توفر تقنيات استثارة محواري أداة قوية لدراسة الفيزيولوجيا المرضية والتغيرات الفيزيائية الأحيائية التي تسبق الأحداث التنكسية لا رجعة فيه. هذه المخطوطة يوضح استخدام هذه التقنيات في العصب الزندي تخديره من الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
في فيفو القياس الكهربية للعصب الزندي الفئران مع اختبار استثارة محواري
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تمكن الكهربية التقييم الموضوعي لوظيفة الأعصاب الطرفية في فيفو. تدابير التوصيل العصبية التقليدية، مثل السعة والكمون اكتشاف فقدان إكسون المزمنة وديمييلينيشن، على التوالي. تقنيات استثارة محواري "بالعتبة التي تتبع" توسيع هذه التدابير بتوفير المعلومات المتعلقة بالنشاط قنوات أيون ومضخات والمبادلات التي تتصل بوظيفة الحادة وقد تسبق الأحداث التنكسية. على هذا النحو، قد يوفر استخدام استثارة محواري في نماذج حيوانية للاضطرابات العصبية مقياسا مفيداً في فيفو لتقييم التدخلات العلاجية الرواية. هنا يصف لنا إعداد تجريبية لتدابير متعددة لتقنيات السيارات استثارة محواري في الفئران العصب الزندي.
الحيوانات تخديره مع isoflurane ورصدها بعناية لضمان عمق ثابت وكاف من التخدير. يتم باستمرار رصد درجة حرارة الجسم ومعدل التنفس ومعدل ضربات القلب وتشبع الأكسجين في الدم. دراسات استثارة محواري تتم باستخدام التحفيز عن طريق الجلد على العصب الزندي وتسجيل من عضلات هيبوثينار مخلب فوريليمب. مع التنسيب الكهربائي الصحيح، يتم تسجيل إمكانية عمل العضلات مجمع واضحة أن الزيادات في السعة ومع تزايد كثافة التحفيز. ثم يستخدم برنامج الآلي لتقديم سلسلة من النبضات الكهربائية التي تولد تدابير محددة استثارة 5 في التسلسل التالي: تحفيز استجابة السلوك، اليكتروتونوس عتبة العتبة الحالية، قوة مدة وقت ثابت العلاقة ودورة الانتعاش.
البيانات المقدمة هنا الإشارة إلى أن هذه التدابير هي قابلة للتكرار، وإظهار التشابه بين اليسار واليمين الزندية الأعصاب عند تقييمها في نفس اليوم. حد من هذه التقنيات في هذا الإعداد هو تأثير الجرعة والوقت تحت التخدير. ينبغي الاضطلاع برصد وتسجيل هذه المتغيرات للنظر فيها في الوقت لتحليل دقيق.
المقدمة
باستخدام تقنيات الكهربية أداة أساسية للتحقيق في فيفو في وظيفة الأعصاب الطرفية في الاضطرابات العصبية. طرق التوصيل العصبية التقليدية استخدام المحفزات سوبراماكسيمال لتسجيل السيارات إمكانات العمل السعة والكمون. ولذلك هذه التقنيات توفر معلومات مفيدة عن عدد إجراء الألياف وعلى سرعة التوصيل من الألياف أسرع. أداة تكميلية قيمة اختبار استثارة محواري. ويستخدم هذا الأسلوب أنماط التحفيز الكهربية متطورة لتقييم الخصائص الفيزيائية للأعصاب المحيطية، مثل نشاط قنوات أيون مضخات تعتمد على الطاقة وعمليات التبادل الأيوني وغشاء المحتملة غير مباشر 1.
ويستخدم اختبار استثارة محواري عادة في الإعداد السريرية للتحقيق في العمليات الفيزيولو....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمتثل للعناية بالحيوان ولجنة الأخلاقيات في سيدني UNSW جميع الإجراءات التجريبية الموصوفة هنا وأجريت وفقا "الوطنية للصحة" ومجلس البحوث الطبية (NHMRC) من لوائح أستراليا للتجارب الحيوانية.
1-التجريبية إعداد
ملاحظة: استخدمت الفئران منذ فترة طويلة-إيفانز الأسبوع 12 من العمر، والنساء في هذا الإجراء.
- تخدير الفئران في دائرة التعريفي لاستخدام إيسوفلوراني 4% و 1 لتر كل دقيقة س2 معدل التدفق. تأكيد التخدير كافية عن طريق اختبار لرد الفعل رايتينج وضمان عدم وجوده قبل إزالة الحيوان من قاعة التعريفي. علما أن مختلف عوامل مخدر آثار تفاضلية على استثارة العصب10.
- أمن مكان آنف الحيو....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
وتم الحصول على تدابير الكهربية للعصب الزندي الفئران مع هذا البروتوكول. يوضح الشكل 3 ممثل تسجيل من العصب الزندي الأيسر من الفئران "إيفانز طويلة" الإناث 12 أسبوع من العمر. إمكانات العمل مجمع العضلات تتصل بعدد الألياف التي يتم تنشيطها في الوقت نفسه إجراء. رد ذروة سوبراماكسيمال (mV) (الشكل 3 أ) يوضح استجابة ذروة تحقيقه عندما يزداد الحافز بشكل متدرج حتى أن هناك أي تغيير في الاستجابة (الشكل 2).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
يوضح الإجراء وصف بسيطة وموثوق بها، تقنية مينيملي التي يسمح تقييم الخصائص الفيزيائية-الحيوية وإمكانات غشاء إكسون في فترة قصيرة من الزمن. مقارنة مع تقنيات أكثر الغازية الأخرى، التي تتطلب التعرض للعصب، يستحث الأسلوب الحالي لاختبار استثارة محواري تلف الأنسجة الحد الأدنى مما يمكن في فيفو التقييم أن يحافظ على الظروف الفسيولوجية العصب للفائدة ويسمح للقياسات المتكررة.
لضمان نتائج متسقة هناك هي بعض الاعتبارات المنهجية التي يتعين معالجتها. هو واحد من هذه العوامل بتركيز ونوع من مخدر. وقد ثبت ساب.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
وأيد المشروع مؤسسة Lundbeck، مؤسسة نوفو نورديسك، المجلس الدانمركي للبحوث الطبية، لودفيج ومؤسسة السس سارة، كاي مؤسسة داهلبومس ومؤسسة البحوث في علم الأعصاب وجايتي. R.A معتمد من قبل "أوائل الوظيفي شواغر الزمالة الوطنية للصحة" و "مجلس البحوث الأسترالي الطبية" (#1091006)
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| برنامج QTracS | Digitimer Ltd. | برنامج الاستثارة المحورية | |
| AM-Systems 2200 ، عازل التحفيز التناظري ، 2200 فولت / 50 هرتز | SDR محفز 850005 العلمي | ||
| مضخم التيار المتردد عالي الأداء نموذج LP511 | مضخم تقنيات | ||
| Humbug 50/60Hz مزيل الضوضاء | Quest Scientific Instruments | 726310 | مزيل الضوضاء |
| منخفض المقاومة البلاتين أحادي القطب تحت الجلد إبرة أقطاب | كهربائية Grass Technologies | F-E2-24 | أقطاب تسجيل ، طول 10 مم ، مقياس 30 |
| منخفض مقاومة البلاتين تخطيط كهربية الدماغ أقطاب | Cephalon | 9013L0702 | أقطاب كهربائية محفزة ، طول 10 مم ، 30 مقياس |
| متعدد الوظائف نموذج جهاز الإدخال / الإخراج USB-6341 | National Instruments | جهاز إدخال / إخراج متعدد الوظائف | |
| لوحة قاعدة الحديد IP | مختبر الأدوات العلمية Narishige | يستخدم لتثبيت قطب الإبرة المحفز في مكانه | |
| مختبر Narishige للأدوات العلمية | يستخدم لتثبيت قطب الإبرة المحفز في مكانه |
المراجع
- Krishnan, A. V., Lin, C. S. -Y., Park, S. B., Kiernan, M. C. Axonal ion channels from bench to bedside: a translational neuroscience perspective. Prog neurobiol. 89 (3), 288-313 (2009).
- Lin, C. S. -Y., Krishnan, A. V., Park, S. B., Kiernan, M. C.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
