تقييم الدالة Microvascular الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام فيديوميكروسكوبي

Summary

تستخدم نظم فيديوميكروسكوبي لدراسة الخصائص الفنية للشرايين الأنسجة الدهنية معزولة في الاستجابة للمحفزات الفسيولوجية والدوائية. يمكن استخدام هذا الأسلوب لدراسة ميكروفاسكولار تعمل في مجالات مختلفة من الأنسجة الدهنية في البشر يعانون من السمنة المفرطة.

Abstract

في حين أن السمنة ترتبط ارتباطاً وثيقا بتطور المرض الأيضي والقلب والأوعية الدموية، يعرف الكثير عن الآليات التي تحكم هذه العمليات. هو الافتراض بأن الوسطاء المحترفين atherogenic صدر من الأنسجة الدهنية لا سيما بالاشتراك مع أديبوسيتي الوسطى/الحشوي قد تعزز التغييرات الأوعية الدموية المسببة للأمراض محلياً وعناصره، والفكرة أن أمراض القلب والأوعية الدموية قد تكون نتيجة للخلل في الأنسجة الدهنية لا تزال تتطور. وهنا يصف لنا طريقة فريدة من فيديوميكروسكوبي الذي ينطوي على تحليل لردود وعائي ومضيق للأوعية الشرايين البشرية الصغيرة سليمة إزالتها من مستودع الدهنية لمعيشة البشر. يتم استخدام فيديوميكروسكوبي لدراسة الخصائص الفنية من ميكروفيسيلس معزولة في الاستجابة للمحفزات الدوائية أو الفسيولوجية باستخدام نظام ضغط الذي يحاكي في فيفو الظروف. هذا الأسلوب هو نهجاً مفيداً فهم الفيزيولوجيا المرضية والآليات الجزيئية التي تسهم في ضعف الأوعية الدموية محلياً داخل الوسط الأنسجة الدهنية. وعلاوة على ذلك، ارتبطت أيضا تشوهات في ميكروفاسكولاتوري الأنسجة الدهنية مع الأمراض الجهازية. قمنا بتطبيق هذا الأسلوب لدراسة استجابات الأوعية الدموية الخاصة بمستودع في أشخاص يعانون من السمنة المفرطة. قمنا بتقييم البطانة تعتمد على توسع الأوعية لزيادة تدفق واستيل في الشرايين الدهنية (50-350 ميكرون قطرها الداخلي، 2-3 مم في الطول) المعزولة من مستودعين الدهنية مختلفة أثناء جراحات من الفرد نفسه. أظهرنا أن الشرايين من الدهون الحشوي يحمل البصر من توسع الأوعية البطانة تعتمد على مقارنة بالسفن معزولة من مستودع تحت الجلد. وتشير النتائج إلى أن المكروية الحشوي يرتبط بخلل وظيفي غشائي الأوعية الدموية التي قد تكون ذات صلة بالملاحظة الإكلينيكية ربط adiposity الحشوي زيادة آليات الأمراض الجهازية. يمكن استخدام هذا الأسلوب فيديوميكروسكوبي لفحص الأوعية الدموية تعمل من مخازن الدهون المختلفة، فضلا عن مقارنة النتائج بين الأفراد بدرجات مختلفة من السمنة والخلل الأيضي. يمكن أيضا استخدام الأسلوب دراسة استجابات الأوعية الدموية طوليا ردا على التدخلات السريرية.

Introduction

فيديوميكروسكوبي تقنية مفيدة تستخدم لفحص وظيفة الشرايين الصغيرة إزالة من معيشة البشر السابقين فيفوفاسوموتور. لدينا مختبر ركز على تشريح خارج ميكروفيسيلس صغيرة من حجرات مختلفة من الأنسجة الدهنية لوصف آثار ميكرونفيرونمينتس الدهنية المختلفة على ميكروفاسكولاتوري. وميزة رئيسية لهذا الأسلوب هو أن إزالتها من جسم الإنسان الأوعية الدموية تبقى وظيفية ويمكن فحص سهولة في غضون دقائق إلى ساعات بعد خزعة. هي تحاكي الظروف الفسيولوجية وثابت الضغط ترانسمورال في الفضاء intraluminal عبر cannulas الزجاج الصغير الذي الخص العديد من الخصائص في فيفو . ^{1 , 2} بالإضافة إلى ذلك، يسمح إنشاء فيديوميكروسكوبي موثوق بها مع برامج....

Protocol

البروتوكول والأمثلة المذكورة هنا قد أقر "بوسطن جامعة مدرسة من الطب المؤسسية استعراض المجلس" (مجلس الهجرة واللاجئين، بروتوكول #H-25644) وأجريت وفقا "إعلان هلسنكي". جميع المواضيع المقدمة الموافقة الخطية قبل المشاركة-

1-إعداد الحلول والزجاج الصغير Cannulas

1. تحضير الحل 4-2-هيدروسيثيل-1-بيبيرازينيثانيسولفونيك المالحة الحمضية (حبيس). حل للأم 1، ز 8.059 كلوريد الصوديوم، 0.298 ز بوكل، ز 0.296 مجسو ₄ • 7 ح ₂ س، ز 0.235 كاكل ₂ • 2 ح ₂ س، ز 0.16 خ ₂ ص ₄، ز 0.01 يدتا و 1.081 ز د-الجلوكوز 2.383 غ حمض حبيس في 950 مل من منزوع المياه. تشكل وحدة التخزين إلى 1 لتر مع الم....

Results

مختبرنا استخدمت فيديوميكروسكوبي لدراسة تعتمد على البطانة-وتوسع الأوعية مستقلة، فضلا عن وظيفة فاسوكونتراكتيلي من الأنسجة الدهنية الشرايين المعزولة من الدهون تحت الجلد والأحشاء من البشر يعانون من السمنة المفرطة. يتم عرض الإعداد التجريبية المميزة في الشكل 1A. علقت بين اثنين الزجاج الماصات الشعرية الشرايين الأنسجة الدهنية والمضمونة في المكان مع خيوط داخل قاعة الجهاز كما هو موضح في الشكل 1 باء. كما هو موضح أعلاه في القسم 5.1، يمكن تقي.......

Discussion

تشريح والعزلة للشرايين الدهنية من الأنسجة المحيطة يمكن أن يكون عملية تستغرق وقتاً طويلاً وتتطلب عمالة مكثفة مع الحرص على الاهتمام بالتفاصيل والبروتوكول التقنية. يتطلب الإجراء ميكروديسيكتيون المهارات الدقيقة وأواني تشريح المتخصصة لمنع احتمال حدوث ضرر للعضلات الملساء أو غشائي خلية طبقات من ميكروفاسكولاتوري. يمكن منع ثقوب صغيرة حتى عرضي في الجدار أرتيريولار ذات إينترالومينال والنتائج في تجربة غير ناجحة. بالإضافة إلى ذلك، كانولاتيون لاستخدام خيوط الشرايين أمر حاسم لضمان الشرايين بين نصائح الماصة الشعرية الزجاج في نهاية كل من.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
<قوي > الاسم الكيميائي < / قوي >
أستيل كولين	سيجما ألدريتش	A6625
كلوريد الكالسيوم (CaCl 2< / sub>)	سيجما ألدريتش	223506
D- (+) - الجلوكوز	سيجما ألدريتش	G5767
إندوثيلين -1	سيجما ألدريتش	E7764
الإيثيلين جلايكول مكرر (2-أمينوإيثيل إيثر) - N ، N ، N '، N '- حمض الخليك (EGTA)	سيجما ألدريتش	E3889
الإيثيلين ديامين حمض الخليك الرباعي (EDTA)	سيجما ألدريتش	E9884
هيبس	سيجما ألدريتش	H3784
Nw< / em>< sub>-nito-L-أرجينين إستر ميثيل هيدروكلوريد	سيجما ألدريتش	N5751
كبريتات المغنيسيوم (MgSO4< / sub>)	سيجما ألدريتش	M7506
كلوريد البوتاسيوم (KCL)	سيجما ألدريتش	P3911
فوسفات البوتاسيوم (KH2< / sub>PO4< / sub>)	سيجما ألدريتش	P5655
بابافيرين	سيجما ألدريتش	P3510
بيكربونات الصوديوم (NaHCO 3< / فرعي > )	سيجما ألدريتش	S6014
كلوريد الصوديوم (كلوريد الصوديوم)	سيجما ألدريتش	S7653
أحادي هيدرات فوسفات الصوديوم أحادي القاعدة (NaH2Po4)	سيجما ألدريتش	S9638
<قوي>الاسم	<قوي>الشركة	رقم الكتالوج	تعليقات
<قوي> المعدات< / قوي>
ملقط	أدوات العلوم الدقيقة	15000-08
مجهر مقلوب	Zeiss Achromat
مختبر	أنابيب Euro-Pharm	250100306F999
مجتذب إبرة / ماصة	ديفيد كوبف	الأدوات 720
خياطة نايلون أحادية الشعيرات العينية	التخصصات الجراحية	A7756N
مقص	أدوات العلوم الدقيقة	150000-08
غرفة السفينة	DMT	VAS v.2.1