بيان الأخلاقيات: وافقت لجنة رعاية الحيوانات واستخدامها المؤسسية في جامعة ولاية ميسيسيبي على جميع تقنيات الالتقاط والتعامل والوسم وفقًا للبروتوكولات 04-068، 07-036، 10-033 و13-034.
1. إنشاء مواقع الاحتجاز، وتثبيت ونقل غزلان الذيل الأبيض البرية
- تحديد الممتلكات العامة والخاصة المشتركة في برنامج مساعدة إدارة الغزلان22 وإقامة ≥29 موقع اصطياد عبر ثلاث مناطق مصدرية في ولاية ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية.
- تحديد عدة مواقع اصطياد داخل كل منطقة مصدرية لضمان تغطية مدى التنوع الوراثي الموجود في تجمعات السكان الإقليمية.
- ملاحظة: تضمنت المناطق المصدرية هنا منطقة دلتا، التي تشكل ما يقرب من 17% من إجمالي مساحة الأراضي في ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية، وتعتبر منطقة تربة عالية الجودة، حيث يُعد الزراعة الاستخدام الأساسي للأرض23,24. تم اصطياد جميع الحيوانات المدروسة من هذه المنطقة ضمن نطاق انتشار O. v. virginianus25. وشملت المناطق الأخرى منطقة التربة الرملية الرقيقة (Thin Loess) (العلوية والسفلية معًا)، التي تشكل ما يقرب من 14% من إجمالي مساحة الأراضي في ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية، وتعتبر منطقة تربة متوسطة الجودة. تُعد الزراعة أيضًا الاستخدام الأساسي للأرض في منطقة التربة الرملية الرقيقة، وإن كانت أقل انتشارًا مقارنةً بمنطقة دلتا23,24. تم اصطياد جميع الحيوانات المدروسة من هذه المنطقة ضمن نطاق انتشار O. v. virginianus21. وأخيرًا، تشكل منطقة السهل الساحلي السفلي (LCP) ما يقرب من 22% من مساحة ميسيسيبي، وتُصنف كمنطقة تربة منخفضة الجودة. تتمثل الاستخدامات الأساسية للأرض في منطقة LCP في إنتاج الخشب الصنوبري وتربية الماشية23,24. كما تتداخل منطقة LCP مع التوزيع الجغرافي لـ O. v. osceola؛ حيث كانت أربع من السكان المصدرية الستة على بعد 21 كم من هذا التوزيع25. وقد وُصف هذا النوع الفرعي بأنه أصغر من O. v. virginianus26.

الشكل 1: التجمعات المصدرية. المناطق الطبوغرافية التي تم فيها اصطياد الإناث الحوامل والصغار في ولاية ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية. تم تعديل هذا الشكل من المراجع31. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
- اختر مواقع احتمالية للإمساك تفي بالمعايير التالية: خصائص الموائل التي تُسهّل حركة الغزلان، والقرب من الطرق للوصول إليها، وتوزيعها عبر منطقة الدراسة.
ملاحظة: يجب أن تتيح مواقع الإمساك إمكانية إخفاء فني الإمساك.
- استخدم مواقع الطُعم مع حوالي 10 كجم من الذرة المقشرة لجذب الغزلان وتشجيعها على الزيارة، وقيّم استخدامها بناءً على استهلاك الطُعم والغزلان التي تم تصويرها بكاميرات حساسة للحركة. انقل الطُعم إلى مواقع بديلة إذا لم تحضر الغزلان إلى مواقع الطُعم خلال 5-7 أيام.
- أثناء عمليات الإمساك، اجلس في مكان مُخبأ يُعرف بـ"المنصة".
- ضع المنصة على بعد حوالي 20 مترًا في اتجاه معاكس للرياح بالنسبة لموقع الطُعم، مع مراعاة اتجاه الرياح السائد بحيث يقل احتمال شم الغزلان لرائحة فني الإمساك.
ملاحظة: يُفضّل بشدة استخدام منصات مرتفعة، ويجب استخدام أحزمة الأمان. توجد عدة أنواع من المنصات تختلف حسب المورّد التجاري، وتختلف طريقة استخدامها حسب التفضيل الشخصي. على سبيل المثال، تتضمن منصة القفل المقفلة مقعدًا وسلّمًا مُثبّتًا على الشجرة باستخدام أحزمة. يمكن لفني الإمساك حمل منصات التسلق المتنقلة، مما يتيح له حرية أكبر في اختيار شجرة محددة عند الوصول إلى موقع الإمساك. تقتصر منصات التسلق المتنقلة على الاستخدام في الأشجار المستقيمة التي لا توجد فيها فروع عند الارتفاع المختار.
- استخدم بندقية رماية مع طلقة تليسكوبية سعة 3 سم³ لحقن خليط من تيليتامين هيدروكلوريد (4.4 مجم/كجم) وزيلازين هيدروكلوريد (2.2 مجم/كجم).
- خطّط لعمليات الإمساك بحيث تتوافق مع دورة النشاط الغسقية النموذجية للغزلان27. ابدأ كل محاولة إمساك قبل غروب الشمس بـ 2-3 ساعات.
- استمر في عمليات الإمساك لمدة 2-3 ساعات بعد غروب الشمس باستخدام نظارات الرؤية الليلية وليزر نقطة حمراء لتحديد مكان الإطلاق إذا لم يتم الإمساك بالغزلان خلال ساعات النهار.
- أطلق الطلقات على الغزلان عندما تكون في وضع الجنب وساكنة.
ملاحظة: يُستهدف الفخذ الخلفي للغزال لأنه يحتوي على أنسجة عضلية كبيرة ويقع بعيدًا عن القلب والرئتين.
- انتظر حوالي 15 دقيقة حتى تُشلّ الحيوانات المستهدفة (الظباء بعمر ستة أشهر من كلا الجنسين أو الإناث الحوامل) تمامًا قبل تحديدها باستخدام معدات التليسكوب الإرشادية.
- تأكّد من أن الحيوانات مُهدأة بالتحقق من استجابات العين (الرمش). ثم ضع مرهمًا عينيًا على العينين واربط عيني الغزال بغطاء لتقليل التوتر.
ملاحظة: فقدان تنظيم درجة الحرارة هو أحد عواقب التثبيت.
- استخدم م thermometer شرجي لتقييم درجة حرارة الجسم بعد الاستعادة. دفّئ الغزلان باستخدام بطانيات ساخنة إذا كانت درجة حرارة الحيوان أقل من 37.7 °C. برد الغزلان باستخدام أكياس ثلج إذا كانت درجة حرارة الحيوان أعلى من 40.0 °C.
- ضع الغزال في وضعية صدرية على نقالة على النمط العسكري وانقله من موقع الإمساك إلى مقطورة مغلقة.
- بعد وضع الغزال في المقطورة، اعكس تأثيرات زيلازين هيدروكلوريد باستخدام 0.125 مجم/كجم من يوهيمبين هيدروكلوريد28.
- انقل جميع الغزلان الممسوكة إلى المرفق المخصص للإيواء (مثل وحدة الغزلان التذكارية روستي دوكنز في جامعة ولاية ميسيسيبي؛ MSU Deer Unit)، واحتفظ بها منفصلة حسب المنطقة المصدرة.
2. المرافق المقيدة وممارسات رعاية الحيوانات البحثية العامة
ملاحظة: يتم تقسيم وحدة الغزلان في جامعة ولاية ميتشيغان إلى خمسة حظائر تتراوح مساحتها بين 0.4 و0.8 هكتار.
- غطِّ جميع جوانب كل قلم بالقماش الظليل ليكون بمثابة حاجز بصري وفيزيائي بين الأقلام. يساعد القماش الظليل في تقليل الإصابات ويوفر الظل خلال الأشهر الصيفية.
- ضع صندوقين مخبأين مرتفعين (1-2) في أحد طرفي كل حظيرة لتسهيل عمليات التخدير بالسهام أثناء جمع البيانات.
- ضع قِدَّين على شكل مغرة في طرفي كل حظيرة على حدة لتقليل التنافس على الطعام بين الغزلان. كما يجب توفير مغرة ماء في كل حظيرة.
- قدِّم للغزلان غذاءً عالي الجودة (كريات غذائية للغزلان تحتوي على 20% بروتين خام) حسب الرغبة.
ملاحظة: هنا، تضمنت العلفات الإضافية المتاحة داخل الحظائر (تريفوليوم سبب.والفيسكيوم (fescue)فستوكة (Festuca spp)إلى جانب الأعشاب والنباتات العشبية الطوعية.
- إذا كانت العلفيات متاحة، فاحتفظ بها داخل الحظائر باستخدام خليط من المبيدات الحشرية للسيطرة على الأعشاب العريضة الأوراق والأعشاب العشبية، مع استخدام معدلات الخلط المذكورة على البطاقات الإرشادية الخاصة بكل مبيد.
ملاحظة: من المرجح أن يلزم استخدام مرافق خارج الحرم الجامعي لإيواء الذكور بعمر 5.5 شهور فأكثر. وتتكون هذه المرافق من حظيرتين بمساحة 0.7 هيكتار لكل منهما في كل واحدة من ثلاث خواص، مع ممارسات تربية مشابهة لوحدة غزلان جامعة ولاية ميتشيغان (MSU Deer Unit).

الشكل 2: مواقع المرافق المسيرة. المنطقة التي أُجري فيها الدراسة حيث تقع المرافق الفرعية ووحدة الغزلان في جامعة ولاية ميسيسيبي (MSU). تشير المناطق المظللة إلى مقاطعات أوكتيبيها (A)، نوكسيبي (B)، أتالا (C)، سكوت (D)، وكوبيا (E)، في ولاية ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية. تم تعديل هذا الشكل من المراجع34. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
3. مكافحة الطفيليات والأمراض
- راقب الحيوانات البحثية بحثًا عن طفيليات الديدان المستديرة (Strongyloides spp) باستخدام طريقة الطفو البرازي مع قياس الطفيليات بوحدة البيوض لكل جرام (EPG).
- إذا كانت المستويات مرتفعة، قم بتوفير علاج مضاد للطفيليات عن طريق إعطاء علف محبب يحتوي على دواء فاتح للديدان (المادة الفعالة فينبندازول) بمعدل حوالي 0.77 كجم من العلف المحبب لكل 22.7 كجم من العلف خلال شهر مايو.
- إذا بقيت مستويات الطفيليات مرتفعة بعد العلاج الأولي، استخدم علاج الابتكاك بدواء الإيفرمكتين (5 مغ/مل)29، مخلوطًا بنسبة 2 مل/0.45 كجم، وقم بإعطائه للحيوانات بمعدل 0.45 كجم من العلف المعالج لكل 45.4 كجم من كتلة الحيوان.
ملاحظة: مرض الوبأ النزفي الوبائي هو مرض فيروسي قد يكون قاتلًا ينتشر عن طريق ذبابة صغيرة عاقة (Culicoides spp) خلال الأشهر الصيفية وفترة الخريف. إذا كان المرض موجودًا، قم برش منشأة البحث بمبيد حشري (مبيد حشري بنسبة 5% بحجم منخفض جدًا) 2-3 مرات أسبوعيًا من 1 يوليو إلى 1 أكتوبر لتقليل انتشار النواقل بين الحيوانات البحثية. قم برش هذا المبيد الحشري داخل كل حظيرة وحول محيط المنشأة قبل الغسق الرسمي بنحو 90 دقيقة باستخدام جهاز تبخير. تعتمد الطرق المفضلة للسيطرة على الطفيليات والأمراض على كل منشأة مسجنة بشكل فريد. ويجب استشارة الأطباء البيطريين خلال أي بحث على الحياة البرية المسجنة لضمان صحة وسلامة الحيوانات.
4. جمع البيانات

الشكل 3: جمع بيانات حول حديثي الولادة من الغزلان. قياس طول القدم الخلفية لغزال حديث الولادة في وحدة الغزلان التذكارية روستي دوكنز بجامعة ولاية ميسيسيبي في مقاطعة أوكتيبيها، ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
- ابحث يوميًا في المرفق المخصص للحيوانات الأسر خلال موسم الولادة عن صغار الغزلان.
- قم بوضع علامة فريدة على صغار الغزلان حديثي الولادة باستخدام وسوم بلاستيكية متوسطة الحجم تُثبت في الأذن باستخدام أداة تثبيت الوسوم، مع تطبيق مضاد حيوي على الطرف الذكري من الوسم لمنع حدوث عدوى محتملة. ضع الوسم في منتصف أذن الصغير تقريبًا.
- قيس كتلة الجسم (إلى أقرب 0.01 كجم) باستخدام ميزان رقمي معلق، وقيس طول القدم الخلفية والطول الكلي للجسم (إلى أقرب مم).
- اجمع عينات من الشعر وأرسلها إلى موقع بعيد لتحديد الأبوة (انظر جدول المواد).
ملاحظة: تم تحديد الأبوة باستخدام الحمض النووي بناءً على قاعدة بيانات خاصة مبنية على لغة استعلام هيكلية مخصصة وغير إحصائية. في المقارنة الزوجية للألائل، قامت جهة تحديد الأبوة البعيدة بتعيين الأبوة عندما استبعدت جميع الآباء المحتملين ما عدا أبًا واحدًا وأمًا واحدة، استنادًا إلى وجود أليل مشترك من كل والد عند جميع المواقع الجينية المُختبرة (B. G. Cassidy، اتصال شخصي). وقد استُخدمت هذه الطريقة في تحديد الأبوة أيضًا في أبحاث سابقة أُجريت على غزلان الذيل الأبيض في الأسر30,31.
- أعطِ 2 مل من مستحضر التوكسويد الخاص ببكتيريا Clostridium perfringens من النوعين C وD، ومستحضر مضاد السموم الخاص بـ Clostridium perfringens من النوعين C وD، عن طريق الحقن تحت الجلد، وأعطِ 0.3 مل/كجم من الإيفرمكتين المذاب في الجلايكول البروبيليني (من كلية الطب البيطري بجامعة ولاية ميسيسيبي، ميسيسيبي، الولايات المتحدة الأمريكية) عن طريق الفم لكل صغير من الغزلان.
- أوقف تهدئة الذكور البالغين (الذين تبلغ أعمارهم 1.5 سنة أو أكثر) كيميائيًا خلال شهري أكتوبر ونوفمبر لجمع البيانات.
- قم بتهدئة الحيوانات البالغة المحصورة باستخدام نفس المزيج من هيدروكلوريد التيليتامين وهيدروكلوريد الزايلازين المستخدم في احتجاز الحيوانات البرية (الخطوة 1.4).
- أثناء أحداث التهدئة، اصطحب الفني الذي سيقوم بالسهم إلى نهاية الحظيرة حيث تقع الأماكن المرتفعة المخصصة للإخفاء. ضع فنيًا واحدًا في كل من هاتين المنطقتين المخفيتين.
- اجعل الشخص الذي أصطحب الفني إلى مكان الإخفاء يعود إلى الطرف المقابل من الحظيرة.
ملاحظة: تبتعد الغزلان عن هؤلاء الفنيين وتتجه إلى المكان الأمامي أمام أماكن الإخفاء، حيث يكون الفنيون في وضع مناسب لتنفيذ سهام أخلاقية على كل غزالة.
- قم بإطلاق السهام على الغزلان عندما تكون في وضع جانبي وساكنة (القسم 1.4).
- انتظر حوالي 15 دقيقة حتى يُشل الحيوان المُسهم تمامًا قبل الاقتراب منه.
- تأكد من أن الحيوان مُهدأ بالتحقق من استجابات العين (الرمش). ضع مرهمًا عينيًا على العينين واغطِ عيني الغزالة لتقليل التوتر.
- بعد أن يُهدأ فرد الغزالة بنجاح، راقب معدلات حيوية للغزالة.
- استخدم ميزان حرارة شرجي لتقييم درجة حرارة الجسم بعد التعافي. سخّن الغزالة باستخدام بطانيات ساخنة إذا كانت درجة حرارة الحيوان أقل من 37.7 °C. برد الغزالة باستخدام كمادات ثلج إذا كانت درجة حرارة الحيوان أعلى من 40.0 °C.
- حمّل الغزالة على نقالة على الطراز العسكري، وانقلها باستخدام مركبة متعددة المهام إلى منطقة محددة مسبقًا لجمع البيانات.
- بعد النقل، سجّل نفس القياسات المورفومترية التي سُجلت عند الولادة (الخطوة 4.1).
- قيس كتلة الجسم (إلى أقرب 0.01 كجم) باستخدام ميزان رقمي معلق، وقيس طول القدم الخلفية والطول الكلي للجسم (إلى أقرب مم).
ملاحظة: تتفاعل الغزلان الفردية بشكل مختلف مع مزيج الأدوية المستخدم أثناء أحداث التهدئة، لذا قم بإعطاء حوالي 0.1–0.3 مل من مزيج هيدروكلوريد التيليتامين وهيدروكلوريد الزايلازين (حسب كتلة جسم الغزالة الفردية) إذا استعاد الغزالة وعيه قبل اكتمال جمع البيانات.
- أعطِ كميات مناسبة من المضاد الحيوي، والإيفرمكتين، ولقاح الكلوستريديا، ولقاح الحُوَيْضات (الليبتوصبيرا) لكل غزالة بعد نقلها إلى منطقة جمع البيانات (انظر الأقسام 1 و3).
- خذ ثلاث قياسات من القرون من الذكور البالغين باستخدام شريط قياس مخصص للقرون أثناء تهدئة الحيوان.
- قيس المسافة الداخلية (أوسع مسافة بين السناقيب الرئيسية)، والمحيط القاعدي (أصغر قطر موجود بين النتوء وفرع G1)، وطول السنبوب الرئيسي (المسافة من قاعدة القرن إلى طرف السنبوب الرئيسي) للقرون قبل إزالتها.
- أزل القرون على بعد حوالي 3 سم فوق النتوء باستخدام منشار ترددي. لا تقم بإزالة القرون على بعد أقل من 3 سم.

الشكل 4: جمع البيانات من الذكور البالغين. إزالة القرون باستخدام منشار ترددي من غزال ذي ذيل أبيض بالغ مُربى. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
- بعد جمع جميع البيانات من الفرد المُهدأ، ضع الغزال في الحظيرة المناسبة وقم بإعطاء إما 0.125 ملغ/كغ من الياهمبين هيدروكلورايد28 أو 4.0 ملغ/كغ من التولازولين هيدروكلورايد32 لعكس تأثيرات الزيلازين هيدروكلورايد. راقب الأفراد للتأكد من بقائهم في وضعية صدرية حتى يستيقظوا من التخدير ويصبحوا مستيقظين بالكامل.
ملاحظة: إذا حدثت مضاعفات واضطررت إلى تهذيب الحيوان، فإن التهذيب بالفصل الدماغي باستخدام جهاز صاعق أو قطع الوريد اليافوري يُعد من الطرق الأخلاقية للتخلص من الحيوان.
- انقل القرون إلى منطقة مخصصة لإكمال قياس حجمها.
- قس كل فص فرعي منفرد يبرز من الساق الرئيسية (G1، G2، G3، إلخ) والنقاط غير الاعتيادية الإضافية باستخدام سلك.
ملاحظة: تُعرَّف النقاط التي لا تملك نظيرًا مطابقًا على الساق الرئيسية المقابلة أو التي لا تتماشى مع تعريف مجموعة قرون نموذجية من قبل نادي بون وكركت33.
- لف السلك حول النقطة التي يلتقي فيها الفص بالساق الرئيسية وعلّم تلك النقطة كمرجع.
- قس من هذه النقطة المرجعية إلى طرف الفص، وكرر ذلك لكل فص.
- اجمع باقي قياسات المحيط من خلال تحديد أصغر نقطة بين الفصين G1 وG2 (محيط H2)، وبين الفصين G2 وG3 (محيط H3)، وبين الفصين G3 وG4 إن وُجد (محيط H4).
- إذا لم يكن الفص G4 موجودًا، فقس المسافة بين منتصف الفص G3 ونهاية الساق الرئيسية، ثم قس محيط H4 عند النقطة المتوسطة.
- قس أقل من أربع محيطات عندما تحتوي القرون على أقل من ثلاث فصوص.
ملاحظة: على سبيل المثال، الساق الرئيسية التي تحتوي على نقطتين نموذجيتين تشمل فقط ثلاث قياسات محيط. قد يستخدم الأفراد إرشادات أخرى (نادي السفاري الدولي) لحساب حجم القرون؛ ومع ذلك، يجب استخدام طرق متسقة لكل حيوان من أجل مقارنة صحيحة.
- بعد إجراء جميع القياسات، احسب درجة القرون مشابهة لدرجة بون وكركت الإجمالية غير النموذجية33.
- وزن القرون لأقرب 0.1 غرام باستخدام ميزان رقمي علمي، وعيّن كتلة حرجة دنيا مقدارها 1 غرام للحيوانات من السنة الأولى التي تمتلك قرونًا أقصر من 3 سم.
- أهدر جراءً صغيرة مُحتجزة كيميائيًا في عمر يناهز 5.5 شهرًا باستخدام نفس الطرق المستخدمة للبالغين (القسم 4.2)، ووسم الجراء بوساطة علامة أذن بلاستيكية كبيرة (الخطوة 4.1.1).
- استخدم نفس معدلات خليط الدواء لتثبيط البالغين المحتجزين كما استخدمت لتثبيط الغزلان البرية (القسم 1).
- اجمع نفس القياسات التي جُمعت عند الولادة (الخطوة 4.1.2)، وقم بإعطاء نفس العلاجات الوقائية كما في البالغين (القسم 4.2).
ملاحظة: بعد جمع جميع البيانات، انقل كل ذكر صغير إلى منشأته الفرعية المخصصة عشوائيًا باستخدام مقطورة.
5. إنتاج الأبناء من الجيل الأول والثاني
- صنّف العوائل التي يبلغ عمرها ستة أشهر والمأخوذة من البرية، والصغار المولودة في المرفق المخصص للإيواء من إناث تم أخذها من البرية، كأفراد من الجيل الأول.
- خلال موسم التكاثر، ضع ذكرَين مع 7 إلى 16 أنثى، ليكون متوسط نسبة التكاثر كذكر واحد لكل ثماني إناث.
ملاحظة: اختر الذكور المخصصة للتكاثر من المرافق الفرعية بناءً على المظهر الجسدي، لأن الذكور الأصحّ (ذوي القرون والأجسام الأكبر حجمًا) هم الأكثر احتمالًا لخدمة الإناث طوال فترة موسم التكاثر دون التعرّض للإصابات الناتجة عن الطبيعة العدوانية للذكور خلال هذا الموسم.
- اسمح للغزلان بالتكاثر فقط مع أفراد من نفس المنطقة المصدر (مثلاً: يُزاوج ذكر دلتا مع إناث دلتا، وذكر ثين لويس مع إناث ثين لويس، وذكر LCP مع إناث LCP).
- صنّف الغزلان المولودة من أبويْن من الجيل الأول كأفراد من الجيل الثاني. ربّت هذه الأفراد في الأسر منذ الولادة، وغذّها بنفس النظام الغذائي عالي الجودة الذي يُقدّم لآبائها.
ملاحظة: قد تُنتج الإناث صغارًا خلال سنوات متعددة، لكن عادةً يكون لكل سنة أب مختلف. اجمع نفس البيانات على أفراد الجيل الثاني التي تم جمعها من أفراد الجيل الأول والغزلان المأخوذة من البرية.