هنا نقدم مجموعة من نضح دوبلر الليزر التصوير (لدبي) والليزر دوبلر نضح الرصد (لدبم) لقياس العمود الفقري الحبل تدفق الدم المحلية وتشبع الأكسجين (هكذا2)، فضلا عن إجراء موحد لإدخال الحبل الشوكي الصدمة في الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
هنا نقدم مجموعة من نضح دوبلر الليزر التصوير (لدبي) والليزر دوبلر نضح الرصد (لدبم) لقياس العمود الفقري الحبل تدفق الدم المحلية وتشبع الأكسجين (هكذا2)، فضلا عن إجراء موحد لإدخال الحبل الشوكي الصدمة في الفئران.
ليزر دوبلر flowmetry (LDF) هو أسلوب موسع لقياس التدفق (BF) الدم، مما يجعل من الأفضل لقياس microcirculatory التعديلات على الحبل الشوكي. في هذه المقالة، كان هدفنا استخدام تصوير "دوبلر الليزر" والرصد لتحليل التغير من فرنك بلجيكي بعد إصابة الحبل الشوكي. كانت موظفة الماسح الضوئي الصورة دوبلر الليزر والتحقيق/جهاز العرض للحصول على كل قراءات. توفير البيانات الخاصة لدبي توزيع محلي لفرنك بلجيكي، الذي قدم عرضاً لنضح حول موقع الإصابة وإتاحتها للتحليل المقارن لفرنك بلجيكي بين مواقع مختلفة. بشكل مكثف لقياس مجال السبر على مدى فترة من الزمن، وكان استخدام مجس مجتمعة لقياس تشبع الحبل الشوكي، يظهر نضح الحبل الشوكي عموما وإمدادات الأكسجين فرنك بلجيكي والأكسجين في نفس الوقت. وقد LDF نفسها عدد قليل من القيود، مثل التدفق النسبي، حساسية للحركة، والصفر البيولوجي الإشارات. بيد أن التكنولوجيا قد طبقت في الدراسة السريرية والتجريبية نظراً لإعداد بسيطة والقياس السريع لفرنك بلجيكي.
أنسجة النخاع الشوكي فاسكولاريزيد جداً وحساسة للغاية لنقص الناجمة عن إصابات النخاع الشوكي (الخيال العلمي). وأظهرت دراساتنا السابقة أن تدفق الدم من الحبل الشوكي قد تناقص بصورة كبيرة بعد ارتجاج الإصابة1،2، التي قد تكون ذات صلة بالعجز في وظيفة الحركة. وقد أظهرت الدراسات الأخيرة أن سلامة الأوعية الدموية عقب الخيال ارتباطاً جيدا مع تحسين وظيفة الحركة الحسية3. وأفيد أن تحسن الأوعية الدموية قد إنقاذ المسألة الأبيض، غير مباشر مما يؤدي إلى تحسين وظيفة4. ولذلك، يبدو الحفاظ على التروية بعد إصابة الحبل الشوكي أهمية كبرى للحفاظ على السلامة والأداء الوظيفي.
التي درست آثار المعالجات المختلفة على التروية بعد علوم المحققين العديدة باستخدام مجموعة متنوعة من التقنيات في نماذج تجريبية لعلوم5،،من67. ليزر دوبلر، كتقنية راسخة، وبلا شك وسيلة مفيدة لقياس التروية في عدة الدراسات الحيوانية والبشرية8،،،من910،11. الأسلوب الذي يستند إلى قياس التحول دوبلر12 الناجمة عن نقل خلايا الدم الحمراء للضوء منيرا. منذ إضفاء الطابع التجاري على هذه التقنية في أوائل الثمانينات، أحرز تقدم كبير في تكنولوجيا الليزر والألياف البصرية ومعالجة الإشارات لقياس التروية بالليزر دوبلر الصكوك13، التي جعلت LDF تقنية موثوقة.
في الدراسة الحالية، وطبقت كل أساليب قياس دوبلر الليزر لتقييم تدفق الدم (BF) في الحبال الشوكي من الفئران كونكوسيفي. نظراً لطبيعة موسع إعداد بسيطة والتكنولوجيا، لدينا بروتوكول يوفر طريقة حساسة وسريعة وموثوق بها لقياسات فرنك بلجيكي للحبل الشوكي. الأهم من ذلك، هذا الأسلوب يسمح دراسة طولية من الخيال وظيفة كونكوسيفي فرنك بلجيكي دون التضحية بالحيوان عند كل نقطة في الوقت.
بسبب القدرة على تقييم فرنك بلجيكي للأنسجة والتغيرات السريعة التروية خلال التحفيز، فمن الممكن تطبيق هذا البروتوكول تقييم الدماغي فرنك بلجيكي14،15 ، فضلا عن قياس أنسجة أخرى مثل الكبد16، 17و18،الجلد19واﻷمعاء20. في نموذج الفئران من انسداد الشريان الدماغي الأوسط عابرة، استخدمت قراءات دوبلر الليزر لضمان خفض معدل فرنك بلجيكي للمستويات المتوقعة في غبش الدماغية14السليم. في الفئران التي خضعت أطرافهم الحرجة الاسكيمية (CLI) التعريفي، تم تطبيق المسح دوبلر الليزر لمراقبة أطرافهم هند فرنك بلجيكي قبل وبعد الإجراء CLI وخلال فترات مختلفة بعد العلاج21. بالإضافة إلى ذلك، التوافر البيولوجي وتخليص الأيضية لبعض الأدوية يتوقف على كبدي فرنك بلجيكي، التي تم الكشف عنها بواسطة LDF16. ولذلك، يمكن استخدام LDF على نطاق واسع في تقييم نموذج تجريبي، ميكروبيولوجية والحرائك الدوائية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
بروتوكولات الحيوانية التي تنطوي على الحيوانات التجريبية يتبع المبادئ التوجيهية التي وضعتها بالمعاهد الوطنية للصحة (NIH) ووافق رعاية الحيوان واستخدام اللجنة للعاصمة الطبية جامعة.
واستخدمت إجراءات إدخال علوم وقياس فرنك بلجيكي النخاع الشوكي باستخدام الليزر دوبلر المعدات المبينة أدناه في دراسة منشورة1.
1-التحضير لعملية جراحية
2-إعداد الفئران لجراحة
3-الاستئصال والارتجاج في الحبل الشوكي
ملاحظة: لإجراء الاستئصال فقط لمجموعة الشام، اتبع الخطوات 3.1 إلى 3.6.
4-ليزر دوبلر المسح الضوئي
5-ليزر دوبلر الرصد
6-خياطة الجروح والرعاية ما بعد التشغيل
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
واستخدمت لدبي لقياس فرنك بلجيكي في الحبل الشوكي، الذي كان كمياً على المحور روسترال والذيلية للحبل الشوكي عن طريق استخراج الملامح الخطي (الشكل 4). الشكل 5A و 5B الشكل تمثل تصوير الحبل الشوكي من مجموعة الشام ومجموعة علوم والتمويه على التوالي. الرقم 5 و الرقم 5 تمثل BF تغيير طول المحور روسترال والذيلية للحبل الشوكي من مجموعة الشام ومجموعة علوم،...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ينبغي أن يلاحظ بعض التفاصيل عند تنفيذ هذا البروتوكول. أولاً، عملية التخدير والجراحة ينبغي أن تنفذ بسرعة وأناقة قدر الإمكان للتقليل من الإجهاد أدخلت للحيوان. للحد من الاضطرابات إلى النتائج، إبقاء الحيوان في دولة سلمية ومستقرة نسبيا. وثانيا، ينبغي إيلاء مزيد من الاهتمام للنزيف أثناء أخذ القياس باستخدام معدات ليزر دوبلر، نظراً للدم يمكن أن يحتمل أن تتدخل القراءة. وأخيراً، أثناء تسجيل البيانات، ينبغي إبقاء الحيوانات في بيئة التحكم في درجة حرارة لتجنب نتائج غير متناسقة الناجمة عن تباين درجات الحرارة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
المؤلفين قد لا شكر وتقدير.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ليزر دوبلر خط الماسح | مستنقع الأدوات | مستنقع LDLS2 | |
| ليزر دوبلر مراقب | مستنقع أدوات | مورVMS-LDF | |
| مسبار لمراقبة | مستنقع الأدوات | VP3 | إبرة حادة نهاية التسليم التحقيق |
| الاصطدام | أنظمة الدقة والأجهزة | IH-0400 | |
| فينوباربيتال الصوديوم | سيجما ألدريتش | P3761 | |
| Buprenorphine | Sigma-Aldrich | B-908 | |
| حقنة | Becton Dickinson Medica (ق) Pte.Ltd | جراحية 300841 | |
| بخيط | شنغهاي بودونغ جينهوان للمنتجات الطبية المحدودة | 18T0329 (رقم الدفعة) / 4-0 | |
| المشرط | في شنغهاي للأدوات الطبية المحدودة. | J11030 4 # | |
| مصنع أداة تشغيل شفرة المشرط | في شركة شنغهاي للأدوات الطبية المحدودة. | J12130 20 # | |
| ملقط العيون | مصنع أداة التشغيل في شنغهاي للأدوات الطبية المحدودة. | JD1040 | |
| ملقط مرقئ | مصنع أداة التشغيل في Shanghai Medical Instrument Co.، Ltd. | J31050 | |
| بنزيل البنسلين الصوديوم | شمال الصين الصيدلانية المحدودة | F6072116 (رقم الدفعة) | |
| 75 ٪ كحول | Dezhou Anjie Gaoke منتجات التطهير المحدودة | 150421R (رقم الدفعة) | |
| اليود | شاندونغ Lierkang التكنولوجيا الطبية المحدودة | 20170102 (رقم الدفعة) | |
| الفئران | ، أكاديمية طب الألفية علوم | سبراج دولي (سلالة الفئران) |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.