ويعرض هذه المخطوطة أساليب لتحليل شكلي والتغييرات الخلوية داخل اللقمة الفك السفلي من القوارض.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
شكلي وطريقة التحليل الخلوي للقمة الفك السفلي مورين
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الصدغي (المفصل الفكي) لديها القدرة على التكيف مع المؤثرات الخارجية، وتحميل التغييرات يمكن أن يؤثر على موقف condyles، فضلا عن المكونات الهيكلية والخلوية الغضروف اللقمة الفك السفلي (MCC). ويصف هذه المخطوطة أساليب لتحليل هذه التغيرات وأسلوب لتغيير تحميل المفصل الفكي في الفئران (أي الضغط ثابت المفصل الفكي تحميل). التقييم الهيكلي المبين هنا هو اتباع نهج شكلي بسيط يستخدم برنامج ديجيميزير ويتم إجراؤها في الصور الشعاعية للعظام الصغيرة. وباﻹضافة إلى ذلك، تحليل الخلوية التغييرات مما يؤدي إلى تغييرات في التعبير الكولاجين، يعيد البناء العظام، وانقسام الخلية، ويرد وصف لتوزيع بروتيوغليكان في لجنة التنسيق الإداري. التحديد الكمي لهذه التغييرات في الأقسام النسيجي-عن طريق العد بكسل الفلورسنت إيجابية باستخدام صورة البرامج وقياس المسافة التعيين والملون المنطقة مع ديجيميزير-ويتجلى أيضا. الأساليب الموضحة هنا لا تقتصر على المفصل الفكي مورين، ولكن يمكن أن تستخدم في عظام إضافية من الحيوانات التجريبية الصغيرة، وفي مناطق أخرى من التحجر endochondral.
المقدمة
المفصل الفكي مشترك الحاملة فريد من نوعه يقع في منطقة الجمجمة ويتكون من فيبروكارتيلاجي. لجنة التنسيق الإداري المفصل الفكي ضروري لوظيفة مشتركة، بما في ذلك حركة الفك دون عوائق أثناء حديثة والمضغ، لكن عموما فإنه يتأثر بالأمراض التنكسية، بما في ذلك هشاشة العظام1. وقد المفصل الفكي القدرة على التكيف مع المؤثرات الخارجية وتحميل التغييرات، مما يؤدي إلى تغيرات هيكلية والخلوية للعناصر في لجنة التنسيق الإداري2،3،،من45. ويمكن تفسير الخصائص الحاملة من لجنة التنسيق الإداري بالتفاعلات بين مكوناته، بما في ذلك المياه، وشبكة الكولاجين، ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وافقت اللجنة على مؤسسات الرعاية الحيوانية من مركز الصحة في جامعة كونيتيكت جميع الإجراءات الحيوان.
1-تحميل المفصل الفكي ثابتة الضغط: الفم أجبرت مفتوحة
ملاحظة: استخدمت الفئران المعدلة وراثيا عمرها أربع الأسبوع إيواء الصحفيين الفلورسنت للكولاجين (Col2a1XCol10a1)، يرجى قدمها الدكتور ديفيد رو (جامعة كونيتيكت)، للتجارب الموصوفة في هذه المخطوطة (n = 8؛ 4 من الذكور و 4 من الإناث). يتم التعبير عن التحوير (الأزرق) Col2a1 السماوي في الخلايا في منطقة بريهايبرتروفيك من لجنة التنسيق الإداري، في حين Col10a1 الكرز الخلايا (أحمر) موجودة في منطقة الضخامي8 (الشكل 1). وقد تساوت الف....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
إحصاءات وصفية أجريت لدراسة توزيع القياسات شكلي (طول الفك السفلي، طول اللقمة، عرض اللقمة) والتحليل النسيجي. وقورنت النتائج بين مجموعة المحمل (أي، الفئران تعرض لتحميل ضاغطة مع الربيع التيتانيوم بيتا) والسيطرة على المجموعة (أي، مطابقة مكافحة الفئران التي لم تتلق أي إجراء). تحددها فروق معتد بها إحصائيا بين وسائل اختبار t مزاوج، وقيمة p من < يعتبر 0.05 يعتد به إحصائيا.
وأجريت قياسات شكلي، كما هو موضح في الخطوة 4، و .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ووصف هذه المخطوطة أساليب لقياس شكلي والتحليل الخلوي مورين condyles الفك السفلي و mandibles. يمكن أيضا استخدام القياسات شكلي الشعاعي لتحليل العظام الأخرى من الحيوانات التجريبية الصغيرة. وباﻹضافة إلى ذلك، تحليل الخلوية (خلية القياس الكمي وتعيين المسافة الغضروف) لا تقتصر على اللقمة الفك السفلي القوارض، ولكن يمكن استخدامها لتحديد حجم مقاطع نسيجية لانسجة عديدة.
النماذج المعدلة وراثيا الماوس معربا عن الصحفيين الفلورسنت أدوات ممتازة فهم التغيرات في التعبير الجيني بصريا. الطراز الماوس مراسل الفلورسنت .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
المؤلفين قد لا تضارب المصالح المالية.
شكر وتقدير
الكتاب يود أن يشكر الدكتور ديفيد رو يرجى توفير الفئران المحورة وراثيا وتشن لي لمساعدة النسيجي.
وأيد البحث عنها في هذا المنشور من المعهد الوطني لطب الأسنان والجمجمة البحثية "معاهد الصحة الوطنية في" إطار جائزة رقم K08DE025914، والرابطة الأمريكية لمؤسسة "تقويم الأسنان" إلى ياداف سوميت.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| نظام التصوير الشعاعي MX20 | Faxitron X-Ray LLC ؛ | ||
| Digimizer Image | MedCalc Software | ||
| Shandon Cryomatrix تضمين الراتنج | Thermo Scientific | 6769006 | |
| المجهر اليدوي Axio Imager Z1 | Carl Zeiss | 208562 | |
| فلتر بروتين الفلورسنت الأصفر - EYFP | Chroma Technology Corp | 49003 | |
| بروتين الفلورسنت السماوي - ECFP | Chroma Technology Corp | 49001 | |
| مرشح بروتين الفلورسنت الأحمر - Cy5 | Chroma Technology Corp | 49009 | |
| أسيتات الصوديوم اللامائية | Sigma-Aldrich | S2889 | |
| الصوديوم L-tartrate ثنائي القاعدة ثنائي الهيدرات | سيجما ألدريتش | 228729 | |
| نتريت الصوديوم | Sigma-Aldrich | 237213 | |
| ELF97 الركيزة | Thermo Fisher Scientific | E6600 | |
| ClickiT EdU Alexa Fluor 594 HCS kit | Life Technologies | C10339 | يشمل EdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridine) ؛ |
| DAPI (4',6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride) | Thermo Scientific | D1306 | |
| فوسفات الصوديوم ثنائي الأساس | Sigma-Aldrich | S3264 | |
| فوسفات الصوديوم أحادي القاعدة | سيجما ألدريتش | 71505 | |
| تولويدين بلو O & nbsp ؛ | سيجما ألدريتش | T3260 | |
| أدوبي فوتوشوب | أدوبي سيستمز إنكوربوريتد | ||
| أقراص ملحية مخزنة بالفوسفات (PBS) | Research Products International | P32080-100T | |
| CNA Beta III Archwire Ortho | Organizers، Inc. | ||
| GraphPad Prism | برنامج GraphPad ، Inc. |
المراجع
- LeResche, L. Epidemiology of Temporomandibular Disorders: Implications for the Investigation of Etiologic Factors. Crit Rev Oral Biol Med. 8 (3), 291-305 (1997).
- Chen, J., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
