Method Article

شكلي وطريقة التحليل الخلوي للقمة الفك السفلي مورين

DOI:

10.3791/55998

⸱

January 11th, 2018

 ,  ,  ,  , 
1Division of Orthodontics, University of Connecticut Health Center

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويعرض هذه المخطوطة أساليب لتحليل شكلي والتغييرات الخلوية داخل اللقمة الفك السفلي من القوارض.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الصدغي (المفصل الفكي) لديها القدرة على التكيف مع المؤثرات الخارجية، وتحميل التغييرات يمكن أن يؤثر على موقف condyles، فضلا عن المكونات الهيكلية والخلوية الغضروف اللقمة الفك السفلي (MCC). ويصف هذه المخطوطة أساليب لتحليل هذه التغيرات وأسلوب لتغيير تحميل المفصل الفكي في الفئران (أي الضغط ثابت المفصل الفكي تحميل). التقييم الهيكلي المبين هنا هو اتباع نهج شكلي بسيط يستخدم برنامج ديجيميزير ويتم إجراؤها في الصور الشعاعية للعظام الصغيرة. وباﻹضافة إلى ذلك، تحليل الخلوية التغييرات مما يؤدي إلى تغييرات في التعبير الكولاجين، يعيد البناء العظام، وانقسام الخلية، ويرد وصف لتوزيع بروتيوغليكان في لجنة التنسيق الإداري. التحديد الكمي لهذه التغييرات في الأقسام النسيجي-عن طريق العد بكسل الفلورسنت إيجابية باستخدام صورة البرامج وقياس المسافة التعيين والملون المنطقة مع ديجيميزير-ويتجلى أيضا. الأساليب الموضحة هنا لا تقتصر على المفصل الفكي مورين، ولكن يمكن أن تستخدم في عظام إضافية من الحيوانات التجريبية الصغيرة، وفي مناطق أخرى من التحجر endochondral.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المفصل الفكي مشترك الحاملة فريد من نوعه يقع في منطقة الجمجمة ويتكون من فيبروكارتيلاجي. لجنة التنسيق الإداري المفصل الفكي ضروري لوظيفة مشتركة، بما في ذلك حركة الفك دون عوائق أثناء حديثة والمضغ، لكن عموما فإنه يتأثر بالأمراض التنكسية، بما في ذلك هشاشة العظام1. وقد المفصل الفكي القدرة على التكيف مع المؤثرات الخارجية وتحميل التغييرات، مما يؤدي إلى تغيرات هيكلية والخلوية للعناصر في لجنة التنسيق الإداري2،3،،من45. ويمكن تفسير الخصائص الحاملة من لجنة التنسيق الإداري بالتفاعلات بين مكوناته، بما في ذلك المياه، وشبكة الكولاجين، ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وافقت اللجنة على مؤسسات الرعاية الحيوانية من مركز الصحة في جامعة كونيتيكت جميع الإجراءات الحيوان.

1-تحميل المفصل الفكي ثابتة الضغط: الفم أجبرت مفتوحة

ملاحظة: استخدمت الفئران المعدلة وراثيا عمرها أربع الأسبوع إيواء الصحفيين الفلورسنت للكولاجين (Col2a1XCol10a1)، يرجى قدمها الدكتور ديفيد رو (جامعة كونيتيكت)، للتجارب الموصوفة في هذه المخطوطة (n = 8؛ 4 من الذكور و 4 من الإناث). يتم التعبير عن التحوير (الأزرق) Col2a1 السماوي في الخلايا في منطقة بريهايبرتروفيك من لجنة التنسيق الإداري، في حين Col10a1 الكرز الخلايا (أحمر) موجودة في منطقة الضخامي8 (الشكل 1). وقد تساوت الف....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

إحصاءات وصفية أجريت لدراسة توزيع القياسات شكلي (طول الفك السفلي، طول اللقمة، عرض اللقمة) والتحليل النسيجي. وقورنت النتائج بين مجموعة المحمل (أي، الفئران تعرض لتحميل ضاغطة مع الربيع التيتانيوم بيتا) والسيطرة على المجموعة (أي، مطابقة مكافحة الفئران التي لم تتلق أي إجراء). تحددها فروق معتد بها إحصائيا بين وسائل اختبار t مزاوج، وقيمة p من < يعتبر 0.05 يعتد به إحصائيا.

وأجريت قياسات شكلي، كما هو موضح في الخطوة 4،.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ووصف هذه المخطوطة أساليب لقياس شكلي والتحليل الخلوي مورين condyles الفك السفلي و mandibles. يمكن أيضا استخدام القياسات شكلي الشعاعي لتحليل العظام الأخرى من الحيوانات التجريبية الصغيرة. وباﻹضافة إلى ذلك، تحليل الخلوية (خلية القياس الكمي وتعيين المسافة الغضروف) لا تقتصر على اللقمة الفك السفلي القوارض، ولكن يمكن استخدامها لتحديد حجم مقاطع نسيجية لانسجة عديدة.

النماذج المعدلة وراثيا الماوس معربا عن الصحفيين الفلورسنت أدوات ممتازة فهم التغيرات في التعبير الجيني بصريا. الطراز الماوس مراسل الفلورسنت .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المؤلفين قد لا تضارب المصالح المالية.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب يود أن يشكر الدكتور ديفيد رو يرجى توفير الفئران المحورة وراثيا وتشن لي لمساعدة النسيجي.

وأيد البحث عنها في هذا المنشور من المعهد الوطني لطب الأسنان والجمجمة البحثية "معاهد الصحة الوطنية في" إطار جائزة رقم K08DE025914، والرابطة الأمريكية لمؤسسة "تقويم الأسنان" إلى ياداف سوميت.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
نظام التصوير الشعاعي MX20Faxitron X-Ray LLC   ؛
Digimizer Image MedCalc Software
Shandon Cryomatrix تضمين الراتنجThermo Scientific6769006
المجهر اليدوي Axio Imager Z1Carl Zeiss208562
فلتر بروتين الفلورسنت الأصفر - EYFPChroma Technology Corp49003
بروتين الفلورسنت السماوي - ECFPChroma Technology Corp49001
مرشح بروتين الفلورسنت الأحمر - Cy5Chroma Technology Corp49009
أسيتات الصوديوم اللامائيةSigma-AldrichS2889
الصوديوم L-tartrate ثنائي القاعدة ثنائي الهيدرات  سيجما ألدريتش228729
نتريت الصوديوم  Sigma-Aldrich237213
ELF97 الركيزةThermo Fisher ScientificE6600
ClickiT EdU Alexa Fluor 594 HCS kitLife TechnologiesC10339  يشمل EdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridine)   ؛
DAPI (4',6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)Thermo ScientificD1306
فوسفات الصوديوم ثنائي الأساس  Sigma-AldrichS3264
فوسفات الصوديوم أحادي القاعدة  سيجما ألدريتش71505
تولويدين بلو O & nbsp ؛سيجما ألدريتشT3260
أدوبي فوتوشوب  أدوبي سيستمز إنكوربوريتد
أقراص ملحية مخزنة بالفوسفات (PBS)Research Products InternationalP32080-100T
CNA Beta III Archwire OrthoOrganizers، Inc.
GraphPad Prism برنامج GraphPad ، Inc.
برنامج مرشح

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. LeResche, L. Epidemiology of Temporomandibular Disorders: Implications for the Investigation of Etiologic Factors. Crit Rev Oral Biol Med. 8 (3), 291-305 (1997).
  2. Chen, J., et al.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Mandibular Condyle AnalysisMorphometric MeasurementsHistological AnalysisCompressive TMJ LoadingCol10a1 ExpressionTRAP Activity QuantificationEDU StainingProteoglycan DistributionDigimizer SoftwareRadiograph Analysis

Related Articles