يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

البناء وتقييم نموذج عظام النهايات كالفاريال مورين بالتعرض للجسيمات كوكرمو في تخفيف العقيم

8.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/56276

⸱

فبراير 17, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

ويصف هذه المخطوطة نموذج عظام النهايات كالفاريال مورين بالتعرض للجسيمات كوكرمو، الذي يشكل نموذجا حيوان مثالي لتقييم التفاعلات بين الجسيمات البلى وخلايا مختلفة في تخفيف العقيم.

الملخص

عظام النهايات الناجمة عن الجسيمات ارتداء سببا رئيسيا لتخفيف العقيم في تقويم مفاصل الفشل، ولكن الآلية الأساسية التي لا تزال غير واضحة. سبب طويلة المتابعات اللازمة للكشف وحدوث متفرقة، أنه يمثل تحديا لتقييم المرضية الناجمة عن أوفبارتيكلي عظام النهايات في الحالات السريرية. ومن ثم فالنماذج الحيوانية المثلى المطلوبة لإجراء المزيد من الدراسات. نموذج عظام النهايات كالفاريال المنشأة بالتعرض للجسيمات كوكرمو مورين أداة فعالة وصالحة لتقييم التفاعلات بين الجزيئات والخلايا المختلفة في تخفيف العقيم. في هذا النموذج، التي حصل عليها التيار المباشر ثلاث قطب كهربائي عالية الفراغ جسيمات كوكرمو أولاً وحراكه في مخزنة الفوسفات المحلول الملحي بتركيز 50 ملغ/مل. ثم طبقت منتصف كالفاريا موريني 50 ميليلتر من تعليق الناتجة بعد فصل السمحاق الجمجمة بحادة تسلخ. وبعد أسبوعين، كانت التضحية بالفئران، وكانت تحصد كالفاريا العينات؛ وأجريت التقييمات الكمية والنوعية التي توضع وتلطيخ ويوزين والجزئي المقطعي. وتشمل مواطن القوة في هذا النموذج البساطة الداخلي، والتقييم الكمي لفقدان العظام، وسرعة التنمية عظام النهايات والاستخدام المحتمل المحورة وراثيا أو نماذج بالضربة القاضية، وتكلفة منخفضة نسبيا. ومع ذلك، لا يمكن هذا النموذج التي ستستخدم لتقييم القوة الميكانيكية والآثار المزمنة للجسيمات في تخفيف العقيم. نموذج عظام النهايات كالفاريال مورين الناتجة عن التعرض للجسيمات كوكرمو أداة مثالية لتقييم التفاعلات بين الجسيمات ملابس ومختلف الخلايا، مثلاً، الضامة، الليفية، وخلايا الاوستيوبلاستس والأكلة، في تخفيف العقيم.

المقدمة

تخفيف العقيم هو السبب الأكثر شيوعاً لتقويم مفاصل الورك الكلي (ثا) والفشل (تكا) تقويم مفاصل الركبة، الأمر الذي يتطلب مراجعة الجراحة1. ومع ذلك، لا تزال إليه الكامنة غير واضح2. مطلوب متابعة طويلة لاكتشاف عظام النهايات الناجمة عن الجسيمات، التي حدوث أمر نادر الحدوث؛ ولذلك فإنه يمثل تحديا لاستكشاف ما المرضية في الحالات السريرية. ومن ثم تتطلب المزيد من الدراسات التي تركز على آليات معقدة من الخلايا والأنسجة وكل التجارب في فيفو في ارتداء نماذج عظام النهايات الناجمة عن الجسيمات وفحوصات في المختبر في الخلايا المتصلة بالعظام التوازن3. نموذج حيوانية صالحة المهم في الكشف عن آثار الجسيمات ملاب....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) من جامعة نانجينغ.

1. إعداد الجسيمات كوكرمو

  1. الحصول على جسيمات كوكرمو باستخدام تيار المباشر ثلاث قطب كهربائي عالية-فراغ ملفقة4. سبيكة "كوكرمو مكان" في الصك تحت فراغ السلطة الفلسطينية-3 10، 0.04 الأرجون الآلام والكروب الذهنية والهيدروجين 3:2 (v/v)، و 650 ألف الكاثود الحالية.
  2. قياس أقطار جسيمات كوكرمو.
    1. أضف 1 مغ جسيمات كوكرمو إلى 1.5 مل إيثانول اللامائى.
    2. ريسوسبيند جسيمات كوكرمو في الإيثانول اللامائى اهتزاز الموجات فوق الصوتية في 28 كيلو هرتز و 600 واط لمدة 5 دقائق.
    3. تطبيق قطره واحدة....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

كانت الجسيمات كوكرمو النانو المنتجة داخليا حوالي 50 نانومتر (الخطأ المعياري ل 3.56) في القطر، كما كمياً بال (الشكل 2). بعد التعرض للماوس كالفارياس للجسيمات كوكرمو، الحيوانات (n = 6 كل مجموعة) واستمرت لمدة أسبوعين. خلال الأسبوعين الماضيين، شق كالفاريال وقد شفيت تماما، وقد تقع خياطة الجروح. أي عدوى محلية أو نقابية أيار يؤثر على تقييم فقدان العظام. بعد التضحية بالماوس، كانت تحصد عينات كالفاريا. ثم بلطف تطهير جميع الأنسجة اللينة، واستخدمت الأشعة المقطعية الصغرى ا.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

هناك طريقتان الرئيسي لارتداء الناجمة عن الجسيمات عظام النهايات في الفئران: عظام النهايات كالفاريال ونموذج الهواء-الحقيبة. في طراز إير-الحقيبة، المنشأة جوية-حقيبة التي تم إنشاؤها تحت الجلد هو أولاً، متبوعاً بارتداء الجسيمات مقدمة وغرس في أنسجة العظام8. يحاكي الجدار الحقيبة السمحاق في تخفيف العقيم. ومع ذلك، غرس العظام نونفاسكولار مع لا النشاط البيولوجي، مما يجعل من الصعب تقييم التفاعل المباشر بين الجسيمات ونسيج العظام. نموذج عظام النهايات كالفاريال مزايا عديدة على نظيره الجوية-الحقيبة. أولاً، والجسي.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

هذه الدراسة كانت تدعمها مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية (81572111) والعلوم الطبية والتكنولوجيا مشروع مؤسسة من مقاطعة جيانغسو (BL2012002)، مشروع البحوث العلمية نانجينغ (201402007)، العلوم الطبيعية مؤسسة من مقاطعة جيانغسو (BK20161385)، ومؤسسة خاصة من الرابطة الصينية طبيب (2015COS0810).

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
سبيكة CoCrMo من الطرف الاصطناعيWaldemar Link GmbH & CoGEMINI MK IIالمواد الخام للحصول على الجسيمات النانوية CoCrMo
المصنعة عالية الفراغ ثلاثية الأقطاب الكهربائية التيار المباشركلية علوم المواد & الهندسة ، جامعة نانجينغ للتكنولوجياآلة مصممة ذاتيا
6 أسابيع ذكر C57BL / 6J الفئراننموذج مركز أبحاث بجامعة نانجينغN000013
100 ٪ الإيثانولنانجينغ كاشفC0691514023مذيب الجسيمات النانوية CoCrMo لمسح المجهر الإلكتروني
1.5 مل أنابيب الطرد المركزي الدقيقةTaizhou Weierkang Medical Supplies Co.، LTDW603
الميزان التحليلي الجزئيشنتشن تشون طويلة أداة المعدات المحدودة،. LTDEX125DZH
شاكر بالموجات فوق الصوتيةشنغهاي Yuhao الصك العلمي المحدودةYH-200DHلتعليق الجسيمات النانوية CoCrMo
نقل المجهر الإلكترونيFEITecnai G20
SimplePCI softwareCompix Inc.6.6 الإصدارلحساب متوسط القطر وتوزيع حجم الجسيمات.
عموم التعقيماليد QIULONGYIQIKYQL-100DSلتطهير السموم الداخلية
Limulus Amebocyte Lysate (LAL) فحصنهر تشارلزR13025للكشف عن السموم الداخلية   ؛
15 مل أنابيب الطرد المركزيTaizhou Suyi MedicalB122
محلول ملحي مخزن بالفوسفاتBoster التكنولوجيا البيولوجيةAR0030مذيب من محلول مخزون الجسيمات النانوية CoCrMo
Pentobarbital SodiumSigmaP3761لتخدير الفئران
محلول ملحي عاديساكلرSR8572EP-15لمنع جفاف عيون الفئران
75٪ إيثانولكاشف نانجينغC0691560275تطهير
كرة قطنيةطبية Shuitao1278298933تطهير
ماكينة حلاقةKemeiKM-3018لحلاقة الفراء
مقصRWD LIFE SCIENCES12005-10لشق الجلد
خياطةRWD LIFE SCIENCEF34001-01لخياطة الجلد
حامل إبرةRWD LIFE SCIENCEF33001-01لخياطة
إبرةRWD LIFE SCIENCER14003-12لخياطة الجلد
ملقط الوعاءRWD LIFE SCIENCEF22003-09لخياطة الجلد
مشرطRWD LIFE SCIENCES31010-01لحصاد ملاقط كالفاريا
RWD LIFE SCIENCEF12006-10لحصاد كالفاريا
100 & micro ؛ L الماصاتEppendorf3120000240لتضمين تعليق الجسيمات في calvatias
100 & micro; L نصائح الماصةAXYGENT-200-Yلتضمين تعليق الجسيمات في calvatias
5 مل MicrotubesTaizhou Weierkang Medical Supplies co.، LTDW621
4٪ ParaformaldehydeServicebioG1101تثبيت
التصوير المقطعي المحوسب الجزئي   ؛SkyScanSkyScan1176
خدمة حمض رباعي الأسيتيك ثنائي الإيثيلينBioG1105إزالة الكلس
البارافينbio# 0001
آلة تقطيع البارافينLeicaRM2125RTS
شريحة زجاجيةServicebioG6004
غطاء زجاجيServicebio200
طقم تلطيخ HEServicebio# 1-5HE تلطيخ
مجهر خفيفنيكونE200
عالي الدقيقة الجلد خدمة

المراجع

  1. Dong, L., et al. Antisense oligonucleotide targeting TNF-alpha can suppress Co-Cr-Mo particle-induced osteolysis. J Orthop Res. 26 (8), 1114-1120 (2008).
  2. Deng, Z., et al. SIRT1 protec....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

نموذج فئرانيتحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيقصبغ الهيماتوكسيلين والإيوسينمعلق جزيئاتالسمحاق القحفيالكثافة المعدنية للعظامالتصوير بالمجهر الإلكتروني النافذ