ويرد بروتوكول لإنشاء نموذج الفأر المهندسة وراثيا من سرطان القولون والمستقيم عن طريق العدوى الغدة اللحية القطاعية وترصدها عن طريق التنظير القولون عالية الدقة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج الفأر المهندسة وراثيا لسرطان القولون والمستقيم المتفرقة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
على الرغم من مزايا سهولة تطبيق وفعالية من حيث التكلفة، ونماذج الماوس سرطان القولون والمستقيم على أساس حقن الخلايا السرطانية لها قيود شديدة ولا محاكاة بدقة علم الأورام الورم ونشر الخلايا السرطانية. وقد أدخلت نماذج الفئران المهندسة وراثيا للتغلب على هذه القيود؛ ومع ذلك، فإن مثل هذه النماذج تتطلب من الناحية التقنية، وخاصة في الأجهزة الكبيرة مثل القولون الذي هو المطلوب فقط ورم واحد.
ونتيجة لذلك، تم تطوير نموذج مناعة، وراثيا نموذج الفأر من سرطان القولون والمستقيم الذي يتطور الأورام موحدة للغاية، ويمكن استخدامها لدراسات البيولوجيا الورم وكذلك التجارب العلاجية. يبدأ تطور الورم عن طريق العدوى الجراحية، القطاعية من القولون البعيدة مع فيروس الغدة كري في الفئران متحولة مشروط مجمع. الأورام يمكن الكشف عنها بسهولة ورصدها عن طريق تنظير القولون. نحن هنا وصف تقنية الجراحية من العدوى الغدة القطعي منوالقولون، ومراقبة الورم عن طريق تنظير القولون عالية الدقة وتقديم أورام القولون والمستقيم الناتجة.
المقدمة
لا يزال سرطان القولون والمستقيم (كرك) أحد الأسباب الرئيسية للوفاة المرتبطة بالسرطان في البلدان الغربية. 1 في حين أن تشخيص المرضى الذين يعانون من مرض المرحلة المبكرة هو جيد، يتم تشخيص العديد من الأورام في مراحل لاحقة والتي، على الرغم من العديد من خيارات العلاج، والتشخيص محدودة. 2 ، 3 ، 4 ، 5
وتستند معظم نماذج الماوس الحالية من كرك على زرع الخلايا السرطانية المستمدة من خطوط الخلايا أو أورام المريض في الفئران عوز المناعة. 6 ، 7 ، 8 هذا يؤدي إلى المحلية، واعتمادا على موقع الحقن والخلايا السرطانية المستخدمة للحقن، وأورام النقيلي في بعض الأحيان. 9 ، 10 ومع ذلك، فإن نماذج طعم أجنبي الناتجة لها ماجوr. يجب أن تنشأ في الفئران عوز المناعة، وبالتالي القضاء على التفاعل المعقد بين الورم والجهاز المناعي المضيف. وبالإضافة إلى ذلك، كما هو مشتق الورم سدى من الخلايا المضيفة، والتفاعل بين حمة الورم البشري وسدى الفئران هو عيب، وبالتالي لا تمثل المرض. هذه العيوب يمكن تجنبها من خلال استخدام خطوط الخلايا الفئران للحقن. ومع ذلك، تتوفر سوى عدد قليل من خطوط الخلايا كرك الفئران، ومثل معظم خطوط الخلايا البشرية كرك المتاحة، هي أحادية النسيلة ونابلية للغاية. 11 وباختصار، فإن معظم النماذج المتاحة حاليا الماوس كرك هي اصطناعية للغاية وليس ممثلا تماما للمرض البشري.
نماذج الفئران المهندسة وراثيا (جيمس) من كرك يمكن تجنب هذه العيوب لأنها تتميز أورام الماوس الحقيقية التي يتم إنشاؤها عن طريق تحريض الطفرات الرئيسية من كرك في القولون. 12 ، 13 ،14 ويمكن تحقيق ذلك عن طريق تفعيل الطفرات الجرثومية المشروطة (فلوكسد) من قبل ريكومبيناس كري داخل الغشاء المخاطي القولون والمستقيم. في حين أن في جيمس العديد من الكيانات الورم الأخرى يتم استخدام التعبير جرماني (محرض) كري مدفوعة من قبل المروجين الأنسجة محددة، لا يمكن استخدام جرثومة جرثومية كري في القولون لأن هذا يؤدي إلى عدد كبير من الأورام في جميع أنحاء القولون مما تسبب في وفاة حمولة ورم حميد في في سن مبكرة جدا. لذلك، في النموذج الموصوف هنا يستخدم ناقلات الغدة الفرقية التعبير عن كري لتصيب مقطع القولون القصير. وهذا يؤدي إلى تحريض الأورام داخل هذا الجزء من الغشاء المخاطي في نقطة زمنية يحددها المحقق، مما أدى إلى أورام في نهاية المطاف تتقدم إلى سرطان الغازية والنقالي. الأورام هي أورام الفأر الحقيقية، وتنمو في المكروية سليمة، وبالتالي فهي قادرة على محاكاة كامل من أونكوجينيسيس القولون والمستقيم بما في ذلك التفاعل ورم المضيف والتسلسل النقيلي. هذا النموذج هووبالتالي منصة جذابة لدراسة بيولوجيا السرطان والتجارب العلاجية قبل السريرية.
العيب الرئيسي لنماذج الفئران المهندسة وراثيا لاتفاقية حقوق الطفل هو تعقيدها التقني. التسليم المحلي كري باستخدام المستقيم الشرج الغدة الشرجية في الحقن الشرجية في الفئران التي تحمل الأليلات أبك فلوكسد وصفت من قبل؛ ومع ذلك، فإن حدوث وتعدد وموقع الأورام المعوية يمكن أن يكون متغير للغاية مع هذه التقنية. 15 لذلك، تم تطوير تقنية الحد من العدوى الغدة كري عن طريق لقط الجراحي للجزء التي سيتم تحريضها. 13 لقد قمنا بتعديل هذا الإجراء من أجل تحسين رفاه الحيوان، فضلا عن خفض معدل الوفيات وعدد الأورام الناتجة. مع هذا البروتوكول، يجب أن تكون جميع المختبرات مع خبرة في جراحة القوارض الصغيرة قادرة على إنتاج نموذج وإنتاج الأورام التي هي استنساخه للغاية ويمكن الوصول إليها بسهولة لتنظير القولون. اعتمادا على م الشرطيأوتواتيونس المستخدمة ل أورام، يمكن ملاحظة كامل الطيف من الورم الحميد، سرطان الغازية والانبثاث. كما تقع الأورام في القولون البعيدة، والتقييم بالمنظار التسلسلي هو ممكن بسهولة في هذا النموذج.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم استعراض التجارب الحيوانية المقدمة هنا بشكل مستقل واعتمادها من قبل لجنة رعاية الحيوان واستخدام الحكومة المؤسسية وتم إجراؤها وفقا للاتحاد الاتحادات المخبرية للعلوم الحيوانية (فيلاسا) المبادئ التوجيهية. وقد اتخذت جميع التدابير الممكنة لتقليل المعاناة بما في ذلك التخدير وتسكين أو، إذا لزم الأمر، القتل الرحيم المبكر.
1. المحلية الورم الحث عن طريق الجراحية العدوى الغدة كري
- إعداد الحيوانات لعملية جراحية
ملاحظة: تقريبا أي طفرة مشروطة ("فلوكسد") يمكن أن تحدث عن طريق الطريقة الموصوفة هنا. ينصح باستخدام الطفرات في الجينات ذات الصلة في سرطان القولون والمستقيم مثل أبك، كراس أو Tp53. كفاءة إعادة التركيب كري تعتمد على حجم البناء ليتم استئصالها. يتم استئصال متواليات فلوكسيد كبيرة بشكل أقل كفاءة. وينبغي تأكيد إعادة التركيب من جميع الأليلات في الأورام عن طريق الكمبيوترR.- لتطوير أورام القولون والمستقيم، استخدم الصليب من الأليلات الشرطية التالية لنموذج أساسي من كرك (عدد قاعدة بيانات مجي بين قوسين):
أبك tm2Rak (مجي: 3688435) 16
كراس tm4Tyj (مجي: 2429948) 17
Tp53 tm2Tyj (مجي: 3039263) 18 - إذا مطلوب أليل مراسل مضان (على سبيل المثال ، للكشف عن ميكروميتاستاسيس)، استخدم الأليل التالية:
غ (روزا) 26Sor tm6 (كاغ-ZsGreen1) هز (مجي: 3809522) 19
ملاحظة: تتوفر جميع السلالات المذكورة أعلاه عبر نسي نسيب مستودع أو مختبر جاكسون. لا يلزم الصيام كما يمكن مسح جميع البراز المتبقية قبل العدوى الفيروسية. الصيام قبل الجراحة يؤدي إلى ارتفاع معدل الوفيات المحيطة بالجراحة ويشكل ضغوطا هائلة للقوارض الصغيرة. - استخدام سيفوفلوران في 3 - 3.5 فول٪ للتخدير العام. فقدان tانه اصبع القدم منعكس قرصة يشير التخدير كافية.
- قبل شق الأول، وحقن 0.05 ملغ / كغ من البوبرينورفين تحت الجلد.
- تغطية عيون الماوس تخدير مع مرهم العيون لتجنب تجفيف القرنية.
- ضع الماوس في موقف ضعيف على طاولة صغيرة. استخدام الأشرطة اللاصقة غير الصدمة لكبح جماح الماوس.
- حلاقة البطن مع ماكينة حلاقة كهربائية (كريم مزيل الشعر يمكن استخدامها بدلا من ذلك) وتطهير مع مسحات الكحول أو اليود. استخدام وقت الاتصال الموصى به من قبل الشركة المصنعة.
- تغطية الحقل الجراحي مع الستائر المعقمة.
ملاحظة: استخدام المضادات الحيوية المحيطة بالجراحة هو اختياري وتخضع للمبادئ التوجيهية المؤسسية. - استخدام العقيمة استخدام واحد أو أدوات معقمة لجميع العمليات الجراحية.
- لتطوير أورام القولون والمستقيم، استخدم الصليب من الأليلات الشرطية التالية لنموذج أساسي من كرك (عدد قاعدة بيانات مجي بين قوسين):
- البطن في منتصف الخط والتعرض للقولون
- استخدام مقص (المباضع يمكن استخدامها بدلا من ذلك) لجعل شق خط الوسط(~ 15 ملم) من الجلد على أسفل البطن.
- التقاط البطن الجهاز العضلي مع ملقط و شق بعناية مع مقص، وبالتالي فتح تجويف البطن.
- تحديد القولون البعيدة، لمسة فقط مع ملقط أتروماتيك. المشبك القولون مع المشبك الدقيق (على سبيل المثال ، المشبك الأوعية الدموية مايكرو سيريفين) حوالي 15 ملم القريبة من فتحة الشرج.
ملاحظة: إعطاء اهتمام خاص إلى الضعف من القولون في جميع الأوقات. انثقاب يؤدي حتما إلى التهاب الصفاق والإنتان ويتطلب القتل الرحيم للحيوان.
- عدوى القولون القطاعية مع فيروس أدينو-كري
- إدراج أنبوب تفلون مرنة عبر ترانسانالي وتدفع بعناية حتى تصل إلى انسداد التجويف التي حققتها المشبك وضعت سابقا في 15 ملم من حافة الشرج. لا تستخدم القوة الزائدة لأن هذا قد يؤدي إلى ثقب.
- قنية أنبوب مع قنية 30G، وربط حقنة القياسية 1 مل وطرد كولوn مع محلول ملحي عادي من أجل إخلاء البراز المتبقية. وهذا قد يتطلب عدة مل من المياه المالحة.
- مرة واحدة القولون البعيدة فارغة إزالة الأنبوب واستبدالها مع أنبوب تفلون جديدة ومرة أخرى وضعه مباشرة البعيدة إلى المشبك كما هو موضح أعلاه.
- تطويق القولون مع المشبك الثاني ~ 3 مم البعيدة إلى المشبك الداني ( أي ، على أنبوب إدراجها، ~ 12 ملم من حافة الشرج)، مما أدى إلى قطعة معزولة 3 ملم لتكون مصابة.
ملاحظة: للانسداد البعيدة من الجزء وقد ثبت فوجارتي مقاطع الشريان التاجي الأنسب كما هي المطاط، مما يؤدي إلى انسداد ضيق من القولون على الرغم من أنبوب داخل اللمعة بين فروع المشبك. - استخدام حقنة ثانية (معيار 1 مل مع قنية 30G) لحقن بعناية 50 - 80 ميكرولتر من 0.25٪ التربسين إدتا في قطاع القولون فرضت واحتضان لمدة 10 دقيقة. ترك قنية والمحاقن تعلق على أنبوب تفلون لمنع السائل من تسرب الظهر.
ملاحظة: يجب تضخيم القولون لتفتيت حاجز المخاطية والوصول إلى الخلايا الجذعية سرداب، ولكن ليس كثيرا تضخم لتجنب انثقاب من شريحة مثبتة. - أولا إزالة المشبك البعيدة، ومن ثم أنبوب التربسين.
- مسح القولون البعيدة مع ~ 500 ميكرولتر من المياه المالحة العادية لإزالة التربسين المتبقية.
- إدراج أنبوب تفلون جديد، ووضع المشبك البعيدة مرة أخرى في مكان وتضخيم الجزء القولون مع 50 - 80 ميكرولتر من حل الغدة الفيروسة (10 11 وحدة تشكيل لوحة (بفو) / مل في الفوسفات مخزنة المالحة) واحتضان لمدة 30 دقيقة ( الشكل 2A ).
ملاحظة: لا تسرب الحل الفيروسي كما الاتصال مع الغدة كري قد يؤدي إلى تطور الورم في أي نسيج من الفئران متحولة مشروط. - إزالة المشابك والأنبوب.
- إغلاق البطن والانتعاش بعد العملية الجراحية
- إغلاق جدار البطن مع 6-0 بسرعة امتصاص تشغيل سوتوريس (على سبيل المثال ، بوليديوكسانون (بدس)).
- إغلاق الجلد مع مقاطع الجرح الجراحية.
- ضع الماوس على وسادة التدفئة تعيين إلى 38 درجة مئوية حتى تعافى تماما من التخدير.
- إدارة بلعة أخرى من 0.05 ملغ / كغ البوبرينورفين إب 12 ساعة بعد الجراحة، تليها البوبرينورفين إضافية كل 12 ساعة إذا لزم الأمر.
- مراقبة الفئران مرة واحدة على الأقل يوميا لعلامات الشدة بسبب نمو الورم.
2. تنظير القولون
ملاحظة: اعتمادا على الطفرات الشرطية المستخدمة، عدوى الفيروسة الغدانية يؤدي إلى أورام مرئية بالمنظار في غضون 2-4 أسابيع. لذلك، إجراء أول تنظير القولون بعد العملية الجراحية 2 أسابيع بعد الحث الغدانية وتكرار كل 2 أسابيع. ويوصى نظام متاح تجاريا للتنظير القولون الفئران. 20
- إعداد الحيوانات لتنظير القولون
ملاحظة: لا صيام هو ريكيرأد. وعادة ما تكون البراز المتبقية بشكل جيد في القولون البعيدة ويمكن دفعها وراء الورم أثناء تنظير القولون، مما يجعل عملية المجهدة من الصيام المتكررة لا لزوم لها.- استخدام سيفوفلوران في 3 - 3.5 فول٪ للتخدير العام. فقدان المنعكس اصبع القدم قرصة يشير التخدير كافية.
- تغطية عيون الفئران تخدير مع مرهم العيون لتجنب جفاف القرنية.
- كبح الفئران في وضع ضعيف على طاولة صغيرة.
- تنظير القولون
- إدراج نطاق (قطر 1.9 ملم؛ طول 10 سم) في القناة المعوية من خلال فتحة الشرج وبقوة نفخ الهواء تحت التحكم البصري لتوزيع القولون. لا تضخ المزيد من الهواء مما هو مطلوب للفحص.
ملاحظة: ل نفخ الهواء، مضخة الهواء المضادة للضباب من نظام تنظير القولون يمكن استخدامها. إذا لم تتوفر مضخة الهواء المضاد للضباب، يمكن استخدام أي مضخة هواء أخرى ذات إعدادات ضغط منخفضة جدا، أو قبل ذلكسوريزد الهواء مع صمام تخفيف الضغط الحساسة. ثاني أكسيد الكربون (كو 2 ) يؤدي بسهولة إلى الحماض في القوارض الصغيرة، وبالتالي يجب تجنبها. - دفع بعناية نطاق إلى الأمام حتى يمكن التعرف على الآفة المخاطية في القولون البعيدة ( الشكل 1A - 1D ).
- حفظ الصور بالمنظار لتقييم لاحق. وقد تم وصف نظام التسجيل بالمنظار للأورام داخل اللمعة من قبل. 20
- إزالة بعناية نطاق ووضع الماوس على وسادة التدفئة تعيين إلى 38 درجة مئوية حتى تعافى تماما من التخدير.
- إدراج نطاق (قطر 1.9 ملم؛ طول 10 سم) في القناة المعوية من خلال فتحة الشرج وبقوة نفخ الهواء تحت التحكم البصري لتوزيع القولون. لا تضخ المزيد من الهواء مما هو مطلوب للفحص.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
إذا أجريت بشكل كاف،> 85٪ من الحيوانات تطوير الأورام. الوفيات من هنا قدمت الإجراء الجراحي هو <5٪، والوفيات من تنظير القولون يكاد يكون غير موجود. في معظم الفئران، يتم الكشف عن آفة واحدة. في حوالي 30٪ 2 - 3 يمكن الكشف عن الأورام الصغيرة التي عادة فتيل إلى ورم واحد في غضون 2-3 أسابيع بعد تحريض الورم.
النمط الظاهري والسلوك البيولوجي للأورام الناتج...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في حين أنها سهلة عموما لتوليد والحفاظ على، الكلاسيكية نماذج الماوس كرك على أساس حقن خط الخلية هي اصطناعية وغير قادرة على تلخيص تماما المرض البشري. ونتيجة لذلك، وضعت جيمس. كان أول جيم جيم الماوس أبك مين ، الذي يؤوي طفرة خالية متخالف في الجين أبك، وبالتالي محاكاة المرض وراثي الإنسان داء السلائل الغدية العائلي (فاب). 21 ومع ذلك، أبك مين الفئران تتطور دائما الأورام المعوية متعددة لا تقتصر على القولون. أيضا، والوقت والمكان المحدد لتشكيل الو...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
ويكرس هذا العمل لذكرى البروفسور موريتز كوخ.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| <قوية > الكواشف / المواد الاستهلاكية < / قوية> | |||
| Dulbecco's Phosphate Buffered Saline | Life Technologies GmbH | 14190169 | |
| Trypsin-EDTA (0.25٪ ، فينول أحمر) Life | Technologies GmbH | 25200072 | |
| محلول ملحي عادي 0.9٪ (E154) | Serumwerk Bernburg AG | 10013 | |
| Aqua ad injectabilia | B. Braun Melsungen AG | 235144 | |
| Ad5CMV-Cre (الفيروس الغدي ، c = 2E + 11 PFU / مل) | ناقل نقل الجينات الأساسية جامعة أيوا | ||
| 15 مل ، 50 مل أنابيب الطرد المركزي | Greiner Bio-One GmbH | 188271 / 227270 | |
| أنابيب Eppendorf 1.5 مل / 2 مل | Sarstedt AG & Co. | 72،695،400 | |
| طبق بتري PS 100/15 مم (معقم ، نوكلون) | حقنة فيشر Scientific GmbH | 10508921 / NUNC150350 | |
| 1 مل (بدون حجم ميت) - Injekt-F SOLO | Braun / neoLab | 194291661 | |
| إبرة حقن 30G | BECTON DICKINSON | 304000 | |
| Name | Company | <قوي>رقم الكتالوج | تعليقات |
| تسكين / تخدير | |||
| Sevoflurane (Sevoflurane AbbVie) | AbbVie Germany GmbH & Co. KG-Medical | ||
| oxygen | Air Liquide Medical GmbH-Buprenorphine | ||
| (Temgesic) | Indivior Eu Ltd. | - | |
| Bepanthen - مرهم العيون | Bayer Vital GmbH | 10047757 | |
| التخدير البحثية على الطاولة x / O2 Flush w / Sevoflurane Vaporizer | Parkland Scientific | V3000PS / PK | |
| strong>Name < / strong > | Company < / strong > | Catalog Number < / strong > | Comments < / strong> |
| <قوي > معدات جراحية < / قوي > | |||
| مسحات السليلوز | Lohmann & Rauscher Deutschland | 13356 | |
| حقنة الأنسولين EMG 1 مل (مع قنية 30 جرام) | B. Braun Melsungen AG | 9161627S | |
| أنابيب التجويف الدقيقة (التجويف: 0.28 مم / القطر: 0.61 مم) | Smiths Medical Deutschland | 800/100/100 | |
| Micro-Adson Fallps | أدوات العلوم الدقيقة | 11018-12 | |
| مقص القزحية - أدوات العلوم الدقيقة ToughCut | 14058-11 | ||
| Olsen-Hegar حامل إبرة | أدوات العلوم | الدقيقة 12002-12 | |
| مجموعة AutoClip | أدوات العلوم الدقيقة | 12020-00 | |
| PDS Z1012H 6/0 C1 (خياطة جراحية) | جونسون آند أمبير Johnson Medical GmbH | Z1012H | |
| Curved Micro Serrefine Vascular Clamp | أدوات العلوم الدقيقة | 18055-05 | |
| Fogarty Spring Clips | Edwards | CDSAFE 6 | |
| Hot Plate 062 | Labotect | 13854 | |
| Isis - ماكينة حلاقة الشعر | Aesculap - Braun | - | |
| Name | الشركة | <قوي>رقم الكتالوج | <قوي>تعليقات |
| <قوي>تنظير القولون | |||
| نافورة الضوء البارد زينون 175 SCB | كارل شتورتس | 20132101-1 | كارل شتورتز نظام ماينز |
| كابل إضاءة الألياف | كارل شتورتز | 69495NL | كارل شتورتز نظام كولوفيو ماينز |
| TRICAM رأس كاميرا ثلاثي الشرائح | كارل شتورتس | 20221030 | كارل شتورتس نظام كولوفيو ماينز |
| TRICAM SLII وحدة التحكم في الكاميرا | كارل شتورز | 20223011-1 | كارل شتورتس كولوفيو سستمر ماينز |
| شاشة مسطحة 15 بوصة EndoVue | Karl Storz | 9415NN | Karl Storz Coloview System Mainz |
| تلسكوب هوبكنز المستقيم إلى الأمام قطر 1.9 مم ؛ الطول 10 سم قابل للتعقيم نقل ضوء الألياف البصرية مدمج كارل | شتورز | 64301AA | |
| غمد الحماية والفحص | كارل شتورز | 61029C |
المراجع
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics, 2016. CA Cancer J Clin. 66 (1), 7-30 (2016).
- Weitz, J., et al. Colorectal cancer. Lancet. 365 (9454), 153-165 (2005).
- Bork, U., et al. Prognostic relevance of minimal residual disease in colorectal cancer. World J Gastroenterol. 20 (30), 10296-10304 (2014).
- Steinert, G., Schölch, S., Koch, M., Weitz, J. Biology and significance of circulating and disseminated tumour cells in colorectal cancer. Langenbecks Arch Surg. 397 (4), 535-542 (2012).
- García, S. A., et al. LDB1 overexpression is a negative prognostic factor in colorectal cancer. Oncotarget. 7 (51), 84258-84270 (2016).
- van Noort, V., et al. Novel Drug Candidates for the Treatment of Metastatic Colorectal Cancer through Global Inverse Gene-Expression Profiling. Cancer Res. 74 (20), 5690-5699 (2014).
- Nanduri, L. K., García, S., Weitz, J., Schölch, S. Mouse Models of Colorectal Cancer-Derived Circulating Tumor Cells. Med Chem (Los Angeles). 6 (7), 497-499 (2016).
- Taketo, M. M., Edelmann, W. Mouse models of colon cancer. Gastroenterology. 136 (3), 780-798 (2009).
- Schölch, S., et al. Circulating tumor cells exhibit stem cell characteristics in an orthotopic mouse model of colorectal cancer. Oncotarget. 7 (19), 27232-27242 (2016).
- Schölch, S., et al. Radiotherapy combined with TLR7/8 activation induces strong immune responses against gastrointestinal tumors. Oncotarget. 6 (7), 4663-4676 (2015).
- Corbett, T. H., Griswold, D. P., Roberts, B. J., Peckham, J. C., Schabel, F. M. Jr Tumor induction relationships in development of transplantable cancers of the colon in mice for chemotherapy assays, with a note on carcinogen structure. Cancer Res. 35 (9), 2434-2439 (1975).
- Roper, J., Hung, K. E. Priceless GEMMs: genetically engineered mouse models for colorectal cancer drug development. Trends Pharmacol Sci. 33 (8), 449-455 (2012).
- Hung, K. E., et al. Development of a mouse model for sporadic and metastatic colon tumors and its use in assessing drug treatment. Proc Natl Acad Sci USA. 107 (4), 1565-1570 (2010).
- Sharpless, N. E., Depinho, R. A. The mighty mouse: genetically engineered mouse models in cancer drug development. Nat Rev Drug Discov. 5 (9), 741-754 (2006).
- Shibata, H., et al. Rapid colorectal adenoma formation initiated by conditional targeting of the Apc gene. Science. 278 (5335), 120-123 (1997).
- Kuraguchi, M., et al. Adenomatous polyposis coli (APC) is required for normal development of skin and thymus. PLoS Genet. 2 (9), e146(2006).
- Jackson, E. L., et al. Analysis of lung tumor initiation and progression using conditional expression of oncogenic K-ras. Genes Dev. 15 (24), 3243-3248 (2001).
- Olive, K. P., et al. Mutant p53 gain of function in two mouse models of Li-Fraumeni syndrome. Cell. 119 (6), 847-860 (2004).
- Madisen, L., et al. A robust and high-throughput Cre reporting and characterization system for the whole mouse brain. Nature Neurosci. 13 (1), 133-140 (2010).
- Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. High resolution colonoscopy in live mice. Nat Protoc. 1 (6), 2900-2904 (2006).
- Moser, A. R., Pitot, H. C., Dove, W. F. A dominant mutation that predisposes to multiple intestinal neoplasia in the mouse. Science. 247 (4940), 322-324 (1990).
- de Wind, N., Dekker, M., Berns, A., Radman, M., te Riele, H. Inactivation of the mouse Msh2 gene results in mismatch repair deficiency, methylation tolerance, hyperrecombination, and predisposition to cancer. Cell. 82 (2), 321-330 (1995).
- Reitmair, A. H., et al. Spontaneous intestinal carcinomas and skin neoplasms in Msh2-deficient mice. Cancer Res. 56 (16), 3842-3849 (1996).
- Ayala, J. E., et al. Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice. Dis Model Mech. 3 (9-10), 525-534 (2010).
- Jensen, T. L., Kiersgaard, M. K., Sørensen, D. B., Mikkelsen, L. F. Fasting of mice: a review. Lab Anim. 47 (4), 225-240 (2013).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
