدرات. بالإضافة إلى ذلك، نحن تصف تطبيق إكسد و إكسد التي تحتوي على المصل إلى نماذج هشاشة العظام الفئران الفئران.
ويتكون إكسد من 9 غرام كل من كوركوليغو أورشيوادس غايرتن ، هيربا إبيمديي ، الرقم الأساسي مورينداي المخزنية ، والجذر انجليكا سينينسيس و 6 غرام كل من اللحاء فيلودندري و ريزوما أنيمارهيني لكل مريض بالغ يوميا. الجرعة المكافئة للفأرة هي 0.1418 إكسد / كغ / يوم استنادا إلى المعادلة التالية 22 : دب = دا * رب / را * (وا / وب) 1/3 . دا و دب يشير إلى الجرعة لكل وزن الجسم (ملغ / كلغ) من الإنسان والفأر، على التوالي. يتم استبدال الجرعة، في ملغ / كغ، بعدد إكسد / كغ. ويمثل را و رب عامل الجسم البشري وعامل جسم الفأر، على التوالي، والتي تتناسب مع (مساحة سطح الجسم (م 2 ) / وزن الجسم (كغ)) 2/3 (انظر الجدول 1 ). وا و وب تشير إلى وزن الجسم (كلغ) من الإنسان والفأر، على التوالي.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
بروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية رعاية الحيوان من جامعة شنغهاي للطب الصيني التقليدي، وهي معتمدة من قبل التجربة الحيوانية لجنة الأخلاقيات الحيوانية شنغهاي.
1 - البروتوكول الأول: إعداد إكسد
2. البروتوكول الثاني: إعداد المصل المحتوي على إكسد
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تأثير إكسد على كثافة العظام من الفئران أوفكس
يظهر هيماتوكسيلين ويوزين (H & E) تلطيخ القسم الفقرات القطنية زيادة ترابيك العظام بعد العلاج إكسد في الجسم الحي ( الشكل 1A ، اللوحة اليمنى) مقارنة مع تلك الموجودة في مجموعة أوفكس ( الشكل 1A ، اللوحة اليسرى). ويبين الشكل 1B الصور μCT ممثل القطني ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في السنوات الأخيرة، تم إيلاء المزيد من الاهتمام للأدوية العشبية، وهو نوع واحد من الطب البديل الذي تم تطبيقه في الإعداد السريري في العالم الشرقي لآلاف السنين. مختلفة من "مقعد إلى السرير" نمط الطب الحديث، والأدوية العشبية التقليدية تتطلب أولا "السرير إلى مقاعد البدلاء" نمط لشرح آلياتها. ويمكن أن يتبع ذلك التحقق من صحة أجريت في مرحلة مقاعد البدلاء ومعالجة لتطوير الأدوية المحسنة حديثا. حتى الآن، هناك العديد من أساليب الاستخراج التي تم الإبلاغ عنها إلى المكونات النش...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ويعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.
وأيد هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81573992). نشكر إميلي K. لو وكاثلين دينابولي لمساعدتهم تحرير اللغة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Curculigo orchioides Gaertn (9 & thinsp; ز) ، Herbaa Epimedii (9 & thinsp ؛ ز) ، Radix Morindae Officinalis (9 & thinsp ؛ ز) ، Radix Angelicae Sinensis (9 & thinsp ؛ ز) ، Cortex Phellodendri (6 & thinsp ؛ ز) ، و Rhizoma Anemarrhenae (6 & thinsp ؛ ز) | Kang-qiao Chinese Medicine Yinpian Co. Ltd (شنغهاي ، CN) | 160922 | مكونات EXD |
| ورق ترشيح | GElifesciences | 99-103-952 | مرشح مغلي EXD قبل التركيز |
| التحكم في البصمة (ICR) الفئران | مركز مختبر شنغهاي | SCXK 2007-0005 | دراسة في الجسم الحي |
| Sprague Dawley الفئران مركز | شنغهاي للحيوانات | SCXK 2007-0005 | تحضير المصل المحتوي على EXD |
| مرشح حقنة | Millipore | SLGP033RB | 0.22 & micro; إبر |
| التزقيم م (10 مل) قسم | المبيعات التجارية في شنغهاي BO Ge | 59104274 | إدارة الكيتامين EXD |
| (80 مجم / كجم) ؛ | شركة فوجيان جوتيان فارما المحدودة | H35020148 | التخدير |
| زيلازين (10 مجم / كجم) | شركة Sunway Pharma Co. Ltd | CB07591 | Anesthesia |
| Dulbecco تعديل النسر s متوسط Dulbecco (DMEM) متوسط زراعة | Gibco | 12800-116 | DMEM مع 2 ملي مولار L-glutamine وبدون ريبونوكليوسيدات والريبونوكليوتيدات |
| Streptomycin | Sigma | 1277 | 100 & micro; جم / مل |
| البنسلين | سيجما | 4687 | 100 & مايكرو ؛ جم / مل |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.